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伪狂犬病病毒在小鼠原代神经细胞中潜伏感染模型的建立
1
作者 向广韬 吴红霞 +6 位作者 王异民 周末 王亚林 王翌 尹航 仇华吉 孙元 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期1-6,15,共7页
缺少PRV良好的潜伏感染模型已成为研究其潜伏感染机制的障碍。为建立PRV潜伏感染的体外细胞模型,本研究通过分离新生鼠背根神经节(DRG)获取神经细胞,并利用间接免疫荧光试验(IFA)对其进行鉴定,获得了DRG中的神经细胞。采用重组报告病毒r... 缺少PRV良好的潜伏感染模型已成为研究其潜伏感染机制的障碍。为建立PRV潜伏感染的体外细胞模型,本研究通过分离新生鼠背根神经节(DRG)获取神经细胞,并利用间接免疫荧光试验(IFA)对其进行鉴定,获得了DRG中的神经细胞。采用重组报告病毒r PRV-EGFP感染神经细胞,同时添加阿昔洛韦(ACV)抑制病毒复制以建立潜伏感染,并采用棋盘法对病毒感染剂量和ACV浓度进行优化,结果显示,感染复数(MOI)为0.001,ACV浓度为0.5 mmol/L,病毒能够在神经细胞中稳定建立潜伏感染。采用荧光定量RT-PCR、病毒滴度测定、药物刺激再激活的方法对潜伏感染模型鉴定,结果显示,潜伏感染时病毒不能复制,且不产生感染性病毒粒子;而经LY294002(PI3K抑制剂)诱导病毒再激活后,病毒大量复制并产生感染性病毒粒子。本研究首次利用小鼠原代神经细胞建立了PRV的潜伏感染模型,该模型的建立为PRV潜伏感染机制的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 小鼠背根神经节 潜伏感染 再激活 模型
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Cuprizone诱导的多发性硬化疾病动物模型的特点及应用
2
作者 李琳 王异民 +5 位作者 王伟 王珊 盘美良 孙伟强 樊卫平 石建云 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第9期132-137,共6页
多发性硬化(Multiple sclerosis,MS)是以人类中枢神经系统炎性脱髓鞘为主要特点的神经退行性疾病,并伴随着轴突损伤、胶质细胞增生、炎性细胞浸润等病理特征。双环己酮草酰二腙(Cuprizone,CPZ)是一种铜离子螯合剂,给小鼠饲喂CPZ可诱导... 多发性硬化(Multiple sclerosis,MS)是以人类中枢神经系统炎性脱髓鞘为主要特点的神经退行性疾病,并伴随着轴突损伤、胶质细胞增生、炎性细胞浸润等病理特征。双环己酮草酰二腙(Cuprizone,CPZ)是一种铜离子螯合剂,给小鼠饲喂CPZ可诱导小鼠中枢神经系统产生脱髓鞘病变,引起少突胶质细胞凋亡、少突胶质细胞祖细胞增殖、星形胶质细胞和小胶质细胞激活等病理变化,停止饲喂CPZ后,小鼠的中枢神经系统会逐步发生髓鞘再生现象,因此是研究MS脱髓鞘和髓鞘再生的常用模型。本文从CPZ小鼠模型构建、少突胶质细胞、星形胶质细胞、小胶质细胞以及髓鞘再生等不同方面进行了总结,并对采用CPZ模型的特色疗法进行了概括,从而为CPZ模型在科研与医学实践中的广泛应用提供了详细的理论依据。 展开更多
关键词 多发性硬化 CUPRIZONE 神经胶质细胞 脱髓鞘 髓鞘再生 特色疗法
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母源抗体对腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2免疫效力的影响 被引量：4
3
作者 雷建林 杜明亮 +5 位作者 孙元 夏水利 王异民 向广韬 胡永浩 仇华吉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期484-488,共5页
本实验室前期构建了具有标记特征的腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2,效力评价结果表明该嵌合疫苗的免疫原性与C株相当,并且能够完全提供对猪瘟病毒(CSFV)强毒石门株的攻毒保护。为进一步确定该疫苗的免疫效力是否受其... 本实验室前期构建了具有标记特征的腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2,效力评价结果表明该嵌合疫苗的免疫原性与C株相当,并且能够完全提供对猪瘟病毒(CSFV)强毒石门株的攻毒保护。为进一步确定该疫苗的免疫效力是否受其母源抗体(MDA)的干扰及制定合理有效的免疫程序,本研究将rAdV-SFV-E2疫苗株免疫妊娠期的母猪后检测其抗体诱导水平,然后将该疫苗株免疫具有其母源抗体的30日龄新生仔猪及无母源抗体仔猪(n=4),攻毒后,监测所有仔猪的抗体水平、临床症状、病毒血症、病理学等。结果显示,有无母源抗体的仔猪均能够产生高水平的特异性E2抗体及抗CSFV的中和抗体,而且攻毒后未出现猪瘟特异性临床症状,包括发热、食欲减退、腹泻及死亡等;对照组仔猪均出现了明显的临床症状,其死亡率为100%。本研究证明rAdV-SFV-E2疫苗的免疫效力未受其母源抗体的显著干扰,免疫30日龄的仔猪后能够完全抵抗致死性CSFV强毒石门株的攻击。 展开更多
关键词 猪瘟 嵌合载体疫苗 免疫效力 母源抗体
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猪流行性腹泻病毒N蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备 被引量：5
4
作者 李任峰 田香勤 +5 位作者 韩笑 王晓斐 姜金庆 夏小静 王异民 王自良 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第4期52-57,共6页
本研究旨在采用原核表达系统表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)的核衣壳蛋白(N),并进一步制备其单克隆抗体。将构建重组原核表达质粒pET28a-N转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达重组蛋白,并采用Ni-NTA亲和层析和分子筛进行纯化... 本研究旨在采用原核表达系统表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)的核衣壳蛋白(N),并进一步制备其单克隆抗体。将构建重组原核表达质粒pET28a-N转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达重组蛋白,并采用Ni-NTA亲和层析和分子筛进行纯化。将纯化后的重组N蛋白免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾脏B淋巴细胞与SP2/0瘤细胞融合,采用间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞株,并对其分泌抗体的特性进行了分析。结果显示:重组质粒pET28a-N在E.coli BL21中高效表达,筛选获得了2株稳定分泌抗N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株1A3和4F6,其分泌的抗体均为IgG1亚型,腹水效价分别为5.12×10^5、1.28×10^5。本研究为进一步研究N蛋白的功能以及建立PEDV免疫学诊断方法奠定了基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 N蛋白 原核表达 单克隆抗体
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河南省新乡地区猪流行性腹泻流行病学调查 被引量：2
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作者 李任峰 秦保亮 +4 位作者 李文霞 姜金庆 夏小静 王异民 王自良 《河南科技学院学报（自然科学版）》 2019年第5期42-45,共4页
猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)对我国养猪业造成了持续性影响.为了弄清河南省新乡地区猪流行性腹泻的发病规律,对2018年1—12月期间采自新乡地区延津县、封丘县、原阳县、获嘉县、长垣县5个县55个猪场的351... 猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)对我国养猪业造成了持续性影响.为了弄清河南省新乡地区猪流行性腹泻的发病规律,对2018年1—12月期间采自新乡地区延津县、封丘县、原阳县、获嘉县、长垣县5个县55个猪场的351份病料进行了RT-PCR检测.结果表明:PEDV的猪场阳性率和样品阳性率分别为41.3%(19/55)和35.2%(125/351);其中以延津县的样品阳性率最高,为58.33%,封丘县最低,为23.6%;不同季节均有PED发病,冬季较高,阳性率为55.2%,春、秋季较低,阳性率分别为15.0%和32.9%;PEDV与传染性胃肠炎病毒(TGEV)、轮状病毒(RV)和圆环病毒2型(PCV2)存在不同程度的混合感染.研究结果为新乡地区PEDV的防控提供了参考. 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 流行病学 调查
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脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白对脂肪代谢的调控 被引量：7
6
作者 丁悦 苗志国 +5 位作者 赵伟鑫 刘永亮 魏攀鹏 侯文博 张金洲 王异民 《河南科技学院学报（自然科学版）》 2019年第4期41-46,共6页
随着生活水平与膳食结构的不断改善,人们对畜产品质量的要求越来越高.肌内脂肪的组成与含量是影响畜产品品质的重要因素,而脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(adipocyte fatty acid-binding protein,A-FABP)可通过结合长链脂肪酸进而调节脂肪代... 随着生活水平与膳食结构的不断改善,人们对畜产品质量的要求越来越高.肌内脂肪的组成与含量是影响畜产品品质的重要因素,而脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(adipocyte fatty acid-binding protein,A-FABP)可通过结合长链脂肪酸进而调节脂肪代谢过程,并最终改善畜产品品质.就A-FABP基因的结构、功能及其对脂肪代谢调控的分子机制进行综述,从而为优质畜产品生产提供理论参考. 展开更多
关键词 脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(A-FABP) 脂肪代谢 调控 畜产品
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CSFV免疫状态下外周血T淋巴细胞亚群变化及对PRRS的免疫保护作用 被引量：10
7
作者 屈雪琪 白雪 +2 位作者 王异民 赵建增 高英杰 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1089-1094,共6页
建立CSFV疫苗免疫状态下猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染动物模型。测定CSFV抗体阻断率和PRRSV抗体S/P值,根据CSFV抗体阻断率和PRRSV感染情况分析猪外周血中T淋巴细胞亚群变化和对PRRS的保护促进作用。采用流式细胞术(FAC)检测猪外周... 建立CSFV疫苗免疫状态下猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染动物模型。测定CSFV抗体阻断率和PRRSV抗体S/P值,根据CSFV抗体阻断率和PRRSV感染情况分析猪外周血中T淋巴细胞亚群变化和对PRRS的保护促进作用。采用流式细胞术(FAC)检测猪外周血T淋巴细胞CD3、CD4、CD8亚群的变化。结果,CSFV高抗体组中感染PRRSV比率小于CSFV低抗体组;感染PRRSV与未感染PRRSV组比较,CD3+,CD4++CD8+细胞表达量及CD4+/CD8+比值降低;CSFV高抗体组CD3+细胞数量低于CSFV低抗体组,差异显著(P<0.05),CD4++CD8+数量高于CSFV低抗体组,差异显著(P<0.05),CD4+/CD8+比值高于CSFV低抗体组,CSFV高抗体未感染PRRSV组平均值达到1.07,与各组差异显著(P<0.05);CD4+CD8+细胞数量各组没有明显变化,CD4-CD8-细胞数量CSFV低抗体组高于CSFV高抗体组,差异显著(P<0.05)。感染PRRSV组和未感染PRRSV组中,CSFV高抗体组CD3+细胞表达量显著低于CSFV低抗体组,CD4++CD8+及CD4+/CD8+细胞比值显著高于CSFV低抗体组,CD4-CD8-明显低于CSF低抗体组。结果表明免疫CSFV疫苗后,CSFV高抗体组和CSFV低抗体组及每组中感染PRRSV情况不同外周血T淋巴细胞亚群有明显变化,获得CSFV抗体保护的猪体对PRRSV感染产生一定的保护作用。 展开更多
关键词 猪瘟疫苗 猪繁殖与呼吸综合征病毒 流式细胞术 淋巴细胞亚群 保护作用
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嗜神经性疱疹病毒:神经科学研究的有力工具 被引量：1
8
作者 李明智 潘力 +3 位作者 吴红霞 仇华吉 王异民 孙元 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期7-18,共12页
病毒是研究现代神经科学的有力工具。对神经元的连接方式及功能研究大都是利用重组病毒完成的,嗜神经性疱疹病毒便是其中一种重要工具。随着基因工程学以及分子生物学技术的不断发展,多种嗜神经性疱疹病毒被改造为不同的重组病毒工具应... 病毒是研究现代神经科学的有力工具。对神经元的连接方式及功能研究大都是利用重组病毒完成的,嗜神经性疱疹病毒便是其中一种重要工具。随着基因工程学以及分子生物学技术的不断发展,多种嗜神经性疱疹病毒被改造为不同的重组病毒工具应用于神经科学研究。本文基于几种常见且应用较为广泛的嗜神经性疱疹病毒作为神经传导示踪工具、治疗神经性疾病的病毒载体和溶瘤病毒治疗神经肿瘤等应用进行阐述及讨论,为进一步开发嗜神经性疱疹病毒的功能提供参考。 展开更多
关键词 嗜神经性疱疹病毒 病毒示踪 神经环路 神经性疾病治疗
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兽医病理学数字化标本库的建设与应用 被引量：4
9
作者 胡东方 银梅 +2 位作者 王异民 郭丽红 刘思当 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第22期152-154,161,170,共5页
为了更好地加深学生对疾病发生发展过程和临床表现的认知,促进学生学习的积极性和主动性,提高兽医病理学的教学效果,有效解决目前兽医病理学实验教学过程中大体标本数量少、病变不典型及珍贵标本损坏等问题,笔者在互联网技术、移动设备... 为了更好地加深学生对疾病发生发展过程和临床表现的认知,促进学生学习的积极性和主动性,提高兽医病理学的教学效果,有效解决目前兽医病理学实验教学过程中大体标本数量少、病变不典型及珍贵标本损坏等问题,笔者在互联网技术、移动设备及虚拟现实技术蓬勃发展的新形势下,利用三维立体成像技术构建大体标本的数字化标本库,利用数字扫描技术建立病理切片的数字切片库,采用“虚拟实验教学+实体操作”虚实相结合的实验教学模式,有效弥补了传统病理学实验教学的不足,实现了病理实验教学手段的革新,为学生提供一种更生动、更形象、更有效的学习途径,有利于提高实验教学质量,培养理论与实践相结合的应用型人才。 展开更多
关键词 兽医病理学 实验教学 三维立体标本 数字化切片 病理形态学
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