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新型肝癌相关性抗原HCA519及其变异体HCA90的基因克隆和表达 被引量:4
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作者 王歈 韩克军 +1 位作者 屈伟 陈慰峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期46-52,共7页
通过利用肝癌病人体内血清中所含的对肿瘤抗原产生的特异性抗体筛选肝癌组织cDNA表达文库的方法 (SEREX) ,筛选得到了可以诱导肝癌病人抗体免疫应答的两个新抗原HCA5 19基因(GenBankAF14 6 731)及其变异体HCA90基因 (GenBankAF 2 872 6 ... 通过利用肝癌病人体内血清中所含的对肿瘤抗原产生的特异性抗体筛选肝癌组织cDNA表达文库的方法 (SEREX) ,筛选得到了可以诱导肝癌病人抗体免疫应答的两个新抗原HCA5 19基因(GenBankAF14 6 731)及其变异体HCA90基因 (GenBankAF 2 872 6 5 ) .它们定位于染色体 2 0q11 2 ,HCA5 19含 18个外显子 ,HCA90含 19个外显子 .其中HCA90所特有的外显子序列长 10 8bp ,属Alu重复序列片段 ,插入于HCA5 19外显子 10和 11之间 ,原为HCA5 19内含子序列 .该插入片段位于HCA5 19开放阅读框架之内 ,不改变HCA5 19的读码框 ,使HCA5 19编码的 74 7个氨基酸增长至HCA90的 783个氨基酸 .通过Northern杂交和RT PCR分析发现 ,HCA5 19和HCA90基因分别在 9 9例和 6 9例肝癌组织中高表达 ,RT PCR显示 ,它们在正常肝组织和其它正常组织中有极低水平转录本表达 .而这种低表达转录本在Northern杂交中不能被检测到 .HCA5 19蛋白被首次发现在肿瘤病人中能够诱导机体的抗体免疫应答 ,为一个新的肿瘤相关性抗原分子 .其变异体HCA90抗原基因为首次发现的新基因 .其功能可能与细胞的恶性增殖相关 。 展开更多
关键词 肝细胞癌 HCA519 HCA90 SEREX 基因克隆 基因表达
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肿瘤相关抗原基因HCA519在昆虫细胞中的表达和纯化 被引量:4
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作者 王歈 李燕 陈慰峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期50-54,共5页
为进行肿瘤细胞免疫应答的研究及制备肿瘤诊断用抗体 ,利用昆虫细胞表达系统表达了肿瘤相关性抗原HCA5 19的重组蛋白 ,并进行了纯化 .所表达的重组蛋白分子量约 10 0kD ,含 75 5个氨基酸残基 ,在HCA5 19cDNA3′端接入FLAG序列 ,则在重... 为进行肿瘤细胞免疫应答的研究及制备肿瘤诊断用抗体 ,利用昆虫细胞表达系统表达了肿瘤相关性抗原HCA5 19的重组蛋白 ,并进行了纯化 .所表达的重组蛋白分子量约 10 0kD ,含 75 5个氨基酸残基 ,在HCA5 19cDNA3′端接入FLAG序列 ,则在重组蛋白C端接入 1个 8肽的FLAG尾 .利用其特异性抗体可以有效地纯化重组蛋白 .该FLAGTAG不影响整个重组蛋白的免疫反应性 .纯化的重组蛋白与天然蛋白具有相同或相似的免疫反应性 .它可与识别天然蛋白的血清抗体发生同样的阳性反应 .HCA5 19的足量提供 ,可以免疫动物 ,制备抗体 ;可作为抗原 ,分析其诱导肿瘤病人CTL的特异应答 。 展开更多
关键词 HCA519 肿瘤相关性抗原 重组蛋白 免疫反应性 昆虫细胞 表达 纯化
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利用肿瘤抗原多肽疫苗进行肿瘤的免疫治疗 被引量:3
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作者 王歈 陈慰峰 《自然科学进展》 北大核心 2002年第9期903-907,共5页
利用肿瘤抗原多肽疫苗进行肿瘤的临床免疫治疗已成为肿瘤根除性治疗的重要发展方向,随着诱导机体免疫应答的各类不同肿瘤抗原的不断发现,多种肿瘤多肽疫苗已进入临床试验,并取得一定的效果,但高效广谱的疫苗还有待于进一步研究,文中总... 利用肿瘤抗原多肽疫苗进行肿瘤的临床免疫治疗已成为肿瘤根除性治疗的重要发展方向,随着诱导机体免疫应答的各类不同肿瘤抗原的不断发现,多种肿瘤多肽疫苗已进入临床试验,并取得一定的效果,但高效广谱的疫苗还有待于进一步研究,文中总结了设计选用肿瘤多肽疫苗的依据和原则,着重阐述了用作疫苗的肿瘤抗原的选择及其发展方向,为研究肿瘤抗原多肽疫苗提供参考。 展开更多
关键词 肿瘤抗原 多肽疫苗 细胞因子 肿瘤治疗 免疫治疗 免疫应答 抗原特异性
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临床肿瘤免疫治疗技术的突破和问题 被引量:7
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作者 王歈 《医学与哲学(B)》 2015年第2期10-12,34,共4页
通过干预、改造肿瘤患者T细胞进行肿瘤免疫治疗的方法,在部分类型的肿瘤患者取得了长期缓解的疗效。其中包括非特异性解除患者T细胞免疫抑制(阻断免疫检查点)可以使约20%的黑色素瘤和非小细胞肺癌患者获得长期缓解;通过基因转染赋予患者... 通过干预、改造肿瘤患者T细胞进行肿瘤免疫治疗的方法,在部分类型的肿瘤患者取得了长期缓解的疗效。其中包括非特异性解除患者T细胞免疫抑制(阻断免疫检查点)可以使约20%的黑色素瘤和非小细胞肺癌患者获得长期缓解;通过基因转染赋予患者T细胞识别肿瘤细胞抗原和活化的信号,嵌合抗原受体-T细胞(CAR-T)治疗在致死性儿童急性淋巴细胞白血病中取得了约90%的疗效。长期疗效达到75%。这些临床成果,使得肿瘤免疫治疗逐步成为部分肿瘤治疗的一线治疗方案。然而,受到肿瘤高度异质性、能够选择肿瘤抗原的有限性、肿瘤免疫逃逸多重机制的影响,肿瘤免疫治疗仍有许多关键问题需要基础和临床研究进行尝试和解决。 展开更多
关键词 肿瘤免疫治疗 免疫检查点 嵌合抗原受体-T细胞 T细胞受体
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恶性肿瘤的免疫治疗 被引量:4
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作者 王歈 《继续医学教育》 2006年第8期99-102,共4页
关键词 恶性肿瘤 免疫治疗 肿瘤免疫应答 发生发展 免疫系统 二十世纪 肿瘤研究 移植肿瘤
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诱导免疫应答的肿瘤抗原
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作者 王歈 《生命科学》 CSCD 2002年第1期23-26,共4页
肿瘤抗原可以诱导机体的免疫应答,是肿瘤的免疫治疗中多肽疫苗的分子基础。近十年来发展起来的肿瘤疫苗筛选方法,利用肿瘤抗原特异性T细胞或抗体识别肿瘤抗原,为临床肿瘤免疫治疗提供了大量备选抗原分子。文中总结了肿瘤抗原的种类... 肿瘤抗原可以诱导机体的免疫应答,是肿瘤的免疫治疗中多肽疫苗的分子基础。近十年来发展起来的肿瘤疫苗筛选方法,利用肿瘤抗原特异性T细胞或抗体识别肿瘤抗原,为临床肿瘤免疫治疗提供了大量备选抗原分子。文中总结了肿瘤抗原的种类;及迄今几乎所有被证明的含有T细胞识别表位的抗原分子及其血清学反应性,为临床肿瘤疫苗的选择提供了依据。 展开更多
关键词 肿瘤抗原 多肽疫苗 细胞因子 免疫治疗 恶性肿瘤 免疫应答
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雌激素受体在原发性肝癌中的表达与变异 被引量:6
7
作者 邢宝才 家宏 +3 位作者 郝纯毅 黄信孚 王歈 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期620-622,共3页
目的:通过研究原发性肝癌组织中野生型雌激素受体(wild type Estrogen receptor,wER)以及第5外显子缺失而变异的雌激素受体(variant estrogen receptor,vER)的表达情况,期望对原发性肝癌进行内分泌治疗的可能性进行分析。方法:收... 目的:通过研究原发性肝癌组织中野生型雌激素受体(wild type Estrogen receptor,wER)以及第5外显子缺失而变异的雌激素受体(variant estrogen receptor,vER)的表达情况,期望对原发性肝癌进行内分泌治疗的可能性进行分析。方法:收集我院原发性肝癌手术切除的标本28例,应用 RT-PCR 的方法分析 wER 与 vER 在 mRNA 水平的表达,同时通过免疫组织化学分析对 ER 在蛋白水平的表达进行检测。结果:免疫组织化学显示原发性肝癌组织中 ER 的表达率为39.3%(11/28);RT-PCR 显示所有标本中均检测到雌激素受体的表达,89.3%(25/28)的原发性肝癌病人表达 wER,96.4%(27/28)的肝癌表达 vER,其中 wER 和 vER 联合表达的病人为85.7%(24/28),仅表达wER 的病人为3.5%(1/28),而仅表达 vER 的为10.7%(3/28)。结论:在原发性肝癌的形成过程中,96.4%(27/28)的肝癌出现 ER 的变异,提示 ER 的变异与原发性肝癌的形成有密切的关系。 展开更多
关键词 ER 原发性肝癌 表达 雌激素受体 病人 癌组织中 免疫组织化学 MRNA水平 变异 外显子
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肿瘤相关抗原基因HCA520重组蛋白的表达纯化及其肝癌患者血清中相应抗体的分析 被引量:7
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作者 韩克军 杨美香 +2 位作者 王歈 李燕 陈慰峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期31-35,共5页
HCA5 2 0是用SEREX(serologicalidentificationofrecombinantcDNAexpressingcloning)方法 ,即用肝癌病人血清从肝癌组织cDNA表达文库中筛选得到的肝癌相关性抗原编码基因 .利用RT PCR技术检测了HCA5 2 0mRNA在各种组织中的分布情况 ,构... HCA5 2 0是用SEREX(serologicalidentificationofrecombinantcDNAexpressingcloning)方法 ,即用肝癌病人血清从肝癌组织cDNA表达文库中筛选得到的肝癌相关性抗原编码基因 .利用RT PCR技术检测了HCA5 2 0mRNA在各种组织中的分布情况 ,构建了GST融合表达载体并且用亲和层析的方法纯化表达的融合蛋白 .最后用Western印迹检测了重组蛋白的免疫反应性 ,用斑点印迹检测了肝癌病人血清中HCA5 2 0的天然抗体的存在情况 .结果表明 ,HCA5 2 0在各种组织中呈丰度差异分布 ,构建好的pGEX 4T 3重组载体经IPTG诱导后高效表达GST HCA5 2 0融合蛋白 ,其分子量约 4 9kD .经GST Agarose亲和层析 ,重组蛋白得到高度纯化 .Western印迹证实 ,纯化蛋白为目的重组蛋白 ,重组蛋白具有与天然蛋白相同或相似的免疫反应性 .斑点印迹分析表明 ,2 0份肝癌病人血清中有 1份HCA5 2 0抗体阳性 ,而 4份正常人均为阴性 .HCA5 2 0的足量提供 ,可用以研究其在致癌中的作用 ,并可以免疫动物制备抗体 .它作为抗原 ,分析其抗体在不同肿瘤病人中的表达情况 。 展开更多
关键词 HCA520 肿瘤相关性抗原 重组融合蛋白 免疫反应性
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癌基因与抗癌基因在心血管病中的作用 被引量:7
9
作者 周爱儒 夏凉 +6 位作者 杨和平 王歈 姚阿卿 温进坤 汤健 李岱宗 顾健人 《北京医科大学学报》 CSCD 1993年第2期90-90,共1页
高血压和动脉粥样硬化都是以血管平滑肌细胞增生为主要特征的疾病,但其发病机理尚不十分清楚。我们曾提出癌基因表达异常可能是某些心血管病细胞增殖的重要因素之一。本工作应用分子杂交和反义核酸技术表明,某些癌基因的过度表达或抗癌... 高血压和动脉粥样硬化都是以血管平滑肌细胞增生为主要特征的疾病,但其发病机理尚不十分清楚。我们曾提出癌基因表达异常可能是某些心血管病细胞增殖的重要因素之一。本工作应用分子杂交和反义核酸技术表明,某些癌基因的过度表达或抗癌基因的表达不足/突变可能参与高血压和动脉粥样硬化的发病过程。 展开更多
关键词 致癌基因 抗癌基因 心脏血管疾病
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人类肿瘤组织中非编码RNA-NC28和NC119的鉴定及表达
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作者 孙贞媛 袁艳华 +8 位作者 刘长宁 赵屹 黄洁夫 桑新亭 毛一雷 卢欣 王歈 常永生 赵海涛 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期618-621,共4页
目的寻找并验证与肿瘤相关的非编码RNA。方法采用RT-PCR和Northern blot分析非编码RNA在肿瘤组织及细胞系中的表达情况。结果RT-PCR在实体肿瘤和细胞系中鉴定了2个非编码RNA-NC28和NC119的表达,Northernblot检测发现NC28转录子长度大约... 目的寻找并验证与肿瘤相关的非编码RNA。方法采用RT-PCR和Northern blot分析非编码RNA在肿瘤组织及细胞系中的表达情况。结果RT-PCR在实体肿瘤和细胞系中鉴定了2个非编码RNA-NC28和NC119的表达,Northernblot检测发现NC28转录子长度大约为1800个核苷酸,NC119转录子长度大约为1200个核苷酸。结论这两种非编码RNA具有一定的肿瘤共享性,非编码RNA在肿瘤发生发展中可能发挥一定作用。 展开更多
关键词 肿瘤 非编码RNA 肿瘤特异性 差异表达 表达序列标签
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细胞治疗·研究评价 被引量:31
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作者 孟淑芳 佑春 +14 位作者 吴雪伶 赵翔 黄维金 宋雪 贾芳英 霍艳 侯田田 黄瑛 文海若 李芊芊 屈哲 王歈 俞磊 《中国药事》 CAS 2018年第6期829-852,共24页
嵌合抗原受体T细胞,即CAR—T(Chimeric antigen receptor T)是一种基因修饰的T细胞,通过将带有特异性肿瘤细胞抗原识别结构域及T细胞激活信号的遗传物质转人T细胞,使T细胞通过直接与肿瘤细胞表面的特异性抗原相结合而激活,通过释... 嵌合抗原受体T细胞,即CAR—T(Chimeric antigen receptor T)是一种基因修饰的T细胞,通过将带有特异性肿瘤细胞抗原识别结构域及T细胞激活信号的遗传物质转人T细胞,使T细胞通过直接与肿瘤细胞表面的特异性抗原相结合而激活,通过释放穿孔素、颗粒酶素B等直接杀伤肿瘤细胞;同时,还通过释放细胞因子募集人体内源性免疫细胞杀伤肿瘤细胞,从而达到治疗肿瘤的目的;此外,还可形成免疫记忆T细胞从而获得特异性的抗肿瘤长效机制。由于CD19-CAR—T细胞在多种血液肿瘤临床试验中的突出表现,CAR—T细胞已经在全球范围内掀起了研究热潮,甚至有研究者认为肿瘤治愈已成为可能。 展开更多
关键词 细胞治疗 质量控制检测 非临床研究 肿瘤细胞表面 T细胞激活信号 RECEPTOR 杀伤肿瘤细胞 特异性抗原
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腹泻病控制计划1990年中期报告——疫苗部分
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作者 王歈 《微生物学免疫学进展》 1991年第4期42-45,共4页
1990年,与疫苗有关的研究主要是进行轮状病毒性腹泻和伤寒的候选疫苗的现场评价,同时支持研究开发新的和改进的针对轮状病毒性腹泻、志贺氏菌属性腹泻、霍乱及由肠毒性大肠杆菌引起的腹泻的候选疫苗。
关键词 疫苗 腹泻
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嵌合抗原受体T细胞在重度免疫缺陷鼠体内的生物分布研究
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作者 侯田田 李雪姣 +6 位作者 孙磊 秦超 赵晶 霍艳 王歈 耿兴超 黄瑛 《中国药物警戒》 2022年第8期823-827,844,共6页
目的研究嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞在非荷瘤和荷瘤重度免疫缺陷小鼠体内的增殖、分布和存续时间。方法非荷瘤小鼠分布研究:使用转染荧光素酶的CAR-T(CAR-T-FLuc)细胞于小鼠尾静脉给药1次,于给药后不同时间点采用活体成像的方法检测CAR-T... 目的研究嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞在非荷瘤和荷瘤重度免疫缺陷小鼠体内的增殖、分布和存续时间。方法非荷瘤小鼠分布研究:使用转染荧光素酶的CAR-T(CAR-T-FLuc)细胞于小鼠尾静脉给药1次,于给药后不同时间点采用活体成像的方法检测CAR-T-FLuc细胞分布情况,并在给药后3 h和2、7、14、28、56、84 d解剖动物,取血液、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脑、睾丸、附睾、子宫、卵巢、胃、十二指肠、骨髓、脂肪、骨骼肌,QPCR方法检测CAR-T-FLuc细胞在外周血及上述组织器官中的分布情况。荷瘤小鼠分布研究:小鼠尾静脉注射Raji细胞,建立肿瘤模型,之后给予CAR-T-FLuc细胞,并采用与非荷瘤小鼠相同的检测方法考察CAR-T-FLuc细胞在活体和各组织脏器不同时间点的表达。结果非荷瘤小鼠CAR-T-FLuc细胞在脾脏和肺脏中分布最高,其次是血液;给药后3 h,细胞主要分布在肺脏,后转移到其他脏器;各脏器给药后2、14、56 d是CAR表达较高时间点,84 d时CAR表达接近为零。荷瘤小鼠CAR-T-FLuc细胞在脾脏中分布最高,其次是肺和血液。给药后5 min外周血中即可检测到CAR表达,1、6、27 d为CAR表达高峰时间点;大多组织于给药后3 h可检测到CAR-T细胞,以肺中含量最高,随后呈下降趋势,15 d时最低,之后各组织CAR-T细胞含量持续升高,55 d达高峰。结论CAR-T-FLuc细胞在非荷瘤鼠和荷瘤鼠中主要分布在脾脏、肺脏和血液,但在2种动物体内分布具有不同变化趋势,且在荷瘤鼠体内扩增水平高于非荷瘤鼠。 展开更多
关键词 嵌合抗原受体T细胞(CAR-T细胞) 生物分布 NSG小鼠 荷瘤鼠 非荷瘤鼠 重度免疫缺陷
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多种癌-睾丸抗原基因在术前化疗非小细胞肺癌中的表达 被引量:4
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作者 王歈 梁震 +7 位作者 袁艳华 韩燕 刘月香 刘年 Yao-Tseng Chen Gerd Ritter Lloyd J Old 张力建 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期464-468,共5页
目的 研究癌 睾丸抗原 (CT)抗原在经术前化疗的非小细胞肺癌 (NSCLC)中的表达谱 ,以确定NSCLC经化疗、手术后可能的辅助免疫治疗疫苗治疗组成成分。方法 用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测了 5 1例经化疗后手术的原发性NSCLC病人... 目的 研究癌 睾丸抗原 (CT)抗原在经术前化疗的非小细胞肺癌 (NSCLC)中的表达谱 ,以确定NSCLC经化疗、手术后可能的辅助免疫治疗疫苗治疗组成成分。方法 用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测了 5 1例经化疗后手术的原发性NSCLC病人肿瘤组织中 11种CT抗原基因的表达情况。结果 所检测的 11种CT基因在经化疗后的NSCLC表达最高的为MAGE 3,38% ,其次分别为NY ESO 12 1% ,CT10 17% ,LAGE 115 % ,MAGE 4 13% ,SCP 1、SSX1、SSX4均为 12 % ,MAGE 110 % ,SSX2 6 % ,CT72 %。在这些病人中 ,有 34例 (6 7% )病人表达至少 1种CT基因。在不表达所检测的任何CT基因的 17例病人中 ,13例 (76 % )为Ⅰ期病人。MAGE 3和CT10在NSCLC中表现出了随疾病进展而增加的现象 ;反之 ,SCP 1的表达主要在Ⅰ期和Ⅱ期。将NSCLC经病理分类分为鳞癌和腺癌 ,发现鳞癌中至少表达 1种CT基因 (75 % )和共表达CT基因的频率 (5 5 % )均比腺癌 (5 3%和 2 4 % )高。结论  (1)包括MAGE 3、NY ESO 1、LAGE 1等抗原成分的CT抗原疫苗可应用于术前化疗的NSCLC病人的治疗 ;(2 )对不同NSCLC肿瘤分期的病人可采取不同CT抗原成分疫苗 ;(3)对晚期手术和化疗疗效不好的病人和鳞癌病人 ,CT抗原疫苗治疗是一个值得研究的重要方向。 展开更多
关键词 基因表达调控 免疫疗法 化学疗法 非小细胞肺癌 癌-睾丸抗原基因
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11种癌-睾丸抗原基因在食管癌中表达的检测 被引量:9
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作者 梁震 孙贞媛 +4 位作者 袁艳华 韩燕 王歈 顾晋 张力建 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期534-537,共4页
目的研究11种癌-睾丸(CT)抗原基因在食管癌中的表达,明确食管癌辅助免疫治疗疫苗的组成成分,为食管癌肿瘤疫苗的研制提供理论依据。方法用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测35例食管癌肿瘤组织以及相对应的癌旁正常食管黏膜组织中11种C... 目的研究11种癌-睾丸(CT)抗原基因在食管癌中的表达,明确食管癌辅助免疫治疗疫苗的组成成分,为食管癌肿瘤疫苗的研制提供理论依据。方法用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测35例食管癌肿瘤组织以及相对应的癌旁正常食管黏膜组织中11种CT抗原基因的表达。结果所检测的11种CT抗原基因在正常食管黏膜中均无表达。在食管癌组织中表达率最高的为MAGE-3(62.9%);其次为MAGE-4(31.4%)、LAGE-1(28.6%)、MAGE-1(25.7%)、CT10(20.0%)、NY-ESO-1(20.0%)、CT7(5.7%)和SCP-1(2.9%),无一例食管癌组织表达SSX-1、SSX-2、SSX-4基因。在35例食管癌组织中,28例(80.0%)表达至少1种CT基因,21例(60.0%)表达2种以上的CT基因。其中,19.0%(4/21)同时表达4种及4种以上CT基因,占总数的11.4%(4/35)。不表达任何CT基因的7例中,Ⅱ期5例,Ⅰ期和Ⅳ期各1例。NY-ESO-1、LAGE-1、MAGE-1、MAGE-3和MAGE-4基因随肿瘤进展,其表达率增加;而SCP-1和CT10的表达主要集中在较早期的Ⅰ期及Ⅱ期食管癌组织。随着肿瘤分期的提高,CT基因的共表达率呈上升趋势,在Ⅲ期时达到最高,为28.6%。结论(1)包含MAGE-3、MAGE-4和LAGE-1等抗原成分的CT抗原疫苗可应用于食管癌患者的免疫治疗;(2)对不同病理分期的食管癌患者应采取含有不同CT抗原成分的疫苗;(3)SSX-1、SSX-2、SSX-4在食管癌组织中无表达,其具体机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 癌/睾丸抗原 食管肿瘤 肿瘤疫苗 免疫治疗 癌-睾丸抗原基因 食管癌组织 检测 逆转录-聚合酶链反应法 MAGE-4基因 NY-ESO-1
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Thy-1肿瘤标记物在肺癌组织中的异常表达及其对肺癌患者预后的影响 被引量:7
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作者 陈晋峰 张力建 +7 位作者 赵爱莲 王歈 吴楠 熊宏超 梁震 李吉友 黄信孚 杨跃 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第27期1921-1925,共5页
目的通过免疫组织化学染色的方法了解Thy1在肺癌组织中的表达状况,分析其对于非小细胞肺癌患者预后的影响,并了解Thy1与p53表达之间的相关性,为Thy1在肺癌中表达机理的进一步研究提供思路。方法以组织芯片的形式,采用免疫组化信号催化... 目的通过免疫组织化学染色的方法了解Thy1在肺癌组织中的表达状况,分析其对于非小细胞肺癌患者预后的影响,并了解Thy1与p53表达之间的相关性,为Thy1在肺癌中表达机理的进一步研究提供思路。方法以组织芯片的形式,采用免疫组化信号催化放大法,对175例包括不同病理类型的肺组织标本中Thy1的表达情况进行检测,并对其中的91例非小细胞肺癌进行Thy1和p53的联合检测。分析这两种蛋白表达之间的相关性,结合临床病理资料及随访结果分析Thy1与患者生存预后的关系。结果Thy1抗体特异性地在不同病理类型肺癌细胞的胞核中有强阳性染色,89例(56.7%)为Thy1细胞核染色阳性。91例非小细胞肺癌患者预后的单因素和多因素分析显示,TNM分期、淋巴结转移和Thy1在细胞核中高表达是影响患者预后的独立因素。分层研究提示,无淋巴结转移组中,Thy1细胞核阴性患者的生存时间明显长于阳性患者(分别为46.42个月和38.56个月,P=0.0207)。Thy1和p53两者表达之间存在显著的相关性(P<0.001)。结论Thy1在肺癌细胞核内特异性高表达是非小细胞肺癌患者预后的影响因素之一。Thy1在细胞核内的异常高表达可以作为肺癌病理诊断的标记物。 展开更多
关键词 THY-1 肺癌患者 肺癌组织 肿瘤标记物 预后 异常 表达及 免疫组织化学染色 非小细胞肺癌 临床病理资料 病理类型 细胞核内 P53表达 抗体特异性 多因素分析 TNM分期 淋巴结转移 相关性 高表达 表达状况 组织芯片 免疫组化
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NY-ESO-1/LAGE-1基因在肝癌组织中的表达及其诱导的体液免疫应答 被引量:6
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作者 邢宝才 袁艳华 +5 位作者 胡志国 刘月香 韩燕 刘年 陈慰峰 王歈 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第23期1980-1982,共3页
目的 检测肿瘤特异性共享抗原NY ESO 1/LAGE 1基因在肝癌中的表达情况及其诱导肝癌患者体液免疫应答的能力 ,为利用NY ESO 1/LAGE 1为抗原进行肝癌的疫苗免疫治疗提供依据。方法 利用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测了 34例肝... 目的 检测肿瘤特异性共享抗原NY ESO 1/LAGE 1基因在肝癌中的表达情况及其诱导肝癌患者体液免疫应答的能力 ,为利用NY ESO 1/LAGE 1为抗原进行肝癌的疫苗免疫治疗提供依据。方法 利用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测了 34例肝癌患者癌和癌旁组织NY ESO 1/LAGE 1基因mRNA水平的表达 ;利用酶联免疫吸附实验检测了NY ESO 1/LAGE 1在 37例肝癌患者中诱导自身抗体产生的能力。结果  34例肝癌组织中 9例 ( 2 6 .5 % )表达NY ESO 1,12例 ( 35 3% )表达LAGE 1。其中 ,同一标本中共表达NY ESO 1/LAGE 1的病例数为 7例 ;表达其中至少一种基因的14例 ,占总数的 4 1.2 %。所检测的 37份肝癌患者血清中 ,6例患者血清抗NY ESO 1抗体阳性 ,5例为Ⅲ期及以上患者 ,1例为Ⅱ期患者。结论 NY ESO 1/LAGE 1在肝癌患者中表达率较高 ,并可诱导自身体液免疫应答 。 展开更多
关键词 NY-ESO-1/LAGE-1基因 肝癌 癌组织 表达 诱导 体液免疫应答
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靶向乙型肝炎表面抗原嵌合抗原受体T细胞对肝细胞癌杀伤作用的研究
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作者 隋明昊 王歈 +1 位作者 李崇辉 卢实春 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期51-55,共5页
目的:分析靶向乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的嵌合抗原受体(CAR)-T细胞对表达HBsAg的肝癌细胞的杀伤作用。方法:构建HBsAg-CAR基因,通过慢病毒载体将其转导入T细胞(健康捐献者的血液中获取),制备HBsAg-CAR-T细胞。制备CD19-CAR-T细胞作为Moc... 目的:分析靶向乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的嵌合抗原受体(CAR)-T细胞对表达HBsAg的肝癌细胞的杀伤作用。方法:构建HBsAg-CAR基因,通过慢病毒载体将其转导入T细胞(健康捐献者的血液中获取),制备HBsAg-CAR-T细胞。制备CD19-CAR-T细胞作为Mock组,未转导的T细胞为Untransduced组。上述三种效应细胞分别与肝癌细胞共同培养,检测三组细胞对肝癌细胞的杀伤作用及抗肿瘤细胞因子(肿瘤坏死因子-α、干扰素-γ、白细胞介素2等)释放水平。建立免疫缺陷NPG小鼠PLC/PRF/5肝癌皮下成瘤模型,随机分组,尾静脉注射HBsAg-CAR-T细胞(实验组,n=5)或未转导的T细胞(对照组,n=5),注射后第15天测量肿瘤体积。结果:体外培养过程中,HBsAg-CAR-T细胞具有较高的增殖能力及存活率,CAR的表达稳定。与表达HBsAg的肝癌细胞共培养后,HBsAg-CAR-T组释放的抗肿瘤细胞因子明显高于Mock组及Untransduced组,差异均有统计学意义(均P<0.05);HBsAg-CAR-T组对HBsAg表达阳性的肝癌细胞的杀伤率明显高于Mock组及Untransduced组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验组NPG小鼠肿瘤体积为(250.8±62.8)mm 3,低于对照组小鼠肿瘤体积(757.5±102.6)mm 3,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HBsAg-CAR-T细胞能够特异性识别并杀伤HBsAg阳性肝癌细胞,并释放高水平的抗肿瘤细胞因子。 展开更多
关键词 肝细胞 乙型肝炎表面抗原 T淋巴细胞 免疫治疗
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扩增活化的淋巴细胞在小鼠体内的生物分布评价 被引量:3
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作者 黄瑛 高阳 +5 位作者 霍艳 张澄 郭晓凯 周英男 王歈 军志 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第13期1587-1592,共6页
目的:研究免疫细胞治疗产品EAL细胞在小鼠体内的分布特征,为其临床应用提供安全性依据。方法:活体成像检测:采用C57BL/6小鼠,分阴性对照组和供试品组,阴性对照组(尾静脉注射,iv)给予生理盐水,供试品组给予DiR标记的EAL细胞,iv单次给药,... 目的:研究免疫细胞治疗产品EAL细胞在小鼠体内的分布特征,为其临床应用提供安全性依据。方法:活体成像检测:采用C57BL/6小鼠,分阴性对照组和供试品组,阴性对照组(尾静脉注射,iv)给予生理盐水,供试品组给予DiR标记的EAL细胞,iv单次给药,于3 h及1,3,6,9,15和21 d 7个时间点,麻醉动物后进行活体成像,检测DiR标记的细胞在小鼠体内的分布。流式细胞仪检测:采用C57BL/6小鼠,分阴性对照组和供试品组,阴性对照组给予非转基因鼠源的EAL细胞,供试品组给予GFP转基因鼠源的EAL细胞,iv单次给药,于3 h及1,3,6,9,15和21 d 7个时间点麻醉解剖,依次取外周血、脾脏、肝脏、肺脏、胸腺、淋巴结、肾脏、骨髓,流式细胞仪检测GFP^+EAL细胞在上述组织器官中所占的比例及分布数量。结果:EAL细胞注射进入动物体内后,其分布水平在给药后3 h至给药后3 d处于较高水平,随时间延长分布水平逐步降低,在给药后d 21可以降低至约峰值的65%以上,分布较高的脏器为肝脏、肺脏、脾脏、淋巴结和外周血液,其他器官有少量分布;同时,流式细胞检测及活体成像检测结果具有较好的一致性。结论:EAL细胞回输小鼠后,在体内不会广泛分布和长期存续,具有较好的临床前安全性。 展开更多
关键词 细胞治疗 扩增活化的淋巴细胞 生物分布 C57BL/6小鼠 安全性
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扩增活化的淋巴细胞EAL在C57BL/6小鼠中的重复给药毒性研究
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作者 黄瑛 高阳 +6 位作者 霍艳 张澄 姜华 张永华 王歈 军志 《药物评价研究》 CAS 2019年第10期1968-1974,共7页
目的对小鼠重复给予扩增活化的淋巴细胞EAL,考察其毒性反应,为临床应用提供安全性依据。方法采用C57BL/6小鼠,设A、B两大项目组,每个大项目组均设置阴性对照组、溶媒对照组、低剂量(1.5×10~6/只)及高剂量(1×10~7/只)组。A项每... 目的对小鼠重复给予扩增活化的淋巴细胞EAL,考察其毒性反应,为临床应用提供安全性依据。方法采用C57BL/6小鼠,设A、B两大项目组,每个大项目组均设置阴性对照组、溶媒对照组、低剂量(1.5×10~6/只)及高剂量(1×10~7/只)组。A项每组36只,进行常规毒性检测、血清生化测定、血液学测定、外周血T淋巴细胞亚群分布测定、大体病理学及组织病理学检查;B项每组24只,进行免疫学测定,包括γ-干扰素(IFN-γ)水平和外周血T淋巴细胞亚群分布测定。所有组别均雌雄各半,静脉注射给药,每周1次,共17次,恢复期为28 d。结果重复给予EAL可能会使C57BL/6小鼠体质量和摄食量增加(P<0.05)。IFN-γ检测结果显示给药组动物个别时间点IFN-γ水平升高。组织病理学检查结果显示给予供试品会加重低剂量组、高剂量组动物脾脏生发中心明显及易染体巨噬细胞增多的病变程度和/或病变频度。供试品未对其他评价指标产生明显影响。结论 C57BL/6小鼠重复给予EAL,可能会引起动物体质量、摄食量的增加以及脾脏生发中心明显和易染体巨噬细胞增多,未见其他相关的毒理学反应。该结果为EAL进入临床试验奠定了基础。 展开更多
关键词 细胞治疗 EAL C57BL/6小鼠 安全性
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