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唱响“完美行知”的百年弦歌——访南通市通州区实验小学王笑梅校长
1
作者 蒋晓飞 蔡华健 王笑梅 《生活教育》 2020年第10期5-10,共6页
一、以愿景为驱动:让学校成为儿童与美相遇的乐园《生活教育》:王校长您好!我们关注到南通市通州区实验小学是一所创办于1920年的学校,今年将迎来百年校庆的高光时刻。在百年来的办学过程中,学校广泛吸收和有机融合了清末举人、地方开... 一、以愿景为驱动:让学校成为儿童与美相遇的乐园《生活教育》:王校长您好!我们关注到南通市通州区实验小学是一所创办于1920年的学校,今年将迎来百年校庆的高光时刻。在百年来的办学过程中,学校广泛吸收和有机融合了清末举人、地方开明士绅孙儆先生出资办学的奉献精神,清末状元、近代著名实业家和教育家张謇先生"父教育、母实业"的教育强国理念,以及陶行知先生生活教育理论等多元思想,从而在长期的办学实践中取得了诸多荣誉。 展开更多
关键词 生活教育理论 百年校庆 陶行知 办学实践 一所 多元思想 实验小学 奉献精神
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高中人生规划需要循序渐进——北京市海淀区教育科学研究所德育心理中心科研员王笑梅专访 被引量：2
2
作者 赵彩侠 王笑梅 《中国教师》 2014年第9期10-14,共5页
《中国教师》：生涯规划在国外从19世纪末就开始了，而我国开展得比较晚，也不成熟。具体到海淀区，是从什么时候、基于何种考虑开始推行高中生涯规划的呢？
关键词 北京市海淀区 教育科学研究所 德育心理 循序渐进 人生规划 高中 专访 科研
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鸡群中鸡传染性贫血病原与抗体检测及分离株VP1基因序列分析 被引量：2
3
作者 冯笑艳 胡明雪 +10 位作者 林雨萌 刘长军 李凯 祁小乐 崔红玉 高立 王素艳 陈运通 王笑梅 张艳萍 高玉龙 《中国家禽》 北大核心 2024年第2期52-58,共7页
为了解鸡群中鸡传染性贫血病毒(CAV)感染及抗体产生情况,从黑龙江省两个无临床症状鸡群(B群和S群)中,分别采集血清通过ELISA方法进行抗体检测,采集抗凝血并分离淋巴细胞,针对基因组保守序列设计引物,通过PCR方法进行病原检测,并对从B群... 为了解鸡群中鸡传染性贫血病毒(CAV)感染及抗体产生情况,从黑龙江省两个无临床症状鸡群(B群和S群)中,分别采集血清通过ELISA方法进行抗体检测,采集抗凝血并分离淋巴细胞,针对基因组保守序列设计引物,通过PCR方法进行病原检测,并对从B群病原阳性鸡分离到的分离株进行VP1基因序列分析。结果显示,B群和S群CAV抗体阳性率分别为62.7%(79/126)和68.2%(88/129),病原阳性率分别为43.0%(49/114)和62.3%(48/77),其中,B群和S群中抗体和病原双阴性的鸡分别为23.7%(27/114)和15.6%(12/77),而抗体和病原双阳性的鸡分别高达28.1%(32/114)和46.8%(36/77);在双阳性鸡中,B群和S群分别有62.5%(20/32)和58.3%(21/36)抗体滴度在1.0×10^(4)及以上,从B群病原阳性鸡全血中分离到一株CAV(HLJ/2022株),分离株HLJ/2022第394位氨基酸为谷氨酰胺,具有强毒的分子特征;两个鸡群的环境拭子CAV阳性率为10.0%(3/30),存在于消毒前的鸡蛋表面、更衣处和鞋底。研究表明,检测鸡群的CAV抗体阳性率在62.7%以上,病原阳性率在43.0%以上,抗体滴度在1.0×104及以上CAV仍可存在,CAV流行株(HLJ/2022)具有强毒分子特征,鸡群环境中存在CAV污染,结果为CIA防控提供重要的参考意见。 展开更多
关键词 鸡传染性贫血病毒 血清学检测 病原学检测 病毒分离鉴定 VP1基因序列分析
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鸡pro-IL-1β表达、多克隆抗体制备与初步应用
4
作者 许萌萌 黄萌萌 +12 位作者 牛鑫鑫 王国栋 于航博 张玉龙 韩京哲 韩金泽 刘润杭 吴子文 于晓雪 王笑梅 高玉龙 李留安 祁小乐 《中国家禽》 北大核心 2024年第10期89-96,共8页
为研究禽类疫病病原触发炎症的分子机制,试验克隆和分析鸡源白细胞介素-1β前体(Interleukin-1β precursors,pro-IL-1β)基因,原核表达和纯化pro-IL-1β蛋白,用纯化的pro-IL-1β蛋白免疫小鼠制备pro-IL-1β多克隆抗体,对该抗体进行ELIS... 为研究禽类疫病病原触发炎症的分子机制,试验克隆和分析鸡源白细胞介素-1β前体(Interleukin-1β precursors,pro-IL-1β)基因,原核表达和纯化pro-IL-1β蛋白,用纯化的pro-IL-1β蛋白免疫小鼠制备pro-IL-1β多克隆抗体,对该抗体进行ELISA效价检测和鉴定,并初步测试了该抗体在间接免疫荧光试验和Western blot试验中的应用效果。结果显示:重组蛋白pro-IL-1β成功表达,分子量约37 ku,能与His标签抗体发生特异性结合反应;获得了ELISA效价高于1∶32 000的鼠抗pro-IL-1β多克隆抗体,该抗体可通过间接免疫荧光试验(IFA)检测到pro-IL-1β真核表达蛋白,也可通过Western blot试验检测到pro-IL-1β原核表达蛋白和真核表达蛋白,还可通过Western blot和IFA检测到传染性法氏囊病病毒(IBDV)诱发的巨噬细胞HD11内源性pro-IL-1β蛋白的表达。研究表明,试验成功制备鸡pro-IL-1β多克隆抗体,为进一步研究禽病病原诱发炎症的分子机制提供了重要工具。 展开更多
关键词 鸡 pro-IL-1β 克隆 表达 多克隆抗体 炎症
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鸡NLRP3蛋白表达、多克隆抗体制备与初步应用
5
作者 许萌萌 黄萌萌 +12 位作者 王国栋 于航博 韩京哲 牛鑫鑫 张玉龙 韩金泽 刘润杭 吴子文 于晓雪 王笑梅 高玉龙 李留安 祁小乐 《中国动物检疫》 CAS 2024年第7期96-103,共8页
为探究禽病病原触发炎症的分子机制,通过克隆和分析鸡源NLRP3基因,原核表达和纯化了NLRP3蛋白,随后用纯化的NLRP3蛋白免疫小鼠制备了NLRP3多克隆抗体,对该抗体进行了ELISA效价检测,并初步测试了该抗体在间接免疫荧光试验(IFA)和Western ... 为探究禽病病原触发炎症的分子机制,通过克隆和分析鸡源NLRP3基因,原核表达和纯化了NLRP3蛋白,随后用纯化的NLRP3蛋白免疫小鼠制备了NLRP3多克隆抗体,对该抗体进行了ELISA效价检测,并初步测试了该抗体在间接免疫荧光试验(IFA)和Western blot试验中的应用效果。结果显示:成功表达重组蛋白NLRP3,其相对分子质量约87 kDa,能与His标签抗体发生特异性结合反应;成功制备鸡NLRP3蛋白多克隆抗体,其ELISA效价高达1:32 000;Western blot和IFA检测中,NLRP3多克隆抗体可与NLRP3原核表达蛋白和真核表达蛋白发生特异性反应,还可检测到由IBDV触发的以及LPS刺激产生的巨噬细胞HD11内源性NLRP3蛋白的上调表达。结果表明,制备的鸡NLRP3蛋白多克隆抗体免疫原性较好、效价较高。本试验为进一步研究禽病病原诱发炎症的分子机制提供了重要工具。 展开更多
关键词 NLRP3 原核表达 多克隆抗体 炎症检测
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胃疡愈方治疗肝郁气滞型胃溃疡患者的临床疗效及对其胃黏膜愈合情况的影响
6
作者 卢川 魏静波 +3 位作者 程龙艳 李梦梦 王培根 王笑梅 《世界中西医结合杂志》 2024年第10期2093-2096,共4页
目的探究胃疡愈方治疗肝郁气滞型胃溃疡(Gastric ulcer,GU)患者的临床疗效及对其胃黏膜愈合情况的影响。方法选取2021年1月—2023年7月期间蚌埠市中医医院脾胃科收治的肝郁气滞型GU患者88例,按随机数字表法分为对照组和治疗组,每组各44... 目的探究胃疡愈方治疗肝郁气滞型胃溃疡(Gastric ulcer,GU)患者的临床疗效及对其胃黏膜愈合情况的影响。方法选取2021年1月—2023年7月期间蚌埠市中医医院脾胃科收治的肝郁气滞型GU患者88例,按随机数字表法分为对照组和治疗组,每组各44例。对照组给予泮托拉唑治疗,治疗组在泮托拉唑治疗基础上给予中药胃疡愈方治疗,每个疗程为14 d,共治疗2个疗程。观察比较两组患者的临床疗效、中医证候评分、GU黏膜愈合及不良反应情况。结果治疗后治疗组临床疗效总有效率90.90%(40/44)明显高于对照组70.45%(31/44),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者中医证候积分均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05),且治疗组中医证候积分明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后治疗组患者GU黏膜愈合总有效率(93.18%)高于对照组(75.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论胃疡愈方能有效提高GU患者的临床疗效,促进临床症状恢复及GU黏膜愈合,且无明显不良反应。 展开更多
关键词 胃疡愈方 肝郁气滞型 胃溃疡
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基于文献计量学对我国中华体育精神研究现状的可视化分析
7
作者 王笑梅 纪沙 《产业与科技论坛》 2023年第12期71-72,共2页
文章以2010年1月至2022年5月中国学术期刊网网络出版总库(CNKI)收录的中华体育精神主题相关文献作为研究对象,运用CiteSpace5.7.R 2软件以“中华体育精神”为关键词开展分析。结果表明:中华体育精神的研究主要是以理论性研究为主,而缺... 文章以2010年1月至2022年5月中国学术期刊网网络出版总库(CNKI)收录的中华体育精神主题相关文献作为研究对象,运用CiteSpace5.7.R 2软件以“中华体育精神”为关键词开展分析。结果表明:中华体育精神的研究主要是以理论性研究为主,而缺乏与新时代大学生学情的有效结合。中华体育精神研究机构较为单一,社会体育机构对于中华体育精神的研究比较匮乏。中华体育精神研究项目资金匮乏。文章针对不足提出,增强中华体育精神研究的实践性,切实提升弘扬中华体育精神的实效性;拓展中华体育精神的研究机构,实现资源共享;加大支持力度,增加关于弘扬中华体育精神的课题项目。 展开更多
关键词 中华体育精神 文献计量 可视化 高校体育
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情境教育的未来展望
8
作者 王笑梅 《江苏教育》 2023年第44期62-66,共5页
情境教育引领未来,体现在通过动感赋能引领深度学习,适时激发引领创造力培养,内核贯穿引领命题变革。情境教育也会与时俱进,未来有望获得三个方面的发展:一是情境理论从“经典情境论”升级为“媒介情境论”,二是情境类型从“经典情境”... 情境教育引领未来,体现在通过动感赋能引领深度学习,适时激发引领创造力培养,内核贯穿引领命题变革。情境教育也会与时俱进,未来有望获得三个方面的发展:一是情境理论从“经典情境论”升级为“媒介情境论”,二是情境类型从“经典情境”升级为“智媒情境”,三是情境关注从“关注儿童”升级为“全面关照”。随着教育技术的全面升级,情境教育很可能出现重大的变革:情境生态变革为“混合样态”,情境系统变革为“自进化系统”,情境模式变革为“弹性模式”,情境模型变革为“智适应模型”,情境引导变革为“智能导师”。在情境教育的已有研究成果中,留住自然情境、守护思想基石这两个方面具有永恒价值,值得未来加以坚守。 展开更多
关键词 情境教育 未来展望 引领发展 变革持守
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“五育融合”背景下幼儿跑酷“跑”运动课程实验研究
9
作者 周文福 王笑梅 《体育科技》 2024年第4期116-117,121,共3页
幼儿园的孩子思想品质、身体素质、心理承受力等方面的可塑性均很强,这就要求在幼儿教学过程中应该大力提倡“五育融合”的教育理念,特别是在教学设计过程中要根据幼儿的成长特点有的放矢。文章通过教学实验研究跑酷课程在幼儿成长中的... 幼儿园的孩子思想品质、身体素质、心理承受力等方面的可塑性均很强,这就要求在幼儿教学过程中应该大力提倡“五育融合”的教育理念,特别是在教学设计过程中要根据幼儿的成长特点有的放矢。文章通过教学实验研究跑酷课程在幼儿成长中的应用效果,旨在探索适合幼儿成长需要的教学形式,并通过实践进一步优化教学内容,完善教学目标,明确教学要求。 展开更多
关键词 五育融合 运动课程 幼儿
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醒脑开窍针刺法联合经颅磁刺激对缺血性卒中后恢复期抑郁状态的影响 被引量：1
10
作者 刘彦麟 杨喜兵 +3 位作者 任宏斌 王笑梅 于亚洁 罗开涛 《上海针灸杂志》 CSCD 2024年第2期148-154,共7页
目的 观察醒脑开窍针刺法联合经颅磁刺激对缺血性卒中后患者恢复期抑郁状态的影响。方法 将80例符合纳入标准的患者随机分为综合组(40例,中止1例)和西药组(40例,脱落2例)。西药组予口服盐酸度洛西汀肠溶片治疗,综合组在西药组口服药物... 目的 观察醒脑开窍针刺法联合经颅磁刺激对缺血性卒中后患者恢复期抑郁状态的影响。方法 将80例符合纳入标准的患者随机分为综合组(40例,中止1例)和西药组(40例,脱落2例)。西药组予口服盐酸度洛西汀肠溶片治疗,综合组在西药组口服药物基础上予醒脑开窍针刺法联合经颅磁刺激治疗。分别于治疗前后观察患者美国国立卫生院卒中量表(National Institutes of Health stroke scale,NIHSS)、改良Barthel指数(modified Barthel index,MBI)、汉密尔顿抑郁量表(Hamilton depression scale,HAMD)和匹茨堡睡眠质量指数(Pittsburgh sleep quality index,PSQI)的评分变化,以及血清同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、中性粒细胞/淋巴细胞的比值(neutrophil/lymphocyte ratio,NLR)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的水平变化。观察两组治疗前后经颅多普勒超声颅内大血管[大脑前动脉(anterior cerebral artery,ACA)、大脑中动脉(middle cerebral artery,MCA)、大脑后动脉(posterior cerebral artery,PCA)及椎动脉(basilar artery,BA)]血流速度的变化。结果 治疗后,两组患者NIHSS、MBI、HAMD和PSQI评分以及血清Hcy、NLR、5-HT和BDNF水平均较治疗前改善(P<0.05),且综合组上述指标均优于西药组(P<0.05)。治疗后,两组ACA、MCA、PCA和BA血流速度均优于治疗前(P<0.05),且综合组上述血管血流速度均优于西药组(P<0.05)。结论 在药物治疗基础上,醒脑开窍针刺法联合经颅磁刺激治疗卒中后患者恢复期抑郁状态的临床疗效优于单一口服西药治疗,可减轻患者的抑郁程度,改善睡眠质量,提高肢体功能和日常生活能力,加快脑血管血流速度,改善血清Hcy、NLR、5-HT和BDNF的水平。 展开更多
关键词 针刺疗法 针药并用 醒脑开窍 经颅磁刺激 中风后遗症 抑郁 血液流变学
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让党徽熠熠生辉 让党旗高高飘扬——我省各级党组织和广大党员在全面振兴新突破三年行动中担当作为建功立业综述
11
作者 王笑梅 《共产党员》 2024年第14期9-10,共2页
一个支部就是一座堡垒,一名党员就是一面旗帜。“七一”前夕,我省评选出一批优秀共产党员、优秀党务工作者和先进基层党组织。他们,是全省363万名党员、18.3万个基层党组织的杰出代表。他们,让党徽在筑梦征程中闪耀光芒,让党旗在振兴一... 一个支部就是一座堡垒,一名党员就是一面旗帜。“七一”前夕,我省评选出一批优秀共产党员、优秀党务工作者和先进基层党组织。他们,是全省363万名党员、18.3万个基层党组织的杰出代表。他们,让党徽在筑梦征程中闪耀光芒,让党旗在振兴一线高高飘扬。新时代,新征程。深入贯彻习近平总书记关于东北、辽宁全面振兴的重要讲话和指示批示精神,全力实施全面振兴新突破三年行动,党的基层组织必须过硬,党员队伍必须过硬。 展开更多
关键词 基层党组织 党的基层组织 党徽 优秀党务工作者 党员队伍 全面振兴 一面旗帜 建功立业
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争做奋斗者 勇当排头兵——辽宁省“两优一先”表彰大会侧记
12
作者 王笑梅 《共产党员》 2024年第14期7-8,F0002,共3页
7月1日,辽宁人民会堂。在欢快热烈的颁奖曲中,辽宁省“两优一先”代表接过荣誉证书,全场掌声雷动。伟大时代呼唤伟大精神,崇高事业需要榜样引领。在中国共产党成立103周年之际,辽宁省“两优一先”表彰大会隆重表彰一批在全省各条战线、... 7月1日,辽宁人民会堂。在欢快热烈的颁奖曲中,辽宁省“两优一先”代表接过荣誉证书,全场掌声雷动。伟大时代呼唤伟大精神,崇高事业需要榜样引领。在中国共产党成立103周年之际,辽宁省“两优一先”表彰大会隆重表彰一批在全省各条战线、各个领域涌现出的优秀共产党员、优秀党务工作者和先进基层党组织,激励全省各级党组织和广大党员履职尽责、奋发有为,在实现全面振兴新突破中锐意进取、建功立业。 展开更多
关键词 大会侧记 优秀党务工作者 先进基层党组织 荣誉证书 各级党组织 奋斗者 崇高事业 全面振兴
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超微血管显像联合超声造影用于浅表肿大淋巴结良恶性鉴别诊断的价值研究
13
作者 张静 邓彦东 +1 位作者 孙立娟 王笑梅 《中国医学装备》 2024年第3期69-72,共4页
目的:观察超微血管显像(SMI)联合超声造影(CEUS)鉴别诊断浅表肿大淋巴结良恶性的价值。方法:选取2020年3月至2022年6月秦皇岛市第四医院收治的82例浅表淋巴结肿大患者,均接受SMI和CEUS检查,以超声引导下穿刺活检为“金标准”,以Kappa分... 目的:观察超微血管显像(SMI)联合超声造影(CEUS)鉴别诊断浅表肿大淋巴结良恶性的价值。方法:选取2020年3月至2022年6月秦皇岛市第四医院收治的82例浅表淋巴结肿大患者,均接受SMI和CEUS检查,以超声引导下穿刺活检为“金标准”,以Kappa分析SMI和CEUS单独及联合诊断浅表肿大淋巴结良恶性与“金标准”的一致性。结果:超声引导下穿刺活检结果显示,82例浅表淋巴结肿大患者的97枚浅表肿大淋巴结中34枚为良性淋巴结,63枚为恶性淋巴结。SMI检查结果显示,97枚浅表肿大淋巴结中37枚为良性淋巴结、60枚为恶性淋巴结,经一致性分析SMI鉴别诊断浅表肿大淋巴结良恶性具有较好的价值,与穿刺活检具有较高的一致性(Kappa=0.712);CEUS检查结果显示,97枚浅表肿大淋巴结中36枚为良性淋巴结,61枚为恶性淋巴结,经一致性分析CEUS鉴别诊断浅表肿大淋巴结良恶性具有较好的价值,与穿刺活检具有较高的一致性(Kappa=0.821);SMI联合CEUS检查结果显示,97枚浅表肿大淋巴结中35枚为良性淋巴结,62枚为恶性淋巴结,经一致性分析SMI联合CEUS鉴别诊断浅表肿大淋巴结良恶性具有较好的价值,与穿刺活检具有较高的一致性(Kappa=0.886)。结论:SMI和CEUS检查诊断浅表肿大淋巴结良恶性均有较好的价值,且二者联合可进一步提高与病理检查结果的一致性,提高诊断价值,对临床筛查恶性淋巴结具有一定的指导意义。 展开更多
关键词 浅表肿大淋巴结 良恶性结节 超微血管显像(SMI) 超声造影(CEUS) 诊断价值
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血清Ⅱ型鸡马立克氏病毒的分离鉴定及SW14分离株pp24基因的序列分析 被引量：2
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作者 林雨萌 胡明雪 +10 位作者 刘长军 葛成菲 郭榕容 李凯 崔红玉 高立 祁小乐 王素艳 王笑梅 高玉龙 张艳萍 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期864-868,共5页
为了解鸡马立克氏病毒(MDV)在我国鸡群中的流行情况,本研究于2021年从福建省已免疫鸡马立克氏病(MD)疫苗鸡群且发生疑似MD病例的鸡场采集21份疑似发病蛋鸡外周血,分离其淋巴细胞接种鸡胚成纤维细胞(CEF),5 d后收集病毒,盲传1~2代后获得2... 为了解鸡马立克氏病毒(MDV)在我国鸡群中的流行情况,本研究于2021年从福建省已免疫鸡马立克氏病(MD)疫苗鸡群且发生疑似MD病例的鸡场采集21份疑似发病蛋鸡外周血,分离其淋巴细胞接种鸡胚成纤维细胞(CEF),5 d后收集病毒,盲传1~2代后获得21株能够形成典型MDV蚀斑的分离株,依次命名SW1~SW21,采用PCR分别扩增MDV血清Ⅰ型(MDV-1) Meq基因、Ⅱ型(MDV-2) ORF873基因、Ⅲ型(MDV-3) US3基因进行MDV分型鉴定,扩增鸡传染性贫血病毒(CAV) VP3基因、禽网状内皮组织增殖病病毒(REV) LTR基因、禽白血病病毒A亚群(ALV-A)、B亚群(ALV-B)、J亚群(ALV-J)的env基因进行外源病毒检测,结果显示MDV-1均为阴性,MDV-2均为阳性,MDV-3阳性率为38.1%(8/21),未检测到外源病毒基因。在MDV-2分离株中选择SW14株进行pp24基因的PCR扩增,测序后与MDV-2参考株SB-1、301B/1、HPRS24的pp24基因进行基因序列比对分析,结果显示,SW14和SB-1株同源性(96.3%)最高。通过透射电镜观察SW14,可见分离株呈双环型,直径约110 nm,符合MDV病毒粒子形态特征。本研究证实该鸡场中存在MDV-2流行,可能会影响疫苗的免疫效果,但其致病性有待进一步研究。本研究从疑似发病蛋鸡中分离到新的MDV-2株,为我国MDV-2的研究提供重要参考依据,同时为我国MD疫情防控提供有价值的研究材料。 展开更多
关键词 鸡马立克氏病毒 分离鉴定 血清Ⅱ型 血清Ⅲ型 pp24基因序列分析
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“温阳通滞”理论指导下施氏针灸治疗脊髓亚急性联合变性验案一则
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作者 任宏斌 王笑梅 +2 位作者 刘彦麟 梁海丽 罗开涛 《中国乡村医药》 2024年第15期27-28,共2页
随着我国经济不断发展,人民生活日益富足,营养摄入均衡,脊髓亚急性联合变性相对少见。我院收治长期严格素食诱发脊髓亚急性联合变性患者1例,通过以施氏针灸“温阳通滞”理论为指导,采用温针、艾灸等疗法,协助患者改善临床症状,报道如下... 随着我国经济不断发展,人民生活日益富足,营养摄入均衡,脊髓亚急性联合变性相对少见。我院收治长期严格素食诱发脊髓亚急性联合变性患者1例,通过以施氏针灸“温阳通滞”理论为指导,采用温针、艾灸等疗法,协助患者改善临床症状,报道如下。1病历摘要患者男,54岁,僧侣,因“乏力、步态不稳4月余”于2023年3月6日收住入院。2022年11月患者渐起双下肢乏力,呈持续性,自觉双下肢沉重,起初未重视,自行休息,然症状未好转且逐渐加重,胃纳不佳。 展开更多
关键词 施氏针灸 温阳通滞理论 温针 艾灸 脊髓亚急性联合变性
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表达鸡传染性法氏囊病病毒VP 2基因的重组火鸡疱疹病毒的构建及生物学特性分析 被引量：2
16
作者 李晓涵 杨伏春 +8 位作者 刘芮 高立 崔红玉 张艳萍 刘长军 祁小乐 王笑梅 高玉龙 李凯 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期656-662,共7页
鸡传染性法氏囊病(IBD)是一种严重危害养禽业的高度致死性和免疫抑制性传染病。为研制IBD重组火鸡疱疹病毒(HVT)活载体疫苗,本研究构建了表达鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)保护性抗原VP2基因的重组HVT并对其体外生物学特性进行了分析。通... 鸡传染性法氏囊病(IBD)是一种严重危害养禽业的高度致死性和免疫抑制性传染病。为研制IBD重组火鸡疱疹病毒(HVT)活载体疫苗,本研究构建了表达鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)保护性抗原VP2基因的重组HVT并对其体外生物学特性进行了分析。通过RT-PCR扩增IBDV超强毒株VP2基因并克隆入pCI载体,获得重组真核表达质粒pCI-VP2。用限制性内切酶将携带CMV启动子的VP2基因表达框架切下,连接于入门质粒pENTR,构建获得重组入门质粒pENTR-VP2。将pENTR-VP2与HVT重组黏粒H3-Kan/ccdB进行LR重组反应,构建重组表达黏粒H3-VP2。用H3-VP2与其他4个相互重叠并覆盖HVT全基因组的黏粒共同转染鸡胚成纤维细胞(CEF),拯救获得重组病毒rHVT-VP2。将重组病毒在CEF中连续传至20代后用PCR、间接免疫荧光试验和免疫印迹试验进行检测,并绘制重组病毒体外生长曲线,分析其体外复制特性。结果表明,重组病毒rHVT-VP2能够稳定表达VP2蛋白,rHVT-VP2在CEF中的复制能力与亲本病毒无明显差异。重组病毒rHVT-VP2免疫鸡后能够诱导产生IBDV中和抗体,并对IBDV强毒株攻击引起的死亡提供90%免疫保护。重组病毒rHVT-VP2的构建为研制IBD重组HVT活载体疫苗奠定了基础,对IBD的防控具有重要意义。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病 火鸡疱疹病毒 VP2基因 生物学特性
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浅析施氏针灸温阳通滞理论与应用
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作者 任宏斌 王笑梅 +3 位作者 刘彦麟 梁海丽 罗开涛 施孝文 《新中医》 CAS 2024年第16期106-109,共4页
浅析施氏针灸温阳通滞理论及临床应用。施氏针灸具有“一针、二灸、三用药,提倡针、灸、药三者并用”之特色。施氏针灸运用温阳通滞理论诊治疾病,认为治疗需以温阳为先,临证通过选穴及艾灸起温阳之效,选穴注重腧穴之穴性,配用合穴,重视... 浅析施氏针灸温阳通滞理论及临床应用。施氏针灸具有“一针、二灸、三用药,提倡针、灸、药三者并用”之特色。施氏针灸运用温阳通滞理论诊治疾病,认为治疗需以温阳为先,临证通过选穴及艾灸起温阳之效,选穴注重腧穴之穴性,配用合穴,重视对督脉诸穴之用,艾灸有麦粒灸、硫磺灸及隔药饼灸等。在温阳的同时,尚宜通滞,临证采用针刺进针、行针手法、配用输穴及温针等方法。施氏认为,针石攻其外,药物攻其内,提倡针、灸、药三者并用,可据辨证酌情选用温阳通滞之药。 展开更多
关键词 施氏针灸 温阳通滞 温针 艾灸
原文传递
基于民国纸币的图元素匹配检索
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作者 王佳婧 王晨 +1 位作者 朱媛媛 王笑梅 《图学学报》 CSCD 北大核心 2023年第3期492-501,共10页
民国纸币种类数量众多,不同纸币类别间的视觉差异小,部分纸币经过流通后发霉、毛边以及破损。针对传统的细粒度图像检索方法对民国纸币识别分类能力差的问题,提出了一种基于多尺度特征融合的民国纸币细粒度检索模型。在使用YOLOv4对纸... 民国纸币种类数量众多,不同纸币类别间的视觉差异小,部分纸币经过流通后发霉、毛边以及破损。针对传统的细粒度图像检索方法对民国纸币识别分类能力差的问题,提出了一种基于多尺度特征融合的民国纸币细粒度检索模型。在使用YOLOv4对纸币图像做图元素检测,减少手动标记数据时间的基础上,利用纸币主景图作为输入特征图,使用EfficientNet-B0作为主干网络进行检索,减少了冗余信息对网络的负担,提升了网络的精度。在模型中,使用PANet融合网络的第2,4,10和15层的特征向量,生成全局特征向量库,提升了纸币匹配检索能力,并使用自适应K均值对特征向量进行聚类,简化了匹配的时间与计算量。实验结果表明,该模型准确率达到了89.6%,相比于使用纸币原图作为输入图像提升了10个百分点,提高了检索精度。改进后的模型分类效果更好,推理时间成本更少,实现了纸币的精细化分类。满足工业实际要求。 展开更多
关键词 民国纸币 深度学习 目标检测 图像检索 细粒度图像分类
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基于推荐区域的民国纸币冠字号码检测
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作者 杜欣 王笑梅 +1 位作者 沈成龙 王佳婧 《计算机仿真》 北大核心 2023年第9期519-524,共6页
针对传统的文本检测和一般的目标检测算法无法精准定位民国纸币冠字号码的问题,提出了一种融合异常值检测、聚类和目标检测的序列检测算法。首先定位推荐区域,利用YOLOv4算法确定字符分割块的位置;然后处理推荐区域,将字符分割块转换为... 针对传统的文本检测和一般的目标检测算法无法精准定位民国纸币冠字号码的问题,提出了一种融合异常值检测、聚类和目标检测的序列检测算法。首先定位推荐区域,利用YOLOv4算法确定字符分割块的位置;然后处理推荐区域,将字符分割块转换为数据点,利用局部相关积分(LOCI)算法检测并剔除异常数据点,采用算法Mean Shift算法聚合分割区域,提高定位精度;最终实现民国纸币冠字号码的检测。实验表明,上述组合算法检测的平均精度均值(mAP)达到99.6%,平均检测一张图像耗时0.83s,验证了算法的高效性。具有重要实际的应用价值。 展开更多
关键词 民国纸币 推荐区域检测 目标检测 均值漂移 异常检测
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传染性法氏囊病毒VP_2在酵母细胞内的高效表达及其免疫原性研究 被引量：8
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作者 王笑梅 王牟平 +3 位作者 高宏雷 付朝阳 曾祥伟 张守发 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期443-447,共5页
应用Pichia酵母表达系统高效表达了传染性法氏囊病毒 (IBDV)VP2 基因片段。首先用OLIGO设计 1对引物P5、P6 ,以插入IBDVVP2 基因的 pUC19为模板 ,扩增出带有终止密码子的 1.5kb片段 ,将此片段正向亚克隆到 pPICZA表达载体上 ,将构建好... 应用Pichia酵母表达系统高效表达了传染性法氏囊病毒 (IBDV)VP2 基因片段。首先用OLIGO设计 1对引物P5、P6 ,以插入IBDVVP2 基因的 pUC19为模板 ,扩增出带有终止密码子的 1.5kb片段 ,将此片段正向亚克隆到 pPICZA表达载体上 ,将构建好的载体pPICVP2 用SacI内切酶线性化后 ,转染酵母PichiapastorisGS115细胞 ,经PCR鉴定 ,筛选出 5 0多个重组子。分别用甲醇诱导后 ,经SDS PAGE凝胶电泳、琼脂扩散试验、Dot ELISA检测 ,得到 9个不同程度表达 4 1kuVP2 活性蛋白的阳性重组子。经凝胶薄层扫描仪分析 ,表达蛋白占酵母细胞总蛋白的最高比率为 16 % ,表达量为 0 .6 2 0 8g·L-1。表达产物免疫SPF鸡可诱导产生特异性抗体 ,并能保护鸡抵抗超强毒致死性攻击 ,具有良好的免疫原性。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒VP2 酵母细胞 基因表达 免疫原性 特异性抗体 传染性法氏囊病 鸡
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