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胶体金免疫层析试纸条在生物毒素检测领域的研究进展
1
作者 闫海兴 袁子钦 +5 位作者 袁嘉康 李梦迪 张超伟 侯洁 覃婷 王自良 《饲料工业》 CAS 北大核心 2024年第5期134-140,共7页
胶体金免疫层析试纸条是一种常用的检测方法,广泛应用于疾病诊断、生物毒素检测等领域。该技术基于胶体金标记的特异性抗原(抗体)与待检样品中的目标分子相互作用,在试纸条上形成可见的测试线或信号变化。其流程包括样品预处理、标记抗... 胶体金免疫层析试纸条是一种常用的检测方法,广泛应用于疾病诊断、生物毒素检测等领域。该技术基于胶体金标记的特异性抗原(抗体)与待检样品中的目标分子相互作用,在试纸条上形成可见的测试线或信号变化。其流程包括样品预处理、标记抗体制备、试纸条组装步骤。胶体金免疫层析试纸条可以用于快速检测食品中的毒素残留、环境中的有害物质以及临床诊断中的相关指标。该技术具有无创、快速、灵敏和准确的特点,在临床应急检测和大规模筛查中能快速获得结果。文章总结了胶体金免疫层析试纸条技术及其在生物毒素检测中的研究进展,并分析了当前胶体金免疫层析试纸条技术的优缺点,展望了该技术在生物毒素检测领域的未来发展方向。 展开更多
关键词 胶体金免疫层析试纸条 生物毒素 快速检测 灵敏 准确
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抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及金标试纸检测方法的建立 被引量：11
2
作者 王自良 王建华 +4 位作者 杨艳艳 杨继飞 张海棠 范国英 张改平 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2006年第5期6-12,共7页
以BSA-CAP-HS免疫Balb／C小鼠,用细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞,体内诱生腹水法制备cAP mAb,并鉴定其免疫学特性;依据胶体金免疫层析试验(GICA)原理,以CAP mAb 为金标抗体,研制CAP残留快速检测金标试纸(CAP-St... 以BSA-CAP-HS免疫Balb／C小鼠,用细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞,体内诱生腹水法制备cAP mAb,并鉴定其免疫学特性;依据胶体金免疫层析试验(GICA)原理,以CAP mAb 为金标抗体,研制CAP残留快速检测金标试纸(CAP-Strip),并对其性能进行测定。结果表明,筛选出了3株杂交瘤细胞,其中最好的4F9-B2株间接ELISA效价细胞培养上清为1:1 280,腹水为1:640 000,亲和常数(Ku)为 1．84×1010 L/mol,对CAP的半数抑制浓度(IC50)为0．88μg/L,与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应(CR%)为150%,与其他酰胺醇类和抗菌素类药物无交叉反应;CAP-Strip的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit拟合曲线,目测检测限为0．5μg/L;其敏感性与竞争ELISA试剂盒相当,符合率为100％;可见CAP-Strip具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于CAP残留的快速检测,具有较高的推广应用价值。 展开更多
关键词 氯霉素 细胞融合 单克隆抗体 胶体金免疫层析试验 快速检测试纸
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氯霉素单克隆抗体免疫金标快速检测试纸的研制及性能测定 被引量：13
3
作者 王自良 张改平 +4 位作者 杨艳艳 张海棠 杨继飞 刑广旭 柴书军 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2006年第5期127-131,共5页
以分泌抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞株的建立为基础,应用胶体金免疫层析试验(GICA)成功研制出CAP残留快速检测试纸(CAP_Strip),并对其性能进行了测定。结果表明,CAP_Strip的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,目测... 以分泌抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞株的建立为基础,应用胶体金免疫层析试验(GICA)成功研制出CAP残留快速检测试纸(CAP_Strip),并对其性能进行了测定。结果表明,CAP_Strip的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,目测检测限为0.5μg/L;与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应为160%,与其他酰胺醇类和抗菌药物无交叉反应;其敏感性与竞争ELISA试剂盒相当,符合率为100%;10 min内显示结果,具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合CAP残留快速检测的推广应用。 展开更多
关键词 氯霉素 单克隆抗体 胶体金免疫层析试验 快速检测试纸
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抗苯巴比妥单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其免疫学特性鉴定 被引量：10
4
作者 王自良 张改平 +3 位作者 杨艳艳 张海棠 王选年 邓瑞广 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期336-340,317,共6页
苯巴比妥(PB)经化学修饰在其苯环上引入活性基团氨基,合成半抗原对氨基苯巴比妥(pAPB),用重氮化法将pAPB偶联于BSA,合成人工抗原BSA-pAPB,并用红外(IR)、紫外(UV)、SDS-PAGE鉴定;用BSA-pAPB免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立抗PB的单克... 苯巴比妥(PB)经化学修饰在其苯环上引入活性基团氨基,合成半抗原对氨基苯巴比妥(pAPB),用重氮化法将pAPB偶联于BSA,合成人工抗原BSA-pAPB,并用红外(IR)、紫外(UV)、SDS-PAGE鉴定;用BSA-pAPB免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立抗PB的单克隆抗体mAb(PB mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备PB mAb,并鉴定其免疫学特性。结果表明,BSA-pAPB偶联成功,偶联率为1∶19;筛选出1B9、3C4、3F6、4E6共4株杂交瘤细胞,其中最好的4E6株间接ELISA效价细胞培养上清为1∶8.1×102,腹水为1∶6.4×105,同种型为IgG1/κ,亲和常数(Ka)为2.08×1010L/mol,对PB的半数抑制浓度(IC50)为11.35μg/L,与巴比妥的交叉反应率(CR%)为12.4%,与其他化合物无CR。本试验研制出高效价、敏感、特异的PB mAb,可用于PB残留检测的免疫学实验。 展开更多
关键词 苯巴比妥 半抗原 人工抗原 单克隆抗体 免疫学特性
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苯巴比妥残留快速检测阻断ELISA试剂盒的研制及性能测定 被引量：9
5
作者 王自良 王建华 +3 位作者 杨艳艳 张海棠 柴书军 张改平 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2006年第4期62-64,共3页
关键词 ELISA试剂盒 残留检测 苯巴比妥 快速检测 测定 阻断 饲料添加剂 单克隆抗体 杂交瘤技术 畜禽生产
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苯巴比妥单克隆抗体的研制及竞争ELISA血药浓度监测方法的建立 被引量：4
6
作者 王自良 王建娜 +3 位作者 张海棠 王选年 杨艳艳 张改平 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第23期1826-1830,共5页
目的研制苯巴比妥单克隆抗体(PBmAb),建立PB血药浓度竞争ELISA监测方法。方法将PB改造成对氨基苯巴比妥(pAPB),用重氮化法合成免疫原BSA-pAPB并免疫Balb/c小鼠;细胞融合技术筛选PBmAb杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备PBmAb;应用PBmAb研... 目的研制苯巴比妥单克隆抗体(PBmAb),建立PB血药浓度竞争ELISA监测方法。方法将PB改造成对氨基苯巴比妥(pAPB),用重氮化法合成免疫原BSA-pAPB并免疫Balb/c小鼠;细胞融合技术筛选PBmAb杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备PBmAb;应用PBmAb研制PB血药浓度监测竞争ELISA试剂盒(PB-Kit),并测定其性能。结果BSA-pAPB偶联成功;筛选出4株杂交瘤细胞,应用其中最好的4E6株制备的PBmAb间接ELISA效价为1∶6·4×105,亲和常数(Ka)为2·08×1010L·moL-1,50%抑制浓度(IC50)为9·84μg·L-1,与巴比妥的交叉反应率(CR)为7·9%,与其他化合物无CR;PB-Kit的检测范围为1·0~128μg·L-1,灵敏度为0·89μg·L-1,检测限为1μg·L-1,血清样添加回收率为94·7%,批内和批间变异系数均<10%;PB-Kit与差示分光光度法(DS)的符合率为100%。结论成功研制出高价、敏感、特异的PBmAb,建立了PB血药浓度竞争ELISA监测方法。 展开更多
关键词 苯巴比妥 单克隆抗体 竞争ELISA 血药浓度 监测
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微量元素钼在养鸡生产中的应用 被引量：18
7
作者 王自良 张海棠 赵坤 《中国家禽》 北大核心 1999年第9期37-39,共3页
详细叙述了钼在饲料和鸡体内的含量和分布，营养作用机理，钼缺乏症和中毒症，在生产中的应用及注意事项。
关键词 鸡 微量元素 钼 营养素
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氯霉素人工免疫原的合成与鉴定 被引量：6
8
作者 王自良 张海棠 +1 位作者 王艳荣 张改平 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第9期1751-1753,1757,共4页
将氯霉素(CAP)进行化学修饰引入羧基活性基团,合成具有半抗原结构特征的氯霉素半琥珀酸酯(CAP-HS);采用混合酸酐(MA)法将CAP-HS与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成人工免疫原BSA-CAP-HS和包被原OVA-CAP-HS,用红外(IR)、紫外(UV... 将氯霉素(CAP)进行化学修饰引入羧基活性基团,合成具有半抗原结构特征的氯霉素半琥珀酸酯(CAP-HS);采用混合酸酐(MA)法将CAP-HS与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成人工免疫原BSA-CAP-HS和包被原OVA-CAP-HS,用红外(IR)、紫外(UV)、凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定;用BSA-CAP-HS免疫BALB/C小鼠,间接ELISA测定多抗(pAb)效价,阻断ELISA鉴定其敏感性,交叉反应试验鉴定其特异性。结果表明,CAP-HS与BSA合成成功,其分子结合比为15.6∶1,获得了高价、敏感、特异的CAP pAb,为CAP残留免疫学检测方法的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 氯霉素 半抗原 人工免疫原 合成 鉴定
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氯霉素残留检测竞争ELISA试剂盒的研制及其性能测定 被引量：4
9
作者 王自良 张海棠 +3 位作者 杨艳艳 邓瑞广 刘俊伟 张改平 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期1-5,共5页
应用抗氯霉素单克隆抗体（CAP mAb）杂交瘤细胞株建立竞争ELISA（ciELISA）分析方法，研制出CAP残留快速榆测试剂盒（CAP—Kit），并对其性能进行了测定。结果表明，CAP—Kit标准曲线呈典型的S型，符合4参数logit曲线拟合，相关系数R^2=... 应用抗氯霉素单克隆抗体（CAP mAb）杂交瘤细胞株建立竞争ELISA（ciELISA）分析方法，研制出CAP残留快速榆测试剂盒（CAP—Kit），并对其性能进行了测定。结果表明，CAP—Kit标准曲线呈典型的S型，符合4参数logit曲线拟合，相关系数R^2=0．9955，检测范围为0．1～128．0μg·L^-1，半数抑制浓度（IC50）为2．4μg·L^-1，灵敏度为0．053μg·L^-1，检测限为0．1μg·L^-1；奶样、肉样的平均添加回收率为88．5％、82．7％，平均批内和批间变异系数均〈15％；CAP—Kit与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应（CR％）为150％，与其他酰胺醇类和抗菌药物无CR；基质对CAP—Kit的检测结果影响不大；CAP—Kit在4C可保存6个月以上。 展开更多
关键词 氯霉素 单克隆抗体 竞争ELISA 快速检测试剂盒
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氯霉素多克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定 被引量：5
10
作者 王自良 张海棠 +4 位作者 王艳荣 刘俊伟 吴玉平 柴书军 张改平 《中国农学通报》 CSCD 2006年第6期5-9,共5页
将氯霉素(CAP)进行化学修饰引入羧基活性基团,合成具有半抗原结构特征的氯霉素半琥珀酸酯(CAP-HS);采用混合酸酐(MA)法将CAP-HS与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成人工免疫原BSA-CAP-HS和包被原OVA-CAP-HS,用红外(IR)、紫外(UV... 将氯霉素(CAP)进行化学修饰引入羧基活性基团,合成具有半抗原结构特征的氯霉素半琥珀酸酯(CAP-HS);采用混合酸酐(MA)法将CAP-HS与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成人工免疫原BSA-CAP-HS和包被原OVA-CAP-HS,用红外(IR)、紫外(UV)、凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定;用BSA-CAP-HS免疫新西兰白兔和SPF鸡制备多克隆抗体(pAb),间接ELISA测定其效价,阻断ELISA鉴定其敏感性,琼脂双扩散试验、WestGold膜杂交试验和交叉反应试验鉴定其特异性。结果表明,BSA-CAP-HS偶联成功,其分子结合比为15.6∶1,获得了高价、敏感、特异的CAPpAb,为CAP残留免疫学检测方法的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 氯霉素 半抗原 人工免疫原 多克隆抗体 免疫学特性
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氯霉素在动物性食品中的检测 被引量：7
11
作者 王自良 张海棠 李军民 《中国饲料》 北大核心 2005年第4期34-35,37,共3页
本文对氯霉素在动物体内的代谢与在动物性食品中残留及检测方法进行了阐述。
关键词 动物性食品 氯霉素 残留 代谢 检测方法 动物体内
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肉用畜禽的铬营养及其应用研究 被引量：5
12
作者 王自良 张海棠 郭东升 《粮食与饲料工业》 CAS 北大核心 1999年第9期42-44,共3页
关键词 饲料添加剂 肉用畜禽 微量元素 铬
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来氟米特对儿童难治性肾病综合征临床观察 被引量：8
13
作者 王自良 刘鹏 +1 位作者 陈颖颖 袁明良 《中国中西医结合肾病杂志》 2011年第2期154-155,共2页
目的:观察来氟米特对儿童难治性肾病综合征治疗效果。方法:对27例儿童难治性肾病综合征分为激素抵抗型9例,激素依赖型14例,频复发型4例,分别给予来氟米特1mg/kg,每日1次口服,连续3d后改为0.2～0.4mg/kg,每日1次,泼尼松2mg·kg-1.d-1... 目的:观察来氟米特对儿童难治性肾病综合征治疗效果。方法:对27例儿童难治性肾病综合征分为激素抵抗型9例,激素依赖型14例,频复发型4例,分别给予来氟米特1mg/kg,每日1次口服,连续3d后改为0.2～0.4mg/kg,每日1次,泼尼松2mg·kg-1.d-1,逐渐减至适当剂量维持或停用。结果:治疗前和治疗6个月后血白蛋白(P=0.0002)和24h尿蛋白(P<0.0001)明显改善,27例儿童难治性肾病综合征治疗后部分缓解7例(25.93%),完全缓解12例(44.44%),总缓解率70.37%。在微小病变和非微小病变之间,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:来氟米特对改善儿童难治性肾病综合征具有一定效果。 展开更多
关键词 来氯米特 儿童 难治性肾病综合征
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苯巴比妥多克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定 被引量：1
14
作者 王自良 王建华 +2 位作者 张海棠 柴书军 张改平 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2006年第5期12-14,共3页
关键词 免疫学检测 多克隆抗体 苯巴比妥 特性鉴定 制备 残留检测 动物性食品 毒性作用 食品动物 检验方法
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超敏C反应蛋白和肌钙蛋白对血液透析病人生存影响 被引量：3
15
作者 王自良 王明波 徐岩 《青岛大学医学院学报》 CAS 2015年第2期202-204,共3页
目的探讨血液透析病人系统性炎症反应状况及其对生存影响。方法收集119例血液透析病人（生存组96例,死亡组23例;NYHA分级1~2级64例,3~4级55例）,对其血常规、生化指标、超敏C反应蛋白和肌钙蛋白进行分析。结果生存组与死亡组血清蛋白、... 目的探讨血液透析病人系统性炎症反应状况及其对生存影响。方法收集119例血液透析病人（生存组96例,死亡组23例;NYHA分级1~2级64例,3~4级55例）,对其血常规、生化指标、超敏C反应蛋白和肌钙蛋白进行分析。结果生存组与死亡组血清蛋白、胆固醇、超敏C反应蛋白、肌钙蛋白水平相比较,差异有统计学意义（t=2.11~14.69,P〈0.05）。不同心功能组血清蛋白、超敏C反应蛋白、肌钙蛋白、血红蛋白水平相比较,差异有统计学意义（t=2.40~9.50,P〈0.05）。单因素Logistic回归分析显示,死亡与超敏C反应蛋白、肌钙蛋白、清蛋白和胆固醇水平有关,差异有统计学意义（χ2=4.26~30.05,P〈0.05）。结论系统性炎症反应对血液透析病人的生存有重要影响。 展开更多
关键词 C反应蛋白质 肌钙蛋白 肾透析 无病生存
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补体C_3及C_3c和C_3d在IgA肾病肾组织中的表达 被引量：2
16
作者 王自良 张爱平 刘鹏 《临床内科杂志》 CAS 2008年第9期631-633,共3页
目的阐明补体C3、C3c和C3d分子在IgA肾病肾组织中的表达,探讨C3、C3c和C3d在IgA肾病发病中的作用。方法对36例IgA肾病和43例无IgA沉积的系膜增生性肾炎患者进行回顾性分析,对其肾组织进行抗人C3、C3c和C3d抗体检查,在免疫荧光显微镜下观... 目的阐明补体C3、C3c和C3d分子在IgA肾病肾组织中的表达,探讨C3、C3c和C3d在IgA肾病发病中的作用。方法对36例IgA肾病和43例无IgA沉积的系膜增生性肾炎患者进行回顾性分析,对其肾组织进行抗人C3、C3c和C3d抗体检查,在免疫荧光显微镜下观察C3、C3c和C3d在肾组织上各自的表达。结果补体C3在IgA肾病组肾小球上的表达高于系膜增生性肾炎组患者。C3c和C3d仅在IgA肾病上发现表达;它们的共同表达与肾脏病理损害有关(r=0.99176,P=0.0009)。结论补体C3、C3c和C3d在IgA肾病肾组织上高表达,而且C3c和C3d共同表达与肾脏损害有关,可能是向终末性肾衰竭转化的标志。 展开更多
关键词 IGA肾病 C3 C3c C3D
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中草药饲料添加剂在蛋鸡生产中的应用 被引量：16
17
作者 王自良 《中国饲料》 北大核心 1998年第9期12-14,共3页
目前蛋鸡生产中所使用的药物性饲料添加剂种类主要有抗菌素、抗球虫药和化学合成药物等,由于这些添加剂不仅易使病源菌株产生抗药性,且易导致鸡体和蛋产品药物残留量增加,危害动物和人体健康,因此,新型药物饲料添加剂的研制和使用愈来... 目前蛋鸡生产中所使用的药物性饲料添加剂种类主要有抗菌素、抗球虫药和化学合成药物等,由于这些添加剂不仅易使病源菌株产生抗药性,且易导致鸡体和蛋产品药物残留量增加,危害动物和人体健康,因此,新型药物饲料添加剂的研制和使用愈来愈受到重视.中草药饲料添加剂以其廉价、无毒害、无药残、安全方便、功能全面等优点,引起了人们的极大关注. 展开更多
关键词 卵用鸡 中草药 饲料添加剂 应用 效果
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来氟米特治疗儿童频复发型肾病综合征的临床观察 被引量：4
18
作者 王自良 王明波 +1 位作者 刘鹏 袁明良 《临床肾脏病杂志》 2012年第1期24-25,共2页
目的 观察来氟米特对儿童频复发型肾病综合征治疗效果.方法 选择31例频复发型肾病综合征患儿,其中微小病变（MCD） 18例,局灶节段性肾小球硬化（FSGS） 13例,给予来氟米特治疗.结果 来氟米特治疗后,泼尼松隔日应用维持量从（0.58±0... 目的 观察来氟米特对儿童频复发型肾病综合征治疗效果.方法 选择31例频复发型肾病综合征患儿,其中微小病变（MCD） 18例,局灶节段性肾小球硬化（FSGS） 13例,给予来氟米特治疗.结果 来氟米特治疗后,泼尼松隔日应用维持量从（0.58±0.19） mg/kg减少至（0.21±0.25）mg/kg,复发率从平均每年（3.10±0.88）次下降至平均每年（1.00±1.18）次.其中有10例患儿泼尼松停止应用而没出现复发.结论 来氟米特在治疗儿童频复发型肾病综合征方面是有效的. 展开更多
关键词 来氟米特 肾病综合征 儿童
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苯巴比妥的毒副作用及其残留检测 被引量：1
19
作者 王自良 张海棠 +1 位作者 王艳荣 崔艳红 《中国饲料》 北大核心 2006年第9期36-38,共3页
本文就苯巴比妥(PB)的化学结构、理化特性、构效关系、毒副作用、在动物体内的代谢残留以及检测方法等进行详尽阐述。
关键词 苯巴比妥 毒副作用 动物性食品 残留检测
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氯霉素的毒性及其在动物性食品中的残留与检测 被引量：40
20
作者 王自良 赵坤 张改平 《河南科技学院学报》 2005年第2期101-105,共5页
氯霉素作为作用强、抗菌谱广的一种抗生素,曾经在临床治疗和畜牧业生产中发挥了重大作用,但其在动物性食品中的残留及其对人类健康所造成的危害日益为人们重视。本文就氯霉素的化学结构、理化特性、构效关系、毒性作用,在动物体内的代... 氯霉素作为作用强、抗菌谱广的一种抗生素,曾经在临床治疗和畜牧业生产中发挥了重大作用,但其在动物性食品中的残留及其对人类健康所造成的危害日益为人们重视。本文就氯霉素的化学结构、理化特性、构效关系、毒性作用,在动物体内的代谢与残留,检测方法中的筛选法、定量测定法、确证法等进行了详尽阐述。 展开更多
关键词 氯霉素 毒性 动物性食品 残留 检测
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