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巴瑞替尼调控巨噬细胞极化减轻硬皮病小鼠肺纤维化
1
作者 王郸丹 徐璐璐 张劼 《陆军军医大学学报》 CSCD 北大核心 2024年第2期128-138,共11页
目的 明确巴瑞替尼能否通过抑制酪氨酸蛋白激酶2(Janus kinase, JAK2)/信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription, STAT3)调控巨噬细胞极化,从而减轻硬皮病小鼠肺纤维化程度。方法 30只8周雌性C57BL/... 目的 明确巴瑞替尼能否通过抑制酪氨酸蛋白激酶2(Janus kinase, JAK2)/信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription, STAT3)调控巨噬细胞极化,从而减轻硬皮病小鼠肺纤维化程度。方法 30只8周雌性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为3组:对照组(Ctl组,n=6)、硬皮病组(SSc组,n=12)和硬皮病+巴瑞替尼组(SSc+Ba组,n=12)。SSc和SSc+Ba组小鼠背部皮下注射博来霉素(7.5 mg/kg),SSc+Ba组小鼠胃内灌注巴瑞替尼(5 mg/kg)。采用ELISA检测血浆中炎症因子白介素(interleukin, IL)-1β、IL-4、IL-6、IL-10浓度,HE、Masson染色评估皮肤真皮层厚度和肺组织病变及胶原含量,RT-PCR分析肺组织中炎症因子(IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10)mRNA水平,Western blot分析肺组织中巨噬细胞标志物CD86、CD163及JAK2/STAT3的蛋白表达水平,流式细胞术检测F4/80、CD86和CD163以明确小鼠脾脏巨噬细胞极化情况,免疫荧光检测肺组织中CD86和CD163以明确肺组织中巨噬细胞极化情况。结果 与Ctl组相比,SSc组小鼠注射部位皮肤真皮层增厚(P<0.001),改良肺纤维化评分升高(P<0.001),皮肤和肺组织胶原增多(P<0.001)。SSc+Ba组小鼠上述表现均有不同程度的减轻(P<0.01)。与Ctl组相比,SSc组小鼠血浆中促炎因子IL-1β(P<0.05)和IL-6(P<0.001)浓度以及肺组织中上述两种因子的mRNA(P<0.05)水平明显上调。巴瑞替尼降低上述因子浓度(P<0.01)和肺组织中mRNA(P<0.01)水平。SSc组小鼠肺中JAK2/STAT3表达升高(P<0.01),巴瑞替尼降低上述蛋白的表达(P<0.05)。Western blot和免疫荧光检测结果均表明:与Ctl组相比,SSc组肺中CD86蛋白(M1巨噬细胞标志物)表达升高(P<0.01),CD163蛋白(M2巨噬细胞标志物)表达降低(P<0.05)。SSc+Ba组肺中CD86蛋白表达降低(P<0.05),CD163蛋白表达升高(P<0.05)。流式细胞术检测结果表明,SSc组脾脏巨噬细胞中F4/80+CD86+CD163-的M1型巨噬细胞比例升高(P<0.001),F4/80+CD86-CD163+的M2型巨噬细胞比例降低(P<0.01)。SSc+Ba组中,M1细胞比例降低(P<0.01),M2细胞比例升高(P<0.001)。结论 巴瑞替尼通过靶向JAK2/STAT3信号通路抑制M1巨噬细胞极化,来减轻SSc小鼠肺纤维化程度。 展开更多
关键词 硬皮病 间质性肺病 巴瑞替尼 JAK2/STAT3 巨噬细胞
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农村留守中小学生交通伤害流行特征调查分析 被引量：1
2
作者 王玲玲 刘国礼 +2 位作者 邹羽彤 孙贝贝 王郸丹 《基层医学论坛》 2019年第8期1037-1039,共3页
目的了解安徽农村留守中小学生交通伤害发生现况及影响因素,为农村儿童青少年交通伤害的预防提供依据。方法采用自制调查表对安徽省13所中、小学的968名留守中小学生进行问卷调查。结果伤害发生率为44.01%,男生发生率为52.28%,女生发生... 目的了解安徽农村留守中小学生交通伤害发生现况及影响因素,为农村儿童青少年交通伤害的预防提供依据。方法采用自制调查表对安徽省13所中、小学的968名留守中小学生进行问卷调查。结果伤害发生率为44.01%,男生发生率为52.28%,女生发生率为35.80%;初中生发生率为50.30%,小学生发生率为40.66%;受伤部位以下肢、上肢、头面部为多,分别占比例依次为29.81%,24.41%。22.07%;受伤季节以夏季为主,占51.41%。引起伤害的常见交通工具是自行车或三轮车及摩托车或助动车,分别占48.59%,29.81%。结论农村留守中小学生交通伤害发生率较高,需加强安全防范,以降低其发生率。 展开更多
关键词 交通伤害 留守 中小学生 调查研究
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CEP33779通过影响JAK2与转化生长因子β_(1)的串话机制来减轻类风湿关节炎大鼠相关肺纤维化的实验研究 被引量：1
3
作者 魏一梅 王郸丹 +1 位作者 王薪锰 张劼 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期10-16,I0002,I0003,共9页
目的在牛Ⅱ型胶原免疫诱导类风湿节炎大鼠的基础上,气管注入博来霉素,构建RA合并肺纤维化大鼠模型来观察JAK2抑制剂CEP33779对RA大鼠肺纤维化的改善程度及可能机制。方法①体内研究:将SD大鼠随机分为正常组、单纯肺纤维化组、肺纤维化CE... 目的在牛Ⅱ型胶原免疫诱导类风湿节炎大鼠的基础上,气管注入博来霉素,构建RA合并肺纤维化大鼠模型来观察JAK2抑制剂CEP33779对RA大鼠肺纤维化的改善程度及可能机制。方法①体内研究:将SD大鼠随机分为正常组、单纯肺纤维化组、肺纤维化CEP治疗组、RA合并肺纤维化组、RA合并肺纤维化CEP治疗组。造模当天(d0)大鼠尾部皮下注射牛Ⅱ型胶原0.2 ml(1 mg/ml)构建RA模型;造模第13天(d13)气管内注射100μl博来霉素(2.5 mg/kg)诱导肺纤维化模型;造模第14天(d14)治疗组予以CEP(10 ml/kg每日1次)灌胃,共4周。测定大鼠右后足关节肿胀度并行关节炎指数评分,检测肺顺应性(Cst)和肺比重,HE和Masson染色观察左肺病理变化,蛋白免疫印迹法(WB)检测右肺胞外基质水平。②体外研究:TGF-β_(1)(10 ng/ml)刺激人胚肺成纤维细胞(HFL1)24 h和48 h后,用免疫荧光法检测p-JAK2表达;HFL1接种培养板后,设置空白组、TGF-β_(1)刺激组、TGF-β_(1)+LY2109761(TGFβ-R1/2抑制剂,0.5 mmol/L和2 mmol/L)组、TGF-β_(1)+CEP(0.1 mmol/L和1.0 mmol/L)组共育48 h,WB测定TGFβ-R_(2)、α-SMA、JAK2、Col1表达水平。多组间比较采用Tukey′s检验,两组间比较采用独立t检验。结果①体内研究:与正常组(1.45±0.04)相比,RA+PF+Vehicle组第13天大鼠关节肿胀度升高[(2.54±0.16),t=16.02,P<0.001],CEP治疗3 d后第16天开始大鼠平均关节炎指数评分、足趾体积降低[(2.89±0.11),t=5.78,P<0.001;(1.92±0.13),t=6.85,P<0.001]。肺纤维化大鼠肺组织有不同程度的肿大,肺比重升高、Cst下降,肺炎症和纤维化程度升高[(0.96±0.06),t=19.76,P<0.001;(0.26±0.09),t=17.64,P<0.001;(3.63±1.51),t=6.00,P<0.001;(1.75±0.71),t=5.84,P<0.001]。CEP灌胃后,RA合并肺纤维化大鼠肺肿胀减轻,肺比重下降、Cst增加[(0.82±0.05),t=5.76,P<0.001;(0.43±0.18),t=2.31,P=0.038],肺组织纤维化和炎症程度评分[(3.00±1.00),(1.56±0.52)]均有下降趋势,但差异无统计学意义。CEP可抑制肺纤维化大鼠肺组织中TGF-β_(1)、TGFβ-R_(2)、α-SMA、Fn和JAK2的表达,5组间差异均有统计学意义(F=9.02,P=0.017;F=4.86,P=0.048;F=6.57,P=0.032;F=11.26,P=0.010;F=13.32,P=0.007)。②体外研究:TGF-β_(1)可刺激HFL1表达更强的磷酸化的JAK2(p-JAK2)荧光信号;WB可见TGFβ-R_(2)、α-SMA、JAK2和Col1表达显著增加,LY、CEP干预后,上述蛋白呈浓度依赖性减少,5组间差异均有统计学意义(F=337.30,P<0.001;F=20.61,P<0.001;F=100.60,P<0.001;F=180.90,P<0.001)。结论JAK2抑制剂对RA相关肺纤维有改善作用,其机制可能是通过干扰JAK2与TGF-β_(1)信号通路的"串话"来减轻TGF-β_(1)所致的肺纤维化。 展开更多
关键词 关节炎 类风湿 转化生长因子Β 肺纤维化 JAK2 CEP33779
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