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二甲双胍阻断乳腺癌细胞-间质细胞的交互作用:基于抑制肿瘤相关成纤维细胞缺氧诱导因子-1α的表达
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作者 邵珊 白薇超 +3 位作者 邹鹏程 罗敏娜 赵新汉 雷建军 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期428-436,共9页
目的探讨二甲双胍(Met)对乳腺癌肿瘤-间质细胞交互作用的影响及机制。方法将肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)与乳腺癌细胞共培养,运用二甲双胍进行干预,分为对照组和Met干预组,ELISA及RT-qPCR检测Met对CAFs中HIF-1α、p-AMPK、基质衍生因子-1(... 目的探讨二甲双胍(Met)对乳腺癌肿瘤-间质细胞交互作用的影响及机制。方法将肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)与乳腺癌细胞共培养,运用二甲双胍进行干预,分为对照组和Met干预组,ELISA及RT-qPCR检测Met对CAFs中HIF-1α、p-AMPK、基质衍生因子-1(SDF-1)和白细胞介素-8(IL-8)等因子的表达变化以及Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。运用外源性SDF-1、IL-8干预后,Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。运用缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)shRNA或过表达质粒调节CAFs-HIF-1α的表达,以及AMPK-shRNA抑制AMPK的表达,并运用OG和2-OXO调节脯氨酸羟化酶的表达,及运用外源性TGF-β1干预后,Western blot及RT-qPCR检测CAFs中p-AMPK、HIF-1α、SDF-1、IL-8的表达,Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。结果相较于对照组,Met干预组中CAFs的p-AMPK、SDF-1和IL-8的表达水平升高(P<0.05),HIF-1α表达水平下降(P<0.05),AMPK的表达水平差异无统计学意义(P>0.05),Met组中乳腺癌细胞侵袭能力下降(P<0.05)。外源性SDF-1、IL-8干预可降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用,增加乳腺癌细胞的侵袭能力(P<0.05)。过表达HIF-1α及运用脯氨酸羟化酶抑制剂OG提高HIF-1α的表达后,可降低Met对CAFs中HIF-1α、SDF-1及IL-8表达的抑制作用,并可降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用(P<0.05);运用HIF-1α-shRNA及运用脯氨酸羟化酶激活剂2-OXO抑制HIF-1α的表达后,降低乳腺癌细胞的侵袭能力(P<0.05);运用AMPK-shRNA抑制p-AMPK的表达后,可降低Met对CAFs中HIF-1α表达的抑制作用,并可降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用(P<0.05);加入外源性TGF-β1后,可部分降低Met对CAFs中HIF-1α表达的抑制作用,并可部分降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用(P<0.05)。结论Met通过抑制CAFs-HIF-1α的表达进而发挥阻断乳腺癌细胞-间质细胞交互作用。 展开更多
关键词 肿瘤相关成纤维细胞 缺氧诱导因子-1Α 二甲双胍 磷酸化-AMPK 肿瘤微环境
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雷公藤内酯甲通过抑制巨噬细胞M2极化发挥抗肺癌作用
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作者 白薇超 刘亚 +2 位作者 庞亚梅 李宏 宁谦 《现代生物医学进展》 CAS 2024年第16期3013-3019,共7页
目的:探讨雷公藤内酯甲(Wilforlide A,WA)对肺癌细胞增殖和侵袭及巨噬细胞M2极化的影响。方法:(实验一):将肺癌细胞LLC按照WA处理浓度分为0、0.01、0.1、1和10μg/L组。WA孵育48 h后,采用MTT法、Annexin V-FITC/PI染色法和Transwell法... 目的:探讨雷公藤内酯甲(Wilforlide A,WA)对肺癌细胞增殖和侵袭及巨噬细胞M2极化的影响。方法:(实验一):将肺癌细胞LLC按照WA处理浓度分为0、0.01、0.1、1和10μg/L组。WA孵育48 h后,采用MTT法、Annexin V-FITC/PI染色法和Transwell法检测细胞增殖、凋亡和侵袭。采用Western blot检测Bcl-2、Bax、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平。(实验二):将单核巨噬细胞RAW264.7按照WA处理浓度分为0、0.01、0.1、1和10μg/L组。采用MTT法检测细胞增殖。然后再将RAW264.7细胞为Control组、IL-4组、WA组和IL-4+WA组。使用10 ng/mL的IL-4和1μg/L的WA培养细胞24 h。采用ELISA法检测细胞培养上清液中CD206、Arg-1和IL-10水平。(实验三):细胞分组如下:Blank组、RAW264.7组、IL-4 RAW264.7组、WA组和IL-4RAW264.7+WA组。按照分组方案,将LLC细胞分别与RAW264.7细胞、IL-4诱导RAW264.7细胞以及10μg/L的WA共培养24 h,然后检测细胞增殖、凋亡、侵袭及细胞培养上清液中的M2型巨噬细胞标志物水平。流式细胞仪检测CD86和CD206阳性百分比。结果:(实验一):与0μg/L组比较,0.1、1和10μg/L组LLC细胞的相对细胞活力降低(P<0.05),细胞凋亡率和Bax蛋白相对表达水平均升高(P<0.05),侵袭细胞数量以及Bcl-2、MMP-2和MMP-9蛋白相对表达水平均降低(P<0.05)。(实验二):与0μg/L组比较,10μg/L组RAW264.7细胞的相对细胞活力降低(P<0.05)。与Control组比较,IL-4组RAW264.7细胞的CD206、Arg-1和IL-10水平升高(P<0.05),WA组RAW264.7细胞的CD206、Arg-1和IL-10水平降低(P<0.05)。与IL-4组比较,IL-4+WA组RAW264.7细胞的CD206、Arg-1和IL-10水平降低(P<0.05)。(实验三):与Blank组比较,RAW264.7组和IL-4 RAW264.7组的相对细胞活力和侵袭细胞数量均升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05)。与RAW264.7组比较,IL-4 RAW264.7组的相对细胞活力和侵袭细胞数量升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),CD206、Arg-1和IL-10水平升高(P<0.05),CD86百分比降低,CD206百分比升高(P<0.05)。与IL-4 RAW264.7比较,IL-4 RAW264.7+WA组的相对细胞活力和侵袭细胞数量降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),CD206、Arg-1和IL-10水平降低(P<0.05),CD86百分比升高,CD206百分比降低(P<0.05)。结论:本研究表明雷公藤内酯甲具有抗NSCLC作用,其机制与抑制巨噬细胞的M2型极化有关。 展开更多
关键词 雷公藤内酯甲 雷公藤 非小细胞肺癌 巨噬细胞M2极化 免疫微环境
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几丁质酶和几丁质酶样蛋白在慢性炎症疾病的研究进展 被引量：4
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作者 白薇超 魏珂阳 +2 位作者 熊露 孟列素 朱文华 《生命的化学》 CAS CSCD 2020年第10期1771-1780,共10页
在哺乳动物中几丁质酶通过降解病原体中几丁质成分参与针对病原体的免疫反应。虽然几丁质酶样蛋白缺少几丁质酶活性,但也与感染、炎症、组织修复等过程密切相关。已有研究表明,几丁质酶和几丁质酶样蛋白参与了糖尿病、动脉粥样硬化、过... 在哺乳动物中几丁质酶通过降解病原体中几丁质成分参与针对病原体的免疫反应。虽然几丁质酶样蛋白缺少几丁质酶活性,但也与感染、炎症、组织修复等过程密切相关。已有研究表明,几丁质酶和几丁质酶样蛋白参与了糖尿病、动脉粥样硬化、过敏性炎症、自身免疫疾病等多种慢性炎症疾病的发生发展,文中对其最新的研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 几丁质酶 几丁质酶样蛋白 慢性炎症疾病
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