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IGFBP5增龄性表达促进胸腺上皮细胞线粒体自噬和凋亡
1
作者 陈禧禅 曾继涛 +2 位作者 瞿思铭 高维武 吴玉章 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期567-577,共11页
目的 探讨在胸腺上皮细胞中随年龄增长而上调表达的胰岛素样生长因子结合蛋白5(Insulin Like Growth Factor Binding Protein 5,IGFBP5)在胸腺衰退中的作用和机制。方法 使用基因差异表达分析方法从已发表人胸腺基质细胞单细胞数据集(GS... 目的 探讨在胸腺上皮细胞中随年龄增长而上调表达的胰岛素样生长因子结合蛋白5(Insulin Like Growth Factor Binding Protein 5,IGFBP5)在胸腺衰退中的作用和机制。方法 使用基因差异表达分析方法从已发表人胸腺基质细胞单细胞数据集(GSE147520)中筛选出随年龄增长表达上调程度最高的基因IGFBP5;Mfuzz趋势分析筛选出与IGFBP5具有相同表达趋势的基因;富集分析注释与IGFBP5共趋势基因集;使用蛋白序列比对工具研究IGFBP5蛋白氨基酸序列的人鼠同源性;使用NIH基因数据库研究IGFBP5在人鼠器官组织中表达模式;免疫组化研究IGFBP5在不同年龄C57/BL6小鼠胸腺中的表达模式;构建IGFBP5过表达胸腺上皮细胞系;透射电镜观察IGFBP5过表达胸腺上皮细胞系中线粒体的形态变化;免疫蛋白印记(Western Blot, WB)对线粒体及全细胞组分线粒体自噬标志物微管相关蛋白1B(Microtubule Associated Protein 1 Light Chain 3 Beta, LC3B)、PTEN诱导激酶1(Pten Induced Kinase 1, PINK1)、Parkin泛素蛋白连接酶(Parkin Rbr E3 Ubiquitin Protein Ligase, Parkin)、BCL2互作蛋白3(BCL2 Interacting Protein 3, BNIP3),细胞凋亡标记物活化型胱天蛋白酶3 (Cleaved-Caspase3)表达水平进行检测;细胞双重免疫荧光对线粒体标志物与线粒体探针(MitoTracker)胞内定位进行检测;使用流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)对细胞系凋亡水平进行检测。结果 IGFBP5是人胸腺上皮细胞中随年龄增长表达上调程度最大的基因,与其具有共同表达模式的基因集显著富集在线粒体相关通路上。人与小鼠IGFBP5蛋白序列高度保守,其在人、小鼠多器官组织中表达模式相近,且IGFBP5在人、小鼠胸腺中均呈现中等表达水平;此外,IGFBP5在人和小鼠胸腺上皮中随年龄增长表达升高;在IGFBP5过表达小鼠胸腺上皮细胞系中,透射电镜结果表明线粒体自噬体增多,WB结果表明线粒体组分和细胞组分LC3B、PINK1、Parkin蛋白表达水平上调,BNIP3无明显差异;细胞双重免疫荧光结果表明LC3B、PINK1、Parkin蛋白胞质表达增多且与线粒体共定位;WB表明IGFBP5过表达鼠胸腺上皮细胞系中细胞凋亡标志物Cleaved-Caspase3水平升高;FCM表明IGFBP5过表达细胞系凋亡细胞比例增加。结论 人、小鼠胸腺上皮细胞中随年龄增长而表达升高的IGFBP5促进线粒体自噬和细胞凋亡,从而导致胸腺上皮细胞减少和胸腺功能衰退,因此,IGFBP5可成为干预胸腺衰老、重构人体免疫力的潜在靶标。 展开更多
关键词 胸腺上皮细胞 胰岛素样生长因子结合蛋白5 线粒体自噬 凋亡 胸腺衰退
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天麻素对小鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用 被引量：3
2
作者 袁博 瞿思铭 +4 位作者 吴朴 张洪斌 黄汉飞 曾仲 晋力 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期625-629,共5页
目的探讨天麻素（Gas）对小鼠肝脏缺血再灌注损伤（HIRI）的作用及机制。方法40只C57BL／6雄性小鼠随机分为：假手术（Sham）组、HIRI组、天麻素低剂量（Gas—L）组、天麻素高剂量（Gas—H）组、钴原卟啉（CoPP）组，每组各8只。术前Gas... 目的探讨天麻素（Gas）对小鼠肝脏缺血再灌注损伤（HIRI）的作用及机制。方法40只C57BL／6雄性小鼠随机分为：假手术（Sham）组、HIRI组、天麻素低剂量（Gas—L）组、天麻素高剂量（Gas—H）组、钴原卟啉（CoPP）组，每组各8只。术前Gas—L组、Gas—H组、CoPP组腹腔注射相应剂量药物。除Sham组外，其他组70％肝脏缺血60min再灌注6h。比较各组血清AST、ALT水平；检测肝组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）；实时荧光定量聚合酶链反应检测肝组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）和10（IL-10）、血红素氧合酶-1（HO-1）的表达；肝组织苏木精-伊红染色；TUNEL法检测肝细胞凋亡。结果HIRI组、Gas—L组、Gas—H组和CoPP组ALT水平分别为（5057．34±290．80）U／L、（3917．49±198．10）U／L、（3645．63±171．10）U／L和（2977．78±179．00）U／L，AST分另0为（5871．25±819．01）U／L、（4660．88±505．96）U／L、（4182．25±507．51）U／L、（3788．65±462．14）U／L。Gas—L组、Gas—H组和CoPP组血清ALT、AST低于HIRI组，差异有统计学意义（P〈0．05）。Gas—L组、Gas—L组和CoPP组肝细胞凋亡指数分别为（37．89±4．27）％、（32．59±3．78）％、（20．45±2．49）％，低于HIRI组（58．92±3．32）％，差异有统计学意义（P〈0．05）。与HIRI组比较，Gas—L组、Gas-H组和CoPP组TNF—α和IL-6mRNA相对表达明显降低，IL-10和HO-1mRNA表达升高，SOD活性升高，MDA水平降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论天麻素通过抗炎、抗氧化和抗细胞凋亡的作用减轻小鼠HIRI，其机制可能与促进HO-1的表达有关。 展开更多
关键词 天麻素 肝脏 缺血再灌注损伤 血红素氧合酶-1
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肝窦内皮细胞介导肝再生与纤维化平衡的研究进展 被引量：3
3
作者 袁博 瞿思铭 +1 位作者 黄汉飞 曾仲 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期545-548,共4页
肝窦内皮细胞(LSECs)在维系肝窦微循环以维持肝脏稳态中发挥了积极作用,同时在肝损伤修复中又介导了肝再生和纤维化平衡。急性肝损伤后,LSECs是肝脏修复性再生的调控者,而慢性肝损伤时,异常激活的LSECs促进了肝纤维化的发展。本文就近年... 肝窦内皮细胞(LSECs)在维系肝窦微循环以维持肝脏稳态中发挥了积极作用,同时在肝损伤修复中又介导了肝再生和纤维化平衡。急性肝损伤后,LSECs是肝脏修复性再生的调控者,而慢性肝损伤时,异常激活的LSECs促进了肝纤维化的发展。本文就近年来LSECs介导肝再生与纤维化平衡的研究进展综述,旨在为LSECs靶向治疗肝纤维化和促进肝再生的研究提供新思路。 展开更多
关键词 内皮细胞 肝切除术 肝再生 肝纤维化
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天麻素在肝脏损伤中的应用及其研究进展 被引量：3
4
作者 瞿思铭 曾仲 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 2017年第2期298-300,共3页
天麻素以其多重功效集一身的特点,被普遍应用于临床疾病的辅助治疗当中,在心脑血管领域的疗效较为突出。随着对天麻素研究的不断深入,目前很多学者开始关注天麻素在肝脏损伤中的应用,本文就近年来天麻素在各类肝脏损伤中的应用作一综述... 天麻素以其多重功效集一身的特点,被普遍应用于临床疾病的辅助治疗当中,在心脑血管领域的疗效较为突出。随着对天麻素研究的不断深入,目前很多学者开始关注天麻素在肝脏损伤中的应用,本文就近年来天麻素在各类肝脏损伤中的应用作一综述,为进一步开发利用提供理论基础。 展开更多
关键词 天麻素 研究进展 肝损伤 肝脏脂肪变性
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血红素加氧酶-1对肝窦内皮细胞增殖及促肝再生表型的影响
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作者 袁博 明廷凤 +3 位作者 瞿思铭 黄汉飞 曾仲 林杰 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期536-541,共6页
目的研究血红素加氧酶-1(HO-1)对肝窦内皮细胞(LSECs)增殖、迁移及促肝细胞增殖作用的影响。方法雄性6~8周龄无特定病原体级C57BL/6小鼠18只,行部分肝切除,组织免疫荧光检测术后0、2、4 d残肝内细胞增殖及HO-1表达。以携带HO-1基因的腺... 目的研究血红素加氧酶-1(HO-1)对肝窦内皮细胞(LSECs)增殖、迁移及促肝细胞增殖作用的影响。方法雄性6~8周龄无特定病原体级C57BL/6小鼠18只,行部分肝切除,组织免疫荧光检测术后0、2、4 d残肝内细胞增殖及HO-1表达。以携带HO-1基因的腺病毒转染LSECs细胞系(HO-1组),同时以空载体腺病毒转染和未转染细胞为对照。另外建立不同转染组LSECs与肝细胞系非接触共培养模型,评价HO-1表达对肝细胞的促增殖作用。Western印迹及实时定量聚合酶链反应检测各组细胞HO-1、分化抑制因子1(Id1)、肝细胞生长因子(HGF)、Wnt2蛋白和mRNA表达水平变化,EdU法检测各组细胞增殖,Transwell迁移实验检测细胞迁移能力变化。结果相比小鼠肝切除术后0 d,术后4 d再生肝内LSECs开始大量增殖并伴随LSECs内HO-1表达明显升高。HO-1组LSECs的EdU阳性率(27.20±4.80)%高于空载体组(12.47±3.30)%和未转染对照组(15.97±2.50)%,HO-1组LSECs迁移数量(258.70±36.56)个高于空载体组(122.00±38.16)个和对照组(107.70±30.01)个(均为5个200×视野),HO-1组HO-1、Id1、HGF、Wnt2蛋白及mRNA表达水平均高于空载体组与对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。HO-1组LSECs共培养的肝细胞EdU阳性率(18.33±2.52)%高于空载体组(11.33±1.53)%与对照组(11.70±2.08)%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论上调HO-1表达能够促进小鼠LSECs增殖、迁移以及增强LSECs对肝细胞的促增殖作用。 展开更多
关键词 肝再生 内皮细胞 肝细胞 血红素加氧酶-1
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胆道镜联合钬激光碎石与部分肝切除治疗Ⅰ型肝内胆管结石对比分析 被引量：3
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作者 吴朴 曾仲 +2 位作者 袁博 瞿思铭 段键 《重庆医学》 CAS 北大核心 2017年第A01期145-148,共4页
目的探讨应用胆道镜联合钬激光碎石治疗I型肝内胆管结石的手术方法、疗效在治疗I型肝内胆管结石方面的优势。方法回顾性分析该院2012年8月至2016年6月收治的53例I型肝内胆管结石患者的临床资料，分为研究组（28倒）好对照组（25例）。... 目的探讨应用胆道镜联合钬激光碎石治疗I型肝内胆管结石的手术方法、疗效在治疗I型肝内胆管结石方面的优势。方法回顾性分析该院2012年8月至2016年6月收治的53例I型肝内胆管结石患者的临床资料，分为研究组（28倒）好对照组（25例）。研究组行胆道镜联合钬激光碎石治疗，对照组行部分肝叶切除治疗。结果研究组患者中Ⅳ级胆管中存在少量细小结石2例，因胆道镜不能进入无法取出细小结石，结石取净率为92．8％，术后肝功能轻度受损（AST〈50IU／L、ALT〈45IU／L），无感染、胆漏、胆道大出血等严重并发症。对照组患者中Ⅲ级或Ⅳ级胆管中存在少量细小结石2例，结石取净率为92．0％，肝功能受损2例（AST〉120IU／L、ALT〉120IU／L），术后感染2例，胆漏2例。研究组患者手术时间、手术失血量、术后平均住院时间、术后并发症发生率均明显优于对照组，差异均有统计学意义（P〈o．05）。两组患者结石取净率比较差异无统计学意义（P〉0．05）。研究组患者术后随访1年B超复查未发现结石复发。结论胆道镜联合钬激光碎石治疗I型肝内胆管结石精准、微创、手术操作方法简单、安全、可靠、疗效确切，适合临床推广应用。 展开更多
关键词 钬激光 肝叶切除 Ⅰ型肝内胆管结石 精准医疗
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