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青霉菌立体选择性环氧化顺丙烯磷酸产生磷霉素 被引量:11
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作者 石家骥 崔福绵 葛猛 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期353-356,共4页
由土壤中分离出一株青霉 (Penicilliumsp .) ,编号F5,能选择性的将顺丙烯磷酸环氧化为磷霉素 ,在pH7 5、2 8℃、2 80r min条件下培养 6d ,底物浓度 0 3%时 ,产物浓度达 2 2mg mL ,产率 41 % ;底物浓度 0 6%时产率 8%。转化产物经磷... 由土壤中分离出一株青霉 (Penicilliumsp .) ,编号F5,能选择性的将顺丙烯磷酸环氧化为磷霉素 ,在pH7 5、2 8℃、2 80r min条件下培养 6d ,底物浓度 0 3%时 ,产物浓度达 2 2mg mL ,产率 41 % ;底物浓度 0 6%时产率 8%。转化产物经磷霉素敏感菌生物检测 ,TLC检测 ,并与标准品比较 ,确证为磷霉素。 展开更多
关键词 青霉素 顺丙烯磷酸 磷霉素 生物转化 立体选择性环氧化
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产β-葡聚糖酶菌种T199的选育及发酵条件 被引量:18
2
作者 石家骥 崔福绵 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期750-752,共3页
A mutant strain T199 producing about 8 times as much β-glucanase as its parent strain trichoderma kningii T3 was obtained by treatment with ultraviolet light and N-methyl-N-nitro-N-nitrosoguanidine.Fermentation was... A mutant strain T199 producing about 8 times as much β-glucanase as its parent strain trichoderma kningii T3 was obtained by treatment with ultraviolet light and N-methyl-N-nitro-N-nitrosoguanidine.Fermentation was conducted in 250mL flask,each containing 30mL of medium consisted of 5% corn cob powder,3% wheat bran and 1.4% nitrogen source No.10 ((NH 4) 2SO 4 10%,Peptone 20%,Yeast extract 15%).The optima culture conditions were as below:initial pH5.0,30℃,shaking speed 280r/min,and cultivation time 5d.Enzyme activity toward CMC-Na,lichenin,laminarin and barley β-glucan at pH 5.0 and 60℃ for 10min were 300,1100,12 and 1600 IU/mL,respectively.The optima pH and temperature for enzyme action toward barley β-glucan were pH 5.0 and 70℃,respectively.The enzyme was stable under below 50℃ and at pH 4.5~6.5. 展开更多
关键词 康宁木霉 Β-葡聚糖酶 纤维素酶 昆布多糖酶 地衣多糖酶 菌种 选育 发酵条件
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醌霉素A、C的~1H、^(13)C核磁共振谱归属的修正 被引量:4
3
作者 石家骥 戚长菁 陈文君 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期258-261,共4页
以“精原细胞”法为筛选模型,从云南土壤的一株链霉菌17250的菌丝和发酵液中分离得到2个抗肿瘤抗生素17250-Z1和17250-Z2。经对其理化性质和光谱数据的分析,确证17250-Z1为醌霉素C,17250-Z2... 以“精原细胞”法为筛选模型,从云南土壤的一株链霉菌17250的菌丝和发酵液中分离得到2个抗肿瘤抗生素17250-Z1和17250-Z2。经对其理化性质和光谱数据的分析,确证17250-Z1为醌霉素C,17250-Z2为醌霉素A,并对醌霉素A。 展开更多
关键词 链霉菌 醌霉素 核磁共振 抗肿瘤抗生素
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青霉素G酰化酶在γ-氧化铝上的吸附交联固定化 被引量:6
4
作者 石家骥 崔福绵 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期334-336,共3页
以 γ-氧化铝为载体 ,利用戊二醛对巨大芽孢杆菌 (Bacillus megaterium) Bp931胞外青霉素 G酰化酶进行吸附交联固定化。酶活力回收为 31% ,在 37℃、p H8.0的条件下 ,固定化酶对青霉素 G的活力为30 4IU/ g;作用于青霉素 G的表观米氏常数... 以 γ-氧化铝为载体 ,利用戊二醛对巨大芽孢杆菌 (Bacillus megaterium) Bp931胞外青霉素 G酰化酶进行吸附交联固定化。酶活力回收为 31% ,在 37℃、p H8.0的条件下 ,固定化酶对青霉素 G的活力为30 4IU/ g;作用于青霉素 G的表观米氏常数 Km值为 3.2 3× 10 - 2 M。该固定化酶可耐高离子强度洗涤 ,连续合成头孢拉定 (cephradine) 10批次 ,酶活力剩余 82 % 展开更多
关键词 青霉素G酰化酶 固定化酶 Γ-氧化铝 戊二醛 吸附交联固定化
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纤维素酶的研究进展与发展趋势 被引量:137
5
作者 顾方媛 陈朝银 +1 位作者 石家骥 钱世钧 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第1期83-87,共5页
纤维素酶是一类能够水解纤维素的β-D-糖苷键生成葡萄糖的多组分酶的总称。传统上将其分为3类:内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶。纤维素酶属于糖苷水解酶类,近年来,根据氨基酸序列的同源性以及纤维素酶结构的相似性,将其分... 纤维素酶是一类能够水解纤维素的β-D-糖苷键生成葡萄糖的多组分酶的总称。传统上将其分为3类:内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶。纤维素酶属于糖苷水解酶类,近年来,根据氨基酸序列的同源性以及纤维素酶结构的相似性,将其分成不同的家族。总结了纤维素酶近年来的主要进展与研究趋势,包括酶的作用机理、基因的表达与调控、酶的发酵生产以及在纺织、洗涤、能源等工业的应用进展。 展开更多
关键词 纤维素酶 基因的表达调控 纺织用酶 生物乙醇
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高效协同酶解中性汽爆玉米秸秆的工艺优化 被引量:8
6
作者 钟健 杨敬 +6 位作者 钞亚鹏 武改红 贾文娣 张国青 石家骥 孙艳 钱世钧 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第10期2867-2875,共9页
玉米秸秆是我国主要的农业废弃物之一,在木质纤维素乙醇领域具有广阔的应用前景。而玉米秸秆预处理和酶法糖化成本过高是目前工艺中的重点和难点之一。从4种纤维素降解酶制剂中优选出对中性汽爆玉米秸秆有最佳协同效果的木霉和黑曲霉纤... 玉米秸秆是我国主要的农业废弃物之一,在木质纤维素乙醇领域具有广阔的应用前景。而玉米秸秆预处理和酶法糖化成本过高是目前工艺中的重点和难点之一。从4种纤维素降解酶制剂中优选出对中性汽爆玉米秸秆有最佳协同效果的木霉和黑曲霉纤维素酶制剂(6∶4体积比混合)。在此基础上,评估了木聚糖酶、β-葡萄糖苷酶、β-葡聚糖酶、漆酶、锰过氧化物酶等酶制剂,聚乙二醇-4000、吐温-80、牛血清白蛋白等非酶因子对糖化效率的影响,得到了一组高效协同降解汽爆玉米秸秆的复合酶体系,并获得了适宜的糖化工艺。结果表明,以每克中性汽爆预处理的玉米秸秆为底物,加入10FPU木霉/曲霉混合酶液,并添加1000IU的木聚糖酶和0.05 gPEG4000,于50℃/150 r.min-1条件下水解144 h,糖化液中纤维二糖、葡萄糖和木糖的浓度分别达到8.4、25.1、15.5 g.L-1,总转化率、纤维素、半纤维素的转化率分别可以达到71.1%、81.5%和55.3%。糖化产物中六碳糖和五碳糖总浓度达到49 g.L-1。 展开更多
关键词 纤维素酶 中性汽爆秸秆 协同作用 糖化 木聚糖酶
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枯草芽孢杆菌中性β-甘露聚糖酶的产生及性质 被引量:44
7
作者 崔福绵 石家骥 鲁茁壮 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期60-63,共4页
由土壤中分离出一株产中性β甘露聚糖酶的枯草芽孢杆菌(Bacilussubtilis),编号BM9602。该菌在液体培养条件下,产生中性β甘露聚糖酶。多糖能作为碳源,而单糖不能作为碳源;有机氮源优于无机氮源。产酶最... 由土壤中分离出一株产中性β甘露聚糖酶的枯草芽孢杆菌(Bacilussubtilis),编号BM9602。该菌在液体培养条件下,产生中性β甘露聚糖酶。多糖能作为碳源,而单糖不能作为碳源;有机氮源优于无机氮源。产酶最适培养基组成:魔芋粉4%,牛肉蛋白胨和酵母膏各1%。产酶最适培养条件:培养基起始pH85,35℃,振荡培养36h。以槐豆胶为底物,培养滤液中性β甘露聚糖酶活力为96IU/mL。酶在pH50~100和50℃下稳定;作用最适条件为pH60和50℃;水解魔芋粉和槐豆胶均产生寡聚糖。 展开更多
关键词 Β-甘露聚糖酶 枯草芽孢杆菌 性质 产生
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酶法合成头孢环己二烯 被引量:5
8
作者 崔福绵 石家骥 白小东 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期300-303,共4页
以环己二烯甘氨酸甲酯盐酸盐为酰基供体,7-氨基脱乙酰氧基头孢烷酸为酰基受体,γ-氧化铝为载体的固定化巨大芽孢杆菌胞外青霉素G酰化酶为酰化剂,合成了头孢环己二烯。5%酰基供体,2%酰基受体,每毫升反应物加44IU固定化酶,pH7.5... 以环己二烯甘氨酸甲酯盐酸盐为酰基供体,7-氨基脱乙酰氧基头孢烷酸为酰基受体,γ-氧化铝为载体的固定化巨大芽孢杆菌胞外青霉素G酰化酶为酰化剂,合成了头孢环己二烯。5%酰基供体,2%酰基受体,每毫升反应物加44IU固定化酶,pH7.5,25℃振荡反应5h,头孢环己二烯产率为81%。苯乙酸、苯氧乙酸和头孢霉素G对酶法合成有不同程度的抑制作用。 展开更多
关键词 巨大芽孢杆菌 头孢环己二烯 酶法合成
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中性纤维素酶糖化中性汽爆玉米秸秆工艺优化 被引量:1
9
作者 钟健 岳洋 +3 位作者 石家骥 孙艳 钞亚鹏 钱世钧 《生物质化学工程》 CAS 2013年第2期9-14,共6页
提出一种在非缓冲系统中水解中性汽爆秸秆的工艺。首先选取具有较好协同降解木质纤维素能力的特异腐质霉(Humicola insolens)所产中性纤维素酶进行工艺优化,确定其水解工艺可以在非缓冲体系中进行。在此基础上,通过添加β-葡萄糖苷酶、... 提出一种在非缓冲系统中水解中性汽爆秸秆的工艺。首先选取具有较好协同降解木质纤维素能力的特异腐质霉(Humicola insolens)所产中性纤维素酶进行工艺优化,确定其水解工艺可以在非缓冲体系中进行。在此基础上,通过添加β-葡萄糖苷酶、木聚糖酶、漆酶和表面活性剂与中性纤维素酶制剂中进行复配后在非缓冲体系中(自然pH值)水解中性汽爆秸秆,并用分批加酶水解提高了复合酶的酶解效率。结果表明,每克中性汽爆秸秆底物中加入10FPU中性纤维素酶,75IUβ-葡萄糖苷酶,3000IU木聚糖酶和体积分数为0.5%Triton-100,以100g/L底物浓度水解120h后,综合水解率为48.4%。每克底物中复合酶以15+5FPU,分批加酶水解120h后综合水解率、纤维素水解率和半纤维素水解率分别为56.0%、64.9%和42.5%。这有助于拓宽木质纤维素糖化工艺研究的思路,为木质纤维素材料高效糖化及后续乙醇发酵提供参考。 展开更多
关键词 中性纤维素酶 中性汽爆秸秆 协同作用 糖化
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哺乳动物中的可溶性环氧化物水解酶
10
作者 韩龙 石家骥 石磊 《曲阜师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2013年第1期77-81,共5页
哺乳动物中的可溶性环氧化物水解酶(soluble epoxide hydrolase,sEH)是一种集N-末端磷酸酶活性和C-末端水解酶活性于一体的同型二聚体酶.它对异生物质具有解毒功能,并参与多种生理调控过程,在血压控制和激素调节方面发挥着重要作用.本... 哺乳动物中的可溶性环氧化物水解酶(soluble epoxide hydrolase,sEH)是一种集N-末端磷酸酶活性和C-末端水解酶活性于一体的同型二聚体酶.它对异生物质具有解毒功能,并参与多种生理调控过程,在血压控制和激素调节方面发挥着重要作用.本文从哺乳动物sEH的分子结构、催化机理以及功能等方面做一概述. 展开更多
关键词 可溶性环氧化物水解酶 结构 功能
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产中性纤维素酶特异腐质霉H31-3复合诱变研究 被引量:8
11
作者 芦敬华 石家骥 +2 位作者 葛克山 崔福绵 钱世钧 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期74-78,共5页
中性纤维素酶在纺织、食品、饲料和制药行业均具有广泛的应用。采用离子束注入技术对中性纤维素酶产生菌特异腐质霉(Humicolainsolens)H31-3进行诱变,经发酵筛选获得较高酶活力且传代稳定的正突变菌株H14,制备其原生质体后进行紫外诱变... 中性纤维素酶在纺织、食品、饲料和制药行业均具有广泛的应用。采用离子束注入技术对中性纤维素酶产生菌特异腐质霉(Humicolainsolens)H31-3进行诱变,经发酵筛选获得较高酶活力且传代稳定的正突变菌株H14,制备其原生质体后进行紫外诱变。筛选后得到正突变菌株H14-2,最终CMC酶、滤纸酶活力分别达82.56IU/mL和5.77IU/mL,较原始菌株提高了78.57%和106.81%。 展开更多
关键词 中性纤维素酶 特异腐质霉 离子注入 紫外诱变
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微生物中纤维素酶的研究进展 被引量:5
12
作者 傅佑丽 石家骥 韩龙 《曲阜师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2019年第4期91-95,共5页
纤维素酶(cellulase)是一组能将纤维素降解为葡萄糖的酶的总称,广泛存在于多种生物体内.文 章对微生物中的纤维素酶的分子结构、组成、作用机理以及应用等方面进行了概述.
关键词 纤维素酶 结构 应用 低温纤维素酶
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呼吸道霉菌感染132例临床分析 被引量:6
13
作者 石家骥 李健 余勇 《重庆医学》 CAS CSCD 2003年第4期488-489,共2页
目的 探讨发生呼吸道霉菌感染的多重因素。方法 分析 13 2例呼吸道霉菌感染的特点。结果 本组 70岁以上患者占 79% ,发生霉菌感染前都有严重基础疾病 ,使用过 3~ 5种抗生素者占 82 % ,同时使用激素和抗生素 5d以上占 77% ,本组病例... 目的 探讨发生呼吸道霉菌感染的多重因素。方法 分析 13 2例呼吸道霉菌感染的特点。结果 本组 70岁以上患者占 79% ,发生霉菌感染前都有严重基础疾病 ,使用过 3~ 5种抗生素者占 82 % ,同时使用激素和抗生素 5d以上占 77% ,本组病例死亡率 3 7.9%。结论 严格抗生素和激素的使用 ,注意有严重基础疾病及多脏器功能受损的老年患者的特殊性 ,对减少呼吸道霉菌感染有重要意义。 展开更多
关键词 临床分析 呼吸道霉菌感染 抗生素 糖皮质激素 治疗
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372例急诊“120”患者抢救分析 被引量:7
14
作者 石家骥 《中国中西医结合急救杂志》 CAS 2002年第4期232-234,共3页
目的 :探讨急诊“12 0”对医院急诊科救治水平的影响。方法 :分析 372例急诊“12 0”病例的临床情况及治疗转归。结果 :急诊疾病病谱前 6位病种分别是急性损伤、心脑疾病、昏迷、急性中毒、中暑和肿瘤。 372例筛出多种特殊情况 ,得出本... 目的 :探讨急诊“12 0”对医院急诊科救治水平的影响。方法 :分析 372例急诊“12 0”病例的临床情况及治疗转归。结果 :急诊疾病病谱前 6位病种分别是急性损伤、心脑疾病、昏迷、急性中毒、中暑和肿瘤。 372例筛出多种特殊情况 ,得出本组病例的实际救治率为 82 .3% ;“无名氏”群体 10 3例 (占 2 7.7% ) ,这部分病例给急诊临床和社会带来了新问题 ,如何将其损失减少到最小范围 ,这仍有待今后继续探讨。急诊“12 0”的病例进入急诊科后给各专科病房 (占 39.5 % )和 ICU病房 (占 6 0 .5 % )输送病源 ,经急诊科再救治的患者比未经急诊科处理直接转入专科的病例安全系数大 ,发生纠纷的机会少。急诊“12 0”在应付灾难性事件方面显示了很强的应激能力。结论 :急诊“12 0”是医院急诊科的主要病例来源 ,是“院前急救院急诊科救治 ICU”三位一体急救模式的重要组成部分。 展开更多
关键词 急诊“120” ICU 急诊疾病病谱 “无名氏”群体
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一株耐冷玫红假裸囊菌HD1031的鉴定及其所产纤维素酶的研究 被引量:7
15
作者 韩龙 石家骥 +5 位作者 石磊 王有智 钞亚鹏 杨敬 张国青 钱世钧 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期928-938,共11页
【目的】以纤维素为唯一碳源,从四川省阿坝自治州黄龙沟的高山低温环境中分离筛选产纤维素酶的耐冷菌,并研究菌株的产酶特征。【方法】根据菌株的ITS序列分析及形态特征,对菌株进行鉴定。利用DNS法测定纤维素酶酶活性。【结果】从四川... 【目的】以纤维素为唯一碳源,从四川省阿坝自治州黄龙沟的高山低温环境中分离筛选产纤维素酶的耐冷菌,并研究菌株的产酶特征。【方法】根据菌株的ITS序列分析及形态特征,对菌株进行鉴定。利用DNS法测定纤维素酶酶活性。【结果】从四川省阿坝自治州黄龙沟的高山腐殖土中筛选出一株产纤维素酶的耐冷菌HD1031,经鉴定该菌为玫红假裸囊菌(Pseudogymnoascus roseus)。该菌可在4°C 25°C生长,最适生长温度为16°C 17°C。该菌在以微晶纤维素和玉米芯粉为碳源、硫酸铵和Tryptone为氮源的培养基中,17°C、160 r/min摇瓶发酵8 d后产生纤维素酶,其中内切葡聚糖酶酶活为366.67 U/mL,滤纸酶酶活87.6 U/mL,β-葡萄糖苷酶酶活90.8 U/mL,酶最适反应pH为6.0,最适反应温度为50°C。【结论】筛选获得一株产纤维素酶的耐冷菌HD1031,此菌株所产纤维素酶在20°C 40°C下活性较高,对热敏感,具有低温纤维素酶的特点。 展开更多
关键词 玫红假裸囊菌 耐冷菌 低温纤维素酶
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α-环状糊精葡萄糖基转移酶的固定化及其性质研究 被引量:5
16
作者 杨红艺 钞亚鹏 +3 位作者 石家骥 解复红 薛智权 钱世钧 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期34-38,共5页
研究了一种α-环糊精葡萄糖基转移酶的固定化和固定化酶的性质。通过对戊二醛浓度、酶量和交联时间各单因素的考察,确定了最佳的固定化条件。与游离酶相比,以DEAE纤维素为载体的固定化酶最适pH向酸性偏移,最适温度不变,pH稳定性和热稳... 研究了一种α-环糊精葡萄糖基转移酶的固定化和固定化酶的性质。通过对戊二醛浓度、酶量和交联时间各单因素的考察,确定了最佳的固定化条件。与游离酶相比,以DEAE纤维素为载体的固定化酶最适pH向酸性偏移,最适温度不变,pH稳定性和热稳定性都有所提高。在40℃、150r/min下反应3h,转化率可以达到32%。固定化酶可以连续使用4次以上。固定化酶在4℃、5mmol/L CaCl2溶液里保存18d,还剩余80%以上的活力。 展开更多
关键词 01.环糊精葡萄糖基转移酶DEAE纤维素 固定化环糊精
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枯草芽胞杆菌168不对称转化产生磷霉素的蛋白质组学分析 被引量:1
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作者 解复红 钞亚鹏 +3 位作者 石家骥 张国青 杨敬 钱世钧 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期735-750,共16页
旨在用蛋白质组学方法揭示枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis 168将顺丙烯磷酸转化成磷霉素的机理。B.subtilis 168能够将顺丙烯磷酸不对称转化成磷霉素。气相色谱分析发现在转化培养基发酵液中的磷霉素的含量达816.6μg/mL,转化率为36.05... 旨在用蛋白质组学方法揭示枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis 168将顺丙烯磷酸转化成磷霉素的机理。B.subtilis 168能够将顺丙烯磷酸不对称转化成磷霉素。气相色谱分析发现在转化培养基发酵液中的磷霉素的含量达816.6μg/mL,转化率为36.05%。将分别培养在含有底物和不含底物的培养基中的B.subtilis 168的胞质蛋白进行双向凝胶电泳。对两种条件下的电泳图谱进行比较,发现有98个差异表达蛋白。其中在有底物存在时,表达量下调的点有20个,表达量上调的点52个,底物特异性表达的点有26个。对差异表达蛋白进行质谱鉴定,共鉴定到80个蛋白点,其中下调的点17个,上调的点45个,底物特异性表达的点18个。这些蛋白分别参与胁迫反应、氧化还原反应、物质转运、核苷酸代谢、糖代谢、氨基酸和蛋白质代谢等。根据上述对B.subtilis 168蛋白质组学分析结果,推测菌株是通过两步将顺丙烯磷酸转化成磷霉素的。第一步是水化反应,第二步是脱氢反应。 展开更多
关键词 枯草芽胞杆菌 顺丙烯磷酸 磷霉素 转化 蛋白质组学分析
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黑曲霉QU10果糖基转移酶的克隆表达(英文) 被引量:1
18
作者 张国青 杨敬 +2 位作者 石家骥 钱世钧 钞亚鹏 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期512-522,共11页
微生物果糖基转移酶能够以蔗糖为底物产生低聚果糖。为获得更多新酶资源,通过PCR法成功地克隆出黑曲霉QU10的果糖基转移酶基因(Gen Bank Accession No.KF699529),基因片段长度为1 941 bp,包含一个54 bp的内含子。进一步利用RT-PCR法克... 微生物果糖基转移酶能够以蔗糖为底物产生低聚果糖。为获得更多新酶资源,通过PCR法成功地克隆出黑曲霉QU10的果糖基转移酶基因(Gen Bank Accession No.KF699529),基因片段长度为1 941 bp,包含一个54 bp的内含子。进一步利用RT-PCR法克隆了果糖基转移酶的c DNA,其编码628个氨基酸。将所得片段定向克隆到p ET-22b、p GAPZA及p GAPZαA载体,并转化至大肠杆菌或毕赤酵母中,通过筛选获得果糖基转移酶表达活力高的转化子。利用α信号肽的毕赤酵母转化子获得最高果糖基转移酶胞外酶活力为431 U/m L,是原始菌株酶活力的35倍。此毕赤酵母重组酶为同源二聚体,半天然PAGE表观分子量约200 k Da。以蔗糖为底物,果糖基转移酶在p H 5.0、45℃下反应4 h,酶解产物中主要是蔗果三糖和四糖,蔗果寡糖最高可占总质量的58%。结果表明,果糖基转移酶酵母工程菌具有很高的转果糖基的能力,而且表达活力高,具有潜在的工业应用价值。 展开更多
关键词 黑曲霉 果糖基转移酶 克隆 表达 低聚果糖
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