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程绍辉作品
1
作者 程绍辉 《人大建设》 2018年第A01期183-183,共1页
关键词 绍辉
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焦磷酸测序技术在确认北京严重急性呼吸综合征(SARS)病毒株并检测基因突变中的应用 被引量：5
2
作者 程绍辉 梁明华 +5 位作者 李泽琳 张霆 张珑 马洪涛 刘哲伟 曾毅 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期168-172,共5页
结合严重急性呼吸综合征(SARS)病毒株序列信息分析和高通量测序技术,建立一种快速、简单地确定SARS病毒株并筛查SARS病毒突变位点和突变频率的方法。从感染人SARS病毒的Vero-6细胞中提取病毒RNA,反转录为cDNA后,PCR扩增目的基因片段,采... 结合严重急性呼吸综合征(SARS)病毒株序列信息分析和高通量测序技术,建立一种快速、简单地确定SARS病毒株并筛查SARS病毒突变位点和突变频率的方法。从感染人SARS病毒的Vero-6细胞中提取病毒RNA,反转录为cDNA后,PCR扩增目的基因片段,采用焦磷酸测序技术(PyrosequencingTechnology,PSQ)进行第2601、79199、4791、9838多个碱基突变位点测序和突变频率分析。通过测序分析多个可能出现突变的位点,确定了该病毒为北京流行株,同时发现第7919位碱基发生了A/G突变。PSQ技术对于高通量筛选研究病毒基因的突变和确定病毒株型别有着简单、快速、灵敏的特点。利用生物信息学分析核酸多态性,结合实验验证,可以确定SARS病毒流行株的特征,有利于对突发事件及早确定传染来源。 展开更多
关键词 焦磷酸测序技术 严重急性呼吸综合征 SARS 病毒株 基因突变
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乳清浓缩蛋白对搅拌型酸奶品质特性影响的研究 被引量：14
3
作者 程绍辉 罗永康 +1 位作者 管雪青 王全宇 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2006年第7期13-16,共4页
研究了以全脂奶粉和乳清浓缩蛋白(WPC-3503)为原料,按照全脂奶粉︰乳清浓缩蛋白为100︰0,90︰10,80︰20,70︰30的质量配比生产乳固形物含量为12%的酸奶,对含有不同乳清蛋白比例的酸奶在贮藏过程中理化特性、乳酸菌总数的变化以及感官特... 研究了以全脂奶粉和乳清浓缩蛋白(WPC-3503)为原料,按照全脂奶粉︰乳清浓缩蛋白为100︰0,90︰10,80︰20,70︰30的质量配比生产乳固形物含量为12%的酸奶,对含有不同乳清蛋白比例的酸奶在贮藏过程中理化特性、乳酸菌总数的变化以及感官特性进行了比较分析。结果表明,WPC-3503代替10%～20%全脂奶粉生产酸奶时,在贮藏过程中可减缓pH值及酸度的变化速度,提高酸奶的黏度和保水率,改善感官特性,但对乳酸菌总数无明显的影响。 展开更多
关键词 搅拌型酸奶 乳清浓缩蛋白 物理化学特性 乳酸菌 感官评定
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HIV-1整合酶蛋白的可溶性表达及功能研究 被引量：3
4
作者 程绍辉 马晓慧 +3 位作者 何红秋 刘斌 陈慰祖 王存新 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期22-26,共5页
HIV-1整合酶是HIV病毒复制中一个重要的酶,也是治疗艾滋病药物的一个重要靶点。为了开展以整合酶蛋白为靶点的抑制剂筛选,构建HIV-1整合酶重组质粒,在原核细胞中进行可溶性表达和功能研究。通过重叠PCR技术引入F185K和C280S突变于HIV-1... HIV-1整合酶是HIV病毒复制中一个重要的酶,也是治疗艾滋病药物的一个重要靶点。为了开展以整合酶蛋白为靶点的抑制剂筛选,构建HIV-1整合酶重组质粒,在原核细胞中进行可溶性表达和功能研究。通过重叠PCR技术引入F185K和C280S突变于HIV-1B亚型标准株的整合酶cDNA片段中,PCR扩增片段克隆到pET-28a(+)表达载体中,构建重组质粒,在E.coli中进行整合酶基因表达,SDS-PAGE鉴定表达产物,亲和层析纯化蛋白,酶联免疫吸附实验方法测定整合酶的生物学活性。结果构建的重组质粒获得高效稳定的可溶性表达,ELISA实验证实该蛋白具有整合酶的3′切割DNA和5′链转移的活性。HIV-1整合酶蛋白的可溶性表达和活性研究为建立以整合酶为靶点的抗HIV药物筛选平台打下了基础。 展开更多
关键词 HIV-1整合酶 克隆 表达 ELISA
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低能量氦氖激光照射对荷瘤小鼠IgG含量及脾重的影响 被引量：5
5
作者 程绍辉 王洪斌 黄保续 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期71-72,共2页
本研究动态地观察了低能量氦氖激光照射对荷瘤小鼠IgG含量及脾重的影响。试验以BALB/c昆明鼠为研究对象 ,用 7.33J/cm2 、1 4 .67J/cm2 ,1 1 .0 0J/cm2 ,2 2 .0 0J/cm2 及 2 9.33J/cm2 氦氖激光剂量照射小鼠内眼角 ,连续照射 6天 ,照射... 本研究动态地观察了低能量氦氖激光照射对荷瘤小鼠IgG含量及脾重的影响。试验以BALB/c昆明鼠为研究对象 ,用 7.33J/cm2 、1 4 .67J/cm2 ,1 1 .0 0J/cm2 ,2 2 .0 0J/cm2 及 2 9.33J/cm2 氦氖激光剂量照射小鼠内眼角 ,连续照射 6天 ,照射后第 4天 ,第 8天 ,第 1 2天分别刹死 5只小鼠监测小鼠的IgG含量及脾重的动态变化。结果表明 :中等剂量的氦氖激光照射可以提高IgG含量及脾重 ;大剂量激光照射则降低IgG含量和脾重 ,呈现先上升后下降的变化趋势。 展开更多
关键词 氦氖激光照射 肿瘤 IgG含量 小鼠 脾重
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磁珠分离DNA技术检测HIV-1逆转录酶基因耐药性突变 被引量：1
6
作者 程绍辉 何红秋 +2 位作者 刘斌 陈慰祖 王存新 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期105-109,共5页
HIV-1逆转录酶基因突变导致的耐药性严重影响了药物对病人的治疗效果,耐药性突变的检测对于指导合理用药具有重要意义。发展了一种检测HIV-1逆转录酶基因耐药性突变的新方法,在两步MS-PCR方法的基础上,引入磁珠分离DNA技术并结合酶联免... HIV-1逆转录酶基因突变导致的耐药性严重影响了药物对病人的治疗效果,耐药性突变的检测对于指导合理用药具有重要意义。发展了一种检测HIV-1逆转录酶基因耐药性突变的新方法,在两步MS-PCR方法的基础上,引入磁珠分离DNA技术并结合酶联免疫吸附检测方法(ELISA)检测逆转录酶基因耐药性突变T215F和Y181C。结果显示:MS-PCR结合磁珠分离技术和ELISA具有较高的灵敏度和特异性,阳性/阴性比值(P/N值)达到要求,突变型模板检测限为5%左右,耗时短且能进行高通量检测。无论在HIV-1耐药性突变还是其它的点突变检测中,该方法都具有较好的临床应用前景。 展开更多
关键词 逆转录酶 耐药性突变 磁珠 ELISA MS-PCR
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单细胞电泳法检测肿瘤患者化疗后淋巴细胞DNA损伤 被引量：2
7
作者 程绍辉 马晓慧 +2 位作者 卜黎明 刘宁 孙殿军 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第5期534-537,共4页
应用单细胞电泳 (SCGE)检测肿瘤患者环磷酰胺化疗后外周血T淋巴细胞DNA损伤。在标准SCGE条件下应用彗星图象分析系统定量分析人T淋巴细胞DNA的损伤程度。彗星图象分析研究结果显示 ,肿瘤患者外周血T淋巴细胞DNA损伤明显强于正常对照组 ... 应用单细胞电泳 (SCGE)检测肿瘤患者环磷酰胺化疗后外周血T淋巴细胞DNA损伤。在标准SCGE条件下应用彗星图象分析系统定量分析人T淋巴细胞DNA的损伤程度。彗星图象分析研究结果显示 ,肿瘤患者外周血T淋巴细胞DNA损伤明显强于正常对照组 ,肿瘤患者外周血T淋巴细胞拖尾动量为 10 42± 1 98,正常人群为 1 2 6± 0 77;两者差异极显著 (P <0 .0 1)。肿瘤患者化疗后T淋巴细胞的拖尾长度为 3 3 69± 7 56μm ,DNA损伤的百分比为 3 1 5± 5 46% ;正常人群T淋巴细胞的拖尾长度和DNA损伤的百分比分别为 16 2± 1 5μm和7 46± 1 15% ;两组数据相比差异极显著 (P <0 .0 1)。结论 :单细胞电泳可快速灵敏地检测细胞DNA损伤 ,能用于肿瘤化疗患者的流行病学观察。 展开更多
关键词 单细胞凝胶电泳 DNA损伤 环磷酰胺 淋巴细胞 彗星图象分析系统 肿瘤患者
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锚定表达GM-CSF疫苗的抑瘤效果研究 被引量：1
8
作者 程绍辉 马晓慧 +1 位作者 陈兴 于继云 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2004年第1期27-30,共4页
目的:研究锚定表达GM—CSF的小鼠黑色素瘤作为肿瘤疫苗的有效性。方法:GM-CSF基因嵌合GPI信号肽修饰序列实现在B16小鼠黑色素瘤细胞表面的锚定表达,研究锚定修饰的B16细胞于同源C57BL/6小鼠的成瘤性及诱导抗肿瘤免疫的效果。结果:抑瘤... 目的:研究锚定表达GM—CSF的小鼠黑色素瘤作为肿瘤疫苗的有效性。方法:GM-CSF基因嵌合GPI信号肽修饰序列实现在B16小鼠黑色素瘤细胞表面的锚定表达,研究锚定修饰的B16细胞于同源C57BL/6小鼠的成瘤性及诱导抗肿瘤免疫的效果。结果:抑瘤实验结果表明,锚定修饰GM—CSF的肿瘤细胞免疫原性增强,成瘤性明显下降;成瘤率为58.8％,而肿瘤对照组为100％。活瘤苗接种实验结果显示锚定修饰的肿瘤细胞可以预防肿瘤的发生,肿瘤发生率仅为20％,说明抗肿瘤的免疫应答有记忆性,能够有效地防止野生型肿瘤细胞的攻击。结论:锚定修饰GM-CSF的肿瘤细胞可以诱导抗特异性的抗肿瘤反应,这种设计可以应用于肿瘤疫苗的研究中。 展开更多
关键词 膜表达 GM—CSF 抗肿瘤免疫
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低能量氦氖激光照射对荷瘤小鼠NK细胞活性的影响 被引量：1
9
作者 程绍辉 王洪斌 黄保续 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 1999年第1期9-10,共2页
研究低能量氦氖激光照射荷瘤小鼠对ＮＫ细胞活性的影响。选取ＢＡＬＢ／Ｃ雄性小鼠腹腔接种Ｓ１８０，接种后进行激光照射小鼠内眼角，监测了正常对照组、肿瘤对照组和７．３３、１１．００、１４．６７、２２．００、２９．３３Ｊ／ｃ... 研究低能量氦氖激光照射荷瘤小鼠对ＮＫ细胞活性的影响。选取ＢＡＬＢ／Ｃ雄性小鼠腹腔接种Ｓ１８０，接种后进行激光照射小鼠内眼角，监测了正常对照组、肿瘤对照组和７．３３、１１．００、１４．６７、２２．００、２９．３３Ｊ／ｃｍ２五个激光照射组能明显提高荷瘤小鼠ＮＫ细胞活性（Ｐ＜０．０１）；７．３３、２９．３３Ｊ／ｃｍ２照射组则升高不明显。 展开更多
关键词 氦氖激光 肿瘤 NK细胞活性
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4-1BBL胞外区cDNA的克隆及鉴定
10
作者 程绍辉 于继云 +1 位作者 陈兴 许红莲 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2003年第5期267-269,共3页
目的 研究共刺激分子4-1BBL对T淋巴细胞的作用,并进一步研究肿瘤的免疫治疗。方法 按照4-1BBL的基因序列,设计合成了可扩增4-1BBL胞外区的引物序列,用RT-PCR方法从急性B淋巴白血病Raji细胞系细胞中提取总RNA,扩增出4-1BBL胞外区片段,并... 目的 研究共刺激分子4-1BBL对T淋巴细胞的作用,并进一步研究肿瘤的免疫治疗。方法 按照4-1BBL的基因序列,设计合成了可扩增4-1BBL胞外区的引物序列,用RT-PCR方法从急性B淋巴白血病Raji细胞系细胞中提取总RNA,扩增出4-1BBL胞外区片段,并克隆到载体中,经酶切鉴定后再进行序列分析。结果 所克隆的目的片段经EcoRI和XhoI双酶切和序列分析证明正确。结论 已成功地钓取4-1BBL胞外区基因并克隆到pMD-18载体上。 展开更多
关键词 胞外区 4-1BBL CDNA 克隆 基因 共刺激分子 T淋巴细胞 肿瘤 免疫治疗
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重组GPI-B7胞外段在中华仓鼠卵巢癌细胞膜上的表达
11
作者 程绍辉 于继云 +1 位作者 陈兴 许红莲 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第S1期1-4,共4页
目的 通过从衰变加速因子(DAF)来源的GPI修饰性信号序列克隆到PCI-dhfr真核表达载体,利用GPI信号序列对B7-1基因胞外段序列进行修饰,实现GPI-B7-1锚定蛋白在中华仓鼠卵巢癌细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO)膜表面的表达。方法 应用... 目的 通过从衰变加速因子(DAF)来源的GPI修饰性信号序列克隆到PCI-dhfr真核表达载体,利用GPI信号序列对B7-1基因胞外段序列进行修饰,实现GPI-B7-1锚定蛋白在中华仓鼠卵巢癌细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO)膜表面的表达。方法 应用RT-PCR方法从B淋巴细胞瘤细胞系(Raji细胞系)总RNA中钓取B7-1(CD80)全长基因,扩增B7-1胞外段分子并克隆到已含有GPI修饰性信号序列的真核表达载体pCI-dhfr上,应用脂质体方法转染到CHO-dhfr-细胞中,用氨甲喋呤(Methotrexate,MTX)进行筛选。重组蛋白的表达用细胞免疫荧光进行鉴定。结果 成功地克隆了B7-1全长基因,并扩增了胞外段基因构建到含有GPI修饰性信号序列的真核表达载体pCI-dhfr上,实现了GPI-B7-1锚定蛋白在CHO细胞膜的表达。结论GPI信号序列能够通过其脂质性尾部将GPI-B7-1锚定蛋白整合到细胞膜表面,本研究结果为将来应用GPI-B7-1分子于肿瘤细胞膜表面的修饰做了技术准备,可作为肿瘤免疫治疗的手段。 展开更多
关键词 RT-PCR B7-1 GPI修饰蛋白 膜表达
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H_2O_2致小鼠淋巴细胞DNA的损伤及修复
12
作者 程绍辉 卜黎明 +1 位作者 刘宁 孙殿军 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期243-244,共2页
目的　应用单细胞电泳检测 (SCGE)过氧化氢 (H2 O2 )致小鼠淋巴细胞 DNA损伤及其修复。方法　标准 SCGE条件下荧光显微镜观察。结果　 H2 O2 不同浓度 80、16 0和 32 0μmol/ L ,3个组 H2 O2 浓度均可致小鼠淋巴细胞 DNA损伤 ,较低剂量... 目的　应用单细胞电泳检测 (SCGE)过氧化氢 (H2 O2 )致小鼠淋巴细胞 DNA损伤及其修复。方法　标准 SCGE条件下荧光显微镜观察。结果　 H2 O2 不同浓度 80、16 0和 32 0μmol/ L ,3个组 H2 O2 浓度均可致小鼠淋巴细胞 DNA损伤 ,较低剂量即可造成细胞拖尾 ,可逆性损伤在 6 0 m in内可获得明显修复。结论　单细胞电泳可快速灵敏地检测氧化损伤 ,也可能用于流行病学研究。 展开更多
关键词 单细胞电泳法 DNA损伤 过氧化氢 小鼠 SCGE
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4-1BBL的分子特性及4-1BB/4-1BBL信号传导在肿瘤免疫治疗的应用 被引量：1
13
作者 程绍辉 丁继云 《国外医学（免疫学分册）》 2005年第1期59-62,共4页
4 1BB/ 4 1BBL是一组重要的共刺激分子 ,起初对于 4 1BB/ 4 1BBL研究主要集中于 4 1BB作为T细胞表面分子的共刺激作用。最近的证据显示 ,4 1BBL不只表现一个共刺激分子配基的作用 ,在本综述中 ,我们讨论了 4 1BBL作为共刺激分子... 4 1BB/ 4 1BBL是一组重要的共刺激分子 ,起初对于 4 1BB/ 4 1BBL研究主要集中于 4 1BB作为T细胞表面分子的共刺激作用。最近的证据显示 ,4 1BBL不只表现一个共刺激分子配基的作用 ,在本综述中 ,我们讨论了 4 1BBL作为共刺激分子配基的作用 :如对CD8+ T细胞的优先增殖和刺激作用 ,并进一步地讨论了 4 - 1BB/ 4 1BBL所介导的双信号传导机制 ,在肿瘤细胞表面表达 4 - 1BBL所引发的免疫机制做一回顾 ,探讨其用于肿瘤免疫治疗的价值。 展开更多
关键词 4-1BB/4-1 BBL T细胞 肿瘤免疫治疗
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低能量氦氖激光照射对荷瘤小鼠T淋巴细胞增殖反应的影响 被引量：5
14
作者 程绍辉 黄保续 王洪斌 《激光生物学报》 CAS CSCD 2000年第2期98-100,共3页
目的 :本文研究低能量氦氖激光照射荷瘤小鼠 ,观察对荷瘤 T淋巴细胞增殖反应的影响。结果 :BALB/ C雄性小鼠腹腔接种 S180 接种后 ,进行激光照射小鼠内眼角 ,测定正常对照组、肿瘤对照组和 7.3 3、1 1 .0 0、1 4 .67、2 2 .0 0 J/ cm2 ... 目的 :本文研究低能量氦氖激光照射荷瘤小鼠 ,观察对荷瘤 T淋巴细胞增殖反应的影响。结果 :BALB/ C雄性小鼠腹腔接种 S180 接种后 ,进行激光照射小鼠内眼角 ,测定正常对照组、肿瘤对照组和 7.3 3、1 1 .0 0、1 4 .67、2 2 .0 0 J/ cm2 和 2 9.3 3 J/ cm2 五个剂量激光照射组小鼠的 T淋巴细胞增殖反应 ,结果表明1 1 .0 0 J/ cm2 、1 4 .67J/ cm2 、2 2 .0 0 J/ cm2 剂量的氦氖激光照射能提高 T淋巴细胞增殖反应 ;2 9.3 3 J/ cm2 剂量激光照射抑制 T淋巴细胞增殖反应。结论 :低能量氦氖激光照射对荷瘤小鼠 T淋巴细胞增殖具有双向调节作用。 展开更多
关键词 氦氖激光照射 肿瘤 T淋巴细胞增殖反应 免疫调节
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CD3AK细胞过继免疫治疗的实验研究 被引量：16
15
作者 孙瑛勋 程绍辉 +4 位作者 于鸣 贺永怀 赖春宁 黎燕 沈倍奋 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期218-221,共4页
　目的: 分析抗CD3分子的单克隆抗体 (mAb)yCD3的免疫学特性和生物学活性, 观察其激活的免疫活性细胞CD3AK体外及动物体内的抑瘤作用。方法: 用流式细胞术(FCM)测定yCD3的特异性, 以及CD3AK细胞的免疫表型和产生细胞因子的情况。用 3H -... 　目的: 分析抗CD3分子的单克隆抗体 (mAb)yCD3的免疫学特性和生物学活性, 观察其激活的免疫活性细胞CD3AK体外及动物体内的抑瘤作用。方法: 用流式细胞术(FCM)测定yCD3的特异性, 以及CD3AK细胞的免疫表型和产生细胞因子的情况。用 3H -TdR法测定yCD3对淋巴细胞转化的作用; 乳酸脱氢酶法 (LDH)测定CD3AK细胞的体外细胞毒活性。建立荷瘤小鼠模型, 观察静脉注射CD3AK细胞后肿瘤生长的情况、转移灶数量和小鼠存活天数。结果: yCD3与T细胞呈特异性反应, 5μgyCD3可竞争抑制 70%的标准抗CD3抗体与细胞表面CD3分子的结合。yCD3刺激外周血淋巴细胞增殖的有效浓度为 8μg/L, 并与IL- 2、抗CD28抗体有协同作用。活化的CD3AK细胞中CD3+、CD8+和CD25+细胞增多; 产生IL- 2和IFN γ的CD3+细胞均有不同程度的增加, 在抗CD28抗体协同刺激下分别增加 3. 29和 2. 47倍。当效靶细胞比为 80∶1时, CD3AK细胞对体外肿瘤细胞杀伤的百分率为 57. 54%。分组观察荷瘤动物, CD3AK细胞治疗组的抑瘤率为 33. 17%, 对小鼠肿瘤肺转移的抑制率为39. 70%, 与LAK细胞联合治疗的疗效更显著。结论: yCD3可活化T细胞, 诱导的CD3AK细胞在体外及动物体内显示抑制肿瘤的作用, 在临床抗肿瘤过继性免疫治疗中具有重要意义。 展开更多
关键词 抗CD3单克隆抗体 CD3AK细胞 过继性免疫治疗
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T-2毒素对大鼠心肝肾及外周血淋巴细胞DNA损伤的实验观察 被引量：10
16
作者 卜黎明 刘宁 +1 位作者 程绍辉 孙殿军 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期332-334,共3页
目的　探求 T- 2毒素在体内的毒作用靶器官以及对 T- 2毒素中毒的敏感监测方法和生物标志。方法　采用单细胞凝胶电泳 (SCGE)技术及动物实验。结果　在所测的器官中 ,以大鼠肝脏对 T- 2毒素最为敏感 ,其次为外周血淋巴细胞 (PBL )。结... 目的　探求 T- 2毒素在体内的毒作用靶器官以及对 T- 2毒素中毒的敏感监测方法和生物标志。方法　采用单细胞凝胶电泳 (SCGE)技术及动物实验。结果　在所测的器官中 ,以大鼠肝脏对 T- 2毒素最为敏感 ,其次为外周血淋巴细胞 (PBL )。结论　外周血淋巴细胞的 DNA损伤可以作为机体 T- 展开更多
关键词 T-2毒素 DNA损伤 单细胞凝胶电泳 SCGE 外周血淋巴细胞 PBL KBD 早期诊断
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ERP系统设计与实施中应考虑的几个问题 被引量：4
17
作者 程绍辉 刘永山 黄国言 《燕山大学学报》 CAS 2003年第1期86-90,共5页
针对当前ERP系统实施过程中成功率低的特点,结合当前管理理论的新发展,论述了ERP系统设计与实施所必须认真考虑的业务流程重组BPR、供应链管理SCM与增值链、客户关系管理CRM几个关键问题。为ERP系统设计与成功实施提供参考。
关键词 ERP系统 业务流程重组 供应链管理 客户关系管理
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氦氖激光照射对小鼠脾淋巴细胞增殖反应影响的试验研究 被引量：7
18
作者 黄保续 刘焕奇 +6 位作者 刘云 曲志娜 刘西锋 程绍辉 王洪斌 高利 王海彬 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期69-71,共3页
目的 :研究氦氖激光照射对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响。方法 :以BALB c小鼠为研究对象 ,应用 7.3 3 ,11.0 0 ,14 .67,2 2 .0 0和3 6.67J cm2 五种剂量的氦氖激光照射小鼠哈德腺 ,连续照射 8d ,并于照射开始后第 3、6、9、13和第 17d... 目的 :研究氦氖激光照射对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响。方法 :以BALB c小鼠为研究对象 ,应用 7.3 3 ,11.0 0 ,14 .67,2 2 .0 0和3 6.67J cm2 五种剂量的氦氖激光照射小鼠哈德腺 ,连续照射 8d ,并于照射开始后第 3、6、9、13和第 17d动态监测实验鼠脾淋巴细胞增殖反应。结果 :7.3 3 ,11.0 0 ,14 .67和 2 2 .0 0J cm2 四个剂量组均可增强脾淋巴细胞增殖反应 ,但 11.0 0 ,14 .67和 2 2 .0 0J cm2 三个剂量组在第 3d就达到峰值 ,此后逐步下降 ,而 7.3 3J cm2 剂量组直到第 9d才达到峰值 ,且维持时间最短。与此相反的是 ,3 6.67J cm2 剂量组则在第 3d就出现抑制效应 ,直至第 13d才恢复至正常水平。结论 :适当剂量的氦氖激光照射可对小鼠脾淋巴细胞增殖反应产生增强效应 ,而过大剂量He -Ne激光则对免疫机能产生抑制效应。 展开更多
关键词 氦氖激光 免疫调节效应 小鼠 脾淋巴细胞增殖反应
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GPI-CTLA4Ig嵌合分子的构建和在CHO-dhfr^-细胞膜上的表达 被引量：3
19
作者 于继云 沈倍奋 +4 位作者 黎燕 陈兴 程绍辉 田蓉 曲梅花 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期212-214,共3页
目的 :研制GPI锚定修饰的新型免疫抑制分子GPI CT LA4Ig。方法 :通过将从促衰变因子 (DAF)来源的GPI修饰性信号序列与CTLA4Ig嵌合 ,获得GPI修饰的CTLA4Ig分子。将编码GPI CTLA4Ig嵌合分子的基因克隆到真核表达载体pCI dhfr中 ,并用脂质... 目的 :研制GPI锚定修饰的新型免疫抑制分子GPI CT LA4Ig。方法 :通过将从促衰变因子 (DAF)来源的GPI修饰性信号序列与CTLA4Ig嵌合 ,获得GPI修饰的CTLA4Ig分子。将编码GPI CTLA4Ig嵌合分子的基因克隆到真核表达载体pCI dhfr中 ,并用脂质体法转染CHO dhfr 细胞 ,用氨甲喋呤 (MTX)进行筛选。重组蛋白的表达用RT PCR、ELISA、细胞免疫荧光和Westernblot进行鉴定。最后采用ProteinA亲和层析纯化。结果 :构建了GPI CTLA4Ig嵌合分子 ,并在CHO dhfr 细胞膜上稳定表达。结论 :GPI修饰的CTLA4Ig分子有可能作为新型的免疫抑制剂用于器官移植中 。 展开更多
关键词 CTLA4IG 蛋白质表达 糖基化磷脂酰肌醇 CHO-dhfr^-细胞
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HIV-1跨膜蛋白gp41螺旋结构的原核表达及功能研究 被引量：2
20
作者 刘斌 何红秋 +2 位作者 程绍辉 陈慰祖 王存新 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期100-104,共5页
HIV-1跨膜蛋白gp41是HIV-1包膜与靶细胞膜的融合过程中的关键蛋白,是理想的HIV-1融合抑制剂靶点。为开展以gp41为靶点的抑制剂筛选,以HIV-1B亚型病毒基因为模板,通过PCR、酶切、连接等方法构建得到gp415-helix与6-helix重组质粒,转入大... HIV-1跨膜蛋白gp41是HIV-1包膜与靶细胞膜的融合过程中的关键蛋白,是理想的HIV-1融合抑制剂靶点。为开展以gp41为靶点的抑制剂筛选,以HIV-1B亚型病毒基因为模板,通过PCR、酶切、连接等方法构建得到gp415-helix与6-helix重组质粒,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,经变性和复性后亲和层析纯化蛋白。经SDS-PAGE鉴定,纯化后蛋白纯度较高。通过非变性凝胶电泳证明gp415-helix与C-多肽衍生物T-20存在相互作用,为下一步药物筛选模型的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 GP41 表达 纯化 T-20 非变性凝胶电泳
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