贵州省黔南州幽门螺杆菌克拉霉素的耐药性及23S rRNA基因突变的特征 被引量：3

1

作者 綦廷娜 潘科 +6 位作者 王菲 魏刚 蒋勇 张人弘 郑娟 张丹丹 陈峥宏 《世界华人消化杂志》 CAS 2015年第18期2901-2906,共6页

目的:了解贵州省黔南州幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)克拉霉素耐药相关基因突变情况.方法:采用改良琼脂稀释法检测分离自黔南州人民医院的74株H.pylori对克拉霉素的敏感性,选取H.pylori克拉霉素耐药菌株22株、敏感株10株,以... 目的:了解贵州省黔南州幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)克拉霉素耐药相关基因突变情况.方法:采用改良琼脂稀释法检测分离自黔南州人民医院的74株H.pylori对克拉霉素的敏感性,选取H.pylori克拉霉素耐药菌株22株、敏感株10株,以及NCTC11637进行23S rRNA基因功能区V区片段的PCR扩增和测序,与GenBank中收录的H.pylori敏感菌株U27270相关序列进行比对和分析.结果:74株H.pylori克拉霉素耐药率为29.7%(22/74).共发现10种突变类型,其中在耐药菌株及敏感菌株23S rRNA V区均存在的基因突变包括:T2183C、T2245C和T2321C;仅在耐药株(22株)中检测到的突变包括:A2144G(4/22)、A2224G(4/22)、C2196T(1/22)、C2289 T(1/22)、A2435G(1/22)、C2695A(1/22)、T2712C(1/22).结论:黔南州医院分离的H.pylori克拉霉素耐药率较高;与耐药性相关的23S rRNA基因突变主要为A2144G和A2224G;本院菌株存在A2435G、C2695A、T2712C 3种尚未见报道的突变. 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 克拉霉素 耐药性 突变

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改良的细菌荚膜染色法 被引量：6

2

作者 綦廷娜 陈峥宏 《贵阳医学院学报》 CAS 2006年第2期181-182,共2页

关键词 细菌荚膜 染色和标记 吕氏美蓝染色法 改良荚膜染色法

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SP-D对小鼠腹腔巨噬细胞杀灭幽门螺杆菌作用的影响

3

作者 綦廷娜 李金福 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第7期20-21,共2页

目的探讨表面活性蛋白-D(SP-D)对吞噬细胞杀灭幽门螺杆菌(HP)作用的影响。方法从SD大鼠肺泡灌洗液中提取并纯化SP-D。SP-D组将HP11637、HPSS1菌液分别用SP-D预处理30 min,加入小鼠腹腔巨噬细胞培养液。将细胞与菌液混合物孵育、灭菌、... 目的探讨表面活性蛋白-D(SP-D)对吞噬细胞杀灭幽门螺杆菌(HP)作用的影响。方法从SD大鼠肺泡灌洗液中提取并纯化SP-D。SP-D组将HP11637、HPSS1菌液分别用SP-D预处理30 min,加入小鼠腹腔巨噬细胞培养液。将细胞与菌液混合物孵育、灭菌、补充细胞培养液后继续孵育2、4、6 h后裂解巨噬细胞,取适量细胞裂解稀释液接种、置微需氧环境中孵育3 d,计数菌落形成单位。同时设未经SP-D预处理的HP11637、HPSS1加入巨噬细胞培养液作为对照组。结果孵育2、4、6 h,SP-D组杀灭HP11637数量明显多于对照组;杀灭HPSS1数量与对照组比较无显著差异。结论 SP-D可显著增强巨噬细胞体外杀灭HP11637的作用,而对小鼠腹腔巨噬细胞体外杀灭HPSS1无明显影响。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 表面活性蛋白-D 小鼠腹腔巨噬细胞

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幽门螺杆菌临床菌株克拉霉素耐药性及耐药基因突变位点分析 被引量：8

4

作者 司书梅 张涛 +4 位作者 陈峥宏 王菲 吴晓娟 綦廷娜 杨廷秀 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1117-1119,共3页

目的检测贵阳地区幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床菌株对克拉霉素耐药性及相关基因突变情况。方法采用琼脂稀释法对临床分离鉴定的Hp菌株,进行体外抗生素敏感试验,选取Hp克拉霉素耐药的临床菌株10株、克拉霉素敏感的临床菌株4... 目的检测贵阳地区幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床菌株对克拉霉素耐药性及相关基因突变情况。方法采用琼脂稀释法对临床分离鉴定的Hp菌株,进行体外抗生素敏感试验,选取Hp克拉霉素耐药的临床菌株10株、克拉霉素敏感的临床菌株4株和质控菌株2株,进行23SrRNA基因功能区V区片段的PCR扩增和测序,与GenBank中公布的Hp菌株相关序列进行比对分析。结果贵阳地区Hp临床分离株对克拉霉素的耐药率达30.9%(13/42)。贵阳地区10株Hp耐药菌的23SrRNA基因片段的碱基突变包括T2183C(10/10)、T2245C(9/10)、A2144G(6/10)、C2196T(1/10)、A2224G(1/10),4株敏感菌株在2183、2196、2224和2245位点也存在碱基差异,2144位点的基因突变仅存于耐药菌株中。结论贵阳地区Hp克拉霉素耐药率较高,耐药菌株23SrDNA与耐药性相关的基因突变主要为A2144G。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 克拉霉素 耐药性 基因突变

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应用免疫磁珠分离法及荧光定量PCR技术快速检测肠出血性大肠埃希菌O157:H7 被引量：6

5

作者 王涛 刘凯 +3 位作者 王艳 綦廷娜 叶长芸 熊衍文 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期291-293,315,共4页

目的建立免疫磁珠分离法(immunomagnetic separation,IMS)联合荧光定量PCR(real-time PCR)技术快速检测肠出血性大肠埃希菌O157∶H7的方法。方法根据肠出血性大肠埃希菌O157∶H7抗原特异性基因rfbEO157设计引物和荧光探针,建立real-time... 目的建立免疫磁珠分离法(immunomagnetic separation,IMS)联合荧光定量PCR(real-time PCR)技术快速检测肠出血性大肠埃希菌O157∶H7的方法。方法根据肠出血性大肠埃希菌O157∶H7抗原特异性基因rfbEO157设计引物和荧光探针,建立real-time PCR检测体系,并检测其特异性及敏感性;用O157免疫磁珠特异性捕获标本菌液中的O157∶H7大肠埃希菌,结合real-time PCR对磁珠捕获菌细胞的DNA进行检测分析。结果 Real-time PCR检测结果显示,O157∶H7大肠埃希菌可产生荧光信号,而其他常见致病菌均未见明显荧光信号;采用IMS-real-time PCR方法检测标本,菌液含菌量为3.3×102CFU/mL时即可被检出,检测全过程需时约4h。结论 IMS-real-time PCR检测方法具有特异性强、敏感度高、快速易操作等特点,该检测方法能提高O157∶H7大肠埃希菌的检出率和准确性,可用于标本的快速诊断、疾病监测和暴发疫情的病原学调查。 展开更多

关键词 免疫磁珠分离法 荧光定量PCR 大肠埃希菌O157∶H7

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幽门螺杆菌不同运送条件及培养基分离效果的比较 被引量：6

6

作者 王琼 杨杰 +4 位作者 潘科 黄亚琴 陈峥宏 王菲 綦廷娜 《世界华人消化杂志》 CAS 2016年第8期1241-1246,共6页

目的:探索幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)的适宜运送条件及培养基.方法:将H.pylori实验菌株新鲜菌液分别定量加入含1 g/m L蔗糖和50%(m L/m L)小牛血清布氏肉汤以及脱脂乳运送液,分别置不同温度及气体环境6 h后接种于哥伦比... 目的:探索幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)的适宜运送条件及培养基.方法:将H.pylori实验菌株新鲜菌液分别定量加入含1 g/m L蔗糖和50%(m L/m L)小牛血清布氏肉汤以及脱脂乳运送液,分别置不同温度及气体环境6 h后接种于哥伦比亚血琼脂培养基微需氧培养5 d,计数并比较培养基上菌落数;将20例临床标本分别接种于MH血琼脂培养基和哥伦比亚血琼脂培养基37℃微需氧培养5 d,观察培养基上H.pylori生长情况,比较分离效果.结果:小牛血清运送液中活菌数多于脱脂乳中活菌数;微需氧和烛缸运送下活菌数多于置空气下和有石蜡油覆盖的运送液中活菌数;置微需氧37℃(或26℃)的小牛血清运送液中活菌数多于6℃下的活菌数(P<0.05);置微需氧和烛缸的运送液中活菌数无明显差异(P>0.05).20例胃镜确诊为胃炎、胃溃疡且组织尿素酶阳性的临床标本经MH血琼脂培养阳性率(75%)高于哥伦比亚血琼脂阳性率(45%)(X^2=4.401,P<0.05).结论:胃黏膜标本可置于小牛血清运送液于微需氧条件(或烛缸)下运至实验室培养;从临床胃黏膜标本中进行H.pylori的分离培养时,MH血琼脂培养基分离效果优于哥伦比亚血琼脂培养基. 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 培养基 微需氧 运送

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质子泵抑制剂与抗生素对幽门螺杆菌的联合抗菌作用 被引量：6

7

作者 毕红燕 陈峥宏 +3 位作者 綦廷娜 王菲 毕雅坤 王琼 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2014年第23期3547-3551,共5页

目的:了解抗生素和质子泵抑制剂联合应用对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)的联合抗菌效应.方法:采用界值法检测H.pylori临床菌株对克拉霉素、左氧氟沙星和阿莫西林的敏感性,选取H.pylori克拉霉素敏感菌株(n=5)和耐药菌株(n=5... 目的:了解抗生素和质子泵抑制剂联合应用对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)的联合抗菌效应.方法:采用界值法检测H.pylori临床菌株对克拉霉素、左氧氟沙星和阿莫西林的敏感性,选取H.pylori克拉霉素敏感菌株(n=5)和耐药菌株(n=5)、左氧氟沙星敏感菌株(n=5)和耐药菌株(n=5)或阿莫西林敏感菌株(n=5)和耐药菌株(n=5),采用棋盘格法检测3种抗生素分别与两种质子泵抑制剂(奥美拉唑、雷贝拉唑)联合应用对H.pylori的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)的影响,通过公式计算FIC指数(fractional inhibitory concentration index,FICI),判断药物联合抗菌效应;比较奥美拉唑和雷贝拉唑分别与3种抗生素联合应用时的FICI,采用两小样本t检验的方法进行统计学处理.结果:克拉霉素、左氧氟沙星、阿莫西林分别与奥美拉唑、雷贝拉唑配伍对敏感菌株和耐药菌株的联合抗菌作用FICI均<0.75;雷贝拉唑和左氧氟沙星对敏感菌株的联合抗菌作用FICI比奥美拉唑和左氧氟沙星的联合抗菌试验的FICI小;雷贝拉唑和阿莫西林对耐药菌株的联合抗菌试验FICI比奥美拉唑和阿莫西林的联合抗菌试验的FICI小.结论:(1)奥美拉唑或雷贝拉唑分别与克拉霉素、左氧氟沙星、阿莫西林联合应用均有协同抗菌作用;(2)雷贝拉唑和左氧氟沙星对敏感株的联合抗菌作用比奥美拉唑和左氧氟沙星的联合抗菌作用强;(3)雷贝拉唑和阿莫西林对耐药菌株的联合抗菌作用比奥美拉唑和阿莫西林的联合抗菌作用强. 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 奥美拉唑 雷贝拉唑 抗生素

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贵阳地区儿童感染幽门螺杆菌的分离培养及耐药性检测 被引量：4

8

作者 王菲 朱莉 +3 位作者 熊妍 綦廷娜 蒋勇 陈峥宏 《世界华人消化杂志》 CAS 2015年第8期1369-1373,共5页

目的:了解贵阳地区儿童感染幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)临床分离株对常用抗H.pylori抗生素甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林等的体外敏感性,以指导临床用药根除H.pylori感染.方法:收集2011-10/2014-06贵阳市儿童医院行胃镜检... 目的:了解贵阳地区儿童感染幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)临床分离株对常用抗H.pylori抗生素甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林等的体外敏感性,以指导临床用药根除H.pylori感染.方法:收集2011-10/2014-06贵阳市儿童医院行胃镜检查的患儿胃黏膜标本进行H.pylori分离培养,对分离鉴定后的菌株采用界值法进行甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林、左氧氟沙星的敏感性试验.结果:从434例患儿胃黏膜中培养出H.pylori63株(14.5%),63例H.pylori菌株中3株为敏感菌株,60株为耐药菌株,其对甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林、左氧氟沙星的耐药率分别为57.1%、85.7%、38.1%、90.5%.二重、三重、四重耐药率分别为90.5%(57/63)、57.1%(36/63)、38.1%(24/63).结论:贵阳地区儿童感染H.pylori对阿莫西林敏感性高于对其他常用药物的敏感性;对左氧氟沙星和克拉霉素的耐药率较高,并且多重耐药率较高. 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 药敏试验 耐药性

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黔南州280例胃镜检查患者幽门螺杆菌感染及抗生素耐药情况 被引量：1

9

作者 潘科 张人弘 +5 位作者 郑娟 张丹丹 陈峥宏 王菲 魏刚 綦廷娜 《贵阳医学院学报》 CAS 2015年第9期930-934,共5页

目的:了解黔南州280例胃镜检查患者幽门螺杆菌(H.pylori)感染状况及其对抗生素耐药情况。方法:采集黔南州280例行胃镜检查的上消化道疾病患者胃黏膜组织,采用快速尿素酶法(RUT)诊断H.pylori感染,比较不同民族、性别、疾病类型患者的H.py... 目的:了解黔南州280例胃镜检查患者幽门螺杆菌(H.pylori)感染状况及其对抗生素耐药情况。方法:采集黔南州280例行胃镜检查的上消化道疾病患者胃黏膜组织,采用快速尿素酶法(RUT)诊断H.pylori感染,比较不同民族、性别、疾病类型患者的H.pylori感染率,对RUT试验阳性的胃黏膜组织进行H.pylori微需氧分离培养,以改良琼脂稀释法(界值法)检测各H.pylori临床菌株对阿莫西林、左氧氟沙星、甲硝唑、克拉霉素的敏感性,比较不同民族来源的临床分离株对抗菌药物的耐药率。结果:280例上消化道疾病患者H.pylori感染率为86.1%(241/281),不同民族和不同性别上消化道疾病患者H.Pylori感染率差异无统计学意义(P>0.05);消化性溃疡患者H.Pylori感染率(95.4%)>慢性胃炎患者H.Pylori感染率(84.1%)>胃癌患者H.Pylori感染率(76.9%),P<0.05;经分离培养获得74株H.pylori,对阿莫西林、左氧氟沙星、甲硝唑、克拉霉素的耐药率分别为5.4%(4/74)、20.3%(15/74)、86.5%(64/74)、29.7%(22/74);分离自汉族和少数民族患者的H.Pylori对4种抗菌药物的耐药率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:上消化道疾病患者H.pylori感染率较高,H.Pylori对甲硝唑和克拉霉素耐药率较高,对阿莫西林和左氧氟沙星耐药率较低。 展开更多

关键词 螺杆菌 幽门 感染 抗生素类 耐药性

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弓形虫SAG1-GRA1复合基因真核表达重组质粒的构建与表达 被引量：2

10

作者 綦廷娜 石畅 +2 位作者 汪政勇 宗永丽 李金福 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第3期286-291,共6页

目的:构建弓形虫SAG1-GRA1复合基因真核表达重组质粒,并观察其在小鼠胚胎成纤维细胞系NIH3T3细胞中的表达。方法:采用聚合酶链反应(PCR)法分别扩增弓形虫SAG1和GRA1基因片段,导入质粒载体pc DNA3.1(+),构建真核表达重组质粒pc DNA3.1(+)... 目的:构建弓形虫SAG1-GRA1复合基因真核表达重组质粒,并观察其在小鼠胚胎成纤维细胞系NIH3T3细胞中的表达。方法:采用聚合酶链反应(PCR)法分别扩增弓形虫SAG1和GRA1基因片段,导入质粒载体pc DNA3.1(+),构建真核表达重组质粒pc DNA3.1(+)-SAG1和pc DNA3.1(+)-GRA1,继而构建重组质粒pc DNA3.1(+)-SAG1-GRA1;设pc DNA3.1(+)-SAG1-GRA1为实验组、pc DNA3.1(+)为对照组分别转染NIH3T3细胞,采用免疫荧光染色法鉴定其在NIH3T3细胞中的表达。结果:限制性内切酶双酶切及DNA测序分析结果显示,插入pc DNA3.1(+)的片段分别为1008 bp、570 bp和1578 bp,与预期的SAG1、GRA1和SAG1-GRA1复合基因分子大小相当、序列一致;免疫荧光染色法结果显示,转染重组质粒pc DNA3.1(+)-SAG1-GRA1的NIH3T3细胞内观察到较强的绿色荧光,而转染pc DNA3.1(+)的NIH3T3细胞内未见绿色荧光。结论:成功构建了弓形虫SAG1-GRA1复合基因真核表达重组质粒pc DNA3.1(+)-SAG1-GRA1,且该重组质粒携带的SAG1-GRA1复合基因在NIH3T3细胞中获得表达。 展开更多

关键词 弓形虫属 SAG1基因 GRA1基因 基因重组 重组质粒 体外表达

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高效严谨型大肠杆菌Targetron基因打靶系统的构建 被引量：5

11

作者 陈相好 谷俊莹 +8 位作者 崔古贞 刘芳 王彩霞 陈峥宏 洪伟 蔡梦迪 张峥嵘 綦廷娜 廖永慧 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期213-220,共8页

构建高效严谨型大肠杆菌Targetron 基因打靶系统。将来源于pET28a 的T7-lac 操纵子与来源于pSY6 的II 型内含子组装构建大肠杆菌IPTG 诱导型Targetron 质粒系统。以lacZ 基因为例,选择lacZ-635s 和lacZ-1063a 两个位点为靶位点,利用构建... 构建高效严谨型大肠杆菌Targetron 基因打靶系统。将来源于pET28a 的T7-lac 操纵子与来源于pSY6 的II 型内含子组装构建大肠杆菌IPTG 诱导型Targetron 质粒系统。以lacZ 基因为例,选择lacZ-635s 和lacZ-1063a 两个位点为靶位点,利用构建的IPTG 诱导型Targetron 系统进行基因打靶,通过分析诱导前和诱导后II 型内含子在靶位点的插入效率,验证大肠杆菌IPTG 诱导型Targetron 系统严谨性和打靶效率。最后,通过优化诱导剂浓度及诱导时间,建立高效严谨的诱导型大肠杆菌Targetron 基因打靶系统。在没有IPTG 诱导时,II 型内含子在两个位点均不能插入,打靶效率均为0;当加入0.5 mmol/L IPTG 诱导45 min 时,其在lacZ-635s 位点的打靶效率提高到90.8±5.5%,在lacZ-1063a 位点的打靶效率提高到92.6±2.4%。成功建立高效严谨型大肠杆菌Targetron 基因打靶系统,旨为II 型内含子的机理研究及应用奠定基础。 展开更多

关键词 Targetron II 型内含子 诱导系统 大肠杆菌 LACZ

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内含子编码蛋白Mg2+结合位点功能分析及验证 被引量：3

12

作者 崔古贞 陈相好 +3 位作者 洪伟 张峥嵘 綦廷娜 陈峥宏 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期165-172,共8页

旨为筛选并构建II型内含子编码蛋白Mg2+结合位点突变体,验证该位点突变对II型内含子“归巢”效率的影响。利用生物信息学技术筛选关键位点,利用定点突变技术构建突变体,利用Targetron及蓝白斑计数法验证其“归巢”效率。结果显示,筛选到... 旨为筛选并构建II型内含子编码蛋白Mg2+结合位点突变体,验证该位点突变对II型内含子“归巢”效率的影响。利用生物信息学技术筛选关键位点,利用定点突变技术构建突变体,利用Targetron及蓝白斑计数法验证其“归巢”效率。结果显示,筛选到D308和D309两个位点是II型内含子编码蛋白Mg2+结合的核心催化位点,并成功构建该位点的三种突变体,包括两个单点突变体(D308A和D309A)和一个双点突变体(D308A/D309A),大肠杆菌体内实验结果表明,三种突变体均完全失活了II型内含子的“归巢”功能。证实了II型内含子编码蛋白Mg2+结合位点是其发挥功能的核心催化位点。 展开更多

关键词 Ⅱ型内含子 内含子编码蛋白 Mg2+结合位点 Targetron 反转录结构域

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幽门螺杆菌菌落PCR的优化 被引量：1

13

作者 刘芳 王彩霞 +4 位作者 綦廷娜 吴芳草 文学琴 陈峥宏 崔古贞 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第7期762-766,共5页

目的:通过对常规菌落PCR方法进行优化,探索提高幽门螺杆菌(H.pylori)菌落PCR扩增效率的方法。方法:提取H.pylori 26695基因组DNA作为阳性对照组,以未经任何处理的H.pylori 26695菌落作为阴性对照组,经煮沸裂解速冻法获得的H.pylori 2669... 目的:通过对常规菌落PCR方法进行优化,探索提高幽门螺杆菌(H.pylori)菌落PCR扩增效率的方法。方法:提取H.pylori 26695基因组DNA作为阳性对照组,以未经任何处理的H.pylori 26695菌落作为阴性对照组,经煮沸裂解速冻法获得的H.pylori 26695菌落作为试验组,随机选择8个不同的基因(16S rDNA、cagA-U、cagA-D、iceA、ureA、hetA、ropN、Hp0792)作为菌落PCR的候选基因进行菌落PCR验证,最后以1%琼脂糖凝胶进行电泳检测。结果:在选择的目标基因中,阴性对照组未扩增出目的条带,试验组与阳性对照组均扩增出目的相应大小的条带;与常规菌落PCR比较,煮沸速冻裂解法能显著提高H.pylori菌落PCR的扩增效率。结论:煮沸速冻裂解法可用于H.pylori的高通量筛选鉴定和分子诊断。 展开更多

关键词 螺杆菌 幽门 高通量筛选 分子诊断技术 煮沸速冻裂解法 菌落PCR

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修文贵长猕猴桃与新西兰金果猕猴桃营养成分的比较 被引量：5

14

作者 张峥嵘 綦廷娜 +2 位作者 靡孟衡 贾高旭 陈峥宏 《农技服务》 2020年第4期35-37,共3页

为消费者了解贵州修文贵长猕猴桃与进口新西兰金果猕猴桃2种猕猴桃的营养差异提供参考,以贵州修文贵长猕猴桃与进口新西兰金果猕猴桃为研究对象,检测了2种猕猴桃食用果肉部分的主要营养指标。结果表明:新西兰金果猕猴桃果肉可食用部位... 为消费者了解贵州修文贵长猕猴桃与进口新西兰金果猕猴桃2种猕猴桃的营养差异提供参考,以贵州修文贵长猕猴桃与进口新西兰金果猕猴桃为研究对象,检测了2种猕猴桃食用果肉部分的主要营养指标。结果表明:新西兰金果猕猴桃果肉可食用部位中维生素C(108.43 mg/100g)和没食子酸(4.436μg/g)含量高于贵长猕猴桃维生素C(72.38 mg/100g)和没食子酸(4.029μg/g)含量,贵长猕猴桃的可溶性膳食纤维、不可溶性膳食纤维、β-胡萝卜素、绿原酸、儿茶素和表儿茶素含量均高于金果猕猴桃。 展开更多

关键词 猕猴桃 贵长猕猴桃 金果猕猴桃 营养成分 修文

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琼脂糖凝胶电泳与核酸印迹杂交法检测细菌毒力基因PCR产物的灵敏度比较研究 被引量：3

15

作者 綦廷娜 刘志广 +2 位作者 王涛 李培京 叶长芸 《疾病监测》 CAS 2011年第8期651-653,共3页

目的探讨核酸印迹杂交法在检测细菌毒力基因方面的应用价值。方法分别以10倍连续稀释的O157∶H7肠出血性大肠埃希菌和血清2型猪链球菌染色体提取物为模板,与志贺毒素2基因(stx2)和荚膜多糖2J基因(cps2J)特异性引物进行聚合酶链式反应(P... 目的探讨核酸印迹杂交法在检测细菌毒力基因方面的应用价值。方法分别以10倍连续稀释的O157∶H7肠出血性大肠埃希菌和血清2型猪链球菌染色体提取物为模板,与志贺毒素2基因(stx2)和荚膜多糖2J基因(cps2J)特异性引物进行聚合酶链式反应(PCR)。用1%琼脂糖凝胶电泳及核酸印迹杂交法检测PCR产物,比较两种方法的最低检测限。结果 1%琼脂糖凝胶电泳对EDL933菌株stx2基因PCR产物的最低检测限为6.7×102cfu(56.87 pg)/PCR体系,对SC84菌株cps2J基因PCR产物的最低检测限为4.3×102 cfu(12.65 pg)/PCR体系;核酸印迹杂交法对EDL933菌株stx2基因PCR产物的最低检测限为6.7×10-1 cfu(56.87 fg)/PCR体系,对SC84菌株cps2J基因PCR产物的最低检测限为4.3×10-1 cfu(12.65 fg)/PCR体系。结论用核酸印迹杂交法检测肠出血性大肠埃希菌stx2基因和猪链球菌cps2J基因PCR产物的灵敏度均比普通琼脂糖凝胶电泳检测法高了1000倍。 展开更多

关键词 核酸印迹杂交 琼脂糖凝胶电泳 肠出血性大肠埃希菌O157∶H7 猪链球菌2型 stx2基因 cps2J基因 检测灵敏度

原文传递

肺炎链球菌L型对人淋巴细胞因子分泌刺激作用 被引量：3

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作者 綦廷娜 王和 陈峥宏 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期610-611,共2页

目的观察细胞壁缺陷肺炎链球菌刺激人淋巴细胞分泌白细胞介素-1β(IL-1β)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的作用。方法用青霉素诱导肺炎链球菌形成L型,分离稳定L型纯培养物。将热灭活的肺炎链球菌的细菌型及稳定L型菌液分别与人淋巴细胞混合... 目的观察细胞壁缺陷肺炎链球菌刺激人淋巴细胞分泌白细胞介素-1β(IL-1β)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的作用。方法用青霉素诱导肺炎链球菌形成L型,分离稳定L型纯培养物。将热灭活的肺炎链球菌的细菌型及稳定L型菌液分别与人淋巴细胞混合,体外37℃培养24 h,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养物上清中IL-1β和TNF-α含量。结果L型肺炎链球菌处理的人淋巴细胞培养物上清中IL-1β含量为(29.303±2.812)～(69.894±2.358)pg/mL、TNF-α含量为(38.467±2.208)～(74.329±2.283)pg/mL,明显低于其亲代细菌型肺炎链球菌处理的人淋巴细胞(P<0.05),且与菌液浓度呈相关性(r分别为0.969和0.960)。结论肺炎链球菌L型仍然具有刺激人淋巴细胞分泌IL-1β和TNF-α的免疫原性,但较其亲代细菌型的免疫原性降低。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 稳定L型 人淋巴细胞 白细胞介素-1β(IL-1β) 肿瘤坏死因子-α(TNF-α)

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细胞壁缺陷肺炎链球菌青霉素结合蛋白2b基因片段的检测 被引量：1

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作者 綦廷娜 王和 陈峥宏 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期552-553,共2页

目的了解细胞壁缺陷肺炎链球菌青霉素结合蛋白2b基因(pbp2b)片段的检测及其意义。方法用青霉素诱导肺炎链球菌形成L型,分离稳定L型纯培养物。提取L型染色体DNA,用肺炎链球菌pbp2b序列特异性引物进行聚合酶链式反应(PCR)并检测扩增产物... 目的了解细胞壁缺陷肺炎链球菌青霉素结合蛋白2b基因(pbp2b)片段的检测及其意义。方法用青霉素诱导肺炎链球菌形成L型,分离稳定L型纯培养物。提取L型染色体DNA,用肺炎链球菌pbp2b序列特异性引物进行聚合酶链式反应(PCR)并检测扩增产物的核苷酸序列,测得序列与GenBank公布的肺炎链球菌R6菌株种特异性pbp2b(628 bp)序列比对。结果肺炎链球菌稳定L型PCR扩增产物的核苷酸序列与肺炎链球菌R6菌株种特异性pbp2b序列具有99.1%的同源性。结论细胞壁缺陷肺炎链球菌保留了与肺炎链球菌R6菌株高度同源的种特异性pbp2b基因片段,检测该基因片段可用于肺炎链球菌稳定L型的鉴定。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 细菌L型 pbp2b

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表面活性蛋白D对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬幽门螺杆菌的影响

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作者 綦廷娜 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第17期2057-2059,共3页

目的探讨表面活性蛋白D(SP-D)对吞噬细胞吞噬幽门螺杆菌(HP)的影响。方法从SD大鼠肺泡灌洗液中提取并纯化SP-D。将试验组HP11637、HPSS1菌液分别用SP-D预处理30min,加入小鼠腹腔巨噬细胞培养液。将细胞与细菌混合物置于细胞培养箱中37... 目的探讨表面活性蛋白D(SP-D)对吞噬细胞吞噬幽门螺杆菌(HP)的影响。方法从SD大鼠肺泡灌洗液中提取并纯化SP-D。将试验组HP11637、HPSS1菌液分别用SP-D预处理30min,加入小鼠腹腔巨噬细胞培养液。将细胞与细菌混合物置于细胞培养箱中37℃分别孵育0、30、60min后,用头孢唑啉钠杀灭细胞外的细菌。裂解巨噬细胞后,取适量细胞裂解稀释液接种于微需氧环境中孵育3d后,计数菌落形成单位。同时设置未经SP-D预处理的HP11637、HPSS1加入小鼠腹腔巨噬细胞培养液中作为对照组。结果小鼠腹腔巨噬细胞与HP11637共同孵育后0、30、60min,试验组细胞内HP11637数量为(123±8)、(411±38)、(343±44)个/100个巨噬细胞,显著多于对照组的(104±14)、(179±10)、(163±10)个/100个巨噬细胞(P<0.01)。小鼠腹腔巨噬细胞与HPSS1共同孵育后0、30、60min,两组细胞内HPSS1数量相仿(P>0.05)。结论 SP-D具有显著增强小鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬HP11637的功能,而对小鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬HPSS1无显著影响。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 表面活性蛋白D 巨噬细胞

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大肠埃希菌O157:H7分离株MLVA分子分型 被引量：6

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作者 王涛 綦廷娜 +4 位作者 刘凯 赵爱兰 白雪梅 叶长芸 熊衍文 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期972-974,共3页

目的了解国内大肠埃希菌O157:H7菌株的分子流行特征。方法采用多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)方法对1999-2002年江苏、河南、安徽、山东、云南等地的大肠埃希菌O157:H7分离株135株进行分子分型,选取7个可变数目串联重复序列(VNTR... 目的了解国内大肠埃希菌O157:H7菌株的分子流行特征。方法采用多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)方法对1999-2002年江苏、河南、安徽、山东、云南等地的大肠埃希菌O157:H7分离株135株进行分子分型,选取7个可变数目串联重复序列(VNTR)位点,应用PCR技术及毛细管电泳方法,检测分离株DNA多态性,使用BioNumerics软件进行聚类分析。结果 135株大肠埃希菌O157:H7可分为3个群(A群、B群、C群)38个MLVA型别,其中A群占20.7%(28/135)、B群占23.7%(32/135)、C群占55.6%(75/135);MLVA型别存在一定地域性,同一暴发来源的菌株具有相同MLVA型别。结论大肠埃希菌O157:H7国内分离株存在丰富的基因多态性;MLVA方法具有较高分子分型能力,可以在溯源和流行病学调查中发挥重要作用。 展开更多

关键词 大肠埃希菌O157:H7 多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA) 分子分型

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碳青霉烯类抗生素对铜绿假单胞菌抗菌活性的检测 被引量：3

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作者 易旭 查筑红 綦廷娜 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期56-59,共4页

目的探讨铜绿假单胞菌(PA)临床分离株对碳青霉烯类抗生素耐药性与其产AmpCβ内酰胺酶(AmpC酶)的关系。方法收集并鉴定PA临床分离株,采用头孢西丁敏感试验对产AmpC酶的菌株进行初筛。运用Kirby-Bauer纸片扩散法、固体培养基连续稀释法检... 目的探讨铜绿假单胞菌(PA)临床分离株对碳青霉烯类抗生素耐药性与其产AmpCβ内酰胺酶(AmpC酶)的关系。方法收集并鉴定PA临床分离株,采用头孢西丁敏感试验对产AmpC酶的菌株进行初筛。运用Kirby-Bauer纸片扩散法、固体培养基连续稀释法检测头孢菌素类与碳青霉烯类抗生素对PA筛选菌株的抗菌活性。采用三维确认试验检测碳青霉烯类抗生素耐药菌株产生AmpC酶的情况。结果PA筛选菌株对头孢呋肟钠(CXM)、头孢噻甲羧肟(CAZ)、头孢噻肟钠(CTX)、头孢哌酮钠(CFP)及盐酸头孢吡肟(FEP)的耐药率分别为100%、36.3%、63.6%、54.5%、22.7%;对亚胺培南(IPM)、帕尼培南(ETP)、美罗培南(MEM)的耐药率分别为40.9%、45.0%、18.1%,部分菌株对所有试验用药均耐药。IPM、ETP、MEM对PA筛选菌株的最低抑菌浓度(MIC)均≥19μg/ml,且各试药的最低杀菌浓度(MBC)值与MIC值相差较大,约36.0%菌株的MBC是MIC的16～32倍。约22.6%菌株检测出产生AmpC酶。结论我市医院近半年来收集的PA对第4代头孢菌素类抗生素FEP具有较高的敏感性;对临床用碳青霉烯类抗生素MEM的敏感性明显高于IPM与ETP,但有较大比例的耐药菌株出现;部分菌株耐药性形成可能与其产生AmpC酶有关系。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 碳青霉烯类抗生素

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