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应用宏基因组二代测序诊断异基因造血干细胞移植后早期侵袭性真菌病患者的临床分析
1
作者 姬玉涵 潘明月 +6 位作者 来晓瑜 刘丽珍 施继敏 赵妍敏 余建 杨露欣 罗依 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期311-318,共8页
目的 分析异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation, allo-HSCT)后早期应用宏基因组二代测序(metagenomic next-generation sequencing, mNGS)诊断侵袭性真菌病(invasive fungal disease, IFD)患者的... 目的 分析异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation, allo-HSCT)后早期应用宏基因组二代测序(metagenomic next-generation sequencing, mNGS)诊断侵袭性真菌病(invasive fungal disease, IFD)患者的临床转归。方法 回顾性分析2021年7月至2022年10月在浙江大学医学院附属第一医院接受allo-HSCT患者,移植后早期(100 d内)出现以下情况之一:(1)经验性抗细菌治疗72 h及以上持续发热,且血培养阴性患者;(2)既往抗感染有效后再次出现不明原因高热;(3)下呼吸道症状合并肺部CT病灶,经验性抗感染治疗无效。送检移植后外周血或支气管镜肺泡灌洗液行mNGS检测,并分析患者的总体生存率(overall survival, OS)和非复发死亡率(non-relapse mortality, NRM)。结果 纳入60例患者,送检外周血标本47例,肺泡灌洗液标本13例。mNGS检测病原学阴性组19例,非真菌阳性组30例,真菌阳性组11例;真菌阳性组中曲霉菌3例、毛霉菌5例、热带念珠菌2例、阿萨丝孢酵母菌1例。11例真菌阳性患者经调整抗真菌治疗8例获完全缓解。60例患者1年OS和1年NRM分别为70.0%(95%CI:64.1%~75.9%)和20.0%(95%CI:11.9%~32.5%)。真菌阳性组1年OS为54.5%(95%CI:49.5%~69.5%),1年NRM为36.4%(95%CI:15.5%~70.3%);阴性组、真菌阳性组和非真菌阳性组1年OS (P=0.487)和1年NRM (P=0.358)差异无统计学意义。真菌阳性组与非真菌阳性组OS(P=0.238)和NRM (P=0.154)上的差异亦无统计学意义。结论 mNGS可快速诊断allo-HSCT后早期IFD,有利于及时有效治疗,改善患者的预后。 展开更多
关键词 宏基因组二代测序 异基因造血干细胞移植 侵袭性真菌病
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异基因造血干细胞移植后远期二次肿瘤
2
作者 吴林南 罗依 《临床内科杂志》 CAS 2024年第9期585-588,共4页
随着异基因造血干细胞移植技术的不断优化和提高,越来越多的患者获得长期无病生存。因而对于移植后长期生存患者的远期管理显得尤为重要。然而患者移植后10~30年内死亡率仍高于普通人群,其中常见死因之一是远期二次肿瘤(SMN)。移植患者... 随着异基因造血干细胞移植技术的不断优化和提高,越来越多的患者获得长期无病生存。因而对于移植后长期生存患者的远期管理显得尤为重要。然而患者移植后10~30年内死亡率仍高于普通人群,其中常见死因之一是远期二次肿瘤(SMN)。移植患者实体瘤的发生明显早于一般人群,且发病风险通常是年龄和性别匹配的普通人群的2~4倍。危险因素包括患者相关因素(性别、移植年龄、遗传易感性以及致癌病毒的感染病史)、原发病相关因素(疾病类型、移植前放化疗的暴露史)和移植相关因素(含全身照射的预处理方案、慢性移植物抗宿主病(cGVHD),长期免疫抑制治疗)等。对于移植后长期生存者,肿瘤筛查应该比一般人更早进行且维持终身。在患者、临床医生及多学科专家的共同协作下,关注导致远期SMN的危险因素,及时采取措施避免主动或被动吸烟、减少皮肤在紫外线下长期暴露等早期综合干预措施,并根据受者因素和具体暴露因素针对性的制定筛查重点,将是改善移植后长期生存者整体预后的主要策略。 展开更多
关键词 异基因造血干细胞移植 晚期合并症 二次肿瘤 继发性实体瘤
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异基因造血干细胞移植后长期生存和晚期并发症 被引量：2
3
作者 罗依 吴林南 《浙江医学》 CAS 2023年第9期897-902,共6页
异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)是目前可能治愈血液系统恶性肿瘤的重要手段,越来越多得到治愈的血液系统恶性肿瘤患者实现长期生存。allo-HSCT长期生存者移植后10年总体生存率为80%~92%,20年总体生存率为78%~83%。随着生存期延长,移... 异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)是目前可能治愈血液系统恶性肿瘤的重要手段,越来越多得到治愈的血液系统恶性肿瘤患者实现长期生存。allo-HSCT长期生存者移植后10年总体生存率为80%~92%,20年总体生存率为78%~83%。随着生存期延长,移植患者相对死亡率呈下降趋势,但移植后10~30年内仍高于相匹配的普通人群。allo-HSCT受者常见的晚期并发症包括心血管疾病、非感染性肺部并发症、肝肾功能障碍、内分泌及代谢系统疾病、静脉血栓栓塞、骨和关节并发症、不孕不育及继发第二肿瘤等,不同并发症的发生率受到移植前、移植期间和移植后多种相关因素的影响,一些晚期并发症直接导致非复发死亡率增加,而另一些并发症会损害生活质量,因此对移植患者进行终身随访很有必要。本文对血液系统恶性肿瘤患者行allo-HSCT后的长期生存现况、晚期并发症和生活质量等作一述评,为移植患者提供有效的长期随访建议,采取适当策略监测危险因素、早期发现并发症并实施干预,以期改善临床总体预后。 展开更多
关键词 异基因造血干细胞移植 长期生存 晚期并发症 生活质量
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岭南地区亚健康人群睡眠状况与中医体质类型的相关性研究
4
作者 陈柏书 龙金玲 +5 位作者 赵琳贝妮 陈燕 张清松 罗依 陈淑惠 李迎真 《广州中医药大学学报》 CAS 2024年第7期1676-1681,共6页
【目的】探究岭南地区亚健康人群睡眠状况与中医体质类型的相关性。【方法】选取2022年5月~2023年5月于深圳市宝安区中医院治未病中心就诊的688例在深圳市居住5年以上,无严重心血管疾病,经亚健康人群评定量表评定为亚健康的人群为研究对... 【目的】探究岭南地区亚健康人群睡眠状况与中医体质类型的相关性。【方法】选取2022年5月~2023年5月于深圳市宝安区中医院治未病中心就诊的688例在深圳市居住5年以上,无严重心血管疾病,经亚健康人群评定量表评定为亚健康的人群为研究对象,采用匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)量表、中医体质评定量表对其进行问卷调查,并将其睡眠状况与中医体质类型进行多元线性回归分析。【结果】(1)调查问卷发放回收情况:共发放688份问卷,其中,失访19份,回收669份,剔除无效问卷29份,最终共纳入有效问卷640份。(2)不同睡眠状况人群的PSQI量表评分情况:根据PSQI量表得分情况将人群分为睡眠优组(PSQI总分<8分)350例和睡眠差组(PSQI总分≥8分)290例,组间比较,睡眠优组的入睡时间、睡眠时间、睡眠障碍得分以及总分均明显低于睡眠差组(P<0.05或P<0.01)。(3)不同睡眠状况人群的中医体质类别分布情况:睡眠优者多表现为平和质(86.86%),睡眠差者多表现为偏颇体质(79.64%)。睡眠差人群中,偏颇体质排前3位的分别是湿热质(15.52%)、痰湿质(13.79%)以及气郁质(13.10%)。(4)多元线性回归分析结果显示,入睡时间与痰湿质、气郁质呈正相关(P<0.01),与平和质呈负相关(P<0.05);睡眠效率与湿热质、特禀质呈正相关(P<0.05或P<0.01),与平和质呈负相关(P<0.05);睡眠障碍与气郁质、阴虚质呈正相关(P<0.01);催眠药物与阴虚质呈正相关(P<0.01);日间功能障碍与痰湿质呈正相关(P<0.05)。【结论】岭南地区亚健康人群睡眠状况与其中医体质类型具有一定相关性,湿热质、痰湿质、气郁质、阴虚质、平和质、特禀质是影响睡眠状况主要的6种中医体质类别;结合中医体质辨识指导亚健康人群通过改善其体质从而达到未病先防的目的是很有意义的。 展开更多
关键词 岭南地区 亚健康 中医体质 湿热质 痰湿质 气郁质 睡眠 未病先防
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免疫靶向治疗结合异基因造血干细胞移植治疗成人Ph阴性急性B淋巴细胞白血病
5
作者 杨露欣 罗依 《临床内科杂志》 CAS 2023年第10期659-664,共6页
虽然成人费城染色体(Ph)阴性急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)化疗缓解率较高,但缓解后易复发,长期生存率仍有待提高。嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)免疫疗法迅速发展,极大提高了B-ALL缓解及预后。新兴的免疫靶向药物(单克隆抗体及抗体药物偶联物... 虽然成人费城染色体(Ph)阴性急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)化疗缓解率较高,但缓解后易复发,长期生存率仍有待提高。嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)免疫疗法迅速发展,极大提高了B-ALL缓解及预后。新兴的免疫靶向药物(单克隆抗体及抗体药物偶联物)为复发难治性患者带来新的希望。异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)是ALL最重要的治疗手段。如何将不同治疗有效组合进一步改善成人Ph阴性B-ALL生存是重要课题。本综述总结了目前免疫靶向治疗联合allo-HSCT治疗成人Ph阴性B-ALL的最新进展。 展开更多
关键词 Ph阴性急性B淋巴细胞白血病 细胞免疫治疗 靶向药物 异基因造血干细胞移植
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低温冻存对成人骨髓间质干细胞生物学特性的影响 被引量：12
6
作者 罗依 余勤 +3 位作者 丁伟 余健 梁彬 黄河 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期384-387,共4页
目的:研究低温冻存对骨髓间质干细胞(MSCs)其生物学特性的影响,探讨MSCs理想的保存方法。方法:体外分离培养、扩增正常成人骨髓MSCs,在5%DMSO-30%FBS-DMEM冻存保护剂条件下,分别采用二步法和程控降温冻存方法低温保存3月,以台盼蓝拒染... 目的:研究低温冻存对骨髓间质干细胞(MSCs)其生物学特性的影响,探讨MSCs理想的保存方法。方法:体外分离培养、扩增正常成人骨髓MSCs,在5%DMSO-30%FBS-DMEM冻存保护剂条件下,分别采用二步法和程控降温冻存方法低温保存3月,以台盼蓝拒染回收率(TBR)、MSCs生长曲线、MSCs表面抗原表达以及其多向分化能力检测,比较两种不同的冻存方法对MSCs生物学特性的影响。结果:程控降温冻存后MSCs活力优于二步法[TBR(87·67±2·52)%vs(79·00±3·61)%,P<0·05]。多因素方差分析显示MSCs代数和冻存方法均是影响冻存后MSCs增殖的重要因素。两种冻存方法中P8代细胞的增殖能力明显劣于P1代细胞(P<0·01)或P4代细胞(P<0·01)。MSCs程控冻存后增殖能力与冻存前无差异(P<0·05),优于二步法冻存后的增殖能力(P<0·05)。程控冻存后MSCs稳定表达CD29、CD44、CD166(与冻存前比较,P>0·05)。而二步法冻存后细胞CD29表达下降(与冻存前比较,P<0·05)。两种冻存方法对MSCs向成骨细胞、脂肪细胞和神经元细胞分化没有显著影响,与冻存前比较,P>0·05。结论:采用5%DMSO-30%FBS-DMEM冻存保护液和程控降温的冻存体系,可较完整保持MSCs生物学特性,是深低温保存MSCs的理想方案。 展开更多
关键词 间质干细胞 低温冻存 生物学特性
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格列卫联合清髓性异基因造血干细胞移植治疗慢性髓性白血病 被引量：3
7
作者 罗依 潘杰 +7 位作者 施继敏 谭亚敏 韩晓雁 来晓瑜 朱晓黎 蔡真 林茂芳 黄河 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2007年第4期343-347,共5页
目的：探讨格列卫联合清髓性异基因造血干细胞移植在治疗慢性髓性白血病（CML）中的作用。方法：9例CML患者（5例CP，2例为AP，2例为BP），男性，在清髓性异基因造血干细胞移植前、后口服格列卫（300600mg／d）治疗，移植预处理方案为Bu... 目的：探讨格列卫联合清髓性异基因造血干细胞移植在治疗慢性髓性白血病（CML）中的作用。方法：9例CML患者（5例CP，2例为AP，2例为BP），男性，在清髓性异基因造血干细胞移植前、后口服格列卫（300600mg／d）治疗，移植预处理方案为BuCy2：Bu16mg／kg，口服（6例）或12.8mg／kg，静脉滴注（3例）加CTX120mg／kg。供受者HLA配型完全相合，其中亲缘移植7例，无关供者移植2例。以霉酚酸酯联合环孢菌素A和短程MTX预防aGVHD。移植物有核细胞数5．3（3.7～8．7）×10^8／kg，CD34^＋细胞数4．8（2．8～8．5）×10^6／kg，粒一巨噬细胞集落形成的单位数2．8（1．9～5.3）×10^5／kg。结果：9例CML患者在移植前，经格列卫治疗后获完全血液学缓解（HCR）。移植后中性粒细胞〉0．5×10^9／L中位时间12（8～26）天，血小板计数〉20×10^9／L中位时间为20（8～25）天。移植后并发Ⅰ／Ⅱ度aGVHD3例，cGVHD4例，无早期死亡。移植后30天9例患者均获完全细胞遗传学缓解（CCR），STR检测供髓完全植入。中位随访31（7～34）月，1例治疗前CML急变患者移植后4月因复发死亡，其余病患均获完全分子学缓解（CMR），总体无病生存率88．9％。结论：清髓性异基因造血干细胞移植前、后联合格列卫治疗CML，是一种安全有效的治疗方法，值得临床进一步推广。 展开更多
关键词 白血病 髓性 慢性/治疗 造血干细胞移植 清髓性 异基因造血干细胞移植 格列卫
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双次自体外周血干细胞移植联合序贯大剂量CHOEP方案治疗中高度恶性淋巴瘤 被引量：2
8
作者 罗依 黄河 +4 位作者 蔡真 李黎 谢万灼 孟筱坚 林茂芳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第4期628-630,共3页
为了评价CHOEP方案对外周血干细胞的动员效果、序贯化疗联合双次移植的远期疗效和患者的耐受性,对5例复发、难治中高度恶性淋巴瘤在双次自体外周血干细胞(PBSC)移植联合序贯大剂量CHOEP方案的临床结果进行了回顾性分析。5例恶性淋巴瘤... 为了评价CHOEP方案对外周血干细胞的动员效果、序贯化疗联合双次移植的远期疗效和患者的耐受性,对5例复发、难治中高度恶性淋巴瘤在双次自体外周血干细胞(PBSC)移植联合序贯大剂量CHOEP方案的临床结果进行了回顾性分析。5例恶性淋巴瘤患者的动员方案为CHOEP联合G-CSF5μg/(kg.d),两次移植预处理均为大剂量CHOEP,第二次移植与第一次移植的中位间隔时间为9(5~31)周,两次移植回输单个核细胞数(MNC)分别为3.05(1.91~4.14)×108/?和3.55(2.23~6.0)×108/?;CD34+细胞分别为4.11(2.59~4.94)×106/?和5.70(2.77^-10.6)×106/?;CFU-GM分别为2.97(2.01~4.54)×105/?和2.44(1.78~2.9)×105/?。研究结果表明,回输外周血造血干细胞后,所有患者的造血均快速重建,中性粒细胞(ANC)≥0.5×109/L时间为10(8~12)天和10.5(9~12)天,血小板≥20×109/L分别为11(10~14)天和12.5(10~15)天。双次移植后5例次并发Ⅲ-Ⅳ度口腔粘膜炎,无肝肾功能损害,无移植相关死亡。随访时间46(9~88)月,4例存活,其中3例无病生存,总体生存率80%,无病生存率60%。结论:双次自体外周血干细胞移植联合序贯大剂量CHOEP化疗方案是治疗复发、难治中高度恶性淋巴瘤的有效手段,动员方法简便安全,预处理方案耐受性好,值得临床进一步研究探索。 展开更多
关键词 双次移植 序贯化疗 CHOEP化疗方案 恶性淋巴瘤
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成人骨髓间充质干细胞体外培养扩增及其生物学特性研究 被引量：8
9
作者 罗依 梁彬 余勤 《浙江医学》 CAS 2003年第8期468-469,473,共3页
目的 建立成人骨髓间充质干细胞 (MSCs)体外培养和扩增的条件 ,探讨其生物学特性。方法 取正常成人骨髓用含10%胎牛血清的LG -DMEM培养液培养、扩增后 ,进行透射电镜观察 ,流式细胞仪行细胞表面抗原及细胞周期分析检测。结果 培养扩增... 目的 建立成人骨髓间充质干细胞 (MSCs)体外培养和扩增的条件 ,探讨其生物学特性。方法 取正常成人骨髓用含10%胎牛血清的LG -DMEM培养液培养、扩增后 ,进行透射电镜观察 ,流式细胞仪行细胞表面抗原及细胞周期分析检测。结果 培养扩增获取的成人骨髓MSCs形态均一 ,增殖能力强 ,细胞扩增至第5代细胞数达 (2～3)×108。该类细胞CD29、CD44、CD166表达阳性 ,CD14、CD34、CD45、HLA -DR表达阴性。细胞周期以G0/G1 期为主。细胞胞浆具丰富粗面内质网。结论 所建立的分离和培养方法可获取骨髓粘附细胞中一组独特的细胞群 ,具有MSCs的生物学特性。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 体外培养 扩增 生物学特性 研究
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骨髓增生异常综合征的造血干细胞移植治疗 被引量：4
10
作者 罗依 吴一波 黄河 《浙江医学》 CAS 2019年第10期975-980,共6页
骨髓增生异常综合征(MDS)是一类异质性极强的疾病,需要危险分层指导下的个体化治疗,异基因造血干细胞移植(HSCT)是目前可能治愈该疾病的唯一方法。移植相关并发症指数(HCT-CI)<3、体能状态好,危险分层评估为较高危组,细胞遗传学高危... 骨髓增生异常综合征(MDS)是一类异质性极强的疾病,需要危险分层指导下的个体化治疗,异基因造血干细胞移植(HSCT)是目前可能治愈该疾病的唯一方法。移植相关并发症指数(HCT-CI)<3、体能状态好,危险分层评估为较高危组,细胞遗传学高危和/或输血依赖较低危组MDS患者具有HSCT的适应证。HSCT的时机、HSCT前的桥接治疗、HSCT的方式、HSCT后复发防治等都是MDS患者HSCT治疗的研究热点,未来需推动建立分子生物学指导下的MDS个体化治疗策略。 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征 骨髓增生异常综合征修订国际预后积分系统 造血干细胞移植
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非亲缘异基因骨髓移植后并发急性移植物抗宿主病的诊治 被引量：1
11
作者 罗依 黄河 +5 位作者 林茂芳 孟海涛 黄健 麦文渊 钱文斌 胡晓蓉 《浙江医学》 CAS 2000年第7期421-422,共2页
关键词 非亲缘异基因骨髓移植 急性移植物抗宿主病
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异基因造血干细胞移植后复发的防治进展 被引量：2
12
作者 罗依 袁晓琳 《浙江医学》 CAS 2021年第4期345-351,363,共8页
异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)是目前可能治愈血液系统恶性肿瘤的重要手段,但复发仍是患者移植后死亡的首要原因。移植后复发的防治具有重要的临床意义,是提高移植疗效、改善患者生存的关键,主要包括移植预处理方案和供者的选择、移... 异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)是目前可能治愈血液系统恶性肿瘤的重要手段,但复发仍是患者移植后死亡的首要原因。移植后复发的防治具有重要的临床意义,是提高移植疗效、改善患者生存的关键,主要包括移植预处理方案和供者的选择、移植后预防或抢先干预及复发后治疗等方面。本文对血液系统恶性肿瘤allo-HSCT后复发的防治进展作一述评。 展开更多
关键词 异基因造血干细胞移植 血液 恶性肿瘤 复发
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非去髓性化疗异基因造血干细胞移植的临床应用 被引量：1
13
作者 罗依 《国外医学（输血及血液学分册）》 2000年第6期277-279,共3页
由于大剂量放化疗预处理方案异基因造血干细胞移植(Allo-SCT)毒性大,治疗相关并发症发生率和死亡率高。近几年临床研究采用相对低毒性、小剂量、非去髓性化疗预处理方案治疗年龄偏大,合并其他脏器功能不全的血液系统恶性肿瘤患者,目的... 由于大剂量放化疗预处理方案异基因造血干细胞移植(Allo-SCT)毒性大,治疗相关并发症发生率和死亡率高。近几年临床研究采用相对低毒性、小剂量、非去髓性化疗预处理方案治疗年龄偏大,合并其他脏器功能不全的血液系统恶性肿瘤患者,目的是提供足够免疫抑制达到异基因造血干细胞植入,由此产生免疫性移植物抗白血病(GVL)效应,清除恶性病变,并通过移植后供者淋巴细胞输注(DLI)争取持续缓解。本文主要综述非去髓性Allo-SCT在血液系统恶性疾病中的临床应用。 展开更多
关键词 非去髓性化疗 异基因造血干细胞移植 临床应用
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一个可能的与人端粒结合因子相互作用蛋白Tara的分离和克隆 被引量：5
14
作者 蓝建平 罗依 +7 位作者 朱园园 孙洁 来晓瑜 李静远 余建 施继敏 林茂芳 黄河 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2004年第6期486-490,共5页
目的 :分离和鉴定端粒结合因子 (TRF1)免疫共沉淀蛋白复合物并克隆其基因。方法 :以 TRF1抗体应用免疫共沉淀方法 ,从细胞蛋白抽提物中分离 TRF1蛋白复合物 ,并作蛋白质肽指纹谱鉴定 ;应用温度梯度 PCR,从人 c DNA文库中扩增目的基因 ,... 目的 :分离和鉴定端粒结合因子 (TRF1)免疫共沉淀蛋白复合物并克隆其基因。方法 :以 TRF1抗体应用免疫共沉淀方法 ,从细胞蛋白抽提物中分离 TRF1蛋白复合物 ,并作蛋白质肽指纹谱鉴定 ;应用温度梯度 PCR,从人 c DNA文库中扩增目的基因 ,并构建 p EGFP- C2真核表达载体 ;核苷酸测序和 Western blot验证目的基因序列和表达载体。结果 :从 TRF1免疫沉淀复合物中分离出了 Tara蛋白 ;人 c DNA文库中 PCR扩增所得产物为 1.7kb,与 Tara基因 CDS序列同源性为 99.9% ;GFP/ Tara融合蛋白约 10 0 k D,Tara在间期 He La细胞中弥散表达于胞浆 ,而有丝分裂细胞则定位于整个细胞。结论 :Tara是一个可能的 TRF1相互作用蛋白 ,其作用机制需进一步实验研究。 展开更多
关键词 端粒 蛋白质类/分析 端粒结合因子 基因 Tara 免疫共沉淀 质谱
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人骨髓间充质干细胞端粒酶活性的表达 被引量：4
15
作者 李静远 来晓瑜 +7 位作者 罗依 孙洁 余建 蓝建平 朱园园 谭亚敏 林茂芳 黄河 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2004年第6期481-485,共5页
目的 :探讨人骨髓间充质干细胞 (human mesenchymal stem cells,h MSCs)端粒酶活性的表达以及深低温冻存和向脂肪细胞诱导分化对基因表达的影响。方法 :联合应用密度梯度离心法和贴壁培养法分离人 h MSCs,传代培养。深低温冻存 h MSCs... 目的 :探讨人骨髓间充质干细胞 (human mesenchymal stem cells,h MSCs)端粒酶活性的表达以及深低温冻存和向脂肪细胞诱导分化对基因表达的影响。方法 :联合应用密度梯度离心法和贴壁培养法分离人 h MSCs,传代培养。深低温冻存 h MSCs或诱导其向脂肪细胞分化 ,以 TRAP(Telomerase repeatamplification protocol assay)法分别检测新鲜的不同传代次数的 h MSCs、冻存复苏后培养的 h MSCs和诱导分化为脂肪细胞的 h MSCs的端粒酶活性。结果 :用 TRAP法检测 h MSCs(n=19)端粒酶活性 (RTA)是 (1.4 6± 0 .6 7) % ,分化成脂肪的 h MSCs(n=3)的RTA为 (11.80± 2 .5 2 ) % (P<0 .0 0 1) ;不同传代次数 MSCs端粒酶活性的比较中 ,早期 h MSCs(n=10 )的 RTA为(1.4 6± 0 .83) % ,晚期 h MSCs(n=9)的 RTA为 (1.4 6± 0 .4 7) % (P=0 .99) ;在低温冻存对 h MSCs端粒酶活性的影响中 ,新鲜的 h MSCs(n=13)的 RTA为 (1.4 1± 0 .4 4) % ,低温冻存的 h MSCs(n=6 )的 RTA为 (1.5 7± 1.0 7) %(P=0 .6 4)。结论 :h MSCs的端粒酶呈阴性 ,传代培养和低温冻存不影响基因表达水平。向脂肪细胞分化后 h MSCs端粒酶活性表达水平增高 ,其确切机制尚需进一步研究。 展开更多
关键词 骨髓细胞 干细胞 间充质干细胞 端粒酶 低温冻存 脂肪细胞 分化
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马利兰和环磷酰胺预处理方案的非亲缘异基因骨髓移植治疗骨髓增生异常综合征 被引量：4
16
作者 施继敏 黄河 +9 位作者 蔡真 罗依 叶秀锦 张洁 李黎 何静松 谢万灼 郑伟燕 孟筱坚 林茂芳 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2006年第2期122-126,共5页
目的:评估以马利兰和环磷酰胺(Bu-CY2)为预处理方案的非亲缘异基因骨髓移植治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的临床疗效。方法:对6例MDS患者进行非亲缘异基因骨髓移植术,以Bu-CY2为预处理方案,Bu 4 m g.k-g 1.d-1,-7 d^-4 d,CY 60 m g.k-g 1... 目的:评估以马利兰和环磷酰胺(Bu-CY2)为预处理方案的非亲缘异基因骨髓移植治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的临床疗效。方法:对6例MDS患者进行非亲缘异基因骨髓移植术,以Bu-CY2为预处理方案,Bu 4 m g.k-g 1.d-1,-7 d^-4 d,CY 60 m g.k-g 1.-d 1,-3 d^-2 d。输入单个核细胞数(MNC)为3.38×108/kg(2.4×108/kg^4.6×108/kg),CD 34+细胞数5.81×106/kg(1.2×106/kg^8.5×106/kg),粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)数2.88×105/kg(1.61×105/kg^4.56×105/kg)。以霉酚酸酯加环孢素A(C sA)和短程氨甲蝶呤(MTX)预防移植物抗宿主病,前列腺素E1脂质微球预防肝静脉阻塞病。结果:6例患者中性粒细胞≥0.5×109/L的中位时间为18 d(13~21 d),血小板≥20×109/L的中位时间为21 d(13~24 d)。经DNA短串联重复序列多态性分析和染色体检查,均为供者骨髓植活。早期死亡率为0,移植后随访时间为27个月(6~60个月)。目前实际无病生存6例,缓解期实际生存率100%。结论:以Bu-CY2为预处理方案的非亲缘异基因骨髓移植是治疗MDS的有效方法。 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征/治疗 骨髓移植/方法 环磷酰胺/投药和剂量 白消安/投药和剂量 非亲缘供者
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中国大陆城市建成环境与共享单车配置的关系 被引量：9
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作者 曹小曙 罗依 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期77-85,共9页
共享单车是一种绿色健康灵活的交通出行方式,给城市居民提供便捷出行服务的同时也造成了资源浪费和配置错位等问题。当前该领域的研究主要侧重于建成环境与共享单车的互动关系,集中对某些城市和区域的出行需求与共享单车相关性进行分析... 共享单车是一种绿色健康灵活的交通出行方式,给城市居民提供便捷出行服务的同时也造成了资源浪费和配置错位等问题。当前该领域的研究主要侧重于建成环境与共享单车的互动关系,集中对某些城市和区域的出行需求与共享单车相关性进行分析,对国家层面建成环境与共享单车配置的研究相对较少。以中国大陆275个城市为研究样本,利用多元回归分析对中国大陆城市建成环境与共享单车配置之间的关系进行了测算,在此基础上利用地理加权回归(GWR)模型分析了建成环境各变量对共享单车配置影响的空间异质性。结果显示:①建成环境与共享单车配置之间存在相关性,零售业服务人数、道路密度对共享单车配置数量产生正向影响,收入水平与城市化区域面积对共享单车配置数量产生负向影响。②建成环境对共享单车配置数量的影响存在显著的空间异质性。从东部到西部,零售业服务人数、道路密度对共享单车配置的正向影响与收入水平的负向影响皆在增强;城市化区域面积对共享单车配置的影响在大部分城市区域呈负向作用,整体呈现以中部地区为核心向外负向作用逐渐减弱的圈层结构。 展开更多
关键词 建成环境 共享单车配置 地理加权回归
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人骨髓间质干细胞中的端粒调控机制 被引量：2
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作者 李静远 蓝建平 +7 位作者 赵妍敏 来晓瑜 罗依 孙洁 余建 朱园园 曾芬芳 黄河 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1737-1742,共6页
目的:研究人骨髓来源间充质干细胞(MSCs)端粒长度的调控机制。方法:以贴壁培养法从人骨髓中分离MSCs并用MSCs及造血干细胞相关表面抗体作表型鉴定,用Southern blotting检测MSCs的端粒长度;应用免疫荧光染色技术检测端粒重复序列结合因子... 目的:研究人骨髓来源间充质干细胞(MSCs)端粒长度的调控机制。方法:以贴壁培养法从人骨髓中分离MSCs并用MSCs及造血干细胞相关表面抗体作表型鉴定,用Southern blotting检测MSCs的端粒长度;应用免疫荧光染色技术检测端粒重复序列结合因子1(TRF1)和早幼粒细胞白血病蛋白小体(PML)的定位;以端粒重复序列扩增法(TRAP)和/或Western blotting法检测传代及分化成脂肪细胞的MSCs和经同步化处理被阻断在S期的MSCs的端粒酶表达。结果:与端粒酶阴性ALT细胞株WI-38-2RA细胞相比,MSCs的端粒长度较短并且端粒长度变异度不大;端粒调控相关蛋白TRF1和PML在MSCs中的定位则与端粒酶阳性细胞HeLa细胞相同,两者呈非共定位,而在端粒酶阴性WI-38-2RA细胞中两者呈共定位状态。MSCs中不存在有染色体外端粒重复序列DNA(ECTR DNA)。TRAP法检测传代培养的MSCs端粒酶呈阴性表达,但分化成脂肪的MSCs端粒酶呈阳性表达。Western blotting检测同步化处理前MSCs端粒酶呈微弱表达,经同步化处理被阻断在S期时,MSCs的端粒酶表达明显增高,并且与S期的细胞比例呈正相关。结论:MSCs中不存在ALT相关的早幼粒细胞白血病蛋白小体(APBs)、染色体外端粒重复序列DNA(ECTR DNA)和端粒长度较长、端粒长度变异度大等ALT机制相关分子特征;非同步化在S期处理的MSCs,端粒酶呈微弱表达,但诱导向脂肪细胞分化或处在S期时,MSCs的端粒酶表达明显增高,并且与S期的细胞比例呈正相关。本研究提示MSCs是通过端粒酶机制而不是端粒延长旁路途径(ALT)机制调控其端粒末端。 展开更多
关键词 间质干细胞 端粒 末端转移酶 细胞周期
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非亲缘异基因骨髓移植治疗慢性髓细胞性白血病 被引量：2
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作者 黄河 林茂芳 +15 位作者 孟海涛 钱文斌 罗依 黄健 胡晓蓉 蔡真 郦瑜 陈水云 陈巧芳 周思文 林修基 佟红艳 张洁 谢万灼 李政道 严力行 《浙江医学》 CAS 1999年第4期193-195,共3页
为探讨非亲缘关系异基因骨髓移植在治疗血液系统恶性疾病中的临床应用，采用台湾慈济骨髓损赠资料中心捐赠的非亲缘异基因供体骨髓，患者以ＢＵ－ＣＹ预处理方案化疗，骁悉联合环孢菌素Ａ（ＣｓＡ）加短程ＭＴＸ预防移植物抗宿主病。
关键词 异基因 骨髓移植 慢性 髓细胞性 白血病
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异基因冻存外周血干细胞加骨髓移植治疗白血病 被引量：1
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作者 黄河 林茂芳 +5 位作者 孟海涛 钱文斌 罗依 胡晓蓉 郦瑜 陈水云 《实用肿瘤杂志》 CAS 北大核心 2000年第4期275-276,共2页
目的 探讨异基因外周血干细胞加骨髓移植的临床疗效与急性移植物抗宿主病ａＧＶＨＤ）发生情况。方法 对ＡＭＬＬ患者以其妹冻存外周血干细胞和骨髓联合移植，并观察疗效和并发症发生情况。结果 患者造血恢复良好，患者移植后为（＋... 目的 探讨异基因外周血干细胞加骨髓移植的临床疗效与急性移植物抗宿主病ａＧＶＨＤ）发生情况。方法 对ＡＭＬＬ患者以其妹冻存外周血干细胞和骨髓联合移植，并观察疗效和并发症发生情况。结果 患者造血恢复良好，患者移植后为（＋）１９天中性粒细胞数〉０．５×１０＾９／Ｌ，＋３０天Ｐｌｔ数〉５０×１０＾９／Ｌ。无ａＧＶＨＤ情况。结论 冻存外周血干细胞加骨髓移植是白血病有效的治疗方法，值得进一步探索。 展开更多
关键词 白血病 异基因冻存 外周血干细胞骨髓联合移植
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