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大鼠皮肤的冷冻干燥保存 被引量：6
1
作者 杨维 姜曼 +7 位作者 耿文鑫 严兴荣 都慧聪 魏菁 刘亮岐 赵洁 李立文 陈富林 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第41期8080-8084,共5页
背景:细胞干燥保存的研究报道较多,组织器官是否适用于干燥保存,尚缺乏证据。目的:用海藻糖作为干燥保护剂,优化海藻糖载入大鼠皮肤的条件,探索皮肤干燥保存的可行性。设计、时间及地点:观察性实验,于2007-11/2008-11在西北大学生命科... 背景:细胞干燥保存的研究报道较多,组织器官是否适用于干燥保存,尚缺乏证据。目的:用海藻糖作为干燥保护剂,优化海藻糖载入大鼠皮肤的条件,探索皮肤干燥保存的可行性。设计、时间及地点:观察性实验,于2007-11/2008-11在西北大学生命科学学院组织工程实验室完成。材料:体质量150g左右成年SD大鼠。海藻糖由Sigma公司提供。方法:通过控制海藻糖浓度(50,300,500,800,1000mmol/L)、负载时间(0.5,4,7,9h)和温度[4℃、4～37℃(相转变)和37℃],优化海藻糖导入大鼠皮肤的条件。将负载海藻糖的皮肤置于含100g/L二甲基亚砜的DMEM冷冻液中孵育,程序冷冻仪以1℃/min的速率降温至-80℃后移入冷冻干燥机中进行冻干。将冻干皮肤水化复苏后分别用双醋酸羧基荧光素(CFDA)、四甲基偶氮唑盐(MTT)检测皮肤活性,并以新鲜和甲醛固定皮肤的吸光度值作为阳性和阴性对照。以苏木精-伊红染色和观察皮肤组织结构,并进行自体移植。主要观察指标:海藻糖在不同加载浓度、孵育温度和时间载入大鼠皮肤的情况。冻干皮肤水化后的形态学、组织学变化及其自体移植后存活情况。结果:海藻糖浓度小于800mmol/L,皮肤的海藻糖载入量随海藻糖浓度的升高而明显增(P<0.05),浓度大于800mmol/L,海藻糖载入量差异不显著。孵育温度为37℃组和相转变组皮肤海藻糖载入量明显高于4℃组(P<0.05),相转变组与37℃组差异无统计学意义。皮肤孵育4,7,9h的海藻糖载入量明显高于孵育0.5h的载入量(P<0.05),孵育时间为4,7,9h之间的海藻糖载入量差异不显著,但孵育7h后皮肤的海藻糖载入量不再增加。实验以海藻糖浓度为800mmol/L,孵育温度为37℃,孵育时间为7h为优化的负载条件处理大鼠皮肤。冻干皮肤玻璃化状态良好,呈半透明状。水化后能够恢复到新鲜皮肤的大小和色泽,组织结构和细胞形态与新鲜皮肤组织无差别。冷冻干燥皮肤的活性明显高于甲醛固定的大鼠皮肤(P<0.05)。冻干保存的皮肤水化后移植回自体大鼠,可存活长达13d。结论:海藻糖可作为干燥保护剂进行大鼠皮肤冷冻干燥保存,海藻糖浓度为800mmol/L,孵育温度为37℃,孵育时间为7h是海藻糖载入大鼠皮肤的最佳条件。 展开更多
关键词 皮肤 海藻糖 冷冻干燥 保存 自体移植
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东方蝾螈肢体异位再生的研究 被引量：1
2
作者 耿文鑫 严兴荣 +9 位作者 陈煜娴 都慧聪 魏 菁 赵洁 都慧聪 魏菁 赵洁 李立文 陈富林 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第37期7301-7304,共4页
背景:蝾螈具有很强的肢体再生能力,研究蝾螈肢体再生对于实现患者肢体再生有着重要的指导作用。目的:验证东方蝾螈的肢体再生能力,并通过诱导东方蝾螈异位肢体生成,建立东方蝾螈为模式动物的再生医学研究技术平台。设计、时间及地点:观... 背景:蝾螈具有很强的肢体再生能力,研究蝾螈肢体再生对于实现患者肢体再生有着重要的指导作用。目的:验证东方蝾螈的肢体再生能力,并通过诱导东方蝾螈异位肢体生成,建立东方蝾螈为模式动物的再生医学研究技术平台。设计、时间及地点:观察性实验,于2008-07/2009-01在西北大学教育部西部资源与现代生物技术重点实验室完成。材料:东方蝾螈,购买于西安宠物市场。方法:①将成体东方蝾螈右前肢上臂处切断,连续10周观察记录其断肢再生情况,并分别取材进行组织学观察。②通过东方蝾螈前肢运动神经异位转移和对侧皮肤移植,观察肢体异位再生情况。主要观察指标:①观察东方蝾螈肢体再生能力和组织学过程。②观察东方蝾螈的异位肢体诱导情况,并进行组织学观察。结果:①东方蝾螈断肢后10周左右肢体成功再生。肢体再生过程中,肢芽中出现大量皮肤成纤维细胞。②通过神经异位转移和对侧皮肤移植,可以诱导出肢芽。约13周可以成功在异位诱导出新的肢体。结论:①东方蝾螈具有完全肢体再生能力,皮肤成纤维细胞是参与肢体再生的重要细胞来源。②神经异位转移和对侧皮肤移植可以在异位诱导出新的肢体。 展开更多
关键词 肢体 再生 东方蝾螈 神经
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具有皮肤美容应用潜能的透皮型弹性蛋白样多肽的制备 被引量：3
3
作者 白转丽 都慧聪 +2 位作者 耿文鑫 李立文 舒茂国 《中国美容医学》 CAS 2017年第10期64-67,共4页
目的:设计、制备透皮型弹性蛋白样多肽(elastin-like polypeptide,ELP)融合蛋白,探索其作为皮肤美容制剂的潜能。方法:设计具有透皮特性的蛋白转导功能域(protein transduction domain,PTD)和ELP融合蛋白PTD-ELP,联合密码子优化、重叠延... 目的:设计、制备透皮型弹性蛋白样多肽(elastin-like polypeptide,ELP)融合蛋白,探索其作为皮肤美容制剂的潜能。方法:设计具有透皮特性的蛋白转导功能域(protein transduction domain,PTD)和ELP融合蛋白PTD-ELP,联合密码子优化、重叠延伸PCR和定向递归连接等技术构建其原核表达载体。在此基础上将该载体转化至大肠杆菌中,进行异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-Thiogalactoside,IPTG)诱导表达并对目标蛋白的亚细胞定位和可溶性进行分析。结果:成功构建了携带PTD-ELP读码框架的原核表达载体,携带该载体的大肠杆菌在IPTG诱导5h时PTD-ELP融合蛋白的表达量达到峰值,约占菌体总蛋白的23.6%;亚细胞定位分析表明PTD-ELP融合蛋白主要以包涵体形式在胞内表达。结论:成功设计并构建了能够表达PTD-ELP融合蛋白的原核表达载体并在大肠杆菌中实现了其高效表达,为深入探讨PTD介导的ELP透皮给药在逆转皮肤衰老和预防、治疗光老化中的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 弹性蛋白样多肽 蛋白转导功能域 原核表达 重组蛋白
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中小学教师绩效评价存在的问题及对策 被引量：1
4
作者 耿文鑫 谢念湘 《黑龙江教师发展学院学报》 2022年第5期30-33,共4页
教师绩效评价为教师绩效工资分配提供分配信息,不仅关系到教师待遇,而且关系到教师专业发展和学校的教学质量。实施教师绩效工资改革20多年的时间里,绩效评价存在着评价指标缺陷和评价体系公平性等问题。只有将评价指标中的学业成绩标... 教师绩效评价为教师绩效工资分配提供分配信息,不仅关系到教师待遇,而且关系到教师专业发展和学校的教学质量。实施教师绩效工资改革20多年的时间里,绩效评价存在着评价指标缺陷和评价体系公平性等问题。只有将评价指标中的学业成绩标准分量化,在终结性评价基础上注重过程评价,才能使得评价指标更加科学、准确,增强学校管理的自主管理权才能提升绩效管理效能。绩效评价终究是以教师发展和成长为目标,只有评价以人为本才能起到激励教师工作热情的作用,实现促进教师职业发展的目标。 展开更多
关键词 教师绩效评价 问题 实施策略
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“两自一包”改革实施的问题与策略
5
作者 耿文鑫 谢念湘 《教育科学论坛》 2022年第20期3-7,共5页
为“激发办学活力”,成都武侯区创新“两自一包”制度对公办中小学和幼儿园进行改革。“教师自聘”“学校自主管理”和“经费包干”突破了以往人事制度、财政制度和层级管理制度的束缚。改革试点学校为增加办学生机活力,实施岗位绩效制... 为“激发办学活力”,成都武侯区创新“两自一包”制度对公办中小学和幼儿园进行改革。“教师自聘”“学校自主管理”和“经费包干”突破了以往人事制度、财政制度和层级管理制度的束缚。改革试点学校为增加办学生机活力,实施岗位绩效制度、将学校事务打包成项目、依法治校扁平化管理等措施。梳理相关文献发现,制度试行过程中存在教师间不良竞争、教师缺乏管理意识以及制度落实上的问题。“两自一包”还需要教育行政部门给予保障和支持以解决学校自主选聘过程中教师薪资设置的限制,同时应尽快完善绩效预警机制,防止项目申请的不良竞争和岗位绩效的过劳现象出现。学校还需完善民主竞聘制度,促进教师参与管理的积极性,加强反馈机制以改进扁平化管理中的用人问题。 展开更多
关键词 两自一包 教师自聘 经费包干 扁平化管理
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齐齐哈尔市:发展绿色食品的思考
6
作者 耿文鑫 张永海 《统计与咨询》 2001年第5期20-,共1页
关键词 齐齐哈尔市 质量 企业 黑龙江省 企业管理 绿色食品生产
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