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基于^(1)H-NMR的冠心病血瘀证、痰浊证的代谢组学研究 被引量：12
1
作者 易敏 戴幸平 +3 位作者 李秋霞 赵玉航 聂闪闪 王东生 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期591-600,共10页
目的:冠心病以其极高的发病率严重威胁着人类的健康,对冠心病药物治疗及作用靶点的研究仍非常迫切。本研究旨在运用核磁共振氢谱(^(1)H nuclear magnetic resonance spectroscopy,^(1)H-NMR)代谢组学技术建立冠心病血瘀证及痰浊证的指... 目的:冠心病以其极高的发病率严重威胁着人类的健康,对冠心病药物治疗及作用靶点的研究仍非常迫切。本研究旨在运用核磁共振氢谱(^(1)H nuclear magnetic resonance spectroscopy,^(1)H-NMR)代谢组学技术建立冠心病血瘀证及痰浊证的指纹代谢图谱,寻找这2种证型的血浆标志性代谢物,并揭示血府逐瘀汤治疗冠心病血瘀证的机制。方法:采集符合纳入标准的69例冠心病血瘀证患者、60例冠心病痰浊证患者及40例健康对照受试者的清晨空腹血浆,基于^(1)H-NMR构建冠心病血瘀证及痰浊证的^(1)H-NMR指纹代谢图谱。使用多元统计分析方法主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交化偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)寻找冠心病血瘀证及冠心病痰浊证的标志性代谢物。随机抽取冠心病血瘀证患者30例,予血府逐瘀汤治疗30 d,对治疗前后的清晨空腹血浆进行^(1)H-NMR检测,分析冠心病血瘀证患者服药前后标志性代谢物的变化。结果:冠心病血瘀证组与对照组存在显著性差异的代谢物有以下15种:3-羟基丁酸、乳酸、丙氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、丙酮酸、磷脂酰胆碱、甘油磷脂酰胆碱、甘氨酸、葡萄糖、苯丙氨酸、柠檬酸、酪氨酸、甲酸盐、极低密度脂蛋白,除葡萄糖、3-羟基丁酸、极低密度脂蛋白水平升高外,其他12种代谢物水平均下降。冠心病痰浊证组与对照组存在显著性差异的代谢物有以下16种:缬氨酸、乳酸、丙氨酸、N-乙酰-β-葡萄糖苷酶、谷氨酸、谷氨酰胺、丙酮酸、肌酸、胆碱、甘氨酸、葡萄糖、苯丙氨酸、柠檬酸、组氨酸、酪氨酸、甲酸盐,除葡萄糖和胆碱2种水平升高外,其他14种代谢物水平均下降。冠心病血瘀证患者服用血府逐瘀汤治疗后胆碱、磷脂/甘油磷脂类、肌酸、脂质、柠檬酸水平升高,乳酸水平下降。结论:^(1)H-NMR结合多元统计学方法能够建立诊断冠心病血瘀证和痰浊证证型的有效模型,找到证型相关标志性代谢物;血府逐瘀汤可通过调节脂质代谢、能量代谢治疗冠心病血瘀证。 展开更多
关键词 冠心病血瘀证 冠心病痰浊证 代谢组学 核磁共振氢谱 血府逐瘀汤
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基于UPLC-PDA测定加味四君子汤的6种主要抗癌成分含量 被引量：1
2
作者 赵玉航 聂闪闪 王东生 《中医药导报》 2019年第15期72-74,84,共4页
目的:利用超高效液相色谱-二极管阵列检测法(UPLC-PDA)同时检测加味四君子汤水煎液中6种主要抗癌成分的含量。方法:采用WatersBEH(R)C18色谱柱(100mm×2.1mm,1.7μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,柱温为25℃,流速为0.2m... 目的:利用超高效液相色谱-二极管阵列检测法(UPLC-PDA)同时检测加味四君子汤水煎液中6种主要抗癌成分的含量。方法:采用WatersBEH(R)C18色谱柱(100mm×2.1mm,1.7μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,柱温为25℃,流速为0.2mL/min。结果:各对照品在线性范围内线性关系良好,r≥0.999,6;加样回收率为98.86%~101.86%,RSD均≤3.45%。加味四君子汤水煎液中人参皂苷Re、白术内酯Ⅲ、茯苓酸、甘草酸、齐墩果酸和小檗碱的含量分别为70.15~71.32、12.67~14.03、17.77~34.34、98.72~103.89、31.37~38.73、13.00~13.20mg/L。结论:该方法操作简便,各峰的分离度好,结果准确,重复性高,能够高效检测加味四君子汤中6种抗癌成分含量,可作为加味四君子汤的质控方法,为进一步研究提供参考。 展开更多
关键词 超高效液相色谱 加味四君子汤 人参皂苷RE 白术内酯Ⅲ 茯苓酸 甘草酸 齐墩果酸 小檗碱
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加味四君子汤含药血清对胃癌细胞SGC-7901凋亡相关因子表达的影响 被引量：20
3
作者 聂闪闪 李洵 +1 位作者 赵玉航 王东生 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期25-30,共6页
目的:研究加味四君子汤含药血清对胃癌细胞SGC-7901凋亡相关因子表达的影响,进一步探讨其具体抗肿瘤作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为加味四君子汤低、中、高剂量组(0.213,0.426,0.853 g·kg^(-1)),空白组,每组10只,空白组给予等... 目的:研究加味四君子汤含药血清对胃癌细胞SGC-7901凋亡相关因子表达的影响,进一步探讨其具体抗肿瘤作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为加味四君子汤低、中、高剂量组(0.213,0.426,0.853 g·kg^(-1)),空白组,每组10只,空白组给予等体积的生理盐水灌胃,各组连续灌胃10 d,末次给药1.5 h后,水合氯醛腹腔麻醉,心脏采血,分离血清,56℃灭菌,0.22μm过滤,制备加味四君子汤高、中、低剂量组含药血清,各剂量组含药血清孵育胃癌细胞SGC-7901,运用流式细胞仪检测细胞早期和晚期凋亡情况,运用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)技术检测肿瘤抑制基因p53,c-核蛋白类基因(c-Myc),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),凋亡相关基因B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)mRNA的表达,运用细胞免疫荧光技术检测p53,c-Myc,Caspase-3,Bcl-2蛋白的相对表达量情况。结果:与空白组比较,加味四君子汤含药血清高剂量组细胞凋亡比率显著升高(P<0.01),且可使胃癌细胞SGC-7901早期+晚期凋亡率达到22.58%(P<0.01)。Real-time PCR结果显示加味四君子汤中剂量组能显著促进Caspase-3 mRNA表达(P<0.01),加味四君子汤高剂量组能显著上调p53及c-Myc mRNA表达量(P<0.01),加味四君子汤高剂量组显著抑制Bcl-2 mRNA表达(P<0.01)。免疫荧光结果显示加味加味四君子汤高剂量组能使c-Myc,Caspase-3,p53蛋白表达水平显著升高(P<0.01),而Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:加味四君子汤含药血清能抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,促进凋亡相关分子p53,c-Myc,Caspase-3的表达,发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 加味四君子汤含药血清 胃癌细胞SGC-7901 细胞凋亡 肿瘤抑制基因P53 c-核蛋白类基因(c-Myc) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3) 凋亡相关基因B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)
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葛根交泰丸对2型糖尿病大鼠的治疗作用 被引量：3
4
作者 李秋霞 吴凝 +2 位作者 聂闪闪 姜序吉 王东生 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期133-138,共6页
目的：观察不同剂量葛根交泰丸对2型糖尿病（T2DM）大鼠的治疗作用。方法：采用高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素的方法建立T2DM大鼠模型，随机分为正常组（N组），模型组（MOD组），二甲双胍组（MET组），葛根交泰丸高（... 目的：观察不同剂量葛根交泰丸对2型糖尿病（T2DM）大鼠的治疗作用。方法：采用高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素的方法建立T2DM大鼠模型，随机分为正常组（N组），模型组（MOD组），二甲双胍组（MET组），葛根交泰丸高（GJH），中（GJM），低（GJL）剂量（12．15，8．1，4．05g·kg^-1）组；治疗后每周测量大鼠体质量及空腹血糖（FBG），末次给药24h后收集大鼠血清样本，比较各组大鼠血脂[总胆固醇（TC），甘油三酯（TG），高密度脂蛋白一胆固醇（HDL-C），低密度脂蛋白一胆固醇（LDL-C）]，血清肝酶[天门冬氨酸氨基转移酶（AST），丙氨酸氨基转移酶（ALT）]活性，血尿素氮（BUN），血肌酐（SCr），血尿酸（UA）的差异。结果：与N组比较，MOD组大鼠体质量减轻，FBG，TG，TC，LDL-C，ALT，AST，BUN，SCr，UA均升高，HDL-C降低（P〈0．05）；与MOD组比较，各治疗组大鼠体质量均增加，FBG，TG，TC，LDL-C下降（P〈0．01），MET组，GJH组和GJM组ALT，UA明显下降（P〈0．05）；与MET组比较，GJl4组和GJL组体质量，LDL-C下降（P〈0．05），GJL组FBG，ALT，uA均升高（P〈0．05），GJM组TC，LDL-C降低（P〈0．01）；与GJM组比较，GJH组和GJL组体质量降低，FBG，TC，LDL-C均升高（P〈0．05），GJL组ALT，uA升高（P〈0．01）。结论：不同剂量的葛根交泰丸均能明显降低T2DM大鼠的血脂及血糖水平，增加大鼠体质量，抑制ALT表达，降低UA含量，可用于防治T2DM及其并发症。 展开更多
关键词 葛根交泰丸 不同剂量 2型糖尿病 空腹血糖(FBG) 血清肝酶
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