河南省部分地区1140名献血者丙型肝炎病毒感染状况 被引量：6

1

作者 职慧军 张亚冰 +6 位作者 杨小昂 葛乐芳 赵爱香 王恩久 王妙玲 陈洪涛 金志宏 《中国输血杂志》 CAS CSCD 1993年第4期218-220,共3页

输血是丙型肝炎病毒(HCV)的主要传播途径。通过对献血者丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)的筛选,可减少输血后丙型肝炎的发生。1989年,美国 Choo 等应用基因克隆技术,获得了一株表达 HCV 抗原的克隆。此后,应用 RIA 和 EIA 检测抗 -HCV 的方法... 输血是丙型肝炎病毒(HCV)的主要传播途径。通过对献血者丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)的筛选,可减少输血后丙型肝炎的发生。1989年,美国 Choo 等应用基因克隆技术,获得了一株表达 HCV 抗原的克隆。此后,应用 RIA 和 EIA 检测抗 -HCV 的方法相继建立。近年又建立了聚合酶链反应(PCR)检测 HCVRNA,使丙型肝炎的研究获得了突破性进展。 展开更多

关键词 输血 血浆 丙型肝炎病毒 感染

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抗－HBe阳性患者乙肝病毒前核心基因的扩增与克隆

2

作者 职慧军 蒋菊 +1 位作者 赵世桢 熊诗松 《河南医学研究》 CAS 1995年第4期308-310,共3页

本文采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法从９例抗－ＨＢｅ阳性的乙肝患者血清中扩增了含ＰｒｅＣ和Ｃ基因的ＤＮＡ片段，并分别与载体ｐＵＣ１８相连接，成功地克隆入大肠杆菌中，为后续的ＤＮＡ测序及分析ＰｒｅＣ基因突变打下了基础。并... 本文采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法从９例抗－ＨＢｅ阳性的乙肝患者血清中扩增了含ＰｒｅＣ和Ｃ基因的ＤＮＡ片段，并分别与载体ｐＵＣ１８相连接，成功地克隆入大肠杆菌中，为后续的ＤＮＡ测序及分析ＰｒｅＣ基因突变打下了基础。并建立了快速、简便的ＰＣＲ直接筛选和鉴定阳性克隆的方法。 展开更多

关键词 乙型肝炎 核心抗原 乙型肝炎病毒 前核心基因

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聚合酶链反应检测血清及肝脏中丙型肝炎病毒核糖核酸的研究

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作者 职慧军 金志宏 《河南医学研究》 CAS 1993年第3期264-267,共4页

本文报道了简便快速检测血清及肝脏中丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)的聚合酶链反应(PCR)方法。检测单浆献血员61例,其中抗-HCV阳性30例,检出血清HCV RNA阳性者17例;抗-HCV阴性31例,检出血清HCV RNA阳性者9例。检测6例血清HCV RNA阴性、... 本文报道了简便快速检测血清及肝脏中丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)的聚合酶链反应(PCR)方法。检测单浆献血员61例,其中抗-HCV阳性30例,检出血清HCV RNA阳性者17例;抗-HCV阴性31例,检出血清HCV RNA阳性者9例。检测6例血清HCV RNA阴性、抗-HCV阳性丙型肝炎患者的肝穿标本,发现4例HCV RNA阳性。说明本文所建立的PCR方法是诊断HCV感染的特异性强、敏感度高的一种新方法。检测肝组织内的HCV RNA可提高HCV RNA的检出率。本文还对标本的处理及如何避免假阳性等问题进行了讨论。 展开更多

关键词 聚合酶链反应 抗-丙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒核糖核酸

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青海喜马拉雅旱獭感染矛形双腔吸虫的观察 被引量：2

4

作者 金志宏 杨小昂 +3 位作者 职慧军 汲振余 陈洪涛 晋雪香 《中国比较医学杂志》 CAS 1992年第Z2期77-77,共1页

矛形双腔吸虫(Dicrocoelium lanceatum)在我国分布较广,主要在新疆、青海、甘肃和陕西等省区。多寄生于牛羊,也可见于猪、驴、犬等,但旱獭感染矛形双腔吸虫尚未见报告。本研究首次在青海喜马拉雅旱獭肝脏胆管中发现矛形双腔吸虫,并对其... 矛形双腔吸虫(Dicrocoelium lanceatum)在我国分布较广,主要在新疆、青海、甘肃和陕西等省区。多寄生于牛羊,也可见于猪、驴、犬等,但旱獭感染矛形双腔吸虫尚未见报告。本研究首次在青海喜马拉雅旱獭肝脏胆管中发现矛形双腔吸虫,并对其所致的病理学变化进行了观察。 喜马拉雅旱獭分布于青藏高原,为草食性动物。由于它与东方土拨鼠属同一属系动物,生活习性相似,并在旱獭肝脏和血清中发现病毒样颗粒,曾试图将其作为乙型肝炎实验动物。在对300只旱獭剖腹探查中, 展开更多

关键词 矛形双腔吸虫 喜马拉雅旱獭 东方土拨鼠 多寄生 乙型肝炎 实验动物 草食性动物 病毒样颗粒 病理学变化 寄生虫学检查

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中国部分地区丁型肝炎的流行特点及特异性诊断试剂的制备研究 被引量：1

5

作者 金志宏 买凯 +5 位作者 杨小昂 张亚冰 职慧军 汲振余 陈洪涛 熊诗松 《河南医学研究》 CAS 1992年第1期62-66,共5页

本研究采用免疫学方法对我国11个省、市自治区1027例乙型肝炎患者血清进行检测,抗-HD阳性率为1.7%。首次在我国新疆、内蒙和西藏等少数民族地区发现 HDV 感染,并对其与 HBsAg 亚型的关系进行了探讨。阐明了我国丁型肝炎的一些流行特征... 本研究采用免疫学方法对我国11个省、市自治区1027例乙型肝炎患者血清进行检测,抗-HD阳性率为1.7%。首次在我国新疆、内蒙和西藏等少数民族地区发现 HDV 感染,并对其与 HBsAg 亚型的关系进行了探讨。阐明了我国丁型肝炎的一些流行特征。采用 HDV 感染携带 WHV 的东方土拨鼠,建立了HDV 感染的实验动物模型。利用土拨鼠肝脏提取纯化 HDAg,制备了检测抗-HD 的诊断试剂盒。该试剂与爱尔兰 Noctech 公司同类试剂相比较,特异性和敏感性均相一致。重复性好,操作方便.诊断快速。可解决国内丁肝试剂短缺的问题。 展开更多

关键词 丁型肝炎 流行病学抗-HD HBsAg亚型 动物模型 诊断试剂

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PCR技术检测石蜡包埋肝癌、癌旁组织中HBV DNA及与血清学标记之间关系

6

作者 崔广林 李振峰 +2 位作者 崔新科 职慧军 刘益清 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 1992年第1期28-30,共3页

本文应用先进的聚合酶链反应(PCR)技术,检测了27例原发性肝癌(HCC)患者肝癌及癌旁双份组织中的乙肝病毒DNA(HBV DNA),并探讨了与血清学标记物(HBV-M)之间的关系.检测结果表明:癌组织中HBV DNA检出率较癌旁组织中检出率低,且差异有统计... 本文应用先进的聚合酶链反应(PCR)技术,检测了27例原发性肝癌(HCC)患者肝癌及癌旁双份组织中的乙肝病毒DNA(HBV DNA),并探讨了与血清学标记物(HBV-M)之间的关系.检测结果表明:癌组织中HBV DNA检出率较癌旁组织中检出率低,且差异有统计学意义(P<0.05).HBsAg阳性合并HBeAg阳性者检出HBV DNA最高,癌旁组织中慢活肝中HBVDNA检出率最高. 展开更多

关键词 聚合酶链反应 原发性肝癌 乙肝病毒

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PCR检测石蜡切片中HBV DNA

7

作者 张亚琳 崔广林 +1 位作者 李振峰 职慧军 《世界华人消化杂志》 CAS 1996年第1期54-55,共2页

目前,PCR检测乙肝病毒DNA多为血清标本,而对肝组织尤其是石蜡包埋组织方面应用报道甚少。我们尝试把此项技术用于检测石蜡包埋组织中HBV DNA,并与血清检测进行了对照研究。

关键词 肝肿瘤 肝炎 乙型肝炎病毒

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HDV重组抗原的测定及与其它抗原的比较

8

作者 杨小昂 高峰 +2 位作者 方华 职慧军 金志宏 《中国卫生检验杂志》 CAS 2002年第1期28-29,共2页

[目的]为了研究重组HDV抗原的性质及与其它HDV抗原的差别。[方法]本文用ELISA方法对重组HDAg进行了测定,并与肝脏提取的HDAg及美国HDAg进行了比较实验。[结果]重组HDAg能与抗-HD特异性结合,中和抑制试验平均抑制率为86％,该抗原在37℃放... [目的]为了研究重组HDV抗原的性质及与其它HDV抗原的差别。[方法]本文用ELISA方法对重组HDAg进行了测定,并与肝脏提取的HDAg及美国HDAg进行了比较实验。[结果]重组HDAg能与抗-HD特异性结合,中和抑制试验平均抑制率为86％,该抗原在37℃放置1～7d稳定性良好。[结论]三种抗原对抗-HD阳性血清和HBsAg阳性血清的检测结果一致,表明基因重组 HDAg可以替代诊断试剂中的其他HDV抗原。 展开更多

关键词 丁型肝炎病毒 重组抗原 比较实验

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聚合酶链反应检测HBsAg(-)慢性肝病患者血清中HBV DNA

9

作者 崔广林 崔新科 +3 位作者 元阿萍 李振峰 职慧军 刘益清 《河南医科大学学报》 1993年第3期263-264,共2页

应用聚合酶链反应检测了53例HBsAg(-)慢性肝病患者血清中的HBV DNA。结果为:53例患者中38例阳性,占71.70%;其中慢性肝炎15例,阳性率83.33%(15/18);肝炎后肝硬化7例,阳性率58.33%(7/12);原发性肝癌16例,阳性率69.57%(16/23)。结果提示在H... 应用聚合酶链反应检测了53例HBsAg(-)慢性肝病患者血清中的HBV DNA。结果为:53例患者中38例阳性,占71.70%;其中慢性肝炎15例,阳性率83.33%(15/18);肝炎后肝硬化7例,阳性率58.33%(7/12);原发性肝癌16例,阳性率69.57%(16/23)。结果提示在HBsAg(-)慢性肝病中,仍以乙肝病毒感染为主。 展开更多

关键词 聚合酶链反应 乙型肝炎病毒 DNA

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通过原生质体融合改建酵母细胞的研究——Ⅴ.酿酒酵母与糖化酵母种间融合杂种的遗传分析 被引量：4

10

作者 李桃生 职慧军 +1 位作者 罗玉萍 陈士怡 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1992年第5期467-474,共8页

HU-KDP-185菌株是由单倍体糖化酵母与二倍体椭圆酿酒酵母经原生质体融合而获得的种间三倍体融合杂种。遗传分析表明,该杂种在遗传上是稳定的;在一般情况下,其产孢率为13.54%;但在特定预培养条件下,可提高到38.61%,即使在只含0.98%醋酸钾... HU-KDP-185菌株是由单倍体糖化酵母与二倍体椭圆酿酒酵母经原生质体融合而获得的种间三倍体融合杂种。遗传分析表明,该杂种在遗传上是稳定的;在一般情况下,其产孢率为13.54%;但在特定预培养条件下,可提高到38.61%,即使在只含0.98%醋酸钾和0.186%KCl的HU-Li简易产孢培养基上,其产孢率也可达33.23%。用显微操作器解剖了202个4孢子子囊,得到376个四分子单孢株,其孢子成活率达46.53%;四分子的交配型出现A、a、AA、aa4种类型,没有发现有AAa交配型存在。四分子发酵可溶性淀粉的能力为1:2(发酵:不发酵);而遗传标记的分离比为野生型:营养缺陷型(包括hisˉ,argˉ,hisˉargˉ)约为1:1。 展开更多

关键词 遗传分析 原生质体融合 酵母

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一株种间融合的三倍体杂种酵母减数分裂产物的遗传学分析 被引量：1

11

作者 李桃生 赵小立 +2 位作者 杜英 职慧军 陈士怡 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1995年第6期487-493,共7页

通过原生质体融合技术将二倍体酿酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅｖａｒ．ｅｌｌｏｐｓｉｏｄｅｕｓ）与单倍体糖化酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｄｉａｓｔａｔｉｃｕｓ）构建成遗传上稳定的种间三倍体融... 通过原生质体融合技术将二倍体酿酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅｖａｒ．ｅｌｌｏｐｓｉｏｄｅｕｓ）与单倍体糖化酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｄｉａｓｔａｔｉｃｕｓ）构建成遗传上稳定的种间三倍体融合杂种。实验结果表明，这种融合杂种象有性杂种一样能诱导产孢；对其完整和非完整四分子的遗传分析，证明了通过遗传标记互补选择法获得的种间三倍体融合杂种ＨＵ－ＫＤＦ－２４０在产孢过程中，标记基因发生了分离和交换，出现了亲二型和重组类型；四分子对可溶性淀粉的发酵和不发酵分离比为１∶２，而原养型与营养缺陷型的分离比是１∶１。 展开更多

关键词 酵母 原生质体融合 遗传分析 减数分裂

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酿酒酵母渗透敏感新基因的定位及其作用机理的研究

12

作者 职慧军 李桃生 陈士怡 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1992年第6期541-548,共8页

本文通过四分子分析将酿酒酵母中另一控制渗透敏感的基因osm3进行了定位。遗传分析表明,osm3是位于染色体Ⅱ上的1个新基因,与gal1座位相距大约45厘摩。其第二次分裂分离频率为51.01%,它与着丝粒的图距为25.51厘摩,属着丝粒连锁基因。回... 本文通过四分子分析将酿酒酵母中另一控制渗透敏感的基因osm3进行了定位。遗传分析表明,osm3是位于染色体Ⅱ上的1个新基因,与gal1座位相距大约45厘摩。其第二次分裂分离频率为51.01%,它与着丝粒的图距为25.51厘摩,属着丝粒连锁基因。回复突变的研究结果表明,渗透敏感性状很可能是因为osm3座位上发生了错义或无义突变所致。 根据渗透敏感菌株和正常菌株对高渗透压反应试验,证明了高的胞内甘油含量是酵母在高渗条件下生长所必需的。osm3菌株不能耐高渗的主要原因是由于甘油转运失调所致,OSM3基因产物可能与甘油的转运过程有关。本文还就高渗对酿酒酵母发酵力的影响进行了讨论。 展开更多

关键词 酿酒酵母 渗透敏感基因 基因定位

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人乳头瘤病毒16型E6和E7基因突变体表达蛋白的稳定性和抗原性分析 被引量：6

13

作者 职慧军 韩立群 +4 位作者 任皎 田厚文 骆卫锋 梁雨 阮力 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期124-127,共4页

目的　筛选适合于宫颈癌治疗性疫苗研制的人乳头瘤病毒 1 6型 (HPV1 6)E6和E7突变基因。方法　采用定点诱变技术对E6和E7基因进行改造 ,得到几种E6和E7基因的突变体 ;构建成表达野生型和突变型E6与E7的重组痘苗病毒 ,对这些重组痘苗病... 目的　筛选适合于宫颈癌治疗性疫苗研制的人乳头瘤病毒 1 6型 (HPV1 6)E6和E7突变基因。方法　采用定点诱变技术对E6和E7基因进行改造 ,得到几种E6和E7基因的突变体 ;构建成表达野生型和突变型E6与E7的重组痘苗病毒 ,对这些重组痘苗病毒表达的E6和E7蛋白的稳定性及其免疫原性进行了比较研究。结果　E6蛋白第 50位氨基酸的突变、E7蛋白第 2 4和 2 6位氨基酸的突变都不影响蛋白的稳定性和抗原性 ,但E7蛋白第 91位氨基酸的突变使E7蛋白的稳定性和抗原性大大减弱。结论　证实了E7蛋白C 末端的锌指结构对E7蛋白结构的完整性和稳定性是非常重要的。 展开更多

关键词 稳定性 抗原性分析 人乳头状瘤病毒 宫颈肿瘤 疫苗 插入诱变

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表达野生型和突变型HPV16-E7重组痘苗病毒诱发的抗肿瘤免疫反应 被引量：5

14

作者 职慧军 韩立群 +4 位作者 任皎 田厚文 骆卫锋 梁雨 阮力 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期222-225,共4页

目的　选出适合于治疗性疫苗研制的HPV16E7突变基因。方法　对表达野生型和突变型E7蛋白的重组痘苗病毒所诱发的细胞免疫反应和抗肿瘤活性进行比较研究。结果　表达突变型ME7 1(2 4G2 6G)的重组痘苗病毒VmE7 1与表达野生型E7的VwE7相同 ... 目的　选出适合于治疗性疫苗研制的HPV16E7突变基因。方法　对表达野生型和突变型E7蛋白的重组痘苗病毒所诱发的细胞免疫反应和抗肿瘤活性进行比较研究。结果　表达突变型ME7 1(2 4G2 6G)的重组痘苗病毒VmE7 1与表达野生型E7的VwE7相同 ,可诱发特异性抗体和CTL的产生 ,明显推迟成瘤时间并且保护部分小鼠抵抗肿瘤细胞的攻击 ;而表达突变型ME7 2(2 4G2 6G91G)的重组痘苗病毒VmE7 2免疫小鼠后难以有效的激发细胞免疫反应 ,在抗肿瘤移植实验中也不具明显的免疫保护作用。结论　E7突变基因ME7 1可作为候选基因用于HPV16治疗性疫苗的研制。 展开更多

关键词 乳头状瘤病毒 宫颈肿瘤 疫苗 插入诱变

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共表达HPV16型E6和E7突变基因重组痘苗病毒的构建及其抗肿瘤免疫效果的观察 被引量：2

15

作者 职慧军 韩立群 +4 位作者 任皎 田厚文 骆卫锋 梁雨 阮力 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期341-344,共4页

目的　构建用于子宫颈癌治疗的HPV16型E6和E7重组痘苗病毒实验性疫苗株 ,并对其抗肿瘤免疫效果进行初步评价。方法　以痘苗病毒为载体、利用同源重组技术构建共表达HPV16E6和E7基因的重组痘苗病毒。该病毒免疫C57BL 6小鼠后 ,检测其免... 目的　构建用于子宫颈癌治疗的HPV16型E6和E7重组痘苗病毒实验性疫苗株 ,并对其抗肿瘤免疫效果进行初步评价。方法　以痘苗病毒为载体、利用同源重组技术构建共表达HPV16E6和E7基因的重组痘苗病毒。该病毒免疫C57BL 6小鼠后 ,检测其免疫原性和抗移植瘤生长情况。结果　PCR结果显示 ,重组病毒VmE6E7的TK基因内插入了分别由痘苗病毒早晚期启动子H6和7.5K表达的ME6和ME7 1基因。动物实验结果表明 ,rVmE6E7在C57BL 6小鼠体内可诱发E6和E7特异性抗体产生 ,被免疫小鼠能够抵抗HPV16E6E7转化的同系肿瘤细胞的攻击。结论　获得 1株用于宫颈癌治疗的HPV16型实验疫苗株 ,为进一步研制人用HPV16型疫苗株奠定了基础。 展开更多

关键词 抗肿瘤免疫效果 16型人乳头状瘤病毒 宫颈肿瘤 DNA疫苗 E6蛋白 E7蛋白 治疗性疫苗实验株

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表达HPV16型结构蛋白的非复制型重组痘苗病毒的构建与鉴定 被引量：7

16

作者 韩立群 任皎 +6 位作者 梁雨 田厚文 职慧军 骆卫锋 陆振华 魏兰兰 阮力 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期256-260,共5页

目的　构建表达人乳头瘤病毒 16型 (HPV16 )结构蛋白的非复制型重组痘苗病毒人用疫苗株。方法　采用聚合酶链反应技术 (PCR)扩增并克隆HPV16主要结构蛋白L1和次要结构蛋白L2基因 ;将经过结构修饰的L1和L2基因插入痘苗病毒表达载体 ,通... 目的　构建表达人乳头瘤病毒 16型 (HPV16 )结构蛋白的非复制型重组痘苗病毒人用疫苗株。方法　采用聚合酶链反应技术 (PCR)扩增并克隆HPV16主要结构蛋白L1和次要结构蛋白L2基因 ;将经过结构修饰的L1和L2基因插入痘苗病毒表达载体 ,通过与痘苗病毒在宿主细胞中同源重组后 ,筛选共表达L1 L2蛋白的重组痘苗病毒并对其进行鉴定。结果　DNA序列分析证实PCR扩增所获L1和L2克隆基因是正确的 ;斑点杂交结果表明重组病毒基因组中有L1和L2基因插入 ;该重组病毒在人源细胞中不复制或低水平复制 ,但可稳定表达相对分子质量为 5 70 0 0的L1蛋白和相对分子质量为 90 0 0 0的L2蛋白。结论　获得 1株稳定表达HPV16L1 L2蛋白的非复制型重组痘苗病毒人用疫苗株。 展开更多

关键词 宫颈肿瘤 乳头状瘤病毒 子宫颈癌 非复制型重组痘苗病毒 HPV16型结构蛋白

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