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miR-140在骨肉瘤组织中表达降低及其过表达可促进骨肉瘤U2细胞的凋亡 被引量:7
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作者 陈翔 黄路 +4 位作者 张中卒 肖前仁 陈少卿 舒勇 曹凯 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第4期439-444,共6页
目的探讨骨肉瘤组织中miR-140的表达,以及过表达miR-140后对骨肉瘤细胞生物学行为的影响。方法用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测40例骨肉瘤患者肿瘤组织与癌旁组织中miR-140的表达。用脂质体法瞬时将人工合成的成熟miR-140片段(miR-140 m... 目的探讨骨肉瘤组织中miR-140的表达,以及过表达miR-140后对骨肉瘤细胞生物学行为的影响。方法用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测40例骨肉瘤患者肿瘤组织与癌旁组织中miR-140的表达。用脂质体法瞬时将人工合成的成熟miR-140片段(miR-140 mimic)转染至骨肉瘤U2细胞中;用qRT-PCR法检测细胞中miR-140的表达,CCK-8法及流式细胞仪检测细胞的增殖及凋亡,Transwell小室检测细胞的侵袭能力,Western印迹法检测miR-140靶基因组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)的表达。结果 72.5%(29/40)的骨肉瘤组织miR-140表达明显低于瘤旁组织(P<0.05)。转染miR-140 mimic后U2细胞miR-140的表达水平明显上调(P<0.05),细胞增殖能力明显降低(P<0.05),凋亡率明显升高(P<0.05),侵袭能力明显下降(P<0.05),细胞中HDAC4蛋白的表达水平明显下降(P<0.05)。结论 miR-140在骨肉瘤中低表达;过表达miR-140后可抑制骨肉瘤U2细胞的增殖和侵袭,并促进其凋亡。这一作用可能部分依赖于miR-140靶向抑制HDAC4的表达。 展开更多
关键词 骨肉瘤 微小RNA-140 组蛋白去乙酰化酶4 凋亡
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RNA干扰组蛋白去乙酰化酶4诱导骨肉瘤细胞凋亡
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作者 肖前仁 黄路 +4 位作者 张中卒 张战民 陈少卿 舒勇 曹凯 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第12期1693-1698,共6页
目的探讨沉默组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)对骨肉瘤细胞HOS,U2OS生物学行为的影响。方法用脂质体瞬时转染法将化学合成HDAC4-siRNA转染至骨肉瘤HOS及U2OS细胞中,实时荧光定量PCR(q-PCR)法检测细胞中HDAC4 mRNA的表达;蛋白质免疫印迹法(West... 目的探讨沉默组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)对骨肉瘤细胞HOS,U2OS生物学行为的影响。方法用脂质体瞬时转染法将化学合成HDAC4-siRNA转染至骨肉瘤HOS及U2OS细胞中,实时荧光定量PCR(q-PCR)法检测细胞中HDAC4 mRNA的表达;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测细胞HDAC4及其下游基因HIF-1α的蛋白表达;CCK-8法检测细胞的增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡;Transwell小室法检测细胞的侵袭能力。结果转染后HOS及U2OS细胞中HDAC4 mRNA表达明显降低(P<0.01)。沉默HDAC4后HOS细胞早期凋亡率为(16.8±2.1)%,较si-control组(10.2±2.5)%明显增加(P<0.05);U2OS细胞早期凋亡率为(21.4±3.1)%,较si-control组(12.5±2.3)%明显增加(P<0.05);HOS细胞si-con组及si-HDAC4组细胞的穿膜细胞数分别为(146±34)个、(45±20)个,U2OS细胞为(207±35)个、(121±23)个,分别显著低于si-con组(P<0.05)。si-HDAC4能够明显降低HDAC4以及下游基因HIF-1α的表达。结论针对HDAC4基因的特异性RNA小干扰片段能够下调HDAC4mRNA及蛋白的表达,并抑制骨肉瘤细胞的增殖和侵袭,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 骨肉瘤 RNAI 组蛋白去乙酰化酶4
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miR-186通过下调垂体瘤转化基因1的表达抑制骨肉瘤细胞的增殖侵袭并诱导其凋亡 被引量:1
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作者 李乾 魏志辉 +5 位作者 肖前仁 陈佳骏 周新 王滕羽 张中卒 张铭华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期864-869,共6页
目的:探讨miR-186对骨肉瘤细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响,并探讨其可能机制。方法:实时荧光定量PCR检测骨肉瘤细胞HOS、U2-OS、Saos-2及成骨细胞NHOst中miR-186表达,并运用人工合成的miR-186模拟片段及对照scramble mimic转染至人骨肉... 目的:探讨miR-186对骨肉瘤细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响,并探讨其可能机制。方法:实时荧光定量PCR检测骨肉瘤细胞HOS、U2-OS、Saos-2及成骨细胞NHOst中miR-186表达,并运用人工合成的miR-186模拟片段及对照scramble mimic转染至人骨肉瘤HOS及U2-OS细胞内,运用实时荧光定量PCR检测转染后细胞中miR-186的表达水平;分别运用CCK-8法、流式细胞检测技术及Transwall体外侵袭实验检测过表达miR-186对HOS及U2-OS细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响;运用Western blotting及实时荧光定量PCR检测miR-186过表达对细胞中垂体瘤转化基因1(pituitary tumor transforming gene 1,PTTG1)的蛋白及m RNA表达水平的影响。结果:骨肉瘤细胞中miR-186呈现低表达;转染人工合成的miR-186片段可上调HOS及U2-OS细胞中miR-186的表达;miR-186过表达组细胞的增殖能力较scramble组明显下降(P<0.01),转染组HOS[(16.9±2.1)%vs(10.4±1.6)%,P<0.05]及U2-OS[(22.6±2.9)%vs(14.1±2.2)%,P<0.05]细胞的凋亡比例明显高于scramble组,转染组HOS及U2-OS细胞的穿膜数明显低于scramble组(P<0.01);转染组细胞中PTTG1的蛋白及m RNA表达水平均明显下降(P<0.01),而scramble组无明显变化(P>0.05);结论:miR-186能够抑制骨肉瘤细胞的增殖及侵袭并促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制PTTG1表达相关。 展开更多
关键词 miR-186 骨肉瘤 垂体瘤转化基因1
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脊柱骨盆内固定治疗Tile C型骨盆后环骨折的近期临床效果
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作者 姚富华 梁建斌 +2 位作者 毛立飞 苏一凡 肖前仁 《中国当代医药》 2020年第18期91-93,共3页
目的 探讨脊柱骨盆内固定治疗Tile C型骨盆后环骨折的近期临床效果.方法 选取2015年1月~2019年8月在我院接受治疗的38例Tile C型骨盆后环骨折患者作为研究对象,依据治疗方法的不同将其分为观察组(28例,采用脊柱骨盆内固定治疗)和对照组... 目的 探讨脊柱骨盆内固定治疗Tile C型骨盆后环骨折的近期临床效果.方法 选取2015年1月~2019年8月在我院接受治疗的38例Tile C型骨盆后环骨折患者作为研究对象,依据治疗方法的不同将其分为观察组(28例,采用脊柱骨盆内固定治疗)和对照组(10例,采用开放性钢板内固定治疗).比较两组患者的近期临床治疗效果.结果 观察组患者的手术时间短于对照组,术中出血量少于对照组,内固定失败率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者术后1、3个月的Majeed评分优良情况均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 与传统的开放性钢板内固定治疗术相比,脊柱骨盆内固定治疗术能够缩短Tile C型骨盆后环骨折患者的手术时间,减少术中出血量,提高内固定成功率,改善Majeed评分,值得临床推广应用. 展开更多
关键词 脊柱骨盆内固定技术 骨盆后环不稳定性骨折 骨盆骨折 疗效
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微创八字型切口与传统L型切口治疗跟骨骨折效果比较
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作者 姚富华 毛立飞 +2 位作者 苏一帆 肖前仁 梁建斌 《深圳中西医结合杂志》 2020年第9期166-167,共2页
目的:比较微创八字型切口与传统L型切口治疗跟骨骨折的应用效果。方法:回顾性分析2015年1月至2019年6月惠州市中大惠亚医院收治的跟骨骨折患者资料,依据手术切口入路的不同划分为两组,传统L型切口组有患者41例(41足),微创八字型切口组... 目的:比较微创八字型切口与传统L型切口治疗跟骨骨折的应用效果。方法:回顾性分析2015年1月至2019年6月惠州市中大惠亚医院收治的跟骨骨折患者资料,依据手术切口入路的不同划分为两组,传统L型切口组有患者41例(41足),微创八字型切口组有29例(29足),所有患者均先完成各种常规检查的同时进行消肿治疗,之后分别予以不同的手术入路方式,对不同入路方式的术前准备时间、手术时间、切口愈合时间、并发症发生率(切口感染率、骨外露率)进行比较。结果:微创八字型切口组的术前准备时间、切口愈合时间均更短于传统L型切口组,但其手术时间长于传统L型切口组,差异具有统计学意义(P<0.05);微创八字型切口组的并发症发生率(切口感染率、切口皮瓣坏死率、切口愈合延迟率)与传统L型切口组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:微创八字型切口入路治疗跟骨骨折,能够取得更为显著的临床应用价值,不会增加术式并发症发生率,有利于有效缩短患者的术前准备时间与切口愈合时间,更具有治疗优势性。 展开更多
关键词 传统L型切口 微创八字型切口 跟骨骨折 跟骨解剖型钢板
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肿瘤相关巨噬细胞促进尤文肉瘤细胞增殖、侵袭及血管拟态形成 被引量:2
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作者 周新 陈佳骏 +3 位作者 肖前仁 王滕羽 张中卒 邵高海 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期283-290,共8页
目的:探究肿瘤相关巨噬细胞对尤文肉瘤细胞增殖、侵袭及血管拟态形成能力的影响及其可能的分子作用机制。方法:体外诱导人单核细胞U937向M2型巨噬细胞分化,实时荧光定量PCR法检测诱导前后单核细胞中M2型巨噬细胞相关因子CD68、CD163及CD... 目的:探究肿瘤相关巨噬细胞对尤文肉瘤细胞增殖、侵袭及血管拟态形成能力的影响及其可能的分子作用机制。方法:体外诱导人单核细胞U937向M2型巨噬细胞分化,实时荧光定量PCR法检测诱导前后单核细胞中M2型巨噬细胞相关因子CD68、CD163及CD206的表达差异。将诱导后的人单核细胞U937与尤文肉瘤细胞A673及SK-ES-1共培养后,分别采用CCK-8法、Transwell小室侵袭实验及血管拟态形成实验检测尤文肉瘤细胞增殖、侵袭及血管拟态形成能力的变化。蛋白质印迹法检测共培养后尤文肉瘤细胞中信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)及其下游的磷酸化STAT3(phospho-STAT3,p-STAT3)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)和周期蛋白D2(cyclin D2,CCND2)表达的变化。结果:体外诱导后的人单核细胞U937中CD68、CD163及CD206表达水平明显升高(P值均<0.01),提示单核细胞成功分化为M2型巨噬细胞。将诱导后的M2型U937细胞分别与尤文肉瘤细胞A673及SK-ES-1共培养48 h后,A673及SK-ES-1细胞增殖能力较未共培养的对照组明显增强(P值均<0.05),且穿透基质胶的细胞数较对照组明显增多(P值均<0.05),新生血管分支数也较对照组明显增多(P值均<0.05)。共培养后的尤文肉瘤细胞中,STAT3及其下游p-STAT3、MMP2和CCND2蛋白表达水平均较对照组明显升高(P值均<0.01)。结论:肿瘤相关巨噬细胞与尤文肉瘤细胞共培养能够明显促进尤文肉瘤细胞的增殖、侵袭及血管拟态形成,其作用可能是通过激活尤文肉瘤细胞中STAT3通路来实现的。 展开更多
关键词 肉瘤 Ewing 巨噬细胞 细胞增殖 肿瘤侵润 血管拟态形成
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微RNA-107对尤文肉瘤细胞增殖和体外拟态血管形成的抑制作用及其机制探讨 被引量:1
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作者 陈佳骏 周新 +4 位作者 肖前仁 王滕羽 李云云 张中卒 邵高海 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1282-1288,共7页
目的:探讨微RNA-107(microRNA-107,miR-107)表达对尤文肉瘤细胞增殖和体外拟态血管形成能力的影响,并分析其可能的分子作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR法检测不同尤文肉瘤细胞中miR-107的表达水平。将人工合成的miR-107模拟物片段(m... 目的:探讨微RNA-107(microRNA-107,miR-107)表达对尤文肉瘤细胞增殖和体外拟态血管形成能力的影响,并分析其可能的分子作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR法检测不同尤文肉瘤细胞中miR-107的表达水平。将人工合成的miR-107模拟物片段(miR-107 mimic)转染至尤文肉瘤RD-ES和SK-ES-1细胞中,同时设置转染无关片段的对照组。实时荧光定量PCR法检测转染后尤文肉瘤细胞中miR-107表达的恢复情况。然后,分别采用CCK-8法和基质胶血管生成拟态实验检测miR-107高表达对尤文肉瘤细胞增殖及血管拟态形成能力的影响,并采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测细胞中低氧诱导因子1β(hypoxia inducible factor-1β,HIF-1β)mRNA及蛋白表达水平的变化。结果:与人间充质干细胞相比,miR-107在尤文肉瘤RD-ES和SK-ES-1细胞中呈低表达(P值均<0.01)。转染miR-107 mimic后,尤文肉瘤RDES及SK-ES-1细胞中miR-107的表达水平明显升高(P值均<0.01)。miR-107过表达后,RD-ES及SK-ES-1细胞的增殖能力明显降低(P值均<0.05),体外血管拟态形成也被明显抑制(P值均<0.05),而且细胞中HIF-1βmRNA及蛋白表达均明显下调(P值均<0.01)。结论:miR-107在尤文肉瘤细胞中低表达。miR-107过表达能够抑制尤文肉瘤细胞的增殖及体外拟态血管形成,该作用可能是通过靶向调控HIF-1β表达来实现的。 展开更多
关键词 肉瘤 EWING 微RNA-107 低氧诱导因子1 新生血管化 病理性 细胞增殖
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miR-141抑制骨肉瘤细胞系HOS的体外增殖和上皮间质转化
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作者 黄健华 梁建斌 +2 位作者 郭强 邓光茂 肖前仁 《中文科技期刊数据库(全文版)医药卫生》 2022年第12期36-38,共3页
研究miR-141对骨肉瘤细胞系HOS体外增殖及上皮间质转化(EMT)的影响。方法 qRT-PCR检测骨肉瘤细胞系中(HOS和U2)miR-141的表达;将人工合成的 miR-141 模拟物(miR-141 mimic)转染至 HOS细胞中,qRT-PCR检测转染后细胞内miR-141表达的恢复... 研究miR-141对骨肉瘤细胞系HOS体外增殖及上皮间质转化(EMT)的影响。方法 qRT-PCR检测骨肉瘤细胞系中(HOS和U2)miR-141的表达;将人工合成的 miR-141 模拟物(miR-141 mimic)转染至 HOS细胞中,qRT-PCR检测转染后细胞内miR-141表达的恢复情况。然后,采用 CCK-8 法检测过表达miR-141对HOS细胞增殖能力的影响,并采用Western blot检测HOS细胞中Vimentin 及E-cadherin蛋白的表达变化。结果 与人间充质干细胞相比,miR-141 在骨肉瘤细胞中低表达(P<0. 05)。转染miR-141mimic后,HOS细胞内miR-141升高明显(P<0. 01),表明miR-141 mimic转染成功;转染miR-141 mimic组HOS细胞增殖能力下降(P<0.05),而且HOS细胞中Vimentin蛋白表达明显下调,E-cadherin蛋白表达明显上升(P值均< 0.05)。结论 miR-141在骨肉瘤细胞中呈低表达,过表达miR-141能够抑制骨肉瘤细胞的增殖及EMT。 展开更多
关键词 骨肉瘤 miR-141 细胞增殖 上皮间质转化
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