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溶栓新药尿激酶原治疗急性心肌梗死的研究进展和探讨 被引量：12
1
作者 肖成祖 《医学研究杂志》 2011年第1期5-8,共4页
尿激酶原（Pro-UK）是新一代特异性溶栓药,它是尿激酶（UK）的前体,由411个氨基酸组成,它本身的催化活性很低,只有当它被运送至血栓局部,经纤维蛋白溶解酶等酶的激活,使它的肽链在Lys158-Ile159位点之间被打开形成尿激酶后,才能发挥其... 尿激酶原（Pro-UK）是新一代特异性溶栓药,它是尿激酶（UK）的前体,由411个氨基酸组成,它本身的催化活性很低,只有当它被运送至血栓局部,经纤维蛋白溶解酶等酶的激活,使它的肽链在Lys158-Ile159位点之间被打开形成尿激酶后,才能发挥其溶栓作用。同时，当局部出现纤维蛋白的E片段时，可使它原先的催化活性增大500倍， 展开更多
关键词 尿激酶原 急性心肌梗死 溶栓药 纤维蛋白溶解酶 治疗 新药 催化活性 氨基酸组成
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动物细胞微载体灌流培养技术的研究和应用 被引量：1
2
作者 肖成祖 陈昭烈 +6 位作者 黄子才 胡显文 周鹤山 王佃亮 高丽华 刘红 郭志霞 《医学研究通讯》 2000年第11期16-17,共2页
随着基因工程的发展,人们逐渐认识到有许多基因产物不能在原核细胞内表达,它们需要经过真核细胞所特有的翻译后修饰,以及正确的切割,折叠后,才能形成与自然分子一样的功能和抗原性。这就使动物细胞一跃成为一种重要的宿主细胞,用以生产... 随着基因工程的发展,人们逐渐认识到有许多基因产物不能在原核细胞内表达,它们需要经过真核细胞所特有的翻译后修饰,以及正确的切割,折叠后,才能形成与自然分子一样的功能和抗原性。这就使动物细胞一跃成为一种重要的宿主细胞,用以生产各种各样的重要的生物制品,包括有疫苗(如乙肝疫苗、狂犬病疫苗。 展开更多
关键词 动物细胞微载体 灌流培养技术 研究 应用
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加强企业市场营销战略 被引量：4
3
作者 肖成祖 《中外企业家》 2014年第12X期1-2,共2页
在经济快速发展的今天,企业发展越来越快,竞争也越来越激烈。企业要想在市场竞争中站稳脚跟,就必须要开拓创新的市场营销战略,吸引投资者和消费者的眼球,提升企业的知名度和竞争力。但是在一些企业当中,不重视市场营销战略,尤其是在营... 在经济快速发展的今天,企业发展越来越快,竞争也越来越激烈。企业要想在市场竞争中站稳脚跟,就必须要开拓创新的市场营销战略,吸引投资者和消费者的眼球,提升企业的知名度和竞争力。但是在一些企业当中,不重视市场营销战略,尤其是在营销理念、营销策略上没有创新和特色。随着全球化的不断推进,我国企业之间的整合和扩张越来越迅速,在全球化的进程中,企业面临新的挑战和机遇,只有不断加大企业市场营销战略的研究才能找到更好的发展渠道,实现企业的更快更稳的发展。 展开更多
关键词 市场营销战略 市场营销方式 市场竞争 营销管理 市场营销工作 市场营销理念 营销部门 国内市场 外部
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新时期企业文化建设存在的问题与对策 被引量：3
4
作者 肖成祖 《行政事业资产与财务》 2015年第4期39-40,共2页
经济的发展给企业带来的竞争已经不仅仅是产品的竞争,还包括企业文化的竞争。在全球经济大融合的背景下,企业文化的建设状况已经影响到了企业核心竞争力的形成。文章将分析当前形势下企业文化建设中存在的问题,并提出相应的对策。
关键词 新时期 企业文化 问题 对策
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企业管理创新问题探讨 被引量：3
5
作者 肖成祖 《行政事业资产与财务》 2015年第13期39-39,38,共2页
在当前市场经济的背景下,如何对企业现有管理工作进行改进,推进企业管理创新成为影响企业长远发展的重要问题。文章从企业管理创新问题的现状和改进方法两方面着手,对企业管理创新问题进行了深入探讨。
关键词 管理创新 问题 改进方法
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微载体高密度培养Vero细胞的研究 被引量：22
6
作者 王佃亮 肖成祖 +1 位作者 陈昭烈 黄子才 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期164-170,共7页
微载体是动物细胞高密度培养的有效手段。首先在硅化的方瓶中对Ｃｙｔｏｄｅｘ１、Ｃｙｔｏｄｅｘ３、Ｂｉｏｓｉｌｏｎ、Ｂｅｌｌｃｏ Ｇｌａｓｓ Ｍｉｃｒｏｃａｒｒｉｅｒ、ＣＴ－１、ＣＴ－３、ＭＣ－１、ＣＴ－２８种国产和进口... 微载体是动物细胞高密度培养的有效手段。首先在硅化的方瓶中对Ｃｙｔｏｄｅｘ１、Ｃｙｔｏｄｅｘ３、Ｂｉｏｓｉｌｏｎ、Ｂｅｌｌｃｏ Ｇｌａｓｓ Ｍｉｃｒｏｃａｒｒｉｅｒ、ＣＴ－１、ＣＴ－３、ＭＣ－１、ＣＴ－２８种国产和进口微载体进行了比较和筛选。确定以Ｂｉｏｓｉｌｏｎ作为Ｖｅｒｏ细胞高密度培养的首选微载体。用５００ｍｌ Ｗｈｅａｔｏｎ搅拌瓶探索影响Ｖｅｒｏ细胞高密度培养的条件。 展开更多
关键词 动物 细胞培养 微载体 高密度培养 VERO细胞
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多孔微载体无血清培养rCHO细胞生产u-PA 被引量：17
7
作者 胡显文 肖成祖 +5 位作者 李佐虎 郭志霞 高丽华 张正光 胥照平 王菲 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期387-391,共5页
在 30L搅拌式反应器中无血清培养分泌尿激酶型纤溶酶原激活剂 (u PA)的DNA重组CHO细胞 ,定期部分更换Cytopore多孔微载体 ,使生长在多孔微载体中的细胞不断更新繁殖 ,解决大规模细胞培养中的细胞凋亡问题。在 91d连接换液培养过程中 ,... 在 30L搅拌式反应器中无血清培养分泌尿激酶型纤溶酶原激活剂 (u PA)的DNA重组CHO细胞 ,定期部分更换Cytopore多孔微载体 ,使生长在多孔微载体中的细胞不断更新繁殖 ,解决大规模细胞培养中的细胞凋亡问题。在 91d连接换液培养过程中 ,细胞密度可维持在 (1 3～ 2 6 )× 10 7/mL ,活细胞比率维持在 90 %以上。在7 5L搅拌罐中培养细胞 ,利用外部周期性压力振荡刺激并结合载体更新技术 ,可减轻密度效应对细胞生长和表达的影响 ,在一定程度上提高细胞在高密度培养条件下的表达水平。在 6 7d连续换液培养中 ,细胞最高密度为 2 6 4× 10 7/mL ,活细胞比率维持在 95 %以上。与稳压操作相比 ,利用周期变压刺激技术可提高产量 10 %～ 2 0 % ,且可降低葡萄糖厌氧代谢生成乳酸的转化率 ,利用 4步纯化工艺 ,从含u PA约 135g的 2 10 0L上清中获得约 80 gu PA(单链比例约为 90 % )。 展开更多
关键词 动物细胞培养 微载体更新 U-PA RCHO细胞
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用衔接头PCR克隆新的胡萝卜Ⅱ型转化酶基因启动子 被引量：19
8
作者 王新国 肖成祖 +1 位作者 张国华 方荣祥 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期61-65,共5页
为克隆新的胡萝卜 型转化酶基因启动子 ,将胡萝卜基因组 DNA分别用 Pvu 、Eco R 、Dra 和 Sma 酶切 ,酶切片段与一特殊的衔接头连接 .取连接产物作模板 ,以衔接头引物和基因特异引物做 PCR,得到的主要 PCR产物分别为 3.4kb、1 .3kb、0 ... 为克隆新的胡萝卜 型转化酶基因启动子 ,将胡萝卜基因组 DNA分别用 Pvu 、Eco R 、Dra 和 Sma 酶切 ,酶切片段与一特殊的衔接头连接 .取连接产物作模板 ,以衔接头引物和基因特异引物做 PCR,得到的主要 PCR产物分别为 3.4kb、1 .3kb、0 .4kb和 0 .6kb.将 Eco R -衔接头体系的 PCR产物克隆和测序 ,并将其序列与 Gen Bank中的已知序列进行比较分析 ,发现了一个新的胡萝卜 型转化酶启动子序列 ,它含有类似于 TATA box和 CAAT box的元件 ,在启动子的远上游区域还含有多个 AT富含区 .该启动子的发现对于研究植物中糖代谢具有重要意义 . 展开更多
关键词 衔接头PCR Ⅱ型转化酶 启动子 胡萝卜 糖代谢
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内含子对提高转基因动物基因表达效率的影响 被引量：18
9
作者 卢一凡 邓继先 +1 位作者 肖成祖 马清钧 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1995年第4期322-326,共5页
综述了内含子在转基因动物基因表达中的作用，对内源性内含子和异源内含子对转基因表达的影响进行分析，讨论了内含子提高转基因动物基因表达效率的三种可能机制，并指出在表达载体构建中应考虑到内含子的重要性．
关键词 转基因动物 内含子 基因表达 基因工程
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转基因动物理论与技术的研究进展 被引量：16
10
作者 卢一凡 邓继先 +2 位作者 肖成祖 马清钧 王冬平 《生物技术通报》 CAS CSCD 1997年第4期19-25,4,共8页
转基因动物的出现,为生命科学研究提供了有力的工具。在过去的十多年里,已建立了许多整合有外源基因的转基因小鼠和大鼠,转基因兔、猪、羊、牛等也已诞生。使得在基础研究和实际应用方面展示出良好的前景。然而由于转基因动物的建立较... 转基因动物的出现,为生命科学研究提供了有力的工具。在过去的十多年里,已建立了许多整合有外源基因的转基因小鼠和大鼠,转基因兔、猪、羊、牛等也已诞生。使得在基础研究和实际应用方面展示出良好的前景。然而由于转基因动物的建立较为复杂、繁琐,需研究的问题也较多。迄今为止,以小鼠为模型的研究中,获得的转基因小鼠一般具有如下特征: 展开更多
关键词 农业生物工程 转基因动物理论 方法技术
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转基因动物乳腺定位表达重组蛋白质的研究现状(上) 被引量：9
11
作者 卢一凡 邓继先 +1 位作者 肖成祖 马清钧 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1998年第1期54-57,共4页
介绍了转基因动物乳腺定位表达重组蛋白质研究的现状、存在的问题和未来发展前景。
关键词 转基因动物 重组蛋白质 体外重组 乳汁 乳腺
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用多孔微载体大规模长期培养动物细胞的方法 被引量：11
12
作者 胡显文 肖成祖 +1 位作者 高丽华 李佐虎 《生物技术通报》 CAS CSCD 2001年第1期45-48,共4页
长期大规模高密度动物细胞培养是生物制药产业中的关键技术，文中介绍了利用多孔微载体在中试规模生物反应器中长期大规模连续培养分泌尿激酶原的DNA重组中国仓鼠卵巢细胞（rCHO）的方法。
关键词 动物细胞培养 多孔微载体 反应器 高密度 长期培养
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纤维素多孔微载体的制备及其用于动物细胞培养 被引量：10
13
作者 胡显文 肖成祖 +1 位作者 黄子才 张正光 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期93-97,共5页
将纤维素铜氨溶液喷洒至－４０℃的硅油：正己烷＝１：４的冷冻液中形成含冰晶的微球，用－３０℃、４０％的Ｈ２ＳＯ４再生纤维素，并用ＥＤＡＥ盐酸盐修饰其表面，制成适合动物细胞培养的纤维素多孔微载体。利用该微载体培养能分泌尿... 将纤维素铜氨溶液喷洒至－４０℃的硅油：正己烷＝１：４的冷冻液中形成含冰晶的微球，用－３０℃、４０％的Ｈ２ＳＯ４再生纤维素，并用ＥＤＡＥ盐酸盐修饰其表面，制成适合动物细胞培养的纤维素多孔微载体。利用该微载体培养能分泌尿激酶原（ＰｒｏＵＫ）的重组ＣＨＯ细胞，在１００ｍＬ搅拌瓶中换液培养２５ｄ，细胞最高密度为６３×１０６／ｍＬ，尿激酶原最高活性为２３２５ＩＵ／ｍＬ，共获２８７ｍｇ产品。之后转入１０００ｍＬ搅拌瓶中培养，可观察到细胞可从种子微载体中自动转移到新微载体中生长繁殖直至所有微载体中都长有细胞。在２５ｄ二级培养中，细胞最高密度为７３×１０６／ｍＬ，尿激酶原最高活性为３１０８ＩＵ／ｍＬ，共获含３５３ｍｇ尿激酶原的上清１３７Ｌ。在培养后期换用无血清培养基培养，细胞生长及蛋白表达水平正常。 展开更多
关键词 多孔微载体 动物细胞培养 尿激酶原
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转基因动物乳腺定位表达重组蛋白质的研究现状(下) 被引量：6
14
作者 卢一凡 邓继先 +1 位作者 肖成祖 马清钧 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1998年第2期59-62,共4页
转基因动物乳腺定位表达重组蛋白质的研究现状（下）卢一凡邓继先肖成祖马清钧（军事医学科学院生物工程研究所北京１０００７１）四、乳汁中表达产物的特征不论材料的来源如何，如细菌培养物、哺乳动物细胞培养液或转基因动物乳汁，对... 转基因动物乳腺定位表达重组蛋白质的研究现状（下）卢一凡邓继先肖成祖马清钧（军事医学科学院生物工程研究所北京１０００７１）四、乳汁中表达产物的特征不论材料的来源如何，如细菌培养物、哺乳动物细胞培养液或转基因动物乳汁，对重组蛋白都需进行纯化，其所需的要求... 展开更多
关键词 转基因动物 重组蛋白质 乳汁 体外重组 定位表达
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用多孔微载体大规模培养rCHO细胞 被引量：5
15
作者 胡显文 肖成祖 +2 位作者 李文青 黄子才 张正光 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期348-351,共4页
多孔微载体是近年来发展起来的一种用于大规模高密度培养动物细胞的支持物，具有许多优点，如：容易固定细胞，适合于贴壁细胞和悬浮细胞的固定化连续灌流培养；细胞生长在载体内部，增加了细胞固定化的稳定性，可降低血清用量，适合长... 多孔微载体是近年来发展起来的一种用于大规模高密度培养动物细胞的支持物，具有许多优点，如：容易固定细胞，适合于贴壁细胞和悬浮细胞的固定化连续灌流培养；细胞生长在载体内部，增加了细胞固定化的稳定性，可降低血清用量，适合长期培养；能保护细胞免受机械损伤，增... 展开更多
关键词 RCHO细胞 培养 多孔微载体
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自制多孔微球高密度培养Vero细胞的初步研究 被引量：5
16
作者 王佃亮 肖成祖 +1 位作者 陈昭烈 黄子才 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期348-350,共3页
多孔微球是动物细胞高密度培养的有效手段,它是1985年由Verax公司开创的,最初用于流化床生物反应器生产单克隆抗体,后来又出现了Percell和Siran系统系列多孔微球,并且使用的反应器种类和生产的产品都在增加,于是便成为一种新型的细胞培... 多孔微球是动物细胞高密度培养的有效手段,它是1985年由Verax公司开创的,最初用于流化床生物反应器生产单克隆抗体,后来又出现了Percell和Siran系统系列多孔微球,并且使用的反应器种类和生产的产品都在增加,于是便成为一种新型的细胞培养手段而日益受到人们的重视。为此,我们在利用微载体进行Vero细胞高密度培养的同时,又对多孔微球的制备和培养工艺作了初步探索。 展开更多
关键词 细胞工程 VERO细胞 细胞培养 多孔微球
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乳清酸蛋白(WAP)基因调控序列的鉴定及在小鼠乳腺细胞表达LacZ基因的研究 被引量：6
17
作者 卢一凡 邓继先 +2 位作者 周江 肖成祖 马清钧 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第2期128-129,共2页
乳清酸蛋白（ＷＡＰ）是小鼠乳中的主要蛋白质．在亚克隆该基因的基础上，对其进行了酶切鉴定，并对该基因５′区进行克隆和序列分析，在核实序列正确后，构建了以其为调控序列，指导β－半乳糖苷酶基因的真核表达质粒，采用直接注射质... 乳清酸蛋白（ＷＡＰ）是小鼠乳中的主要蛋白质．在亚克隆该基因的基础上，对其进行了酶切鉴定，并对该基因５′区进行克隆和序列分析，在核实序列正确后，构建了以其为调控序列，指导β－半乳糖苷酶基因的真核表达质粒，采用直接注射质粒的方法在小鼠乳腺中表达出β－半乳糖苷酶活性，从而证实基因调控序列的功能正确性，可以用于转基因动物乳腺表达研究，同时证实该方法可以作为一种暂时性表达载体的验证方法． 展开更多
关键词 乳清酸蛋白 乳腺表达 Β-半乳糖苷酶
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提高尿激酶原治疗急性心肌梗死疗效研究
18
作者 肖成祖 《医学研究通讯》 2003年第8期6-8,共3页
尿激酶原是新一代特异性溶栓药。为进一步提高该药的安全性和有效性,本文从使用剂量、给药方案、与其他溶栓药伍用,及给药途径等方面提出了意见,供临床医生使用中参考。
关键词 急性心肌梗死 尿激酶原 治疗 疗效 安全性
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胚胎发育早期转基因整合的研究 被引量：4
19
作者 卢一凡 田 +2 位作者 邓继先 肖成祖 马清钧 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1998年第6期485-490,共6页
转基因动物的建立是一项复杂而艰苦的工作，在转基因胚移植受体前对其进行检测，无疑对转基因动物建立具有重要意义。使用小鼠乳清酸蛋白（WAP）控制下的人粒细胞激落刺激因子（G-CSF）基因为显微注射片段，采用PCR方法检测了转基因胚，... 转基因动物的建立是一项复杂而艰苦的工作，在转基因胚移植受体前对其进行检测，无疑对转基因动物建立具有重要意义。使用小鼠乳清酸蛋白（WAP）控制下的人粒细胞激落刺激因子（G-CSF）基因为显微注射片段，采用PCR方法检测了转基因胚，在1、2和8细胞期的阳性率为100％、77．7％和44．4％。为消除PCR扩增中的假阳性结果，构建了两个具有部分同源性的亚克隆片段进行共注射。PCR扩增片段跨越这一同源区域，转基因的非整合胚不能扩增出特异性片段。结果表明，1、2和8细胞期的阳性率分别为11．1％、55．5％和44．4％，较常规PCR检测获得更为明确的结论，为在大动物转基因的检测提供了新依据。 展开更多
关键词 转基因胚 同源重组 PCR
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基质结合区与转基因动物的基因表达 被引量：3
20
作者 卢一凡 邓继先 +1 位作者 肖成祖 马清钧 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第2期109-112,共4页
基质结合区 (MAR)在稳定转染的细胞系中的研究结果显示 ,能缓冲在其侧翼的染色质某些拮抗作用 .这为外源基因在染色体中随机整合的转基因动物研究提供了新的方向 .文章对其在转基因动物中的探索性研究及可能的机理进行综述 .指出在转基... 基质结合区 (MAR)在稳定转染的细胞系中的研究结果显示 ,能缓冲在其侧翼的染色质某些拮抗作用 .这为外源基因在染色体中随机整合的转基因动物研究提供了新的方向 .文章对其在转基因动物中的探索性研究及可能的机理进行综述 .指出在转基因动物中 ,MAR的应用能导致建立独立的基因活性结构域 .它对基因高效表达无疑具有重要作用 .MAR可能是一种新的顺式作用元件 ,与增强子。 展开更多
关键词 转基因动物 基质结合区 基因表达 基因工程
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