酿酒酵母细胞表面工程应用研究新进展 被引量：5

1

作者 肖朝庭 傅衍 田勇 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期812-816,共5页

酿酒酵母表面展示工程是一个新兴的蛋白表达系统,由于它能进行蛋白翻译后修饰,能方便地对表达的蛋白产物进行检测和筛选,近年来应用研究发展迅猛。它在构建全细胞催化剂、抗原/抗体库、生物吸附剂、生物传感器、组合蛋白文库、免疫检测... 酿酒酵母表面展示工程是一个新兴的蛋白表达系统,由于它能进行蛋白翻译后修饰,能方便地对表达的蛋白产物进行检测和筛选,近年来应用研究发展迅猛。它在构建全细胞催化剂、抗原/抗体库、生物吸附剂、生物传感器、组合蛋白文库、免疫检测及亲和纯化中取得了很多新的应用,在蛋白质分子的功能研究与应用中发挥了更加重要的作用。 展开更多

关键词 细胞表面工程 酿酒酵母

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几种基因差异表达筛选技术在动物发育与繁殖中的最新进展 被引量：3

2

作者 肖朝庭 储明星 傅衍 《中国畜牧兽医》 CAS 2006年第4期34-38,共5页

抑制性消减杂交(SSH)、DNA芯片和基因表达系列分析(SAGE)技术都是高效鉴别不同细胞群之间差异表达基因的方法。作者对这3种方法在动物发育与繁殖领域中的最新应用进展作了简要阐述。

关键词 SSH DNA微阵列 SAGE 动物发育与繁殖 差异表达基因

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骨形态发生蛋白及其受体在哺乳动物繁殖中的作用 被引量：4

3

作者 肖朝庭 储明星 傅衍 《中国畜牧兽医》 CAS 2006年第7期9-13,共5页

骨形态发生蛋白(BM P s)属于转化生长因子-β超家族的成员,最初因其能诱导异位骨形成而得名。随着研究的深入,发现BM P s的功能不限于骨的发育和形成,而是涉及几乎全身所有系统,包括调节哺乳动物生长、细胞分化和细胞凋亡,而且越来越多... 骨形态发生蛋白(BM P s)属于转化生长因子-β超家族的成员,最初因其能诱导异位骨形成而得名。随着研究的深入,发现BM P s的功能不限于骨的发育和形成,而是涉及几乎全身所有系统,包括调节哺乳动物生长、细胞分化和细胞凋亡,而且越来越多的研究结果表明,BM P系统在调节雌性和雄性哺乳动物的繁殖中具有至关重要的功能。作者简要介绍了BM P s及其受体的结构与作用机制,并具体介绍了几种BM P s在哺乳动物繁殖中的功能。 展开更多

关键词 骨形态发生蛋白 骨形态发生蛋白受体 哺乳动物繁殖

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5个绵羊品种BMP6基因部分片段的多态及序列分析 被引量：1

4

作者 肖朝庭 狄冉 +5 位作者 储明星 傅衍 方丽 马月辉 李奎 徐作鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1631-1639,共9页

根据GenBank发表的绵羊骨形态发生蛋白6(Bone morphogenetic protein 6,BMP6)基因部分序列所包含的外显子5、6、7和小鼠BMP6基因外显子5、6、7序列设计3对引物,采用PCR-SSCP技术检测BMP6基因外显子5、6和7在小尾寒羊、湖羊、多赛特、特... 根据GenBank发表的绵羊骨形态发生蛋白6(Bone morphogenetic protein 6,BMP6)基因部分序列所包含的外显子5、6、7和小鼠BMP6基因外显子5、6、7序列设计3对引物,采用PCR-SSCP技术检测BMP6基因外显子5、6和7在小尾寒羊、湖羊、多赛特、特克塞尔、考力代5个绵羊品种301个个体中的单核苷酸多态性。结果发现这3对引物的扩增片段在检测的5个品种中均无多态性,说明所检测的BMP6外显子5、6、7序列比较保守。同时克隆了小尾寒羊(695 bp)和济宁青山羊(699 bp)部分BMP6 mRNA以及小尾寒羊BMP6基因外显子3-4的内含子序列和两端部分外显子序列(785 bp)。发现小尾寒羊和济宁青山羊的核苷酸和氨基酸序列差异很小,两者的核苷酸序列同源性高达99.28%,氨基酸序列同源性为98.1%,除济宁青山羊中插入一个丙氨酸外,两者只有4个氨基酸的差异。绵羊与牛、人、小鼠和大鼠的核苷酸同源性分别为97.04%、81.82%、84.68%和85.06%;氨基酸序列同源性分别为99.05%、91.43%、90.48%和92.38%,均大于90%,表明各物种BMP6核苷酸序列虽然差异较大,但氨基酸序列却非常保守。 展开更多

关键词 绵羊 骨形态发生蛋白6基因 PCR-SSCP

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传染性支气管炎病毒疫苗株H52的全基因组克隆与分析 被引量：1

5

作者 肖朝庭 时莉 +3 位作者 宋翥远 刘然 阿合买提.买买提 周继勇 《中国动物传染病学报》 CAS 2009年第2期17-23,共7页

采用RT-PCR方法克隆测定传染性支气管炎病毒（Infections Bronchitis Virus，IBV）疫苗株H52全基因组序列，并与其它已知全基因组序列的我国分离株进行比较分析，以分析我国IBV地方分离株与疫苗株的分子遗传关系。结果表明，H52基因组... 采用RT-PCR方法克隆测定传染性支气管炎病毒（Infections Bronchitis Virus，IBV）疫苗株H52全基因组序列，并与其它已知全基因组序列的我国分离株进行比较分析，以分析我国IBV地方分离株与疫苗株的分子遗传关系。结果表明，H52基因组全长为27630bp（不包括polyA），A＋T含量为61．8％，它与我国IBV分离株全基因组同源性在83．9％～95．2％之间，其中与KQ6的同源性最高（95．2％），与其余株均在88％以下。在基因组内基因的同源性中，以S1、S2与E变异最大，除KQ6外，其余各株（含台湾株）与H52在S1蛋白上的同源性只有72．4％～80．7％，在S2蛋白上的同源性为85．5％～88．1％，E蛋白为82．9％～93．3％。系统进化分析表明，国内分离株，除KQ6外，在进化分支中已独立于H52和其它Massachusetts型衍生毒株。H52与我国地方分离株存在较大的分子遗传差异，这些差异可能导致单纯Massachusetts型疫苗（如H120，H52）不能有效地免疫保护我国的鸡群。 展开更多

关键词 传染性支气管炎病毒 疫苗株H52 克隆

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骨形态发生蛋白-6基因及其在哺乳动物生殖中的作用

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作者 肖朝庭 储明星 傅衍 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2007年第21期47-50,共4页

骨形态发生蛋白-6(BMP-6)是骨形态发生蛋白(BMPs)家族的成员之一,最初研究是发现它具有诱导软骨内骨化、骨折愈合和异位骨形成的活性,但随着研究的逐步深入发现它在动物体内具有非常广泛的作用。本文就它在哺乳动物生殖中的相关研究做... 骨形态发生蛋白-6(BMP-6)是骨形态发生蛋白(BMPs)家族的成员之一,最初研究是发现它具有诱导软骨内骨化、骨折愈合和异位骨形成的活性,但随着研究的逐步深入发现它在动物体内具有非常广泛的作用。本文就它在哺乳动物生殖中的相关研究做一简要总结,初步阐述了BMP-6在哺乳动物与生殖相关的器官中不同细胞类型内的表达格局、信号传递过程及其调控机制、以及BMP-6在调节哺乳动物生殖过程中的作用,并提出一些有待研究的问题。 展开更多

关键词 骨形态发生蛋白-6 生殖 综述

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从分子水平探讨中国东北狍的分类地位 被引量：12

7

作者 张明海 肖朝庭 Koh Hungsun 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期14-19,共6页

国内外对中国狍的分类地位意见不一。本文测定了来自中国东北完达山、小兴安岭、大兴安岭、三江和吉林向海等 5个地区的 15只野生狍的线粒体DNACytb基因 (4 15bp)和来自完达山、三江和吉林向海等 3个地区的 6只野生狍的线粒体控制区部... 国内外对中国狍的分类地位意见不一。本文测定了来自中国东北完达山、小兴安岭、大兴安岭、三江和吉林向海等 5个地区的 15只野生狍的线粒体DNACytb基因 (4 15bp)和来自完达山、三江和吉林向海等 3个地区的 6只野生狍的线粒体控制区部分序列 (76 4bp) ,分析了中国东北狍与西伯利亚狍、欧洲狍的系统进化关系 ,得出中国东北狍与欧洲狍之间mtDNACytb和mtDNA控制区序列差异平均值分别为 4 12 %和 4 89% ,达到了鹿类动物的种间差异水平 ;而与西伯利亚狍的mtDNACytb和mtDNA控制区序列差异平均值仅为 1 6 1%和 2 4 4 % ,只达到亚种水平。结合形态学的差异 ,本文认为中国东北的狍与欧洲狍为两个独立的物种 ,与西伯利亚狍为同种。并提出中国东北狍与欧洲狍的分歧时间约在 2 0 0万年前 ,与西伯利亚狍的分歧时间约在 展开更多

关键词 分类地位 DNA 控制区 序列差异 系统进化关系 中国东北 物种 分子水平 线粒体 形态学

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传染性支气管炎病毒结构蛋白研究进展 被引量：3

8

作者 宋翥远 卿上田 +1 位作者 肖朝庭 黎满香 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第6期100-102,共3页

传染性支气管炎是禽类最重要疾病的之一,给家禽业造成了重大的经济损失。基因突变、重组和免疫压力等因素都可能引起鸡传染性支气管炎病毒发生遗传变异,给该病的预防和控制带来了很大的困难。近年来国内外学者在分子生物学方面的研究不... 传染性支气管炎是禽类最重要疾病的之一,给家禽业造成了重大的经济损失。基因突变、重组和免疫压力等因素都可能引起鸡传染性支气管炎病毒发生遗传变异,给该病的预防和控制带来了很大的困难。近年来国内外学者在分子生物学方面的研究不断深入,在病毒基因组的结构与功能,以及结构蛋白的研究方面取得了重要进展。论文就分子生物学领域对IBV结构蛋白的结构特性及生物学功能等方面的研究概况做一综述,以揭示IBV的致病机理和分子变异机制,为有效防控IB提供科学依据。 展开更多

关键词 传染性支气管炎 S蛋白 N蛋白 M蛋白

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快速鉴定猪肉和牛肉多重PCR方法的建立及初步应用 被引量：9

9

作者 李杰 乔绪稳 +4 位作者 余兴龙 李润成 肖朝庭 刘国华 蒋大良 《湖南畜牧兽医》 2011年第2期13-15,共3页

建立了快速有效地鉴定猪肉和牛肉的多重PCR方法。根据GenBankTM登陆的猪和牛的线粒体基因序列设计特异性引物,通过PCR条件优化建立起多重PCR方法,并评价该方法的敏感性和特异性。结果表明,该多重PCR方法能特异性扩增到目的大小的牛和猪... 建立了快速有效地鉴定猪肉和牛肉的多重PCR方法。根据GenBankTM登陆的猪和牛的线粒体基因序列设计特异性引物,通过PCR条件优化建立起多重PCR方法,并评价该方法的敏感性和特异性。结果表明,该多重PCR方法能特异性扩增到目的大小的牛和猪线粒体基因片段;该方法不能扩增羊、鸡、狗等8种常见动物线粒体基因组片段;该方法最低能检测到牛DNA9.8×101fg/μ L和猪DNA6.7×101fg/μ L;能检测出市场上猪肉和牛肉商品中的假冒产品。该方法具有高度的特异性和敏感性,能够快速鉴别检测猪肉和牛肉商品。 展开更多

关键词 多重PCR 牛肉 猪肉 检测

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猪星状病毒2型PCR检测分型方法的建立及初步应用 被引量：2

10

作者 罗璋 罗季委 +5 位作者 李海锦 贺巨炬 彭旺 李润成 余兴龙 肖朝庭 《湖南畜牧兽医》 2016年第2期39-41,共3页

根据GenBank登的猪星状病毒2型(PAstV2)序列,设计1对引物。通过优化反应条件,首次在湖南地区检测到PAstV2型病毒。用该方法通过提取样品RNA,采用RT-PCR进行扩增,得到一条预期的特异性条带(243bp),将扩增产物进行测序分析,结果表明该序列... 根据GenBank登的猪星状病毒2型(PAstV2)序列,设计1对引物。通过优化反应条件,首次在湖南地区检测到PAstV2型病毒。用该方法通过提取样品RNA,采用RT-PCR进行扩增,得到一条预期的特异性条带(243bp),将扩增产物进行测序分析,结果表明该序列与PAstV2型的参考序列同源性为96%。同时,用该引物检测可引起腹泻的PEDV、TGEV、CSFV和PRRSV四种病毒RNA,RT-PCR结果均为阴性。该RT-PCR的敏感性试验结果表明其最高敏感度为400 pg/μL。采用该方法对湖南境内78份猪肠道和粪便样品进行检测,发现PAstV2型的感染率达到11.5%(9/78)。结果表明该方法可以应用于临床PAstV2检测。 展开更多

关键词 猪星状病毒 基因型 PCR PAstV2

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猪呼吸道、消化道内细菌质粒的提取

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作者 胡辉 余兴龙 +3 位作者 李杰 肖朝庭 李润成 李斌 《湖北畜牧兽医》 2011年第9期10-12,共3页

使用多种选择培养基,通过菌落形态、革兰氏染色、镜检和生化反应,对猪呼吸道、消化道中常规菌群进行初步分类,并使用碱变性法提取质粒。结果从健康猪呼吸道和消化道中分离培养出66株菌株(兼性厌氧菌),获得了长沙地区猪呼吸道、消化道中... 使用多种选择培养基,通过菌落形态、革兰氏染色、镜检和生化反应,对猪呼吸道、消化道中常规菌群进行初步分类,并使用碱变性法提取质粒。结果从健康猪呼吸道和消化道中分离培养出66株菌株(兼性厌氧菌),获得了长沙地区猪呼吸道、消化道中菌群的基本数据,为相关基础研究和模型应用提供了重要的参考数据;获得了丰富的质粒DNA库,为进一步针对质粒所具有的耐药基因相关研究打下基础。 展开更多

关键词 猪 呼吸道 消化道 常规菌群 分离鉴定 质粒提取

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我国部分地区1996～2008年传染性支气管炎病毒分离株膜蛋白基因的遗传变异与系统进化分析 被引量：4

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作者 时莉 肖朝庭 +3 位作者 宋翥远 张秀美 阿合买提.买买提 周继勇 《中国动物传染病学报》 CAS 2009年第2期31-37,共7页

1996-2008年从我国不同地区分离30株传染性支气管炎病毒（Infectious Bronchitis Viruses，IBV）野毒株的M基因，采用RT-PCR方法克隆测定所分离的野毒株和澳大利亚T株的M基因序列，利用生物信息学软件与GenBank中公布的部分国内外IBV毒... 1996-2008年从我国不同地区分离30株传染性支气管炎病毒（Infectious Bronchitis Viruses，IBV）野毒株的M基因，采用RT-PCR方法克隆测定所分离的野毒株和澳大利亚T株的M基因序列，利用生物信息学软件与GenBank中公布的部分国内外IBV毒株的M基因序列进行比较分析，研究我国IBV的分子流行学特点和分子遗传变异规律。结果发现所测毒株M基因具有4种不同长度的开放阅读框：669bp、672bp、678bp和681bp，分别编码222、223、225和226个氨基酸的多肽，这些长度的差异是由5′端的核苷酸插入或缺失造成的。30个IBV分离株间的同源性在89．5％～100％之间。以疫苗株H120氨基酸位置为参照，在被比较的73株IBVM蛋白中发现62个位点存在变异，其中以2～5、10～16、44～46、217～222等4个区域氨基酸取代率较高。系统进化分析显示，被比较的73个IBV毒株分为5个进化群，我国的IBV分属于其中的4个群，其中第一群和第四群与我国所使用的疫苗病毒株相距较远。同时发现部分近年的分离株与10多年前分离株具有很近遗传进化关系。从M基因看，在我国出现了多种基因型IBV共存的现象，分离株与疫苗株的遗传差异提示我们需要对疫苗的选用做出重新评估。 展开更多

关键词 传染性支气管炎病毒 膜蛋白基因 分子流行病学 遗传变异

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浅议当前野生东北虎的保护价值与策略 被引量：1

13

作者 王永庆 肖朝庭 +1 位作者 崔多英 姜广顺 《野生动物》 2003年第3期3-5,共3页

被誉为森林之王的虎大约起源于100万年前的中国南部,然后逐步辐射演化为8个亚种,即巴厘虎、爪哇虎、里海虎、苏门达腊虎、东北虎(西伯利亚虎)、华南虎、印支虎和孟加拉虎.前三种已经灭绝.东北虎是现存虎的所有亚种中体型最大者,历史上... 被誉为森林之王的虎大约起源于100万年前的中国南部,然后逐步辐射演化为8个亚种,即巴厘虎、爪哇虎、里海虎、苏门达腊虎、东北虎(西伯利亚虎)、华南虎、印支虎和孟加拉虎.前三种已经灭绝.东北虎是现存虎的所有亚种中体型最大者,历史上广泛分布于中国东北、俄罗斯远东地区和朝鲜半岛.自19世纪末至20世纪初,东北虎的分布区开始逐渐退缩,在中国首先是由南向北,然后是由西向东退缩. 展开更多

关键词 野生东北虎 保护价值 生物多样性 自然保护区 补偿机制

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猪札幌病毒VP1基因的表达及ELISA抗体检测方法的建立 被引量：1

14

作者 李润成 刘国华 +4 位作者 黄泽彬 丁建 汪镇南 肖朝庭 余兴龙 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期495-500,共6页

为了在大肠杆菌中表达猪札幌病毒VP1基因,并以纯化的重组蛋白为抗原建立猪札幌病毒血清抗体ELISA检测方法。采用RT-PCR技术扩增VP1基因,并将其克隆到pMD18-T载体中,再将所克隆的衣壳蛋白的编码序列亚克隆到表达载体pET-28a(+)中,将成功... 为了在大肠杆菌中表达猪札幌病毒VP1基因,并以纯化的重组蛋白为抗原建立猪札幌病毒血清抗体ELISA检测方法。采用RT-PCR技术扩增VP1基因,并将其克隆到pMD18-T载体中,再将所克隆的衣壳蛋白的编码序列亚克隆到表达载体pET-28a(+)中,将成功构建的原核表达质粒pETSAVCAP转化大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达。用纯化的VP1蛋白作为抗原建立了猪札幌病毒血清抗体间接ELISA检测方法并初步用于临床样品的检测。结果显示,猪札幌病毒VP1基因可在大肠杆菌中稳定、高效地表达,Western-blot分析表明该重组蛋白具有良好的反应原性。经对反应条件进行优化,确定间接ELISA的抗原最佳包被浓度为0.5μg/mL,且不与其他常见猪病的阳性血清发生交叉反应,建立的ELISA方法具有较好的敏感性、特异性和重复性。通过对从多个省份收集的490份猪血清样品进行检测,阳性率为65.31%。表明,以大肠杆菌表达的猪札幌病毒VP1重组蛋白为抗原建立的间接ELISA方法可以用于猪札幌病毒抗体的检测。 展开更多

关键词 猪札幌病毒 VP1基因 表达 酶联免疫吸附试验 抗体 检测

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湖南省禽白血病病毒分子流行病学调查及env基因序列分析 被引量：10

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作者 吕孙良 张慧慧 +3 位作者 胡文琴 黎洁玉 宋雅婷 肖朝庭 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1936-1941,1975,共7页

为了解禽白血病病毒(ALV)在湖南省各禽类养殖场的感染情况,于2018年1月至2019年1月采集湖南省不同地区21个养殖场的156份组织与血清样品。分别设计针对ALV 5′非翻译区(5′UTR)的检测引物和env基因近全长扩增引物,通过RT-PCR首先用检测... 为了解禽白血病病毒(ALV)在湖南省各禽类养殖场的感染情况,于2018年1月至2019年1月采集湖南省不同地区21个养殖场的156份组织与血清样品。分别设计针对ALV 5′非翻译区(5′UTR)的检测引物和env基因近全长扩增引物,通过RT-PCR首先用检测引物对样品进行检测,然后扩增阳性样品ALV env基因全长并测序分析。结果显示,19个养殖场检测出E亚群ALV(ALV-E),其env基因与GenBank中ALV-E的核苷酸序列同源性为99.38%~99.90%;1个养殖场检测出ALV-J,其env基因推导的氨基酸序列与GenBank中ALV-J的氨基酸序列同源性最高为92.63%,并且在该场同一样品中同时检出ALV-E和ALV-J;1个野鸡养殖场检测出ALV-F,其env基因推导的氨基酸序列与已发表的ALV-F的氨基酸同源性为88.69%;同时检测出2株新型的ALV,其env基因推导的氨基酸序列与已发表的A、B、C、D、E、F、J和K亚群的氨基酸同源性为44.68%~58.42%。结果表明,ALV-E在湖南省禽养殖场普遍存在,并首次在我国养殖野鸡中检测出ALV-F,而且在野鸡中发现了很可能是ALV新亚群的2株病毒。本试验为ALV在湖南禽类养殖场的流行情况研究提供了依据。 展开更多

关键词 禽白血病病毒 ENV基因 序列分析

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