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兔主动脉血管内皮细胞原代改良提取法 被引量：3
1
作者 肖紫春 谭金海 周益 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第7期1019-1024,共6页
背景:目前血管内皮细胞原代获取方法中,使用较多的就是大动脉血管内皮细胞培养及微动脉血管内皮细胞培养,传统多采用酶消化法及组织贴壁法,所获得血管内皮细胞数量和纯度已经不能满足科研实验的需要。目的:探讨兔主动脉血管内皮细胞的... 背景:目前血管内皮细胞原代获取方法中,使用较多的就是大动脉血管内皮细胞培养及微动脉血管内皮细胞培养,传统多采用酶消化法及组织贴壁法,所获得血管内皮细胞数量和纯度已经不能满足科研实验的需要。目的:探讨兔主动脉血管内皮细胞的原代的改良提取及鉴定方法。方法:切取一段兔主动脉,甲组采用改良提取法培养血管内皮细胞,显微器械剥离出血管内层,再用酶消化法获得单个原代细胞,以内皮细胞培养液培养;乙组采用组织贴壁法生长,整个血管内面贴于培养皿中,同时于体积分数5%CO_2,37℃温箱中孵育1 h。分别获得2组细胞沉淀并进行体外培养。采用显微镜观察细胞形态,通过免疫组织化学染色检测CD31、Ⅷ因子及Vimentin蛋白进行血管内皮细胞鉴定,并与组织贴壁生长法培养对比。结果与结论:采用改良提取法得出的内皮细胞纯度比组织贴壁生长高,数量更多。免疫组织化学鉴定结果CD31(+),Ⅷ因子(+),Vimentin蛋白(-)。结果表明此法可以更容易获得纯度较高,数量更多的血管内皮细胞,可操作性及实用性较强。 展开更多
关键词 主动脉 血管 内皮细胞 细胞 培养的 组织工程 组织构建 血管内皮细胞 兔主动脉 酶消化法 改良提取 湖北省自然科学基金
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不同年龄段股骨头坏死267例手术治疗分析 被引量：4
2
作者 肖紫春 谭金海 +1 位作者 陶圣祥 周益 《临床外科杂志》 2016年第2期157-158,共2页
股骨头坏死（osteonecrosisofthefemoralhead，ONFH）又称股骨头缺血性坏死或股骨头无菌性坏死，主要是由于各种病因导致股骨头血供的破坏，以致股骨头缺血坏死，临床上主要表现为髋关节酸胀疼痛，髋关节内收外展等活动障碍，跛行、下... 股骨头坏死（osteonecrosisofthefemoralhead，ONFH）又称股骨头缺血性坏死或股骨头无菌性坏死，主要是由于各种病因导致股骨头血供的破坏，以致股骨头缺血坏死，临床上主要表现为髋关节酸胀疼痛，髋关节内收外展等活动障碍，跛行、下蹲困难等症状，严重影响患者的生活质量。我们对267例股骨头坏死患者手术治疗方法和结果进行分析。 展开更多
关键词 股骨头坏死 手术治疗 疗效分析
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前臂皮神经与浅静脉解剖学研究 被引量：3
3
作者 施娣 刘鸿 +3 位作者 刘雷 肖紫春 阿米特 简超 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期3132-3134,共3页
目的解剖观测前臂浅静脉与皮神经的形态学参数，为临床应用提供解剖学基础。方法通过对40例成人上肢标本进行解剖，观察前臂主要浅静脉与皮神经的起止、分支及伴行情况，并对其进行测量。解剖及测量数据采用SPSS17．0统计软件分析。结... 目的解剖观测前臂浅静脉与皮神经的形态学参数，为临床应用提供解剖学基础。方法通过对40例成人上肢标本进行解剖，观察前臂主要浅静脉与皮神经的起止、分支及伴行情况，并对其进行测量。解剖及测量数据采用SPSS17．0统计软件分析。结果前臂外侧皮神经与头静脉的距离为（0．83±0．14）cm，前臂外侧皮神经距离肱骨外上髁上方（5．47±2．30）cm，前臂内侧皮神经与贵要静脉之间的距离为（1．53±0．29）cm，前臂内侧皮神经肱骨内上髁上方（7．13±3．52）cm，前臂背侧皮神经与头静脉的距离为（2．81±0．52）cm，前臂背侧皮神经在肱骨内、外上髁平面上方（4．21±0．56）cm。桡神经浅支与头静脉距离为（0．26±0．11）cm，桡神经浅支穿出点与桡骨茎突上方的距离为（8．84±1．24）cm，尺神经手背支与贵要静脉相距（0．57±0．32）cm，该神经穿出点在尺骨茎突上方（2．83±0．89）cm。结论前臂皮神经与浅静脉伴行关系恒定，可用于指导皮神经及浅静脉相关的临床治疗及应用。 展开更多
关键词 前臂浅静脉 皮神经 解剖
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果胶季铵盐衍生物与兔骨髓间充质干细胞生物相容性研究 被引量：1
4
作者 刘鸿 陶圣祥 +3 位作者 刘雷 肖紫春 刘国狮 阿米特 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期2790-2791,共2页
目的 探讨果胶季铵盐衍生物与骨髓间充质干细胞（BMSCs）的生物相容性.方法 体外培养兔BMSCs,将BMSCs与果胶季铵盐衍生物复合进行体外培养.分别于第3、6、9天检测细胞与材料的黏附性、细胞增殖活性及行碱性磷酸酶（ALP）活性测定.结果 B... 目的 探讨果胶季铵盐衍生物与骨髓间充质干细胞（BMSCs）的生物相容性.方法 体外培养兔BMSCs,将BMSCs与果胶季铵盐衍生物复合进行体外培养.分别于第3、6、9天检测细胞与材料的黏附性、细胞增殖活性及行碱性磷酸酶（ALP）活性测定.结果 BMSCs能较好的黏附于胶季铵盐衍生物上;增殖检测结果显示,在第3天（实验组0.281±0.003、对照组0.204±0.013）、第6天（实验组0.513 ±0.016、对照组0.583±0.031）时,实验组与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）,第9天（实验组1.108±0.124、对照组0.645 ±0.049）时两组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）;在各时间点,ALP活性测定结果实验组明显高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 果胶季铵盐衍生物与BMSCs有较好的生物相容性,可作为组织工程载体材料应用于骨缺损的修复. 展开更多
关键词 组织工程 骨髓间充质干细胞 果胶季铵盐衍生物 生物相容性
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腕关节三角软骨板的测量及临床意义 被引量：2
5
作者 陈博 刘鸿 +5 位作者 刘雷 陶圣祥 余国荣 阿米特 简超 肖紫春 《医学新知》 CAS 2014年第4期239-240,244,共3页
目的通过解剖测量，了解腕关节三角软骨板主要的形态参数，为临床应用提供解剖学基础。方法通过对40例成人腕骨标本进行解剖，解剖后观察三角软骨板的大致形态，对其直径厚度及其与周围组织的距离进行测量。结果对标本进行解剖及测量后... 目的通过解剖测量，了解腕关节三角软骨板主要的形态参数，为临床应用提供解剖学基础。方法通过对40例成人腕骨标本进行解剖，解剖后观察三角软骨板的大致形态，对其直径厚度及其与周围组织的距离进行测量。结果对标本进行解剖及测量后得出数据采用SPSS20．0统计分析软件分析得出结果为：腕关节三角软骨板背侧的厚度为（5．38±0．56）mm，尺侧缘厚度为（6．45±0．32）mm，桡侧缘厚度为（2．58±0．48）mm，掌测的厚度为（7．49±1．27）mm，中央最薄处厚度为（1．05±0．20）mm，掌背侧直径（17．62±3．56）mm，尺桡侧直径为（13．04±2．67）mm。结论通过解剖测量得出了三角软骨板较为完整的数据；临床应用中按照三角软骨板测量数据及解剖特点进行诊断和治疗，可能有助于减少其损伤的发生。 展开更多
关键词 腕关节三角软骨板 测量 临床意义
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Ras相关区域家族1基因启动子去甲基化对骨肉瘤细胞生物学行为的影响
6
作者 张勇 陶圣祥 +3 位作者 刘国狮 刘鸿 肖紫春 刘雷 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1469-1471,共3页
目的 检测MG-63骨肉瘤细胞Ras相关区域家族1（RASSF1）基因启动子甲基化,并观察5-氮杂胞苷去甲基化对其生物学行为的影响。方法 采用亚硫酸盐测序法（BSP）检测MG-63骨肉瘤细胞RASSF1基因启动子甲基化状态,比较5-氮杂胞苷处理前后RASSF... 目的 检测MG-63骨肉瘤细胞Ras相关区域家族1（RASSF1）基因启动子甲基化,并观察5-氮杂胞苷去甲基化对其生物学行为的影响。方法 采用亚硫酸盐测序法（BSP）检测MG-63骨肉瘤细胞RASSF1基因启动子甲基化状态,比较5-氮杂胞苷处理前后RASSF1甲基化状态、基因表达、细胞增殖曲线、细胞周期和凋亡的差异。结果 5-氮杂胞苷处理前RASSF1基因启动子第13、第16 CG位点甲基化率为40.0%,第415 CG位点甲基化率为60.0%,处理后的MG-63骨肉瘤细胞RASSF1基因启动子第116 CG位点甲基化率为0。正常未处理MG-63骨肉瘤细胞RASSF1基因mRNA和蛋白质表达处于低表达状态,5-氮杂胞苷处理后RASSF1基因mRNA和蛋白质表达显著增加,显著高于处理前。5-氮杂胞苷处理后的细胞增殖速度减慢,D1-D8细胞吸光度值显著低于正常未处理的细胞。5-氮杂胞苷处理后的MG-63骨肉瘤细胞G0/G1,期和凋亡率显著高于处理前细胞（P〈0.05）,S期、G2/M期和增殖指数（PI）显著低于处理前细胞（P〈0.05）。结论 MG-63骨肉瘤细胞RASSF1基因启动子处于甲基化和表达抑制状态,5-氮杂胞苷能逆转RASSF1基因启动子甲基化状态,使基因重新表达而抑制细胞增殖并促进其凋亡。 展开更多
关键词 骨肉瘤 MG-63 Ras相关区域家族1 甲基化 生物学行为
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转化生长因子-β2对骨髓间充质干细胞体外向成骨细胞分化的影响 被引量：3
7
作者 朱磊 谭金海 肖紫春 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1983-1985,共3页
目的 观察转化生长因子（TGF）-β2在体外诱导骨髓间充质干细胞（BMSCs）向成骨细胞分化能力.方法 取第3代BMSCs接种于3.5×103个/孔密度培养板,分为3组：A、B、C组,A组不做任何处理,B、C组培养基中分别添加5 μg/L TGF-β1、5μg/L... 目的 观察转化生长因子（TGF）-β2在体外诱导骨髓间充质干细胞（BMSCs）向成骨细胞分化能力.方法 取第3代BMSCs接种于3.5×103个/孔密度培养板,分为3组：A、B、C组,A组不做任何处理,B、C组培养基中分别添加5 μg/L TGF-β1、5μg/L TGF-β2,每孔200μl,每组4孔.7d对3个实验组行碱性磷酸酶（ALP）活性检测和Western blot检测Collagen Ⅰ表达,第3代BMSCs以5×107/L细胞浓度接种于6孔培养板,每组1板,分组添加方式同前,21d细胞爬片行Von kossa染色.结果 A、B、C组第7天的ALP活力值分别为1.15±0.16、4.26±0.39、4.34±0.14,各组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）,ALP的染色面积及深度、Von kossa染色钙化结节C组强于B组和A组,B组强于A组;Collagen Ⅰ表达C组高于B组和A组,B组高于A组（P＜0.05）.结论 在一定条件下,TGF-β2体外诱导BMSCs成骨能力较转化生长因子-β1强. 展开更多
关键词 转化生长因子-Β2 转化生长因子-Β1 骨髓间充质干细胞 成骨细胞
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骨组织工程修复骨不连的治疗进展
8
作者 肖紫春 谭金海 《医学新知》 CAS 2015年第2期121-124,共4页
随着交通事故等高能量损伤所致的复杂的四肢长骨骨折日益增多，内固定与外固定应用普遍，骨不连发生率高达5%~10%［1］，尤其以四肢长骨骨干骨折多见。对于骨科医生来说，晚期骨不连的治疗已成为骨科医生所面临的一大难题。按照骨科愈... 随着交通事故等高能量损伤所致的复杂的四肢长骨骨折日益增多，内固定与外固定应用普遍，骨不连发生率高达5%~10%［1］，尤其以四肢长骨骨干骨折多见。对于骨科医生来说，晚期骨不连的治疗已成为骨科医生所面临的一大难题。按照骨科愈合标准，骨板形成塑形期需要8~12周，超过这个阶段称为延迟愈合期，超过6个月即为骨不连。2004年 Rodriguez- Merchant 对骨不连的定义是：在6~8个月内愈合失败者通常可以诊断。骨折常常因为粉碎性和感染性等因素造成部分骨碎片丢失、骨缺损，进而造成骨不连，严重影响患者的生活质量。 展开更多
关键词 骨不连 骨组织工程
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钙蛋白酶抑制剂ALLN对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响 被引量：1
9
作者 刘国狮 陶圣祥 +2 位作者 肖紫春 刘雷 刘鸿 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期2518-2520,共3页
目的 观察钙蛋白酶抑制剂ALLN对骨肉瘤细胞株U2OS、MG63增殖和凋亡的影响.方法 培养骨肉瘤细胞株U2OS和MG63,采用浓度分别为0.1、1.0、10.0、100.0、1 000.0μmol/L的ALLN处理,噻唑蓝（MTT）法检测ALLN对于骨肉瘤细胞株U2OS和MG63体外... 目的 观察钙蛋白酶抑制剂ALLN对骨肉瘤细胞株U2OS、MG63增殖和凋亡的影响.方法 培养骨肉瘤细胞株U2OS和MG63,采用浓度分别为0.1、1.0、10.0、100.0、1 000.0μmol/L的ALLN处理,噻唑蓝（MTT）法检测ALLN对于骨肉瘤细胞株U2OS和MG63体外生长的抑制作用,流式细胞术和Western blot检测ALLN的凋亡诱导作用,克隆形成实验检测ALLN对骨肉瘤细胞株U2OS和MG63克隆形成能力的影响.结果 ALLN对于骨肉瘤细胞株U2OS和MG63有明显的生长抑制作用,U2OS和MG63的半数抑制浓度均约为10 μmol/L,ALLN作用于骨肉瘤细胞株U2OS和MG63后可明显诱导其细胞凋亡,同时ALLN也可降低两种细胞的克隆形成能力.结论 ALLN可明显抑制骨肉瘤细胞株的增殖,促进细胞凋亡. 展开更多
关键词 ALLN 骨肉瘤 细胞增殖 细胞凋亡
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