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牛传染性鼻气管炎gE基因TaqMan-MGB与SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立及应用
1
作者 袁浩芳 朱晓晖 +4 位作者 张雨 李焱 李可伟 胡剑武 李家奎 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第11期110-116,共7页
为建立检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的荧光定量检测方法,本研究根据IBRV gE基因的序列设计了相应的探针和引物,分别建立TaqMan-MGB探针和SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,并对2种方法进行了综合比较。结果显示,TaqMan-MGB探针和SYBR Gr... 为建立检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的荧光定量检测方法,本研究根据IBRV gE基因的序列设计了相应的探针和引物,分别建立TaqMan-MGB探针和SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,并对2种方法进行了综合比较。结果显示,TaqMan-MGB探针和SYBR GreenⅠ定量荧光PCR方法的灵敏度分别达到1.0×10^(1) copies/μL和1.0×10^(2) copies/μL;2种荧光定量方法对除IBRV的其他牛病毒和细菌检测结果均为阴性;重复性检测中变异系数均小于2.3%;检测了130份来自西藏的牦牛样品,2种荧光定量PCR阳性检出率均为100%。以上结果表明,2种荧光定量方法都可用于检测IBRV,且TaqMan-MGB荧光定量PCR敏感性高于SYBR GreenⅠ荧光定量PCR。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎病毒 TaqMan-MGB荧光定量PCR SYBR GreenⅠ荧光定量PCR
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非洲猪瘟病毒PCR检测方法的建立 被引量：7
2
作者 李云灿 胡剑武 +1 位作者 赵俊龙 李家奎 《动物医学进展》 北大核心 2021年第5期5-8,共4页
非洲猪瘟给全球养猪业造成了严重危害,需要建立更加敏感的PCR检测方法。根据非洲猪瘟病毒(ASFV)的VP72基因序列,设计PCR引物,建立了ASFV PCR检测方法。以合成的VP72基因片段为阳性对照,进行敏感性试验和特异性试验。同时与世界动物卫生... 非洲猪瘟给全球养猪业造成了严重危害,需要建立更加敏感的PCR检测方法。根据非洲猪瘟病毒(ASFV)的VP72基因序列,设计PCR引物,建立了ASFV PCR检测方法。以合成的VP72基因片段为阳性对照,进行敏感性试验和特异性试验。同时与世界动物卫生组织(OIE)推荐的PCR引物进行对比试验。结果显示,建立的方法可用于ASFV检测,且对其他病毒检测时无交叉反应,特异性良好;敏感性可达到10-8,比OIE推荐的方法高10倍,为ASFV检测提供了一种新的PCR方法。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 聚合酶链反应 VP72基因
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林芝市两区县藏猪流行性腹泻血清学调查 被引量：1
3
作者 胡剑武 周海娟 泽仁群西 《湖北畜牧兽医》 2019年第5期31-32,共2页
为了解西藏市猪流行性腹泻(PED)流行病学情况,采用双抗原夹心酶联免疫法(ELISA)对采集的林芝市巴宜区和米林县364份藏猪血清进行检测。结果表明:藏猪的PEDV抗体平均阳性率为39.56%,其中公猪血清抗体阳性率为40.63%,母猪血清抗体阳性率为... 为了解西藏市猪流行性腹泻(PED)流行病学情况,采用双抗原夹心酶联免疫法(ELISA)对采集的林芝市巴宜区和米林县364份藏猪血清进行检测。结果表明:藏猪的PEDV抗体平均阳性率为39.56%,其中公猪血清抗体阳性率为40.63%,母猪血清抗体阳性率为38.37%。从性别上公猪和母猪的抗体阳性率无显著性差异(P>0.05),但巴宜区(26.37%)和米林县(52.74%)PEDV抗体阳性率存在显著性差异(P<0.05)。说明林芝部分地区藏猪流行性腹泻感染普遍,应注意防止该病的发生。 展开更多
关键词 藏猪 猪流行性腹泻(PED) ELISA
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阻断ELISA在小反刍兽疫抗体监测的应用 被引量：2
4
作者 洛松西热 王玉恒 +3 位作者 吉哈利 于子淇 胡剑武 旦增卓玛 《今日畜牧兽医》 2022年第8期5-5,8,共2页
旨在评价阻断ELISA在小反刍兽疫抗体监测的稳定性。本试验选取20份免疫羊血清,利用阻断ELISA抗体检测试剂盒进行抗体检测。结果显示20份免疫羊血清检测均为小反刍兽疫抗体阳性,其中平均吸光值在0.10~0.19,平均阻断率维持在80%~90%。第... 旨在评价阻断ELISA在小反刍兽疫抗体监测的稳定性。本试验选取20份免疫羊血清,利用阻断ELISA抗体检测试剂盒进行抗体检测。结果显示20份免疫羊血清检测均为小反刍兽疫抗体阳性,其中平均吸光值在0.10~0.19,平均阻断率维持在80%~90%。第一次检测与第二次检测的阻断率差异性较小,进一步表明阻断ELISA检测方法在小反刍兽疫抗体监测中较稳定。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附 抗体 小反刍兽疫
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样品不同运输时长对小反刍兽疫病毒抗体检测结果的影响
5
作者 洛松西热 王玉恒 +3 位作者 吉哈利 于子淇 胡剑武 旦增卓玛 《甘肃畜牧兽医》 2022年第3期30-33,共4页
目的:探究泡沫箱的保温效果及运输时长对血清检测结果的影响。方法:选取10份免疫羊血清样品,放置于模拟4℃、25℃和37℃等外界环境温度内,在不同时段测定泡沫箱内温度,并利用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定羊血清样品的小反刍兽疫病毒抗... 目的:探究泡沫箱的保温效果及运输时长对血清检测结果的影响。方法:选取10份免疫羊血清样品,放置于模拟4℃、25℃和37℃等外界环境温度内,在不同时段测定泡沫箱内温度,并利用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定羊血清样品的小反刍兽疫病毒抗体。结果显示外界温度为4℃时,泡沫箱内温度会维持在6℃以下;外界温度为25℃时,在24 h内泡沫箱内温度会维持10℃以下;外界温度为37℃时,在8 h内泡沫箱内温度会维持15℃以下。随着运输时长的增加,4℃试验组的平均阻断率基本维持不变;在运输时长超过48 h时,25℃试验组的平均阻断率会降低2%~3%;在运输时长超过24 h时,37℃试验组的平均阻断率会降低2%~5%。结论:外界环境温度与泡沫箱内温度密切相关,而且血清样品的运输时长不宜超过12 h,才能保证检测结果的准确性。 展开更多
关键词 运输时长 温度 小反刍兽疫 抗体检测
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为牧者祈祷什么?
6
作者 胡剑武 《天风》 2019年第8期36-37,共2页
在一些信徒的心目中,牧者为信徒祷告是合理的,而信徒为牧者祷告是不配的。然而,作为牧者的我们,自己心中却十分清楚,我们比众人更软弱,更需要代祷!一位牧师在医院看病时,遇到一位信主不久的信徒,他惊讶地说:“啊?牧师你怎么也会生病啊!... 在一些信徒的心目中,牧者为信徒祷告是合理的,而信徒为牧者祷告是不配的。然而,作为牧者的我们,自己心中却十分清楚,我们比众人更软弱,更需要代祷!一位牧师在医院看病时,遇到一位信主不久的信徒,他惊讶地说:“啊?牧师你怎么也会生病啊!”在某些信徒眼里,牧者应该是远离世俗、清心寡欲的,是知识渊博、知书达理的,是大有口才和胆量的,是性情温和、善解人意的,是安静聆听、解惑答疑的……于是,他们一有问题与困难就找牧者倾诉、解答与代祷。然而,牧者与信徒一样,也是有血有肉的凡人,并非超人,更非救主(参雅5:17)。 展开更多
关键词 祈祷 知识渊博 善解人意 信徒 祷告 牧师 软弱 寡欲
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