基于TLR2/NF-κB信号通路探讨平喘方及拆方改善哮喘小鼠气道重塑作用机制

1

作者 沈世平 杨艳 +5 位作者 薛征 刘亚尊 胡逸中 周欢 韩兆鹏 赵晓曼 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2023年第12期129-134,共6页

目的基于TLR2/NF-κB信号通路研究平喘方及拆方改善卵清蛋白诱导的哮喘小鼠气道重塑的作用机制。方法将75只SPF级BALB/c雄性小鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组、平喘方组和平喘祛瘀方组,每组15只。除空白组外,其余组小鼠于第1日和... 目的基于TLR2/NF-κB信号通路研究平喘方及拆方改善卵清蛋白诱导的哮喘小鼠气道重塑的作用机制。方法将75只SPF级BALB/c雄性小鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组、平喘方组和平喘祛瘀方组,每组15只。除空白组外,其余组小鼠于第1日和第14日采用卵清蛋白联合氢氧化铝凝胶腹腔注射致敏,第21~27日连续予5%卵清蛋白雾化激发哮喘,每次雾化激发1 h后灌胃相应药液,连续7 d,空白组和模型组予等量蒸馏水灌胃。末次给药24 h后取材,HE染色观察小鼠肺组织病理变化,Masson染色观察肺组织支气管周围胶原纤维沉积,RT-qPCR检测肺组织平滑肌肌球蛋白重链(SM-MHC)、钙调蛋白(Calponin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Toll样受体2(TLR2)、核因子(NF)-κB抑制因子α(IκBα)、NF-κBp65 mRNA表达,Western blot检测肺组织纤维连接蛋白1(FN1)、E钙黏蛋白(E-cadherin)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、TLR2、IκBα、NF-κBp65蛋白表达。结果与空白组比较,模型组小鼠支气管管腔狭窄,炎性浸润明显,肺间质可见大量胶原纤维沉积,肺组织SM-MHC、Calponin、IκBαmRNA表达显著降低(P<0.01),α-SMA、TLR2、NF-κBp65 mRNA表达显著升高(P<0.01),FN1、CollagenⅠ、TLR2、NF-κBp65蛋白表达显著升高(P<0.01),E-cadherin、IκBα蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,地塞米松组、平喘方组及平喘祛瘀方组小鼠肺组织病理损伤减轻,炎性浸润及胶原纤维沉积减少,肺组织SM-MHC、Calponin、IκBαmRNA表达显著升高(P<0.01,P<0.05),α-SMA、TLR2、NF-κBp65 mRNA表达显著降低(P<0.01,P<0.05),FN1、CollagenⅠ、TLR2、NF-κBp65蛋白表达显著降低(P<0.01,P<0.05),E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.01),地塞米松组IκBα蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论平喘方及拆方能明显改善哮喘小鼠气道重塑,其机制可能与抑制TLR2/NF-κB信号通路相关。 展开更多

关键词 哮喘 平喘方 平喘祛瘀方 TLR2/NF-κB信号通路 气道重塑 小鼠

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平喘方对哮喘急性发作期小鼠MMP-9、TIMP-1、E-cadherin及CollagenⅠ的影响 被引量：3

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作者 杨艳 薛征 +3 位作者 虞坚尔 胡逸中 刘亚尊 徐万超 《上海中医药杂志》 2021年第6期67-71,共5页

目的通过检测小鼠肺组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)的蛋白表达水平,探讨平喘方对哮喘急性发作期小鼠气道重塑的作用机制。方法将40只Balb/c雄性小鼠按... 目的通过检测小鼠肺组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)的蛋白表达水平,探讨平喘方对哮喘急性发作期小鼠气道重塑的作用机制。方法将40只Balb/c雄性小鼠按随机数字表分为空白组、模型组、地塞米松组、平喘方组,每组10只。除空白组外,其余组均采用OVA"致敏+激发"建立哮喘模型。灌胃给药干预1周后,采用Masson染色观察肺组织病理变化,ELISA法检测血小板衍生生长因子(PDGF)水平,Western blot法检测MMP-9、TIMP-1、E-cadherin、CollagenⅠ蛋白含量。结果空白组可见少许淡蓝色胶原纤维,胶原容积分数(CVF)最小,与空白组比较,模型组胶原纤维面积明显增多(P<0.01),颜色更深;与模型组比较,地塞米松组、平喘方组小鼠胶原纤维面积明显较少(P<0.01)。与空白组比较,模型组小鼠PDGF因子水平、MMP-9、TIMP-1、CollagenⅠ蛋白表达水平显著上升(P<0.01),E-cadherin蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,地塞米松组及平喘方组小鼠PDGF因子水平、TIMP-1、CollagenⅠ均显著下降(P<0.01,P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平均显著上升(P<0.01),地塞米松组MMP-9蛋白表达水平显著升高(P<0.01),平喘方组MMP-9蛋白水平升高,但不显著(P>0.05)。结论在哮喘急性发作期,平喘方可通过抑制PDGF的释放,降低MMP-9、TIMP-1、CollagenⅠ的表达以及上调E-cadherin的表达来缓解气道重塑,从而发挥哮喘治疗作用,为化痰药与祛瘀药相配治疗哮喘提供了理论依据。 展开更多

关键词 平喘方 哮喘 模型小鼠 气道重塑 基质金属蛋白酶9 金属蛋白酶组织抑制因子1 E-钙黏蛋白 Ⅰ型胶原

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平喘方对哮喘小鼠NLRP3炎症小体信号通路表达的影响 被引量：1

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作者 徐万超 虞坚尔(指导) +3 位作者 薛征 朴香 杨艳 胡逸中 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期681-686,共6页

目的:研究平喘方(PCF)对哮喘模型小鼠NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体信号通路的影响,探索其缓解哮喘气道炎症的内在机制。方法:将雄性BALB/c小鼠随机分为空白对照(Control)组、哮喘模型(Model)组、地塞米松(DEX)组和平... 目的:研究平喘方(PCF)对哮喘模型小鼠NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体信号通路的影响,探索其缓解哮喘气道炎症的内在机制。方法:将雄性BALB/c小鼠随机分为空白对照(Control)组、哮喘模型(Model)组、地塞米松(DEX)组和平喘方(PCF)组,每组10只,采用卵清白蛋白(OVA)+铝佐剂致敏2次后,以5%OVA雾化激发哮喘,雾化结束1 h后灌胃给药,雾化给药7 d后处死小鼠。观察雾化给药期间各组小鼠一般行为;HE染色观察各组小鼠肺组织炎症;免疫组化法观察肺组织中NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-1)的阳性表达;Western blot检测肺组织中NLRP3、点凋亡蛋白(ASC)及caspase-1表达;RT-PCR法检测肺组织中NLRP3、caspase-1 mRNA表达;ELISA法检测肺泡灌洗液中IL-1β、IL-18表达。结果:与Control组相比,Model组小鼠行为情况表现为躁动易激惹,气道和肺组织炎症,肺组织中NLRP3、ASC、caspase-1蛋白及基因表达升高(P<0.05),BALF中IL-1β、IL-18表达增多(P<0.05);经地塞米松和平喘方干预后,小鼠行为情况好转,HE染色显示气道和肺组织炎症程度减轻,与Model组相比,NLRP3、ASC、caspase-1蛋白和基因表达及BALF中IL-1β、IL-18表达均降低(P<0.05);与DEX组相比,PCF组肺组织中NLRP3、caspase-1蛋白表达增多(P<0.05),ASC表达差异无统计学意义,NLRP3、caspase-1基因表达及BALF中IL-1β、IL-18表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PCF可改善哮喘模型小鼠气道及肺组织炎症,可能与抑制NLRP3炎症小体信号通路表达相关。 展开更多

关键词 哮喘 平喘方 NLRP3炎症小体

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香佩疗法防治小儿反复呼吸道感染的文献与现代研究 被引量：4

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作者 胡逸中 薛征 《中医外治杂志》 2020年第6期78-80,共3页

香佩疗法防治疾病的历史悠久,形式多样,对后世影响深远。本文梳理回顾了香药运用于小儿反复呼吸道感染的发展历史,阐述了香佩疗法防治复感的作用机制和现代研究,并对其改良前景作了展望。

关键词 小儿反复呼吸道感染 芳香中药 香佩疗法 现代研究

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从新型冠状病毒肺炎探讨中医香佩疗法防疫的可行性及临床应用 被引量：3

5

作者 胡逸中 薛征 《中医文献杂志》 2020年第2期11-13,共3页

香佩疗法作为中医的特色外治法之一,安全有效,可行性强,是中医"治未病""异病同治"理念的具体实践,在古今中外历史中得到了有效运用。本文从新型冠状病毒肺炎入手,阐述中医学对该病的认识、香佩疗法防治瘟疫的研究... 香佩疗法作为中医的特色外治法之一,安全有效,可行性强,是中医"治未病""异病同治"理念的具体实践,在古今中外历史中得到了有效运用。本文从新型冠状病毒肺炎入手,阐述中医学对该病的认识、香佩疗法防治瘟疫的研究进展及应用的可行性,并对其前景作了展望。 展开更多

关键词 新型冠状病毒肺炎 香佩疗法 预防 治疗

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儿童性早熟危险因素调查及中医证型分布特点研究 被引量：9

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作者 耿利娜 薛征 +3 位作者 俞建 刘亚尊 胡逸中 杨艳 《山东中医杂志》 2021年第12期1302-1309,共8页

目的:研究儿童性早熟发病危险因素及中医证型分布特点,探讨两者之间的相关性。方法:采用病例对照设计,纳入243例性早熟患儿为病例组,配比生长发育正常的儿童243例为对照组,采用调查问卷形式进行信息和临床资料收集,采用Logistic回归分... 目的:研究儿童性早熟发病危险因素及中医证型分布特点,探讨两者之间的相关性。方法:采用病例对照设计,纳入243例性早熟患儿为病例组,配比生长发育正常的儿童243例为对照组,采用调查问卷形式进行信息和临床资料收集,采用Logistic回归分析法探讨性早熟相关危险因素,并分析性早熟患儿中医证型分布特点。结果:在性早熟相关危险因素分析中,母亲初潮年龄≤12岁、有性早熟家族史、经常使用塑料制品包装或盛纳食物、使用洗发剂、亮灯睡觉、课业负担重、爱看情感类电视或小说、经常食用营养滋补品、经常食用动物性食品或高蛋白饮食、经常食用油炸类快餐、经常食用加工食品等是性早熟发病的高危因素(P<0.05)。在性早熟中医证型分析中,阴虚火旺证占42.0%、肝郁化火证占41.2%、痰湿壅滞证占14.0%、其他证型占2.9%。在危险因素与中医证型相关性中,肝郁化火型性早熟与看情感类电视或小说关系密切相关(P<0.01),痰湿壅滞型性早熟与多食动物性食品或高蛋白饮食、多食油炸类快餐密切相关(P<0.05)。结论:性早熟危险因素较多,与母亲初潮年龄、家族遗传、饮食和生活习惯等相关;中医证型分布中阴虚火旺证与肝郁化火证比例相当,痰湿壅滞证比例较低;其中肝郁化火型性早熟与爱看情感类电视或小说关系密切,痰湿壅滞型性早熟与多食动物性食品或高蛋白饮食、多食油炸类快餐密切相关。 展开更多

关键词 性早熟 危险因素 中医证型 阴虚火旺 肝郁化火 痰湿壅滞 流行病学调查

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蚓激酶对哮喘小鼠免疫相关转录因子T-bet、GATA-3、RORγt、Foxp3的影响

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作者 韩兆鹏 薛征(指导) +3 位作者 杨艳 胡逸中 周欢 刘亚尊 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第21期2561-2566,共6页

目的:观察蚓激酶对哮喘小鼠炎症因子IL-6、TGF-β、IL-1β、TNF-α水平和免疫相关转录因子T-bet、GATA-3、RORγt、Foxp3 mRNA及蛋白表达的影响。方法:40只BALB/c雄性小鼠随机分为4组:空白对照组(空白组)、哮喘模型组(模型组)、地塞米松... 目的:观察蚓激酶对哮喘小鼠炎症因子IL-6、TGF-β、IL-1β、TNF-α水平和免疫相关转录因子T-bet、GATA-3、RORγt、Foxp3 mRNA及蛋白表达的影响。方法:40只BALB/c雄性小鼠随机分为4组:空白对照组(空白组)、哮喘模型组(模型组)、地塞米松组(地米组)和蚓激酶组,每组10只。第1、14天模型组、地米组和蚓激酶组腹腔注射OVA+Al(OH)3致敏,21~27 d雾化吸入5%OVA建立哮喘模型,每次雾化激发1 h后,地米组、蚓激酶组分别灌胃给予地塞米松溶液、蚓激酶溶液治疗7 d,空白组、模型组灌胃等量生理盐水。末次给药24 h后处死取材,HE染色观察肺组织病理学改变,ELISA检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-6、IL-1β、TGF-β、TNF-α水平,RT-PCR检测肺组织T-bet、GATA-3、RORγt、Foxp3 mRNA水平,Western blot检测肺组织T-bet、GATA-3、RORγt、Foxp3蛋白表达。结果:肺组织病理观察显示,模型组小鼠管腔及周围炎症细胞浸润明显,黏膜水肿增厚,地米组和蚓激酶组小鼠肺部炎症浸润及黏膜增厚水肿均较模型组好转。与空白组相比,模型组IL-6、TGF-β、IL-1β、TNF-α水平显著升高,GATA-3、RORγt mRNA及蛋白表达增加(P<0.01),T-bet、Foxp3 mRNA及蛋白表达降低(P<0.01)。与模型组相比,地米组和蚓激酶组IL-6、TGF-β、IL-1β、TNF-α水平降低(P<0.05,P<0.01),T-bet、Foxp3 mRNA表达升高(P<0.01),GATA-3、RORγt mRNA及蛋白表达降低(P<0.01)。结论:蚓激酶可降低炎症因子IL-6、TGF-β、IL-1β及TNF-α水平,抑制GATA-3、RORγt mRNA及蛋白表达,诱导T-bet、Foxp3 mRNA及其蛋白表达,且可能通过降低相关前炎症因子水平调节免疫细胞转录因子表达。 展开更多

关键词 蚓激酶 哮喘 炎症因子 转录因子

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蚓激酶对哮喘小鼠气道炎症和TLR2/MyD88/NF-κB信号通路的影响

8

作者 韩兆鹏 薛征 +3 位作者 杨艳 胡逸中 周欢 刘亚尊 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1590-1594,共5页

目的研究蚓激酶对过敏性哮喘小鼠TLR2/MyD88/NF-κB信号通路和炎症相关因子IL-5、IL-13、IL-33的影响,探讨蚓激酶对哮喘小鼠气道炎症的作用机制。方法24只SPF级BALB/c雄性小鼠随机分为4组:空白组、模型组、地塞米松组和蚓激酶组,每组6只... 目的研究蚓激酶对过敏性哮喘小鼠TLR2/MyD88/NF-κB信号通路和炎症相关因子IL-5、IL-13、IL-33的影响,探讨蚓激酶对哮喘小鼠气道炎症的作用机制。方法24只SPF级BALB/c雄性小鼠随机分为4组:空白组、模型组、地塞米松组和蚓激酶组,每组6只。HE染色法观察肺组织病理学改变;ELISA法检测肺泡灌洗液(BALF)中IL-5、IL-13、IL-33的表达水平;RT-PCR检测肺组织中TLR2、MyD88、TAK1、IKBα、p65 mRNA水平;Western blot检测肺组织中MyD88、TAK1、IKBα、p65蛋白水平。结果蚓激酶可以改善哮喘小鼠模型炎症细胞浸润,降低BALF中炎症因子IL-5、IL-13、IL-33的表达,以及程度上抑制TLR2/MyD88/NF-κB信号通路相关蛋白和mRNA的激活表达水平。结论蚓激酶对OVA哮喘小鼠气道炎症有明显的改善作用,相关机制可能与TLR2/MyD88/NF-κB信号通路的程度激活抑制有关。 展开更多

关键词 蚓激酶 气道炎症 TLR2/MyD88/NF-κB 哮喘

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平喘方对哮喘小鼠NF-κB信号通路的调控及对TLR4 mRNA和蛋白表达的影响 被引量：11

9

作者 杨艳 薛征 +3 位作者 虞坚尔 胡逸中 刘亚尊 徐万超 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期356-363,共8页

目的研究平喘方通过调节核因子-K B(NF-K B)信号通路对哮喘小鼠的作用及其对Toll样受体4(TLR4)mRNA和蛋白表达的影响。方法将60只SPF级雄性Balb/c小鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组、平喘方组,每组15只。除空白组外,其余组均采用... 目的研究平喘方通过调节核因子-K B(NF-K B)信号通路对哮喘小鼠的作用及其对Toll样受体4(TLR4)mRNA和蛋白表达的影响。方法将60只SPF级雄性Balb/c小鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组、平喘方组,每组15只。除空白组外,其余组均采用先卵清蛋白(OVA)+氢氧化铝凝胶[AI(OH)3]腹腔注射致敏,采用OVA雾化激发的方法来建立哮喘模型。地塞米松组、平喘方组分别予0.075 mg/mL地塞米松溶液、5.33 g/mL平喘方灌胃治疗1周,空白组、模型组给予等量生理盐水灌胃。末次给药24 h后,采用HE、Masson染色观察肺组织病理变化,ELISA法检测肺泡灌洗液(BALF)白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度,Western Blot观察肺组织中NF-κB亚单位(p65)、NF-κB的抑制蛋白(IκBα)、TLR4、髓样分化因子(MyD88)蛋白表达,RT-PCR法观察p65、IκBα、TLR4、MyD88 mRNA水平。结果HE及Masson染色可见模型组小鼠肺组织明显炎症细胞浸润,上皮基底膜增厚,胶原纤维增多,平喘方组小鼠肺部炎性细胞浸润明显减轻,胶原纤维面积减小;与空白组比较,模型组小鼠BALF中IL-6、TNF-α浓度,肺组织中p65、MyD88蛋白表达及mRNA水平,气管中TLR4mRNA及蛋白表达水平均升高(均P<0.01),IκBα蛋白表达及mRNA水平降低(P<0.01);与模型组比较,地塞米松组和平喘方组BALF中IL-6、TNF-α浓度均降低,MyD88、p65、TLR4蛋白表达及mRNA水平下调(P<0.01,P<0.05),地塞米松组IκBα蛋白表达及mRNA水平升高(均P<0.01),平喘方组IκBαmRNA水平升高(P<0.01),IκBα蛋白表达上调,但差异无统计学意义(P>0.05)。与地塞米松组比较,平喘方组BALF中IL-6、TNF-α因子水平、p65 mRNA水平、TLR4 mRNA水平、MyD88蛋白表达及mRNA水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),p65及TLR4蛋白表达升高(P<0.05)。结论平喘方对OVA诱导哮喘小鼠的气道炎症有较好的改善作用,其机制可能与降低TLR4及MyD88活性,调控NF-κB信号通路有关。 展开更多

关键词 哮喘 平喘方 核因子-Kappa B TOLL样受体4

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黄芪甲苷对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠免疫功能的影响 被引量：10

10

作者 胡逸中 薛征 胡炀 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1843-1844,共2页

目的探究黄芪甲苷对免疫低下小鼠血清IL-2、IFN-γ及NK细胞活性的影响。方法将40只SPF级ICR雄性小鼠随机分成4组,即空白对照组、模型组、玉屏风组、黄芪甲苷组。除空白对照组外,其余3组腹腔注射环磷酰胺50mg/(kg·d),隔天注射一次,... 目的探究黄芪甲苷对免疫低下小鼠血清IL-2、IFN-γ及NK细胞活性的影响。方法将40只SPF级ICR雄性小鼠随机分成4组,即空白对照组、模型组、玉屏风组、黄芪甲苷组。除空白对照组外,其余3组腹腔注射环磷酰胺50mg/(kg·d),隔天注射一次,共注射3次,建立免疫抑制动物模型。各组连续28d给予相应药物。末次给药后眼球取血,脱颈处死小鼠后取出脾脏,LDH法检测NK细胞杀伤活性,ELISA法检测小鼠血清IL-2、IFN-γ水平。结果与空白对照组比较,模型组小鼠NK细胞活力、IL-2、IFN-γ水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,黄芪甲苷可增强免疫低下小鼠NK细胞活性(P<0.05),使血清IL-2、IFN-γ含量显著升高(P<0.05)。结论黄芪甲苷可以增强环磷酰胺所致免疫抑制小鼠的NK细胞杀伤能力,提高IL-2、IFN-γ的分泌含量,从而改善小鼠机体的免疫功能。 展开更多

关键词 黄芪甲苷 环磷酰胺 免疫力低下 白细胞介素-2 干扰素-Γ NK细胞活性

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基于IL-33-ST2信号通路对平喘化痰方干预哮喘小鼠机制的研究 被引量：2

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作者 朴香 虞坚尔 +3 位作者 薛征 徐万超 杨艳 胡逸中 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2605-2609,共5页

目的探讨平喘化痰方干预哮喘小鼠观察IL-33-ST2信号通路变化的机制研究。方法 40只BALB/c雄性小鼠随机分为空白对照组、哮喘模型组、地塞米松组和平喘化痰方组,每组10只。除空白对照组外,其余各组小鼠采用10%卵白蛋白(OVA)腹腔注射和5%... 目的探讨平喘化痰方干预哮喘小鼠观察IL-33-ST2信号通路变化的机制研究。方法 40只BALB/c雄性小鼠随机分为空白对照组、哮喘模型组、地塞米松组和平喘化痰方组,每组10只。除空白对照组外,其余各组小鼠采用10%卵白蛋白(OVA)腹腔注射和5%OVA超声雾化吸入建立哮喘小鼠模型。每次雾化后隔6h,平喘化痰方组灌胃平喘化痰方剂量20ml(kg·d),地塞米松组给与地塞米松0.075mg/ml,空白对照组和哮喘模型组则予同等剂量的生理盐水灌胃,连续干预7天。HE染色显示小鼠肺组织病理结构情况,检测肺泡灌洗液(BALF)白介素5(IL-5)、IL-13和IL-33含量,RT-PCR观察肺组织IL-33和ST2L mRNA变化,Western blot检测肺组织IL-33和ST2L蛋白变化。结果哮喘组小鼠光镜下肺组织及支气管可见大量炎性细胞浸润,BALF白介素5(IL-5)、IL-13和IL-33含量较空白对照组增加,肺组织IL-33和ST2L表达量均上调。平喘化痰方和地塞米松组小鼠肺组织及支气管在光镜下可见少量炎性细胞浸润,与哮喘组BALF中的IL-5、IL-13和IL-33含量降低(P<0.01),肺组织IL-33和ST2L mRNA和蛋白含量均下调(P<0.01)。结论平喘化痰方可能通过抑制IL-33/ST2信号通路,降低Th2细胞因子(IL-5和IL-13)释放,减轻气道炎症,控制哮喘发作。 展开更多

关键词 哮喘 平喘化痰汤 气道炎症 IL-33/ST2信号通路

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