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靶向调控Claudin-4基因表达介导DNA损伤修复增强膀胱癌细胞化疗敏感性的研究
1
作者 艾克帕尔·阿布拉江 崔涛 杜恒 《局解手术学杂志》 2023年第4期279-285,共7页
目的探究靶向下调紧密连接蛋白4(Claudin-4)基因表达对膀胱癌细胞DNA损伤修复及其化疗敏感性的影响。方法采用si-Claudin-4及阴性对照(si-NC)转染人膀胱癌细胞系EJ下调Claudin-4的表达,采用qRT-PCR和Western blot检测细胞Claudin-4的表... 目的探究靶向下调紧密连接蛋白4(Claudin-4)基因表达对膀胱癌细胞DNA损伤修复及其化疗敏感性的影响。方法采用si-Claudin-4及阴性对照(si-NC)转染人膀胱癌细胞系EJ下调Claudin-4的表达,采用qRT-PCR和Western blot检测细胞Claudin-4的表达,以确定转染效果。不同浓度顺铂(DDP)处理转染后的EJ细胞,CCK-8法检测细胞存活率。将EJ细胞随机分为对照组、si-Claudin-4组、DDP组、DDP+si-Claudin-4组。经转染处理与DDP处理后,CCK-8法检测各组细胞存活率;平板克隆形成实验检测各组细胞克隆形成能力;细胞免疫荧光染色观察各组细胞内γ-H2AX焦点生成情况;单细胞凝胶电泳法检测各组细胞DNA损伤情况;Western blot检测各组细胞内γ-H2AX、Ku70、Ku80以及DNA-PKcs的蛋白表达水平。结果细胞转染后,si-Claudin-4组细胞内Claudin-4 mRNA和蛋白相对表达量均显著低于对照组和si-NC组(P<0.05)。经不同浓度DDP处理后,si-Claudin-4组EJ细胞存活率显著低于对照组和si-NC组(P<0.05)。与对照组比较,si-Claudin-4组和DDP组细胞存活率显著下降,细胞克隆形成数目显著减少,细胞内γ-H2AX焦点形成显著增加,细胞出现典型拖尾形状,彗星尾长和尾部DNA比例均显著增加,γ-H2AX蛋白相对表达量显著上调,Ku70、Ku80及DNA-PKcs的蛋白相对表达量显著下调,差异均具有统计学意义(P<0.05);与DDP组比较,DDP+si-Claudin-4组细胞存活率显著下降,细胞克隆形成数目显著减少,细胞内γ-H2AX焦点形成显著增加,细胞拖尾现象更加明显,细胞彗星尾长和尾部DNA比例均进一步增加,同时,γ-H2AX蛋白相对表达量显著上调,且Ku70、Ku80、DNA-PKcs的蛋白相对表达量均显著下调,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论在膀胱癌细胞系EJ中靶向下调Claudin-4基因表达,能够增强肿瘤细胞对DDP的敏感性,该作用可能是通过抑制DNA损伤修复能力实现的。 展开更多
关键词 膀胱癌 紧密连接蛋白4 顺铂 化疗敏感性 DNA损伤修复
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泌尿外科后腹腔镜手术的临床治疗分析 被引量：1
2
作者 艾克帕尔·阿布拉江 杜恒 《中国科技期刊数据库 医药》 2022年第4期30-33,共4页
研究泌尿外科后腹腔镜手术和开放手术的临床治疗。方法:选取医院患者86例,对照组和观察组各43例,分别采用开放手术和后腹腔镜手术。结果:观察组泌尿外科手术患者在后腹腔镜手术下临床治疗总有效率高于对照组,有统计学意义(P<0.05)。... 研究泌尿外科后腹腔镜手术和开放手术的临床治疗。方法:选取医院患者86例,对照组和观察组各43例,分别采用开放手术和后腹腔镜手术。结果:观察组泌尿外科手术患者在后腹腔镜手术下临床治疗总有效率高于对照组,有统计学意义(P<0.05)。观察组泌尿外科手术患者在后腹腔镜手术下临床治疗总有效率与对照组开放手术相比,手术时间从127.51±6.39(min)降低至84.26±4.87(min)、术中出血量从88.94±11.40(mL)降低至35.62±7.62(mL)、胃肠道功能恢复时间从3.08±1.12(d)降低至1.06±0.87(d)、住院时间从10.94±2.33(d)降低至8.10±1.85(d),低于对照组,两组泌尿外科手术患者临床手术指标有统计学意义(P<0.05)。观察组泌尿外科手术患者在后腹腔镜手术下临床治疗总有效率与对照组开放手术相比,焦虑SAS评分从55.34±4.72(分)降低至42.81±3.93(分)、抑郁SDS评分从56.80±4.27(分)降低至45.69±3.25(分),低于对照组,两组泌尿外科手术患者负性心理情绪评分有统计学意义(P<0.05)。观察组泌尿外科手术患者在后腹腔镜手术下临床治疗总有效率与对照组开放手术相比,感染几率从4.65(%)降低至0.00(%),出血几率从4.65(%)降低至2.33(%),气胸几率从2.33(%)降低至0.00(%),肠梗阻几率从4.65(%)降低至2.33(%),并发症总发生率从16.28(%)降低至4.65(%),两组泌尿外科手术患者并发症情况有统计学意义(P<0.05)。结论:泌尿外科后腹腔镜手术临床治疗效果显著,后腹腔镜手术等微创手术相对于传统开放手术来说更具推广价值。 展开更多
关键词 泌尿外科 后腹腔镜手术 手术指标 临床治疗效果 并发症
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Klotho蛋白对草酸钙肾结石大鼠肾脏氧化应激的影响 被引量：9
3
作者 木拉提·马合木提 杜恒 +5 位作者 迪力亚尔·吐尔洪 艾克帕尔·阿布拉江 阿不都赛买提·艾力 阿里木·太来提 张涛 安尼瓦尔·牙生 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期941-945,共5页
目的探讨Klotho蛋白对草酸钙肾结石大鼠肾小管上皮细胞氧化应激的影响及其机制。 方法2016年11—12月选取30只6～8周龄雄性SD大鼠，分为正常组、结石组、药物组，每组10只。正常组每天生理盐水灌胃；结石组使用1%乙二醇和2%氯化铵诱导... 目的探讨Klotho蛋白对草酸钙肾结石大鼠肾小管上皮细胞氧化应激的影响及其机制。 方法2016年11—12月选取30只6～8周龄雄性SD大鼠，分为正常组、结石组、药物组，每组10只。正常组每天生理盐水灌胃；结石组使用1%乙二醇和2%氯化铵诱导法建立大鼠肾草酸钙结石模型；药物组自由饮水，并用含1%乙二醇和2%氯化铵溶液灌胃的同时，给予2.5 mg福辛普利＋15.0 mg缬沙坦溶于蒸馏水，每次2 ml灌胃。喂养4周后处死各组大鼠。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠肾组织中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽（GSH）的含量；RT-PCR法检测Klotho基因和核因子E2相关因子2（Nrf2）基因mRNA表达水平；蛋白质印迹法检测Klotho和Nrf2蛋白表达水平。 结果结石组MDA含量（12.43±0.43）μmol/mg，明显高于正常组（8.67±0.84）μmol/mg和药物组（7.97±0.81）μmol/mg（均P〈0.05），而药物组与正常组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。正常组、结石组、药物组的SOD分别为（247.89±2.45）、（109.54±4.21）、（189.74±10.47）U/mg，GSH分别为（38.98±4.55）、（26.87±3.92）、（31.29±2.54）μmol/mg，CAT分别为（138.47±8.74）、（119.87±8.45）、（127.46±7.45）U/mg，结石组SOD、GSH、CAT含量均低于正常组和药物组（P〈0.05），而正常组和药物组比较差异无统计学意义（均P〉0.05）。结石组Klotho mRNA（0.208±0.036）和Nrf2 mRNA（0.499±0.086）表达水平明显低于正常组[分别为（1.011±0.174）和（1.023±0.139），均P〈0.05]和药物组[分别为（1.123±0.248）和（1.148±0.089），均P〈0.05]。结石组肾组织中Klotho蛋白（0.341±0.127）和Nrf2蛋白（0.201±0.030）低于正常组[分别为（0.750±0.140）和（0.558±0.095），均P〈0.05]和药物组[分别为（0.841±0.288）和（0.450±0.153），均P〈0.05]。 结论福辛普利和缬沙坦可通过上调乙二醇诱导的Klotho基因低表达，降低肾小管上皮细胞损伤，抑制草酸钙晶体黏附成石；Klotho的抗氧化损伤作用可能与Keap1-Nrf2-ARE信号通路被激活有关。 展开更多
关键词 KLOTHO基因 核因子E2相关因子2 草酸钙结石 氧化应激
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