流感病毒在不同细胞中适宜培养条件的研究 被引量：15

1

作者 范东瀛 陈俊英 +2 位作者 张新文 李卫东 廖国阳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期510-512,共3页

目的探索流感病毒在细胞中培养的适宜条件。方法采用MEK细胞、FRhK-4细胞、MDCK细胞分别接种甲型流感病毒H1N1型、H3N2型和乙型流感病毒疫苗毒株,观察3种毒株在不同培养条件下的细胞病变、血凝滴度。结果3株流感病毒接种细胞在33℃培养... 目的探索流感病毒在细胞中培养的适宜条件。方法采用MEK细胞、FRhK-4细胞、MDCK细胞分别接种甲型流感病毒H1N1型、H3N2型和乙型流感病毒疫苗毒株,观察3种毒株在不同培养条件下的细胞病变、血凝滴度。结果3株流感病毒接种细胞在33℃培养72h后出现拉网、圆缩、脱落等现象;FRhK-4细胞和MDCK细胞对流感病毒较敏感。胞龄为48h的细胞,在NaHCO3的终浓度为1.4‰,TPCK-胰酶浓度为1.0μg/ml的病毒维持液培养流感病毒为最适条件。结论寻找到了细胞流感病毒的适宜条件。 展开更多

关键词 流感病毒 细胞培养 血凝滴度

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超高压力对流感病毒生物活性的影响 被引量：2

2

作者 范东瀛 姜述德 +4 位作者 陈俊英 蒋燕军 邱丰 李卫东 廖国阳 《重庆医学》 CAS CSCD 2007年第1期57-59,共3页

目的研究超高压力对流感病毒影响。方法通过血凝素、感染性和RP-PCR等检测不同压力处理后流感病毒的变化。结果250MPa处理1h病毒感染力下降了4～5log10TCID50／ml，血凝效价变化不大；350MPa以上，病毒感染性完全消失，血凝效价也明显... 目的研究超高压力对流感病毒影响。方法通过血凝素、感染性和RP-PCR等检测不同压力处理后流感病毒的变化。结果250MPa处理1h病毒感染力下降了4～5log10TCID50／ml，血凝效价变化不大；350MPa以上，病毒感染性完全消失，血凝效价也明显降低。但400MPa压力下仍可扩增出流感病毒组。结论流感病毒在250MPa压力下血凝素抗原损伤小，基因耐高压能力较强。 展开更多

关键词 超高压力 流感病毒 灭活

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清开灵注射液体外抗2型登革病毒的作用 被引量：3

3

作者 范东瀛 高娜 +3 位作者 安静 王蕾 王培刚 吴娜 《微生物学免疫学进展》 2017年第5期34-40,共7页

目的研究清开灵注射液(简称清开灵)体外抗2型登革病毒(dengue virus 2,DENV2)的作用。方法 (1)稀释清开灵至不同质量浓度(72.000、63.000、54.000、45.000、22.500、11.250 mg/mL),同时稀释利巴韦林注射液(简称利巴韦林,12.500、6.250、... 目的研究清开灵注射液(简称清开灵)体外抗2型登革病毒(dengue virus 2,DENV2)的作用。方法 (1)稀释清开灵至不同质量浓度(72.000、63.000、54.000、45.000、22.500、11.250 mg/mL),同时稀释利巴韦林注射液(简称利巴韦林,12.500、6.250、3.125、1.563、0.781、0.391 mg/m L)作为阳性对照,生理盐水为空白对照,利用MTT比色法分别检测上述药物对人肝癌细胞HepG2株的细胞毒性作用,并确定各药物的最大无毒质量浓度;(2)分别稀释清开灵和利巴韦林并与DENV2(MOI=0.5)等体积混合孵育30 min后,接种于HepG2细胞,于2、8、24 h后取细胞上清,利用间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay,IFA)检测阳性细胞率和实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测DENV2基因组表达水平,验证清开灵对DENV2的直接灭活作用;(3)稀释清开灵或利巴韦林并与DENV2(MOI=0.5)等体积混合后接种于HepG2细胞,2 h后收获细胞,利用IFA验证清开灵对DENV2的抑制作用;(4)DENV2(MOI=0.5)感染HepG2细胞1 h后,弃上清加入含清开灵或利巴韦林的维持液,于感染后2、8、24 h收获细胞上清,利用IFA和qPCR验证清开灵直接给药的抗病毒作用;(5)用清开灵或利巴韦林预处理HepG2细胞2 h,加入DENV2(MOI=0.5)孵育1 h弃上清,再次相应加入清开灵和利巴韦林(维持治疗),于感染后2、8、24 h收获细胞上清,IFA和qPCR验证清开灵预给药联合维持治疗的抗病毒作用。结果 (1)清开灵的最大无毒质量浓度为11.250 mg/m L,利巴韦林的最大无毒质量浓度为1.563 mg/m L;(2)直接灭活:2、8、24 h,清开灵和利巴韦林检测水平均优于空白对照(P<0.01),而且清开灵在2 h和24 h的IFA检测水平均优于利巴韦林(P<0.01),以及8 h和24 h的qPCR检测水平均优于利巴韦林(P<0.01);(3)抑制病毒进入:清开灵与利巴韦林的IFA检测均优于空白对照(P<0.01);(4)直接给药:药物作用2、8、24 h后,清开灵和利巴韦林不同时相点检测水平均优于空白对照(P<0.01);(5)预给药联合维持治疗:药物作用2、8、24 h后,清开灵和利巴韦林不同时相点检测水平均优于空白对照(P<0.01),而且清开灵的不同时相点的IFA检测水平均优于利巴韦林(P<0.01)。结论清开灵具有明显的体外抗DENV2的作用,且以预给药联合维持治疗的给药方式抗病毒作用最佳。 展开更多

关键词 清开灵注射液 登革病毒 抗病毒作用 间接免疫荧光染色 实时定量聚合酶链反应

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拯救生命,医学科学的永恒使命——2008年诺贝尔生理学或医学奖简介

4

作者 范东瀛 高娜 安静 《首都医科大学学报》 CAS 2008年第6期671-673,共3页

2008年10月6日瑞典卡罗林斯卡医学院将2008年诺贝尔生理学或医学奖授予发现HPV与宫颈癌相关性的德国科学家Harald zur Hausen及发现HIV的两名法国科学家Franc,oise Barré-Sinoussi和Luc Montagnier,以表彰其在病毒学领域所做出的... 2008年10月6日瑞典卡罗林斯卡医学院将2008年诺贝尔生理学或医学奖授予发现HPV与宫颈癌相关性的德国科学家Harald zur Hausen及发现HIV的两名法国科学家Franc,oise Barré-Sinoussi和Luc Montagnier,以表彰其在病毒学领域所做出的杰出贡献。本文从3位获奖科学家的简介、主要贡献、HPV和HIV发现的重大意义等方面进行综述。 展开更多

关键词 HPV HIV 诺贝尔生理学或医学奖

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2007-2008年北京地区CA16VP1区系统进化分析 被引量：22

5

作者 王娟 罗珍 +3 位作者 范东瀛 高娜 朱俊萍 安静 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第23期2342-2346,共5页

目的了解2007-2008年北京地区柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)流行情况及其种系进化规律和基因分型。方法收集北京地区2007-2008年133例手足口病病例临床标本,从中筛选CA16毒株,扩增部分毒株VP1区并进行序列测定和分析。结... 目的了解2007-2008年北京地区柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)流行情况及其种系进化规律和基因分型。方法收集北京地区2007-2008年133例手足口病病例临床标本,从中筛选CA16毒株,扩增部分毒株VP1区并进行序列测定和分析。结果共筛选得到39例45份CA16阳性标本,测定其中16株病毒的VP1区核苷酸序列,其同源性为91.43%～98.65%,氨基酸同源性为97.98%～100%。该16株病毒与GenBank中选取的24株CA16参考株的核苷酸同源性为78.13%～98.65%,氨基酸同源性为89.9%～100%。16株北京分离株中的9株与近年多数中国大陆分离株形成进化树上亲缘关系较近的一群,其余7株与我国台湾及周边国家的一系列分离株亲缘关系较近。结论CA16为北京地区手足口病的主要致病原之一,本地区毒株同源性较高,同GenBank中24株CA16参比毒株序列进行系统进化分析显示其属于B基因群,16株北京分离株在系统进化树上有分别归属于两支的趋势。 展开更多

关键词 柯萨奇病毒A组16型 手足口病 系统进化分析

原文传递

利用甲基纤维素改良的病毒噬斑技术 被引量：3

6

作者 盛子洋 王娟 +2 位作者 吴江漫 安静 范东瀛 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期363-365,368,共4页

目的探究病毒噬斑实验的方法寻找其改良之处,为实验操作提供方便。方法用甲基纤维素代替琼脂糖覆盖病毒感染后的细胞。结果改良后的新方法在进行登革病毒滴度检测时相较于传统方法,可形成均匀、清晰的噬斑,复孔重复性好,而且噬斑在实验... 目的探究病毒噬斑实验的方法寻找其改良之处,为实验操作提供方便。方法用甲基纤维素代替琼脂糖覆盖病毒感染后的细胞。结果改良后的新方法在进行登革病毒滴度检测时相较于传统方法,可形成均匀、清晰的噬斑,复孔重复性好,而且噬斑在实验后2年内仍保存完好,与背景形成明显对比,便于复查。结论利用甲基纤维素的病毒噬斑技术,省时省力节约成本且便于操作,是一个值得推广的有价值的实验方法。 展开更多

关键词 登革病毒 噬斑实验 甲基纤维素

原文传递

链球菌蛋白对人肝癌Bel-7402细胞的增殖抑制作用及其分子机制 被引量：3

7

作者 李彦芹 郑群 +5 位作者 王艳 李卫红 朱俊平 平国玲 范东瀛 张力平 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第43期8733-8736,共4页

目的:从分子水平观察链球菌蛋白质对人肝癌Bel-7402细胞的生长增殖的抑制作用。方法:实验于2005-10/2006-11在首都医科大学病原生物学系实验室完成。①链球菌32080株购自中国医学细菌保藏管理中心,人肝癌Bel-7402细胞株由首都医科大学... 目的:从分子水平观察链球菌蛋白质对人肝癌Bel-7402细胞的生长增殖的抑制作用。方法:实验于2005-10/2006-11在首都医科大学病原生物学系实验室完成。①链球菌32080株购自中国医学细菌保藏管理中心,人肝癌Bel-7402细胞株由首都医科大学细胞生物学系惠赠。②常规培养链球菌并按照Winters方法提取细菌蛋白。③用0,10,20,100mg/L细菌蛋白作用于单层培养的Bel-7402细胞24,48,72h,采用MTT法检测链球菌蛋白对细胞的增殖抑制作用。④Bel-7402细胞经10mg/L或50mg/L细菌蛋白分别作用48,72h后,流式细胞术检测细菌蛋白对癌细胞生长周期时相分布。⑤Bel-7402细胞经50mg/L的细菌蛋白分别作用24,48,72h后,Annexin-v PI双染法检测Bel-7402细胞凋亡率。⑥用50mg/L的链球菌蛋白分别作用于Bel-7402细胞0,24,48,72h后,Western Blot检测链球菌蛋白对Bel-7402细胞凋亡相关蛋白的影响。结果:①链球菌蛋白对Bel-7402细胞的抑制作用:链球菌蛋白能显著抑制人肝癌Bel-7402细胞增殖,100mg/L细菌蛋白作用于细胞24,48,72h的抑制率分别为15.6%,35.6%,50%,呈剂量和时间依赖关系。②细菌蛋白对肝癌细胞生长周期时相分布及细胞凋亡率的影响:经链球菌蛋白(10,50mg/L)作用后,G2/M期Bel-7402细胞比率较正常对照组增加,差异有显著性(P<0.05);流式细胞术检测显示,经50mg/L链球菌蛋白作用后,实验组Bel-7402细胞凋亡率明显高于对照组细胞(P<0.01)。③Bel-7402细胞凋亡相关蛋白的变化:Bel-7402细胞经50mg/L链球菌蛋白分别作用24,48,72h后,细胞色素C的释放逐渐增多,Procaspase-3及Bcl-2蛋白水平降低。结论:链球菌32080株蛋白对人肝癌Bel-7402细胞的生长抑制作用存在着剂量和时间依赖性,并能将细胞的生长周期阻滞于G2/M期,诱导细胞凋亡,影响Bcl-2,procaspase-3和细胞色素C等重要的凋亡相关蛋白水平。 展开更多

关键词 链球菌 细胞凋亡 人肝癌Bel-7402细胞 流式细胞术

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浅析埃博拉病毒致病机制 被引量：3

8

作者 盛子洋 范东瀛 安静 《首都医科大学学报》 CAS 2014年第5期529-532,共4页

埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)属于丝状病毒科的单股负链RNA病毒,人体感染后可导致致命的埃博拉病毒病(Ebola viral disease,EVD)。当前EBOV广泛流行于非洲大陆,传染性强、致死率高、曾造成多次大暴发,严重威胁着疫区人们的健康和生命... 埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)属于丝状病毒科的单股负链RNA病毒,人体感染后可导致致命的埃博拉病毒病(Ebola viral disease,EVD)。当前EBOV广泛流行于非洲大陆,传染性强、致死率高、曾造成多次大暴发,严重威胁着疫区人们的健康和生命。然而目前EBOV的致病机制尚不明确,本文仅就EHF发病机制的最新进展做一综述,供广大同行参考。 展开更多

关键词 埃博拉病毒 出血热 致病机制

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思维导图在医学微生物学教学中的应用策略 被引量：5

9

作者 王一松 高娜 +4 位作者 盛子洋 范东瀛 吴艳花 王培刚 安静 《医学教育管理》 2022年第S01期103-107,共5页

思维导图是一种新的图形思维工具,是教学工作的得力助手。以往的教学中,根据医学微生物学的课程特点,结合目前课程教学中存在的具体问题,将思维导图这种可视化信息图形工具,运用到医学微生物学的辅助教学中,结合实例介绍思维导图的具体... 思维导图是一种新的图形思维工具,是教学工作的得力助手。以往的教学中,根据医学微生物学的课程特点,结合目前课程教学中存在的具体问题,将思维导图这种可视化信息图形工具,运用到医学微生物学的辅助教学中,结合实例介绍思维导图的具体实施方法。研究结果表明,思维导图可以提高医学微生物学的教学效果,有助于学生医学逻辑思维能力、临床思维和自主学习能力的培养。 展开更多

关键词 医学微生物学 思维导图 教学效果

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埃博拉病毒,何去何从 被引量：3

10

作者 盛子洋 范东瀛 安静 《微生物学免疫学进展》 2014年第5期60-64,共5页

埃博拉病毒(Ebola Virus,EBOV)是丝状病毒科的单股负链RNA病毒,其形态呈丝状,共有5个型别,其中扎伊尔型致死率高,曾在非洲大陆引起多次暴发。EBOV自然宿主尚不明确,猪、非人灵长类及蝙蝠都可能与病毒的传播有关,其中果蝠的关系最为密切... 埃博拉病毒(Ebola Virus,EBOV)是丝状病毒科的单股负链RNA病毒,其形态呈丝状,共有5个型别,其中扎伊尔型致死率高,曾在非洲大陆引起多次暴发。EBOV自然宿主尚不明确,猪、非人灵长类及蝙蝠都可能与病毒的传播有关,其中果蝠的关系最为密切。由于EBOV的毒力强和传播性强,加之目前尚无特效药物和疫苗,被列为生物危害四级,同时也被视为生物恐怖主义的工具之一。最近该病毒在西非肆虐人类,引起了广泛关注,因而就此做一综述,供广大同行参考。 展开更多

关键词 埃博拉病毒 病毒性出血热 自然宿主 ZMapp 丝状病毒

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重组丙型肝炎病毒核心蛋白的原核表达、纯化和抗体制备 被引量：1

11

作者 陈辉 高娜 +3 位作者 范东瀛 郑群 王娟 安静 《微生物与感染》 2010年第3期140-145,共6页

本文旨在获得纯化丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白(HCV-C)及抗HCV-C多克隆抗体,为深入研究HCV-C与肝细胞相互作用的分子机制奠定基础。首先以HCV1b亚型HC-J4-91全基因组质粒为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增HCV-C基因,构建重组质粒pQE31-HCV-C... 本文旨在获得纯化丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白(HCV-C)及抗HCV-C多克隆抗体,为深入研究HCV-C与肝细胞相互作用的分子机制奠定基础。首先以HCV1b亚型HC-J4-91全基因组质粒为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增HCV-C基因,构建重组质粒pQE31-HCV-C。融合蛋白经原核表达、纯化后,免疫BALB/c小鼠,制备抗HCV-C多克隆抗体。利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体效价,蛋白免疫印迹(Westernblot)和间接免疫荧光染色鉴定抗体特异性。结果显示,表达HCV-C的原核表达质粒pQE31-HCV-C构建正确,获得相对分子质量约22000的纯化融合蛋白。ELISA检测重组蛋白免疫小鼠的抗血清效价达1:12800。结果显示,自制的抗HCV-C多克隆抗体能特异性识别HCV-C。本研究获得了纯度较好、原核表达的HCV-C,并成功制备了抗HCV-C多克隆抗体,为深入研究HCV-C的致病机制提供了有实用价值的研究工具。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 核心蛋白 原核表达 抗体制备

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开展《医学微生物学》第二课堂活动,提高学生的综合素质 被引量：3

12

作者 吴艳花 范东瀛 安静 《继续医学教育》 2017年第1期64-65,共2页

医学微生物学是医学教育中实践性与应用性很强的重要学科。自主学习能力、创新思维能力、实验操作能力、团结协作能力以及分析问题和解决问题的能力是新形势下对医学人才的要求。开展医学微生物学第二课堂、设立专题进行查阅文献、讨论... 医学微生物学是医学教育中实践性与应用性很强的重要学科。自主学习能力、创新思维能力、实验操作能力、团结协作能力以及分析问题和解决问题的能力是新形势下对医学人才的要求。开展医学微生物学第二课堂、设立专题进行查阅文献、讨论并设计实验,进而开展实验进行验证,不仅发挥了学生的主观能动性,巩固了第一课堂理论知识,而且对于各种综合能力的提高均有裨益。 展开更多

关键词 医学微生物学 第二课堂 自主学习

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转化医学和精准医学理念在基础医学专业本科生培养中的应用 被引量：1

13

作者 王一松 范东瀛 吴艳花 《继续医学教育》 2016年第11期35-36,共2页

转化医学的理念已经渗透到医学研究的各个领域,成为实现精准医学的重要手段。在转化医学和精准医学并驾齐驱的崭新医学模式下,基础医学专业本科生的培养面临新的挑战。与临床医学相比,基础医学专业主要培养从事生物医药基础教学和科研... 转化医学的理念已经渗透到医学研究的各个领域,成为实现精准医学的重要手段。在转化医学和精准医学并驾齐驱的崭新医学模式下,基础医学专业本科生的培养面临新的挑战。与临床医学相比,基础医学专业主要培养从事生物医药基础教学和科研的高级专业人才。因此,如何在新的模式下培养基础医学专业本科生的转化医学和精准医学理念是人才培养过程中的重要任务。结合基础医学专业学生科研指导的体会,就如何将转化医学和精准医学的理念融入到基础医学专业本科生培养中的体会进行归纳和总结,以期为新时期基础医学专业本科生的人才培养模式提供参考。 展开更多

关键词 转化医学 精准医学 基础医学专业 科研培养

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GM-CSF作为Ⅱ型登革病毒E蛋白免疫佐剂的免疫效果观察

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作者 崔晓云 房树玉 +2 位作者 范东瀛 吴艳花 安静 《微生物学免疫学进展》 2017年第1期7-12,共6页

目的观察粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)作为II型登革病毒E蛋白免疫佐剂的保护效果,评估GM-CSF作为蛋白疫苗免疫佐剂的可行性。方法提取GM-CSF质粒(pCAG-GM)、将表达II型登革病... 目的观察粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)作为II型登革病毒E蛋白免疫佐剂的保护效果,评估GM-CSF作为蛋白疫苗免疫佐剂的可行性。方法提取GM-CSF质粒(pCAG-GM)、将表达II型登革病毒E蛋白的重组质粒(E/pGEX-6P-1)进行诱导,表达产物用亲和层析纯化。将BALB/c小鼠随机分为E蛋白组、佐剂组(E蛋白+GM-CSF)和对照组进行免疫,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清抗体终点效价;采用蚀斑减少中和试验(PRNT)检测II型登革病毒中和抗体水平;酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测小鼠免疫后细胞因子的水平;用攻毒试验观察各组小鼠保护率。结果 E蛋白组和佐剂组小鼠血清中抗体终点效价、中和抗体水平均在免疫后有一定的升高,差异无统计学意义(P>0.05);佐剂组细胞因子(IFN-γ和IL-10)水平较E蛋白组均有明显上升,差异具有统计学意义(P<0.05);但攻毒试验显示,佐剂组小鼠全部死亡,生存率为0,而E蛋白组的小鼠保护率为33%。结论 GM-CSF免疫佐剂可抑制II型登革病毒E蛋白的免疫保护作用,其作为蛋白疫苗免疫佐剂仍需慎重。 展开更多

关键词 登革病毒 E蛋白 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 佐剂 免疫效果

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人巨细胞病毒通过STAT3上调胶质瘤中endocan表达 被引量：5

15

作者 王士杰 范东瀛 +3 位作者 罗乔荔 邢燕 王一松 安静 《微生物与感染》 2016年第6期347-355,共9页

本研究旨在探讨人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)和内皮细胞特异性分子1(endocan)在胶质瘤发生发展中的作用及机制。利用HCMV感染人脑胶质瘤U87细胞,检测感染后第1、2、4天信号转导及转录激活蛋白3(signal transducer and acti... 本研究旨在探讨人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)和内皮细胞特异性分子1(endocan)在胶质瘤发生发展中的作用及机制。利用HCMV感染人脑胶质瘤U87细胞,检测感染后第1、2、4天信号转导及转录激活蛋白3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)和endocan的表达变化,并分析HCMV、STAT3和endocan三者之间的可能关联。结果显示,HCMV感染的U87细胞中pSTAT3和endocan表达上调,并随感染时间延长而逐渐升高;用RNAi干扰STAT3基因表达,endocan表达量下降;利用抗病毒药物更昔洛韦抑制HCMV复制后,pSTAT3表达量下降,endocan表达量随之下降。进一步利用免疫组织化学法检测79例脑胶质瘤患者和8例对照者脑组织中pSTAT3表达情况,发现pSTAT3在胶质瘤组织中表达上调;与低级别胶质瘤相比,高级别胶质瘤中pSTAT3染色强度较高。结果提示,HCMV感染可能通过STAT3信号通路上调endocan表达,从而参与胶质瘤的进展。 展开更多

关键词 胶质瘤 人巨细胞病毒 内皮细胞特异性分子1 信号转导及转录激活蛋白3

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Rasmussen脑炎患者脑组织的转录组学特征分析 被引量：1

16

作者 罗乔荔 王一松 +5 位作者 关宇光 陈思畅 范东瀛 王培刚 栾国明 安静 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第14期1407-1413,共7页

目的探究Rasmussen脑炎(Rasmussen encephalitis,RE)患者脑组织的转录组学特征。方法采用RNA-seq的方法,对2008年4月至2013年12月首都医科大学附属北京三博脑科医院收治的RE及颞叶癫痫(temporal lobe epilepsy,TLE)患者(对照)中各选取4... 目的探究Rasmussen脑炎(Rasmussen encephalitis,RE)患者脑组织的转录组学特征。方法采用RNA-seq的方法,对2008年4月至2013年12月首都医科大学附属北京三博脑科医院收治的RE及颞叶癫痫(temporal lobe epilepsy,TLE)患者(对照)中各选取4例脑组织的基因表达谱进行检测。结果聚类分析显示RE患者及对照脑组织差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)谱存在明显差异。共筛选出1285个DEGs,其中782个(60.9%)下调,503个(39.1%)上调。上调表达的DEGs主要富集于神经元信号转导相关的通路,可能与RE患者频繁的癫痫发作相关;下调表达的DEGs主要富集于细胞骨架、细胞周期及趋化作用相关的通路,可能与RE患者脑组织中神经元的丢失及再生以及部分病原体感染后的免疫应答相关。上调表达的关键基因为TAS2R40、HTR4、NAP1L2,下调表达的关键基因为CXXC1、SEPTIN8、CCR7。结论RE患者脑组织的转录组学具有明显特征,DEGs主要富集于神经元信号转导、细胞周期以及趋化作用相关的通路中。 展开更多

关键词 RASMUSSEN脑炎 癫痫 RNA-SEQ 转录组学

原文传递

登革病毒包膜蛋白的原核表达及免疫原性研究 被引量：2

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作者 房树玉 吴艳花 +2 位作者 崔晓云 范东瀛 安静 《微生物与感染》 2014年第3期152-156,共5页

登革病毒感染引起的登革热和登革出血热/登革休克综合征是目前流行最为广泛的虫媒病毒病,但其发病机制不明,也无疫苗和特异性抗病毒药物用于防治。登革病毒包膜蛋白(E蛋白)在病毒致病和免疫过程中发挥重要作用。本研究构建了登革病毒2型... 登革病毒感染引起的登革热和登革出血热/登革休克综合征是目前流行最为广泛的虫媒病毒病,但其发病机制不明,也无疫苗和特异性抗病毒药物用于防治。登革病毒包膜蛋白(E蛋白)在病毒致病和免疫过程中发挥重要作用。本研究构建了登革病毒2型E蛋白基因的重组质粒E/pGEX-6P-1,并优化表达条件,获得登革病毒E蛋白的高效可溶性表达;用谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B亲和层析柱纯化,获得纯度较高的蛋白。该蛋白具有较好的免疫原性,免疫小鼠后可获得高效价抗体。本研究为进一步了解登革病毒E蛋白的功能及其在相关疾病中的应用奠定了基础。 展开更多

关键词 登革病毒 包膜蛋白 原核表达 免疫原性

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基孔肯亚病毒垂直传播的研究进展

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作者 刘利波 范东瀛 +2 位作者 安静 周红宁 王培刚 《微生物与感染》 CAS 2021年第2期137-144,共8页

基孔肯亚病毒(chikungunya virus,CHIKV)是一种由埃及伊蚊和白纹伊蚊传播的蚊媒病毒,属于披膜病毒科甲病毒属。从2005年起,CHIKV在非洲、亚洲和美洲多次发生大规模疫情,其感染率较高,能引起发热性疾病,常伴有关节炎,关节炎症状可维持数... 基孔肯亚病毒(chikungunya virus,CHIKV)是一种由埃及伊蚊和白纹伊蚊传播的蚊媒病毒,属于披膜病毒科甲病毒属。从2005年起,CHIKV在非洲、亚洲和美洲多次发生大规模疫情,其感染率较高,能引起发热性疾病,常伴有关节炎,关节炎症状可维持数月甚至数年,对患者生活和社会生产造成极大影响。除了蚊媒传播,妊娠期母体感染CHIKV还可通过垂直传播引起胎儿或新生儿感染,甚至造成新生儿严重神经系统后遗症。本文将从垂直传播案例、临床表现、可能的方式及机制、动物模型、诊断、预防和治疗等方面进行综述,以期为CHIKV及其垂直传播的深入研究提供帮助。 展开更多

关键词 基孔肯亚病毒 垂直传播 临床表现 动物模型 诊断 预防和治疗

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登革2型病毒与整合素β3相互作用机制的研究

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作者 明颖 高娜 +5 位作者 张俊磊 陈辉 王娟 范东瀛 吴江漫 安静 《传染病信息》 2011年第1期18-20,64,共4页

目的观察登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)感染后及转染DV2病毒蛋白的质粒后,EA.hy926细胞中整合素β3表达规律及表达量的变化,以初步明确DV2与整合素β3的相互作用的可能机制。方法经噬斑法测定DV2在EA.hy926中的增殖规律,并... 目的观察登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)感染后及转染DV2病毒蛋白的质粒后,EA.hy926细胞中整合素β3表达规律及表达量的变化,以初步明确DV2与整合素β3的相互作用的可能机制。方法经噬斑法测定DV2在EA.hy926中的增殖规律,并通过间接免疫荧光染色检测DV2感染后及病毒蛋白质粒转染后整合素β3表达量的变化。结果 DV2能够在EA.hy926细胞中增殖,在感染复数为1的条件下,最高病毒滴度为105pfu/ml,出现在感染后第5天,以后随着感染时间延长病毒滴度逐渐下降。DV2感染后整合素β3的表达量增高,且随感染时间的延长有渐增趋势;转染DV2E蛋白可诱导整合素β3的表达,且E蛋白与整合素β3有明显的共存,而DV2的其他病毒蛋白无明显诱导整合素β3表达的作用,且与之无明显共存。结论 DV2感染可诱导EA.hy926细胞整合素β3的表达,而E蛋白可能是DV2与整合素β3相互作用、进而介导病毒进入细胞的重要分子。 展开更多

关键词 登革热病毒 整合素类 病毒包膜蛋白质类

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登革病毒感染HepG2-严重联合免疫缺陷小鼠模型的建立

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作者 陈艳雷 王娟 +3 位作者 高娜 范东瀛 王一松 安静 《微生物与感染》 2013年第1期16-20,共5页

缺乏合适的动物模型严重限制了登革病毒(DENV)致病机制研究的进展。本研究旨在构建DENV感染小鼠模型,为阐明其致病机制提供实验材料。首先在严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠腹腔内接种人肝癌细胞株HepG2,构建人鼠嵌合体动物模型;移植后10d... 缺乏合适的动物模型严重限制了登革病毒(DENV)致病机制研究的进展。本研究旨在构建DENV感染小鼠模型,为阐明其致病机制提供实验材料。首先在严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠腹腔内接种人肝癌细胞株HepG2,构建人鼠嵌合体动物模型;移植后10d腹腔接种DENV,通过检测病毒在体内分布及主要器官的组织学改变,评价该动物模型的实用价值。结果显示,在SCID小鼠成功移植HepG2并感染DENV后,出现病毒血症及主要器官严重损伤等现象,但无后肢麻痹等人类登革热无关症状。本研究成功构建了HepG2-SCID人鼠嵌合模型,该模型能支持DENV复制,并表现出部分人类DENV感染的临床症状,为研究DENV的致病机制提供了有价值的实验材料。 展开更多

关键词 登革病毒 动物模型HepG2细胞株

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