目的通过构建针对p53凋亡抑制蛋白(inhibitory member of the apoptosistimulating protein of p53,i ASPP)的RNAi质粒,研究在体内外抑制i ASPP基因表达后对大肠癌细胞HT-29凋亡的影响。方法构建i ASPP的腺病毒RNAi质粒p Ad-i ASPP-RNAi...目的通过构建针对p53凋亡抑制蛋白(inhibitory member of the apoptosistimulating protein of p53,i ASPP)的RNAi质粒,研究在体内外抑制i ASPP基因表达后对大肠癌细胞HT-29凋亡的影响。方法构建i ASPP的腺病毒RNAi质粒p Ad-i ASPP-RNAi,体外转染HT-29细胞,同时建立HT-29的裸鼠移植瘤模型;采用RT-PCR和Western blotting检测转染后瘤细胞i ASPP基因在mRNA和蛋白质水平的变化;采用流式细胞仪检测转染前后瘤细胞凋亡的变化。结果转染i ASPP RNAi后,与阴性对照组、空载病毒对照组相比,HT-29细胞的i ASPP mRNA及蛋白表达量均降低;i ASPP-RNAi组HT-29细胞的凋亡率、坏死率与阴性对照组及空白病毒对照组相比显著增加,差异有统计学意义(P<0.01)。裸鼠移植瘤细胞在病毒转染后,细胞体积增大,核染色质浓集,出现凋亡;移植瘤细胞的凋亡率、坏死率与阴性对照组、空载病毒对照组相比显著增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论在体内外抑制i ASPP基因的表达能够促进大肠癌细胞HT-29的凋亡,i ASPP有可能成为大肠癌分子免疫治疗的靶标。展开更多
目的研究p53凋亡刺激蛋白(apoptosis-stimulating protein of p53, ASPP)家族成员在结直肠癌(colorectal cancer, CRC)组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学方法和免疫荧光染色方法检测115例CRC组织中ASPP蛋白...目的研究p53凋亡刺激蛋白(apoptosis-stimulating protein of p53, ASPP)家族成员在结直肠癌(colorectal cancer, CRC)组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学方法和免疫荧光染色方法检测115例CRC组织中ASPP蛋白家族成员(ASPP1、ASPP2、iASPP)的表达,并应用统计学方法检验ASPP的表达与CRC临床病理特征之间的关系。结果 ASPP1在115例CRC组织中均无表达,ASPP2的表达率为91.3%(105/115),iASPP的表达率为22.6%(26/115)。ASPP2的表达在≥50岁与<50岁组患者间差异具有统计学意义(P<0.01);0+Ⅰ期CRC中的表达与Ⅲ期相比,差异具有统计学意义(P<0.05);浸润深度上,Tis+T1组与T3组相比,差异具有统计学意义(P<0.01);淋巴结转移分组,N0与N2组间差异具有统计学意义(P<0.01)。iASPP在淋巴结转移分组N0组与N1组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。ASPP2和iASPP的表达与CRC的其他临床病理特征均无相关性。结论 ASPP家族成员在CRC组织中的表达存在差异;ASPP2可用于判断CRC患者的预后。展开更多
文摘目的通过构建针对p53凋亡抑制蛋白(inhibitory member of the apoptosistimulating protein of p53,i ASPP)的RNAi质粒,研究在体内外抑制i ASPP基因表达后对大肠癌细胞HT-29凋亡的影响。方法构建i ASPP的腺病毒RNAi质粒p Ad-i ASPP-RNAi,体外转染HT-29细胞,同时建立HT-29的裸鼠移植瘤模型;采用RT-PCR和Western blotting检测转染后瘤细胞i ASPP基因在mRNA和蛋白质水平的变化;采用流式细胞仪检测转染前后瘤细胞凋亡的变化。结果转染i ASPP RNAi后,与阴性对照组、空载病毒对照组相比,HT-29细胞的i ASPP mRNA及蛋白表达量均降低;i ASPP-RNAi组HT-29细胞的凋亡率、坏死率与阴性对照组及空白病毒对照组相比显著增加,差异有统计学意义(P<0.01)。裸鼠移植瘤细胞在病毒转染后,细胞体积增大,核染色质浓集,出现凋亡;移植瘤细胞的凋亡率、坏死率与阴性对照组、空载病毒对照组相比显著增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论在体内外抑制i ASPP基因的表达能够促进大肠癌细胞HT-29的凋亡,i ASPP有可能成为大肠癌分子免疫治疗的靶标。
文摘目的研究p53凋亡刺激蛋白(apoptosis-stimulating protein of p53, ASPP)家族成员在结直肠癌(colorectal cancer, CRC)组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学方法和免疫荧光染色方法检测115例CRC组织中ASPP蛋白家族成员(ASPP1、ASPP2、iASPP)的表达,并应用统计学方法检验ASPP的表达与CRC临床病理特征之间的关系。结果 ASPP1在115例CRC组织中均无表达,ASPP2的表达率为91.3%(105/115),iASPP的表达率为22.6%(26/115)。ASPP2的表达在≥50岁与<50岁组患者间差异具有统计学意义(P<0.01);0+Ⅰ期CRC中的表达与Ⅲ期相比,差异具有统计学意义(P<0.05);浸润深度上,Tis+T1组与T3组相比,差异具有统计学意义(P<0.01);淋巴结转移分组,N0与N2组间差异具有统计学意义(P<0.01)。iASPP在淋巴结转移分组N0组与N1组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。ASPP2和iASPP的表达与CRC的其他临床病理特征均无相关性。结论 ASPP家族成员在CRC组织中的表达存在差异;ASPP2可用于判断CRC患者的预后。
