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幽门螺杆菌抗原基因ureB在乳酸菌中的克隆表达与免疫反应性研究 被引量：3
1
作者 张小娟 张荣光 +1 位作者 段广才 范青堂 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期925-928,932,共5页
目的为了开发幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)口服疫苗,将Hp尿素酶B(UreB)在食品级乳酸乳球菌NZ3900菌株中进行表达,并研究其免疫反应性。方法 PCR扩增Hp MEL-HP27菌株ureB基因(基因号:FJ436980),将其克隆入大肠杆菌-乳酸乳球菌穿... 目的为了开发幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)口服疫苗,将Hp尿素酶B(UreB)在食品级乳酸乳球菌NZ3900菌株中进行表达,并研究其免疫反应性。方法 PCR扩增Hp MEL-HP27菌株ureB基因(基因号:FJ436980),将其克隆入大肠杆菌-乳酸乳球菌穿梭质粒pNZ8110中并转化乳酸乳球菌NZ3900;采用正交试验确定目的蛋白表达的适宜条件;应用western-blot鉴定其免疫反应性。结果成功扩增了Hp MEL-HP27菌株ureB基因,构建了ureB基因的乳酸菌NICE(Nisin-controlled expression)原核表达系统;UreB蛋白适宜的表达条件为:在ureB重组菌生长至对数生长前期(OD600≈0.3～0.4)加入终浓度为40ng/mL的nisin,诱导表达5h,可溶性UreB蛋白表达量最高,可达27.26μg/mL培养基。可溶性UreB蛋白的表达占上清蛋白的比例最高可达20.19%;Western-blot结果显示乳酸乳球菌表达的UreB抗原蛋白具有良好的免疫反应性。结论结果提示应用乳酸乳球菌构建幽门螺杆菌食品级疫苗可能具有较好前景。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 乳酸乳球菌 NICE UREB
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镉对巨噬细胞毒性及DNA损伤作用的研究 被引量：3
2
作者 吴静 范青堂 +2 位作者 程学敏 崔留欣 刘华莲 《中国公共卫生学报》 1999年第6期356-358,共3页
应用ＭＴＴ 比色、琼脂糖凝胶电泳方法研究氯化镉对小鼠腹腔巨噬细胞（ ＭΦ） 的毒性及ＤＮＡ 的损伤作用。结果表明，染毒６ 小时，氯化镉对ＭΦ活性产生抑制效应，染毒２４ 小时，抑制效应最大；镉浓度与ＭΦ活性抑制率之间存在剂量... 应用ＭＴＴ 比色、琼脂糖凝胶电泳方法研究氯化镉对小鼠腹腔巨噬细胞（ ＭΦ） 的毒性及ＤＮＡ 的损伤作用。结果表明，染毒６ 小时，氯化镉对ＭΦ活性产生抑制效应，染毒２４ 小时，抑制效应最大；镉浓度与ＭΦ活性抑制率之间存在剂量反应关系。染毒２４ 小时，镉浓度为１０ 、２０ 、４０ 、８０μｍｏｌ／Ｌ时，ＭΦＤＮＡ 电泳呈现“梯子”条带（ 凋亡特征） ；镉浓度为１６０ 、３２０μｍｏｌ／Ｌ 时，ＤＮＡ 电泳呈现“膜”状（ 坏死特征） 。本研究提示，氯化镉可抑制离体ＭΦ的活性，而且可引起ＤＮＡ 的降解，不同浓度的氧化镉引起ＭΦ损伤的方式不同。 展开更多
关键词 镉 MΦ 细胞毒性 DNA 凋亡
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饮水型地氟病区水氟标准研究——水氟浓度与氟斑牙患病关系 被引量：2
3
作者 崔留欣 范青堂 +8 位作者 程学敏 吕风臣 刘华莲 沙明富 高玉真 朱新坡 张莉 罗国庆 张振华 《河南预防医学杂志》 1993年第4期193-196,共4页
本文重点阐述了天荒苹抽水蓄能电站励磁系统主回路方案选择、励磁系统功能设置，并对励磁系统设备作了简要介绍。
关键词 氟 水氟 氟斑牙 地方病 氟中毒
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幽门螺杆菌尿素酶基因ureB植物双元表达载体的构建
4
作者 杨成运 段广才 范青堂 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2011年第1期57-59,共3页
目的:构建含有人幽门螺杆菌(H.pylori,Hp)ureB基因的植物表达载体。方法:采用高保真PCR技术从质粒pMED-ureB中扩增出ureB基因,构建质粒pUC18-ureB,再将pUC18-ureB酶切,将ureB基因与质粒pBI121连接。结果:构建的PBI121-ureB经PCR、酶切... 目的:构建含有人幽门螺杆菌(H.pylori,Hp)ureB基因的植物表达载体。方法:采用高保真PCR技术从质粒pMED-ureB中扩增出ureB基因,构建质粒pUC18-ureB,再将pUC18-ureB酶切,将ureB基因与质粒pBI121连接。结果:构建的PBI121-ureB经PCR、酶切鉴定和测序分析证明,插入的基因片段为ureB基因,长度为1716bp,与GenBank报道的核苷酸序列同源性为99.76%,氨基酸序列同源性为100%。结论:成功构建了ureB基因的植物表达载体。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 UREB 植物表达载体
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正常人和食管癌患者食管组织微量元素分析
5
作者 韦俊萍 范青堂 +2 位作者 刘华莲 赵杰 陈全录 《河南医科大学学报》 1990年第3期241-243,共3页
用原子吸收分光光度法测定了50例食管癌患者和16例正常人食管组织中微量元素铜、锌、铁、钴、锰、镍的含量。结果:①食管癌组织铜含量明显高于癌旁组织、余差异无显著性;②正常人食管组织锰、钴高于食管癌组织及癌旁组织,铜低于癌组织,... 用原子吸收分光光度法测定了50例食管癌患者和16例正常人食管组织中微量元素铜、锌、铁、钴、锰、镍的含量。结果:①食管癌组织铜含量明显高于癌旁组织、余差异无显著性;②正常人食管组织锰、钴高于食管癌组织及癌旁组织,铜低于癌组织,但与癌旁组织差异无显著性。作者认为.食管癌组织铜含量升高可能是癌变的结果。食管癌病人食管组织锰、钴低于正常人有可能是癌变原因之一。 展开更多
关键词 食管癌 微量元素 分析
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镉对巨噬细胞分泌功能影响的研究 被引量：9
6
作者 吴静 张琳 +3 位作者 程学敏 崔留欣 范青堂 刘华莲 《环境与健康杂志》 CAS CSSCI CSCD 北大核心 1999年第6期332-333,339,共3页
为探讨镉对免疫系统抑制的机理，研究镉对小鼠腹腔巨噬细胞分泌生物活性介质的影响。结果发现，５－０μｍｏｌ／Ｌ 及１０ μｍ ｏｌ／Ｌ 的镉，可减少巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子α（ ＴＮＦα） 及氧化氮（ ＮＯ） 的量，但提高其分... 为探讨镉对免疫系统抑制的机理，研究镉对小鼠腹腔巨噬细胞分泌生物活性介质的影响。结果发现，５－０μｍｏｌ／Ｌ 及１０ μｍ ｏｌ／Ｌ 的镉，可减少巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子α（ ＴＮＦα） 及氧化氮（ ＮＯ） 的量，但提高其分泌前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２） 的量，这可能是其发挥免疫抑制作用的机制之一。 展开更多
关键词 镉 巨噬细胞 肿瘤坏死因子 氧化氮 免疫抑制
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