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苦荞麦酸奶的研制和质量特性分析 被引量：10
1
作者 任大勇 陈青青 +4 位作者 荣凤君 周亭亭 王珂 刘宏锋 沈明浩 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2017年第2期102-105,共4页
以牛奶和苦荞麦为主要原料,研究了保健型苦荞麦酸奶的加工工艺条件。通过单因素试验和正交试验确定了最佳条件,即苦荞麦添加量为3.4%,蔗糖添加量为8.0%,发酵时间为6.0 h,接种量为5.0%,在此条件下苦荞麦酸奶感官最佳。本实验还研究了4℃... 以牛奶和苦荞麦为主要原料,研究了保健型苦荞麦酸奶的加工工艺条件。通过单因素试验和正交试验确定了最佳条件,即苦荞麦添加量为3.4%,蔗糖添加量为8.0%,发酵时间为6.0 h,接种量为5.0%,在此条件下苦荞麦酸奶感官最佳。本实验还研究了4℃保存温度对酸奶品质的影响。实验结果表明,在4℃酸奶的p H值和酸度具有较高的稳定性及较高的活性乳酸菌含量。 展开更多
关键词 苦荞麦 酸奶 乳酸菌 加工工艺 质量特性
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乳酸菌破壁方法的比较研究 被引量：9
2
作者 潘荣荣 王茂鹏 +7 位作者 李昌 邸洋 荣凤君 杜寿文 朱羿龙 刘立明 朱国强 金宁一 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期34-38,共5页
本实验旨在探索一种快速、高效、经济的乳酸菌破壁方法。通过甘氨酸破壁法、反复冻融破壁法、溶菌酶破壁法、氧化锆珠破壁法、超声波破壁法以及3种复合破壁法对植物乳杆菌Lactobacillus.plantarum 1.557进行破壁处理,并以革兰氏染色和... 本实验旨在探索一种快速、高效、经济的乳酸菌破壁方法。通过甘氨酸破壁法、反复冻融破壁法、溶菌酶破壁法、氧化锆珠破壁法、超声波破壁法以及3种复合破壁法对植物乳杆菌Lactobacillus.plantarum 1.557进行破壁处理,并以革兰氏染色和十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)为评价方法,比较破壁效果和破壁时间的差异。此外,通过β-葡萄糖醛酸酶(GUS)活力的测定对氧化锆珠破壁法所提蛋白进行活性检测,通过琼脂糖凝胶电泳对氧化锆珠破壁法所提RNA的质量进行了检测。结果表明:氧化锆珠破壁法优胜于其他几种处理方法,该法所提取的GUS蛋白具有蛋白活性,提取的RNA的OD_(260)/OD_(280)的比值在1.8~2.1之间,符合标准的比值,纯度较高,降解程度低。因此,氧化锆珠破壁法适用于快速提取乳酸菌菌体蛋白和总RNA,它是一种快速、高效、经济的乳酸菌破壁方法。 展开更多
关键词 乳酸菌 破壁方法 氧化锆珠 蛋白提取 RNA提取
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发酵食品乳酸菌分离鉴定及功能特性研究 被引量：11
3
作者 任大勇 荣凤君 +4 位作者 宫圣洁 朱剑威 张振业 刘宏妍 于寒松 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2016年第19期194-199,共6页
对发酵食品中分离出的7株乳酸菌进行了亚硝酸钠、乳糖、胆固醇降解试验、抗氧化活性试验和抑菌试验,筛选出益生功能较强的乳酸菌菌株。结果表明:菌株A1对亚硝酸钠和胆固醇的降解率都是最高,分别为91.8%和56.6%,对乳糖降解率最高的是A2,... 对发酵食品中分离出的7株乳酸菌进行了亚硝酸钠、乳糖、胆固醇降解试验、抗氧化活性试验和抑菌试验,筛选出益生功能较强的乳酸菌菌株。结果表明:菌株A1对亚硝酸钠和胆固醇的降解率都是最高,分别为91.8%和56.6%,对乳糖降解率最高的是A2,降解率为73.9%,菌株A2对亚硝酸钠的降解率也超过90%。3种抗氧化试验的结果各不相同,自由基清除率最高的是A4,为94.6%;羟基清除率最高的是A7,为40.9%;亚铁离子清除率最高的是A1,为71.1%。经过100℃处理后的乳酸菌抑菌效果没有发生太大的改变;经酶处理后,加入胃蛋白酶和胰蛋白酶的A6菌液对大肠杆菌,没有产生抑菌效果。 展开更多
关键词 乳酸菌 亚硝酸钠 胆固醇 乳糖 抑菌试验
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乳酸菌氧化锆珠破壁方法的优化及适用性研究 被引量：1
4
作者 潘荣荣 王茂鹏 +7 位作者 李昌 邸洋 荣凤君 杜寿文 朱羿龙 刘立明 朱国强 金宁一 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期140-143,共4页
本实验旨在优化氧化锆珠破壁方法,以期筛选出较佳的破壁条件,提高蛋白得率。实验在菌体重量、研磨buffer和研磨时间这3方面对该破壁方法进行了优化,并通过SDS-PAGE来分析其破壁效果。在优化后的条件下,同时对6株乳酸菌进行破壁处理并通... 本实验旨在优化氧化锆珠破壁方法,以期筛选出较佳的破壁条件,提高蛋白得率。实验在菌体重量、研磨buffer和研磨时间这3方面对该破壁方法进行了优化,并通过SDS-PAGE来分析其破壁效果。在优化后的条件下,同时对6株乳酸菌进行破壁处理并通过SDS-PAGE来分析其破壁效果。结果表明:在菌体重量、研磨buffer、锆珠三者的加入比例(W/V/W)为0.013 g∶300μL∶1 g的条件下,研磨15 min,提取的蛋白图谱条带清晰,丰度高;RIPA、PBS、PENP、GUS作为研磨buffer时,提取的蛋白图谱条带清晰且丰度高,而8 mol/L尿素作为研磨buffer时,图谱条带模糊且丰度低;6株乳酸菌经该方法破壁处理后,蛋白图谱条带均具有较高的丰度和清晰度。因此,对于乳酸菌的破壁,氧化锆珠破壁法具有快速、高效的优点。 展开更多
关键词 乳酸菌 氧化锆珠 优化 适用性
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不同来源乳酸菌对2种致病菌的抑菌活性比较及抑菌性质研究 被引量：5
5
作者 任大勇 荣凤君 +4 位作者 宫圣洁 张振业 朱剑威 刘宏妍 于寒松 《食品工程》 2015年第4期41-44,共4页
天然抗生素已经成为现代生物科学和食品科学关注的热点,筛选出含有抑菌物质的天然抗生素菌株,已经成为食品、生物研究的新趋势。选用9株不同来源的乳酸菌对2种致病菌进行体外抑菌试验,采用牛津杯法对乳酸菌的上清液、上清液(p H=6.5)、... 天然抗生素已经成为现代生物科学和食品科学关注的热点,筛选出含有抑菌物质的天然抗生素菌株,已经成为食品、生物研究的新趋势。选用9株不同来源的乳酸菌对2种致病菌进行体外抑菌试验,采用牛津杯法对乳酸菌的上清液、上清液(p H=6.5)、超声波裂解液、活菌体的抑菌性能进行研究。试验结果表明,当致病菌为金黄色葡萄球菌时:上清液抑菌最好的菌株是H9,直径为2.56 cm;上清液(p H=6.5)抑菌最好的是L12,直径为1.26 cm;活菌体抑菌最好的菌株H8,直径为1.63 cm;超声波裂解液抑菌最好的是L2,直径是1.27 cm。当致病菌为沙门氏菌时:上清液抑菌最好的菌株是L16,直径为2.54 cm;上清液(p H=6.5)抑菌最好的是L17,直径为1.47 cm;活菌体抑菌最好的菌株L17,直径为1.27 cm;超声波裂解液抑菌最好的是L16,直径是2.04 cm。 展开更多
关键词 乳酸菌 抑菌 牛津杯法 病原菌
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用于活体成像裸鼠肺癌肿瘤模型的建立 被引量：3
6
作者 范园园 李铁 +10 位作者 陈爽 李一权 荣凤君 李文杰 尹逊哲 韩继成 李善智 李敏 崔传信 李霄 金宁一 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1177-1184,共8页
本研究构建1株能够稳定表达荧光素酶的人肺癌细胞，并进行生物学特性鉴定及体内成瘤情况验证。将携带有萤火虫荧光素酶基因的pGL4．50质粒转入A549细胞中，利用G418一直加压筛选出能够表达荧光素酶的阳性细胞克隆，并对阳性细胞克隆进... 本研究构建1株能够稳定表达荧光素酶的人肺癌细胞，并进行生物学特性鉴定及体内成瘤情况验证。将携带有萤火虫荧光素酶基因的pGL4．50质粒转入A549细胞中，利用G418一直加压筛选出能够表达荧光素酶的阳性细胞克隆，并对阳性细胞克隆进行稳定性和体外活体成像检测。测定A549-luc细胞和A549细胞的生长曲线、迁移、侵袭及细胞周期，确定转染前后细胞生物学特性变化。为检测A549-luc细胞在体内成瘤和发光情况，建立裸鼠皮下荷瘤模型并应用小动物活体成像系统观察。结果表明，通过G418一直加压筛选和荧光素酶活性检测，筛选出2株荧光素酶活性高的克隆Clone20和Clone28，并连续传至40代，每5代检测1次荧光素酶活性，最终保留荧光素酶活性和稳定性最高的Clone28，Clone28通过体外活体成像检测显示生物发光值与细胞数目呈正相关的线性关系（R^2=0．9948）。A549-luc细胞和A549细胞具有相似的生长特性、迁移和侵袭能力以及细胞周期。成功建立了裸鼠皮下荷瘤模型，其发光强度与肿瘤体积呈正相关的线性关系（R^2=0．9715）。本研究稳定表达荧光素酶的人肺癌细胞的构建并成功建立裸鼠皮下荷瘤模型，可通过活体生物成像系统动态监测肿瘤的变化。 展开更多
关键词 A549细胞 荧光素酶 活体成像 裸鼠 肺癌肿瘤模型
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乳酸菌表达CRISPR gRNA载体的构建与鉴定 被引量：1
7
作者 邸洋 王茂鹏 +6 位作者 李昌 潘荣荣 荣凤君 杜寿文 朱羿龙 郭焱 金宁一 《生物技术》 CAS 北大核心 2017年第1期9-16,共8页
[目的]构建并筛选重组gRNA(向导RNA)表达质粒p SJCR-LDH和p SJCR-C9PX,并对gRNA在乳酸菌中的表达进行鉴定。[方法]通过PCR技术扩增复制子SH71、氯霉素抗性基因CM和gRNA表达盒片段。将CM片段分别与gRNA表达盒进行融合,再与SH71复制子进... [目的]构建并筛选重组gRNA(向导RNA)表达质粒p SJCR-LDH和p SJCR-C9PX,并对gRNA在乳酸菌中的表达进行鉴定。[方法]通过PCR技术扩增复制子SH71、氯霉素抗性基因CM和gRNA表达盒片段。将CM片段分别与gRNA表达盒进行融合,再与SH71复制子进行无缝克隆。通过转化,构建重组质粒p SJCR-LDH和p SJCR-C9PX。应用PCR、RT-PCR、Real-Time PCR对重组质粒进行鉴定,gRNA表达验证及拷贝数检测。[结果]PCR及RT-PCR结果显示获得169 bp大小目的条带,表明获得重组质粒载体且该gRNA表达载体在植物乳杆菌WCFS1株、CGMCC1.557株、乳酸乳球菌MG1363株中均成功表达,绝对荧光定量PCR检测获得LDH-gRNA标准曲线为y=-3.480log X+45.34,扩增效率为93.8%;C9PX-gRNA标准曲线为y=-3.327log X+37.07,扩增效率为99.8%。[结论]为利用CRISPR基因编辑技术在乳酸菌中进行基因操作奠定基础,为乳酸菌载体构建提供方法。 展开更多
关键词 乳酸菌 基因编辑 重组表达质粒 gRNA CRISPR
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