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琼枝白化特征及其附生菌群多样性分析
1
作者 马艺丹 唐磊 +4 位作者 王一帆 张帅 王振东 茅云翔 莫照兰 《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期52-62,共11页
2021-2022年,海南昌江养殖的琼枝(Betaphycus gelatinae)白化现象频发,造成了一定的经济损失,影响了海洋生态环境。为探究白化琼枝的特征和附生菌群落结构的差异,本研究分析了不同状态琼枝的形态差异;测定了色素含量、光合生理、生理生... 2021-2022年,海南昌江养殖的琼枝(Betaphycus gelatinae)白化现象频发,造成了一定的经济损失,影响了海洋生态环境。为探究白化琼枝的特征和附生菌群落结构的差异,本研究分析了不同状态琼枝的形态差异;测定了色素含量、光合生理、生理生化等指标;分离、鉴定了不同状态琼枝表面的可培养附生细菌,同时采用16S rRNA高通量测序技术分析了健康琼枝(BgR)和白化琼枝(BgW)表面附生细菌的α多样性、β多样性以及菌群群落结构组成。研究显示,白化琼枝藻体的皮层组织结构遭到破坏,色素含量、最大光合效率(QY_max)显著降低,活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、脯氨酸(Pro)含量显著降低(p<0.05);BgW的可培养附生细菌数量(2.76×10^(7) cfu/g)显著高于BgR(3.3×10^(4) cfu/g),BgR中可培养附生细菌优势菌为鲁杰氏菌属(Ruegeria),BgW中为Yoonia属;高通量测序结果显示,两组样品附生菌群的α多样性指数无显著差异,但BgW的Ace、Chao、Simpson指数均有所升高,相似性分析(ANOSIM)表明,BgR和BgW表面附生菌群之间存在显著差异,比对注释结果共识别出253个OTUs,无色杆菌属(Achromobacter)、琼脂小杆菌属(Agaribacterium)、Hirschia属、Mesoflavibacter属和Aquimarina属是BgR和BgW之间相对丰度差异最显著的细菌类群(p<0.001);BgR的优势菌群为无色杆菌属,BgW的优势菌群为琼脂小杆菌属。本研究首次报道了白化琼枝的特征及表面附生菌群的变化,为进一步探究琼枝白化的原因奠定了基础。 展开更多
关键词 琼枝 白化 附生细菌 多样性 生理生化 病理特征
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多纹钱蝶鱼源海豚链球菌的分离鉴定及灭活疫苗的免疫效果
2
作者 尚忠 唐磊 +3 位作者 王连慧 黄海 茅云翔 莫照兰 《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期38-50,共13页
为探究养殖的多纹钱蝶鱼(Selenotoca multifasciata)病害频发的原因,建立有效的病害防控方法,对暴发于海南养殖场的多纹钱蝶鱼病害开展调查并进行灭活疫苗的研制及免疫保护效果评估。分离到2株病原菌LSSM和DFSM,经形态学和16S rDNA序列... 为探究养殖的多纹钱蝶鱼(Selenotoca multifasciata)病害频发的原因,建立有效的病害防控方法,对暴发于海南养殖场的多纹钱蝶鱼病害开展调查并进行灭活疫苗的研制及免疫保护效果评估。分离到2株病原菌LSSM和DFSM,经形态学和16S rDNA序列分析,将病原鉴定为海豚链球菌(Streptococcus iniae)。将这2株菌与实验室收集保藏的2株鱼源海豚链球菌(菌株GXTO和GXAS)进行了血清型鉴定和耐药性、致病性分析,制备了灭活疫苗并评价了疫苗的免疫保护效果。研究表明:4株海豚链球菌鉴定为血清Ⅰ型。所有菌株均对青霉素类、头孢类、四环素等23种抗生素高度敏感、对丁胺卡那耐药,其中海南株LSSM、DFSM对庆大霉素和卡那霉素抗生素耐药,广西株GXTO和GXAS对庆大霉素和卡那霉素敏感。DFSM、GXTO和LSSM对多纹钱蝶鱼的半数致死量(LD_(50))分别为7.20×10^(2)、2.72×10^(3)和3.40×10^(6) CFU/尾,GXAS未显示毒力。分别制备3株毒株(DFSM、GXTO和LSSM)的灭活疫苗,通过腹腔注射途径免疫多纹钱蝶鱼,各组免疫鱼在同源菌株攻毒后,获得的免疫保护率分别为84.6%~85.7%、69.2%~71.4%和33.3%~40.0%;此外,DFSM免疫鱼在异源毒株LSSM和GXTO攻毒后,获得的交叉免疫保护率分别为86.7%和100%。本研究确定了海豚链球菌是海南养殖的多纹钱蝶鱼病害频发的病原,使用DFSM株制备的海豚链球菌灭活疫苗对多纹钱蝶鱼有良好的免疫保护效果。 展开更多
关键词 多纹钱蝶鱼 海豚链球菌 灭活疫苗 分离鉴定 半数致死量 相对存活率 交叉免疫
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绿鳍马面鲀与许氏平鲉杀鲑气单胞菌病原的分离和鉴定 被引量：1
3
作者 晋怀远 刘耀宽 +5 位作者 高晔 夏苏东 陈四清 莫照兰 边力 李杰 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2023年第1期191-200,共10页
2018年和2019年,山东省烟台市蓬莱市一养殖场工厂化养殖的绿鳍马面鲀(Thamnaconus septentrionalis)和许氏平鲉(Sebastes schlegeli)发病死亡,主要症状为嘴部溃疡、红肿和出血。从发病鱼内脏中均可分离到大量形态一致的优势菌,分别命名... 2018年和2019年,山东省烟台市蓬莱市一养殖场工厂化养殖的绿鳍马面鲀(Thamnaconus septentrionalis)和许氏平鲉(Sebastes schlegeli)发病死亡,主要症状为嘴部溃疡、红肿和出血。从发病鱼内脏中均可分离到大量形态一致的优势菌,分别命名为2018TS-1和2019SS-1,分离菌株经16S rRNA测序、生理生化鉴定和vap A基因分析确定为杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种(Aeromonas salmonicida subsp. masoucida)。人工感染结果显示,2018TS-1和2019SS-1分别能引起绿鳍马面鲀和许氏平鲉的死亡,被感染鱼呈嘴部红肿症状,与自然发病症状一致,其半数致死量分别为1.78×10^(5)和0.89×10^(5) CFU/尾。本研究首次报道了国内工厂化养殖绿鳍马面鲀和许氏平鲉感染杀鲑气单胞菌的病例,是目前人工养殖绿鳍马面鲀的首个疾病报道,也是继大西洋鲑(Salmo salar)、大菱鲆(Scophthalmus maximus)和裸盖鱼(Anoplopoma fimbria)等品种后,在山东省海水养殖鱼类中再次发现杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种的感染。本研究结果丰富了杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种的感染宿主范围,也为绿鳍马面鲀和许氏平鲉养殖的病害防控提供依据。 展开更多
关键词 绿鳍马面鲀 许氏平鲉 细菌鉴定 杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种
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紫菜腐霉拮抗菌的筛选和鉴定
4
作者 翁佩文 杨慧超 +3 位作者 李杰 张文彬 阎永伟 莫照兰 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2023年第2期186-195,共10页
生物防治广泛用于农作物的病害防治,该方法在藻类病害防控方面尚未有相关的报道。腐霉(Pythiumsp.)是引起紫菜(Neopyropia)赤腐病(redrotdisease)的主要病原,本研究的目的是筛选和鉴定对紫菜腐霉有拮抗能力的细菌。从养殖藻类及其养殖... 生物防治广泛用于农作物的病害防治,该方法在藻类病害防控方面尚未有相关的报道。腐霉(Pythiumsp.)是引起紫菜(Neopyropia)赤腐病(redrotdisease)的主要病原,本研究的目的是筛选和鉴定对紫菜腐霉有拮抗能力的细菌。从养殖藻类及其养殖环境中分离鉴定了385株细菌,通过平板对峙法筛选到9株对腐霉有拮抗作用的细菌,进一步通过含毒介质法筛选到3株胞外产物对腐霉具有抑制活性的细菌(P3、P6和P19)。3株拮抗菌对8株腐霉均有拮抗活性,对腐霉生长的抑制率分别为52.09%~97.95%(P3)、26.81%~78.04%(P6)、10.47%~41.91%(P19)。通过16S rRNA鉴定和多位点序列进化分析(16Sr RNA-dnaA-dnaN-recA),将P3和P6鉴定为杀鱼假交替单胞菌(Pseudoalteromonaspiscicida),P19鉴定为解肽假交替单胞菌(Pseudoalteromonaspeptidolytica)。本研究筛选得到的拮抗菌为下一步建立紫菜赤腐病的生物防治方法奠定了基础。 展开更多
关键词 腐霉 拮抗菌 假交替单胞菌 生物防治
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养殖牙鲆鱼苗腹水症病原菌的鉴定及系统发育学分析 被引量：52
5
作者 莫照兰 茅云翔 +3 位作者 陈师勇 张振冬 徐永立 张培军 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期131-141,共11页
从患腹水症养殖牙鲆鱼苗分离到一株细菌B1 7,人工感染实验证实其具有致病性。用Biolog GN细菌鉴定系统对B1 7进行测试 ,发现其与参考菌株的相似性较低 ,不能进行鉴定。常规生理生化测试表明 ,B1 7具有弧菌属的特征 ,其表型特征与Vibrios... 从患腹水症养殖牙鲆鱼苗分离到一株细菌B1 7,人工感染实验证实其具有致病性。用Biolog GN细菌鉴定系统对B1 7进行测试 ,发现其与参考菌株的相似性较低 ,不能进行鉴定。常规生理生化测试表明 ,B1 7具有弧菌属的特征 ,其表型特征与Vibriosplendidus非常相似。为了进一步明确菌株B1 7的分类学地位 ,测定了其 1 6SrRNA基因序列 ,分析了相关细菌相应序列的同源性 ,构建了系统发生树 ,结果表明菌株B1 7与V .splendidus的亲缘关系最近。综合上述结果 ,菌株B1 7可鉴定为V .splendidus。 展开更多
关键词 牙鲆 腹水症 16SRRNA基因 系统发育学分析 Vibriosplendidus
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一株牙鲆皮肤溃烂症病原菌的鉴定 被引量：48
6
作者 莫照兰 茅云翔 +1 位作者 陈师勇 张培军 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期263-269,共7页
从山东荣成养鱼场发病牙鲆分离到一株病原菌M3 ,革兰氏阴性 ,杆状 ,能运动 ,菌落半透明 ,用BIOLOG细菌鉴定系统不能鉴定。通过 1 6SrDNA序列分析和同源性检索发现M3菌株与弧菌属的同源性较高 ,为 94%～ 98%。系统发育学分析表明菌株M3... 从山东荣成养鱼场发病牙鲆分离到一株病原菌M3 ,革兰氏阴性 ,杆状 ,能运动 ,菌落半透明 ,用BIOLOG细菌鉴定系统不能鉴定。通过 1 6SrDNA序列分析和同源性检索发现M3菌株与弧菌属的同源性较高 ,为 94%～ 98%。系统发育学分析表明菌株M3与鳗弧菌关系最近 ,相似性为 99 6 % ,其生化性状也和鳗弧菌的特征相似 ,故可把M3定为鳗弧菌 (Vibrioan guillarum)。 展开更多
关键词 牙鲆 皮肤溃烂症 病原菌 鉴定 鳗弧菌 16S RDNA 系统发育
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一株牙鲆出血症病原菌的分子生物学鉴定 被引量：28
7
作者 莫照兰 茅云翔 +2 位作者 陈师勇 张振冬 张培军 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第12期12-17,共6页
从患出血症养殖牙鲆分离到一株病原菌M 4 ,革兰氏阴性 ,杆状 ,有极生和侧生鞭毛 ,能运动 ,菌落半透明。进行了常规生理生化和BIOLOG GN细菌鉴定系统测试 ,结果表明菌株M 4与V .carchariae的表型特征非常相似。为了进一步确定M 4的分类... 从患出血症养殖牙鲆分离到一株病原菌M 4 ,革兰氏阴性 ,杆状 ,有极生和侧生鞭毛 ,能运动 ,菌落半透明。进行了常规生理生化和BIOLOG GN细菌鉴定系统测试 ,结果表明菌株M 4与V .carchariae的表型特征非常相似。为了进一步确定M 4的分类学地位 ,测定了其 16SrRNA基因序列 ,分析了相关细菌相应序列的同源性 ,构建了系统发生树 ,结果表明菌株M 4与V .carchariae的亲缘关系最近。综合上述结果 ,菌株M 4可鉴定为Vibirocarchariae。 展开更多
关键词 牙PING 16SrRNA基因序列 系统发育学分析 鉴定 分子生物学 出血症 病原菌M4 Vibiro carchariae
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虾池有机污染物降解细菌的筛选 被引量：29
8
作者 莫照兰 王祥红 +3 位作者 于勇 李会荣 纪伟尚 徐怀恕 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期334-338,共5页
在实验室条件下对 6 12株海洋细菌和 10株海水驯化淡水菌进行筛选 ,检测其快速降解水体中富营养有机物的能力。利用对虾饵料培养基、BOD仪、胞外酶检测等方法进行筛选 ,最后筛选到 10株对富营养有机物具有较高降解性能的细菌。所有的细... 在实验室条件下对 6 12株海洋细菌和 10株海水驯化淡水菌进行筛选 ,检测其快速降解水体中富营养有机物的能力。利用对虾饵料培养基、BOD仪、胞外酶检测等方法进行筛选 ,最后筛选到 10株对富营养有机物具有较高降解性能的细菌。所有的细菌均能产生明胶酶和脂酶 (Tween - 80 ) ,其中 9株细菌能产生淀粉酶 ,8株产生卵磷脂酶 ,2株产生酪蛋白酶 ,1株产生褐藻胶酶。通过测量BOD来衡量 10株细菌利用对虾饵料的效果 ,2天时能消化 46 .6 %～ 5 9.5 %的对虾饵料 ,5天时能消化 5 0 .8%～ 70 .2 %的对虾饵料。用常规生理生化方法将细菌鉴定到属 ,其中 3株为弧菌属细菌 (Vibriospp .) ,3株为假单胞菌属细菌 (Pseudomonasspp .) ,2株为发光杆菌属细菌 (Photobacteriumspp .) ,1株为气单胞菌属细菌 (Aeromonasspp .) ,1株为枯草杆菌 (Bacillussubtilis)。 展开更多
关键词 有机污染物降解细菌 饵料培养基 虾池 淤泥
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弧菌拮抗菌的筛选 被引量：32
9
作者 莫照兰 俞勇 +3 位作者 李会荣 李筠 纪伟尚 徐怀恕 《青岛海洋大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2001年第2期225-231,共7页
用平板划线或点种法对 6 0 2株海洋细菌进行筛选 ,得到 4株对海水养殖动物 (鱼、虾、贝 )的病原菌有拮抗作用的细菌。并对拮抗菌 QJ2的拮抗作用进行了研究 ,结果为 :QJ2有广泛的弧菌抗菌谱 ,对 37株弧菌的抗菌阳性率达到 89.2 % (33/ 37... 用平板划线或点种法对 6 0 2株海洋细菌进行筛选 ,得到 4株对海水养殖动物 (鱼、虾、贝 )的病原菌有拮抗作用的细菌。并对拮抗菌 QJ2的拮抗作用进行了研究 ,结果为 :QJ2有广泛的弧菌抗菌谱 ,对 37株弧菌的抗菌阳性率达到 89.2 % (33/ 37) ;用活菌平板计数法和 O.D.60 0 nm研究了QJ2培养物的去细胞上清液 (CFS)与病原菌 W- 1的作用动力学 ,15min时 W- 1的细菌数便开始减少 ,4 h时细菌数最少 ,6 h后开始增加 ,而对照组的细菌数呈逐渐上升趋势 ;QJ2对自身的拮抗物质不敏感 ;QJ2抗性物质的分子量不大于 80 0 0 Da;经常规生理生化方法和 API- 2 0细菌快速鉴定系统鉴定 ,QJ2为气味黄杆菌 (Flavobacterium odoratum)。 展开更多
关键词 拮抗菌 病原性弧菌 抗菌谱 气味黄杆菌 海洋细菌 拮抗作用 水产养殖
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细菌糖蛋白对螯虾免疫因子的影响 被引量：21
10
作者 莫照兰 李会荣 +4 位作者 俞勇 王祥红 纪伟尚 徐怀恕 P.S. Sudheesh 《中国水产科学》 CAS CSCD 2000年第3期28-32,共5页
实验检测了气味黄杆菌的胞外糖蛋白对克氏原螯虾（Ｐｒｏｃａｍｂａｒｕｓ ｃｌａｒｋｉｉ）的几种非特异性免疫困子一凝集素、酚氧化酶、溶菌、抗菌和超氧化物歧化酶等活力的影响。注射１０ ｍｇ糖蛋白后，实验组螯虾血清的免疫因子活... 实验检测了气味黄杆菌的胞外糖蛋白对克氏原螯虾（Ｐｒｏｃａｍｂａｒｕｓ ｃｌａｒｋｉｉ）的几种非特异性免疫困子一凝集素、酚氧化酶、溶菌、抗菌和超氧化物歧化酶等活力的影响。注射１０ ｍｇ糖蛋白后，实验组螯虾血清的免疫因子活力均高于对照组，凝集素活力在第１～４天最高；酚氧化酶在第１～５天维持较高活力，最大活力在第 ２天，溶菌、抗菌活力在第 １～ ６天维持较高水平，分别在第 ３天、第 ２天达到最大。与对照组相比，实验组螯虾肌肉的溶菌和抗菌、超氧化物歧化酶活力没有明显的变化。结果表明：气味黄杆菌的胞外糖蛋白可增强螯虾血淋巴的凝集素、酚氧化酶、溶菌和抗菌活力。 展开更多
关键词 气味黄杆菌 糖蛋白 克氏原螯虾 凝集素
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对虾WSSV人工感染螯虾及其检测 被引量：15
11
作者 莫照兰 雷质文 +2 位作者 杨冰 黄倢 张培军 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期43-46,共4页
用对虾白斑综合症病毒(WSSV)人工感染淡水克氏原螯虾(Procambarusclarkii) ,感染组螯虾3～6d内全部死亡。核酸探针点杂交两次检测感染螯虾的鳃、胃、血淋巴 ,阳性检出率分别为92% (92% ) ,89 % (86 % ) ,81 % (75 % ) ,对照为11 % (3% )... 用对虾白斑综合症病毒(WSSV)人工感染淡水克氏原螯虾(Procambarusclarkii) ,感染组螯虾3～6d内全部死亡。核酸探针点杂交两次检测感染螯虾的鳃、胃、血淋巴 ,阳性检出率分别为92% (92% ) ,89 % (86 % ) ,81 % (75 % ) ,对照为11 % (3% ) ,5 % (5 % ) ,0(0) ;光镜下可观察到感染螯虾的胃、鳃组织的靶细胞核肿大、嗜酸性着染 ,电镜下病变组织细胞核可见形态大小与WSSV一致的病毒粒子 ;病毒核酸原位杂交两次检测感染螯虾的胃、鳃 ,阳性检出率均为100 % ,对照阳性检出率均为0。结果表明 :对虾WSSV可感染淡水克氏原螯虾 。 展开更多
关键词 WSSV 人工感染 克氏原螯虾 核酸探针点杂交 核酸原位杂交 检测 对虾病毒
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细菌QJ2对对虾病原性哈维氏弧菌的拮抗作用 被引量：8
12
作者 莫照兰 俞勇 +3 位作者 王祥红 李会荣 纪伟尚 徐怀恕 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期432-437,共6页
对气味黄杆菌（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉａ　ｏｒｄｏｒａｔｕｍ）　ＱＪ２及其去细胞上清液（ＣＦＳ）对对虾病原性哈维氏弧菌（Ｖｉｂｒｉｏｈａｒｖｅｙｉ）Ｚ３Ｇ２　Ｅ０２２的拮抗作用进行了研究。ＱＪ２的ＣＦＳ对病原菌表现显... 对气味黄杆菌（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉａ　ｏｒｄｏｒａｔｕｍ）　ＱＪ２及其去细胞上清液（ＣＦＳ）对对虾病原性哈维氏弧菌（Ｖｉｂｒｉｏｈａｒｖｅｙｉ）Ｚ３Ｇ２　Ｅ０２２的拮抗作用进行了研究。ＱＪ２的ＣＦＳ对病原菌表现显著的拮抗性能，在６ｈ内使数量为１０５－１０６ｃｆｕ·ｍＬ的病原菌（Ｚ３、Ｅ０２２均降为０。经热、酸碱、蛋白酶处理的ＣＦＳ，抑菌活性均有不同程度下降，结果为；经６０℃处理以６０ｍｉｎ的ＣＦＳ，经６ｈ使Ｚ３Ｇ２细菌数降为０，经１５ｍｉｎ使Ｅ０２２数量降为最低，为初始菌数的６３．０％：经１００℃处理１０ｍｉｎ，ＣＦＳ使Ｚ３Ｇ２和Ｅ０２２数量分别在１ｈ和１５ｍｉｎ降为最低，各为初始菌数的２３．７％和７２．１％；经ｐＨ４时作用３０ｍｉｎ，ＣＦＳ使Ｚ３Ｇ２和Ｅ０２２数量分别在１５ｍｉｎ和１ｈ降为最低，各为初始菌数的８８．３％和１５．９％，而经ｐＨ１２处理３０ｍｉｎ后，ＣＦＳ没有使病原菌数下降，但使病原菌以比对照组细菌低的速率缓慢上升；经蛋白酶Ｋ于３７℃作用６０ｍｉｎ后，ＣＦＳ在１５ｍｉｎ时使Ｚ３Ｇ２和Ｈ０２２数量降为最低，各为初始菌数的１５．０％和６６．１％。在人工水体中，ＱＪ２活菌对病原菌也具有显著的拮抗? 展开更多
关键词 气味黄杆菌 病原性哈维氏弧菌 拮抗 细菌QJ2 对虾病
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养殖牙鲆鳗弧菌疫苗的研究 被引量：21
13
作者 莫照兰 徐永立 张培军 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期63-66,共4页
以牙鲆病原性鳗弧菌M3为抗原 ,制备了细胞(CV)、细胞 胞外产物(CEV)、脂多糖(LPS)三种疫苗 ,通过浸泡和注射两种途径对牙鲆进行两次免疫 ,检测疫苗的免疫保护效果。免疫后4周可检测到免疫组牙鲆具有明显的凝集抗体效价 ,其中注射组效... 以牙鲆病原性鳗弧菌M3为抗原 ,制备了细胞(CV)、细胞 胞外产物(CEV)、脂多糖(LPS)三种疫苗 ,通过浸泡和注射两种途径对牙鲆进行两次免疫 ,检测疫苗的免疫保护效果。免疫后4周可检测到免疫组牙鲆具有明显的凝集抗体效价 ,其中注射组效价显著高于浸泡组 ,而对照组变化不明显。与对照组相比 ,免疫组牙鲆获得良好的免疫保护力 ,其中注射免疫组高于浸泡组。在注射免疫途径中 ,以CEV的免疫保护效果最好 ;在浸泡免疫途径中 ,以CEV和LPS的免疫保护效果最好。结果表明鳗弧菌M3的细胞 展开更多
关键词 牙鲆 鳗弧菌 疫苗 鳍条出血
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益生素在水产养殖中的应用 被引量：19
14
作者 莫照兰 徐怀恕 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期6-9,共4页
关键词 益生素 水产养殖 肠道疾病 防治法 水环境改善
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大菱鲆出血症病原菌的分离和鉴定 被引量：59
15
作者 邹玉霞 张培军 +2 位作者 莫照兰 刘婷 徐永立 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2004年第4期89-93,共5页
从患病大菱鲆体内分离到一株病原菌SMP1，经人工感染试验计算出SMP1的半致死量LD50=1．94×10^6。药敏实验表明氟哌酸、丙氟哌酸、复合磺胺、氯霉素、四环素对SMP1有较强的抑制作用。BIOLOG细菌鉴定系统不能对SMP1鉴定。综合形态观... 从患病大菱鲆体内分离到一株病原菌SMP1，经人工感染试验计算出SMP1的半致死量LD50=1．94×10^6。药敏实验表明氟哌酸、丙氟哌酸、复合磺胺、氯霉素、四环素对SMP1有较强的抑制作用。BIOLOG细菌鉴定系统不能对SMP1鉴定。综合形态观察、生理生化特征、16S rDNA、溶血素基因保守区分析等实验结果，可将SMP1鉴定为鳗弧菌。 展开更多
关键词 大菱鲆 出血症 病原菌 分离 细菌鉴定 鳗弧菌 养殖
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鳗弧菌胞外产物中致病因子的分离纯化及性质研究 被引量：18
16
作者 陈师勇 莫照兰 +2 位作者 张振冬 徐永立 张培军 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第8期96-100,共5页
鳗弧菌致病株M3的胞外产物经超滤、SephadexG10 0凝胶层析、DEAE cellulose离子交换层析和HPLC凝胶色谱层析纯化后 ,得到一个纯化的毒性蛋白酶 ,其对金鱼的半数致死量为 1 2微克蛋白 /克体重。该蛋白酶的分子量为 36 5kDa ,等电点为 5 ... 鳗弧菌致病株M3的胞外产物经超滤、SephadexG10 0凝胶层析、DEAE cellulose离子交换层析和HPLC凝胶色谱层析纯化后 ,得到一个纯化的毒性蛋白酶 ,其对金鱼的半数致死量为 1 2微克蛋白 /克体重。该蛋白酶的分子量为 36 5kDa ,等电点为 5 1;与底物A zocasin作用的最适pH为 8 0 ,最适作用温度 5 5℃ ,85℃作用 30min后酶被灭活。该酶活性可被EDTA、EGTA及 1,10 菲咯啉抑制 ,表明它是金属蛋白酶。N端部分氨基酸序列经测定为AGATGTGPGGAGLTG。 展开更多
关键词 胞外产物 鳗弧菌 致病因子 蛋白酶 分离纯化 鱼类 毒性 流行性疾病
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凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)亲虾繁殖期水体微生物多样性 被引量：18
17
作者 陈琼 李贵阳 +6 位作者 罗坤 孔杰 莫照兰 栾生 李杰 曹宝祥 张玉玲 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期130-138,共9页
为了揭示凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)繁殖期亲虾养殖水体的微生物多样性,我们比较了雌雄虾养殖水体细菌群落结构差异,采用Illumina HiSeq高通量测序方法对凡纳滨对虾亲虾养殖水体细菌的16S rRNA基因的两个高变区(V3-V4)进行测序分... 为了揭示凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)繁殖期亲虾养殖水体的微生物多样性,我们比较了雌雄虾养殖水体细菌群落结构差异,采用Illumina HiSeq高通量测序方法对凡纳滨对虾亲虾养殖水体细菌的16S rRNA基因的两个高变区(V3-V4)进行测序分析,并进行了α-多样性指数和β-多样性指数分析。结果表明:雌雄虾养殖水体细菌群落的α-多样性指数中Chao1,ACE和Goods-coverage指数无显著差异(P>0.05),而Observed-species,Shannon和Simpson指数有显著性差异(P<0.05)。主坐标分析和聚类热图分析表明雌雄虾养殖水体的细菌群落结构不同,变形菌门(Proteobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidetes)为两者共同的优势菌门,但其相对丰度有一定差异,在雄虾养殖池水体中相对丰度分别为76.15%和21.28%;在雌虾养殖池水体中相对丰度分别为66.01%和29.02%。两者的核心微生物群(属水平)明显不同,雄虾养殖水体的核心属主要包括Glaciecola、Octadecabacter、Methylobacterium、Psychroserpens、Olleya;雌虾养殖水体的核心属主要包括Pseudomonas、Polaribacter、Pseudoalteromonas、Vibrio、Arcobacter、Synechococcus、Hyphomonas、Paracoccus、HTCC、Thalassomonas、Thalassobius、Owenweeksia等,其中包括了Vibrio、Pseudomonas和Owenweeksia等病原相关菌类。该实验结果对凡纳滨对虾育苗阶段亲虾的健康管理、病害诊断及防治具有重要意义。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 繁殖期 养殖水体 HiSeq测序 微生物多样性
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溶藻弧菌的PCR快速检测方法 被引量：18
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作者 韩一凡 莫照兰 +4 位作者 李杰 茅云翔 肖鹏 汪笑宇 杨官品 《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1237-1240,共4页
为建立溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)的PCR快速检测方法,本研究根据弧菌toxR基因的高变区序列设计1对扩增片段为161 bp的引物,进行了特异性和敏感性试验。结果表明该方法能特异地检测溶藻弧菌,每个PCR反应检测的敏感度为0.01 pg的DNA... 为建立溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)的PCR快速检测方法,本研究根据弧菌toxR基因的高变区序列设计1对扩增片段为161 bp的引物,进行了特异性和敏感性试验。结果表明该方法能特异地检测溶藻弧菌,每个PCR反应检测的敏感度为0.01 pg的DNA和3.7CFU的细菌。用溶藻弧菌人工感染大菱鲆,以建立的PCR方法检测感染鱼的肝、脾、肾阳性检出率为100%。该方法可用于对感染溶藻弧菌的水生动物疾病进行诊断。 展开更多
关键词 溶藻弧菌 toxR基因 PCR检测
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鳗弧菌(Vibrio anguillarum)M3菌株生长条件及其对蛋白酶产量的影响 被引量：9
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作者 陈师勇 张培军 +9 位作者 莫照兰 邹玉霞 张振冬 徐永立 陈师勇 张培军 莫照兰 邹玉霞 张振冬 徐永立 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期159-166,共8页
采用体外测定细菌浓度、胞外产物 (ECP)蛋白含量和蛋白酶活力的方法 ,进行了鳗弧菌M3菌株在 2 2 16E培养基中的培养条件研究。结果表明 ,该菌株用固体培养基培养至 2 4h左右 ,可得到较高的菌体浓度、ECP蛋白含量和蛋白酶活力。采用响应... 采用体外测定细菌浓度、胞外产物 (ECP)蛋白含量和蛋白酶活力的方法 ,进行了鳗弧菌M3菌株在 2 2 16E培养基中的培养条件研究。结果表明 ,该菌株用固体培养基培养至 2 4h左右 ,可得到较高的菌体浓度、ECP蛋白含量和蛋白酶活力。采用响应面分析方法设计实验 ,用SAS统计软件分析数据 ,得到NaCl浓度、pH值和温度对菌体生长及蛋白酶产量影响的回归模型。在 2 2 16E培养基的基础上 ,添加不同氮源、碳源物质以及不同浓度蛋白胨进行生长研究。结果表明 ,胰大豆蛋白胨能促进菌体生长及ECP蛋白分泌 ;NH4 Cl与酪蛋白水解物可抑制蛋白酶的产生 ;牙鲆肌肉匀浆对菌体、ECP蛋白产量和蛋白酶产生有不同程度的促进作用 ;培养基中蛋白胨浓度为 4 %时菌体量与ECP蛋白含量达最高值 ,在蛋白胨浓度为 2 %时蛋白酶分泌量已稳定 ;1%的葡萄糖、蔗糖、甘油均能显著地提高菌体及ECP蛋白产量 ,却抑制了蛋白酶的产生。 展开更多
关键词 鳗弧菌 蛋白酶 响应面分析 胞外产物 细菌浓度
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鳗弧菌油乳化二价口服疫苗免疫养殖大菱鲆的免疫应答及免疫效果的研究 被引量：10
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作者 肖鹏 莫照兰 +3 位作者 邹玉霞 王波 徐永立 张培军 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期979-985,共7页
以鳗弧菌M3和SMP1为细菌抗原制备了油乳化二价疫苗,用饵料包埋后连续7天口服免疫大菱鲆鱼,评价鱼的免疫应答和疫苗的保护效果.结果显示,乳化疫苗在鱼后肠刺激产生的溶菌酶和抗蛋白酶活性以及抗体水平均高于未乳化疫苗（P＜0.05）;并且... 以鳗弧菌M3和SMP1为细菌抗原制备了油乳化二价疫苗,用饵料包埋后连续7天口服免疫大菱鲆鱼,评价鱼的免疫应答和疫苗的保护效果.结果显示,乳化疫苗在鱼后肠刺激产生的溶菌酶和抗蛋白酶活性以及抗体水平均高于未乳化疫苗（P＜0.05）;并且在乳化疫苗免疫的鱼血清检测到明显升高的M3抗体效价（P＜0.05）.原位杂交结果显示,乳化疫苗免疫鱼的后肠IgM的产生水平高于未乳化疫苗免疫鱼.攻毒实验显示,乳化疫苗免疫的鱼对M3和SMP1的感染分别获得100%和50%的免疫保护率,而未乳化疫苗获得的免疫保护率分别为57.9%和0%.结果表明,鳗弧菌油乳化二价口服疫苗能引起大菱鲆后肠的非特异性和特异性免疫应答并有效地抵抗鳗弧菌的感染,适合用作水产口服鱼用疫苗. 展开更多
关键词 鳗弧菌 油乳化二价口服疫苗 口服免疫 免疫应答 免疫效果 大菱鲆
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