新医科视域下翻转课堂创新急诊医学临床实践教学研究

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作者 金艺华 李霜 葛堂栋 《黑龙江医药科学》 2024年第2期175-176,共2页

目的:探讨引入翻转课堂联合情景式教学及标准化病人模式在急诊教学中的应用。方法:将100名医学生在急诊轮转及急诊专业的研究生、住院医师规范化培训生为研究对象随机分组,对比分析传统课堂教学法与翻转课堂联合情景式教学及标准化病人... 目的:探讨引入翻转课堂联合情景式教学及标准化病人模式在急诊教学中的应用。方法:将100名医学生在急诊轮转及急诊专业的研究生、住院医师规范化培训生为研究对象随机分组,对比分析传统课堂教学法与翻转课堂联合情景式教学及标准化病人模式的教学法的教学有效性。结果:2023年上半年的两次理论考核成绩及问卷调查,观察组成绩都高于对照组(P<0.05),说明采用翻转课堂联合情景式教学及标准病人的模式确实有助于学生知识的掌握。结论:翻转课堂联合情景式教学及标准化病人的教学模式引入急诊教学课堂,可以有效的提高学生的各种急诊临床思维能力,尤其是对困难问题的解决能力,并达到预期设定的教学目标。 展开更多

关键词 翻转课堂 情景式教学 标准化病人 急诊医学

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PBL教学法在医学生物化学实验教学中的应用 被引量：2

2

作者 葛堂栋 张涛 +2 位作者 杨欣艳 张鹏霞 欧芹 《黑龙江医药科学》 2010年第6期87-88,共2页

目的:探索PBL教学在医学生物化学实验教学中的应用效果。方法:以问卷调查和考核的方式评价PBL的教学效果。结果:PBL教学法优于传统教学法。结论:合理使用PBL教学法能够激发学生学习积极性,提高学生综合能力。

关键词 PBL教学法 生物化学 实验教学

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齐墩果酸诱导人白血病HL-60细胞凋亡及细胞周期阻滞 被引量：21

3

作者 张鹏霞 李鸿梅 +2 位作者 陈东 葛堂栋 王淑秋 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1909-1911,共3页

目的:探讨齐墩果酸诱导HL-60细胞凋亡作用及其对细胞周期的影响。方法:以HL-60细胞为研究对象,以不同剂量的齐墩果酸处理HL-60细胞12h、24h、48h、72h后,用MTT法观察HL-60细胞的生长抑制率;琼脂糖凝胶电泳测定DNA梯形条带;流式细胞仪分... 目的:探讨齐墩果酸诱导HL-60细胞凋亡作用及其对细胞周期的影响。方法:以HL-60细胞为研究对象,以不同剂量的齐墩果酸处理HL-60细胞12h、24h、48h、72h后,用MTT法观察HL-60细胞的生长抑制率;琼脂糖凝胶电泳测定DNA梯形条带;流式细胞仪分析HL-60细胞细胞周期的变化;同时用Western blot-ting检测凋亡途径最终执行者caspase-3的表达。结果:齐墩果酸对HL-60细胞生长具有明显的抑制作用,其中80μmol/L齐墩果酸作用48h对HL-60细胞的抑制率达到50%以上,齐墩果酸诱导细胞凋亡呈明显的时间和剂量依赖性;HL-60经齐墩果酸处理48h出现典型的DNA梯形条带;以80μmol/L的齐墩果酸处理HL-60细胞12h即可以使caspase-3的前体procaspase-3断裂为有活性的caspase-3;流式细胞技术检测结果表明HL-60细胞经齐墩果酸处理后细胞周期阻滞于G1期,其中48h和72h分别达到63.24%和67.90%。结论:齐墩果酸可以诱导HL-60细胞凋亡,并使细胞阻滞于G1期。 展开更多

关键词 齐墩果酸 HL-60细胞 细胞凋亡 细胞周期 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3

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痢疾杆菌酸抗性系统相关基因缺失突变体的构建 被引量：9

4

作者 葛堂栋 冯尔玲 +2 位作者 晏本菊 王恒睴 黄留玉 《生物技术通讯》 CAS 2005年第5期488-491,共4页

依赖于谷氨酸脱羧酶的酸抗性系统对痢疾杆菌在宿主细胞内的生存和繁殖至关重要,hdeA、hdeB、yhiE和yhiF是其中几个重要的酸抗性基因。借助Red系统的重组功能,PCR扩增两翼与目的基因上下游同源的抗性基因片段,电击转化痢疾杆菌2457T,对... 依赖于谷氨酸脱羧酶的酸抗性系统对痢疾杆菌在宿主细胞内的生存和繁殖至关重要,hdeA、hdeB、yhiE和yhiF是其中几个重要的酸抗性基因。借助Red系统的重组功能,PCR扩增两翼与目的基因上下游同源的抗性基因片段,电击转化痢疾杆菌2457T,对筛选到的阳性转化子再导入编码FLP位点特异性重组酶的质粒pCP20以去除抗性基因。结果成功的敲除了hdeA、hdeB、yhiE和yhiF等4个酸抗性系统相关基因,为深入研究痢疾杆菌酸抗性基因的调控网络奠定了基础。 展开更多

关键词 痢疾杆菌 基因敲除 RED重组系统 酸抗性

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齐墩果酸对HL60细胞周期调控因子影响的实验研究 被引量：6

5

作者 张鹏霞 刘淼 +2 位作者 陈东 魏晓东 葛堂栋 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期825-827,共3页

目的探讨齐墩果酸(Oleanolic Acid,OA)对人急性早幼粒细胞白血病细胞(HL60)细胞周期相关基因表达的影响。方法体外常规培养HL60细胞,分为空白对照组;二甲基亚砜(DMSO)对照组用80μmol/LOA处理细胞48h和72h用药组RT-PCR法检测p57kip2,cyc... 目的探讨齐墩果酸(Oleanolic Acid,OA)对人急性早幼粒细胞白血病细胞(HL60)细胞周期相关基因表达的影响。方法体外常规培养HL60细胞,分为空白对照组;二甲基亚砜(DMSO)对照组用80μmol/LOA处理细胞48h和72h用药组RT-PCR法检测p57kip2,cyclinD1,cy-clinE mRNA的表达。结果与空白和DMSO对照组比较,OA处理细胞后,细胞生长受抑制,增殖能力减弱;OA用药组p57kip2基因mRNA含量增加,cyclinD1基因和cyclinE基因mRNA含量减少。结论OA可以通过改变细胞周期蛋白的表达而抑制白血病细胞增殖。 展开更多

关键词 OA HL-60 P57^KIP2 CYCLIND1 CYCLINE

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黄芪多糖对衰老HDF细胞染色体末端限制性片段长度的影响 被引量：5

6

作者 朱贵明 江旭东 +5 位作者 王迪迪 欧芹 张丽 孙洁 葛堂栋 盛延良 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1635-1637,共3页

目的探讨黄芪多糖(APS)改善衰老人胚肺二倍体成纤维细胞(HDF细胞)衰老表型的机制。方法 HDF细胞连续传代培养,形成衰老细胞模型;采用MTT法检测细胞活力;免疫组化法检测β-半乳糖苷酶活性;DNA杂交法检测染色体末端限制性片段(TRF)长度。... 目的探讨黄芪多糖(APS)改善衰老人胚肺二倍体成纤维细胞(HDF细胞)衰老表型的机制。方法 HDF细胞连续传代培养,形成衰老细胞模型;采用MTT法检测细胞活力;免疫组化法检测β-半乳糖苷酶活性;DNA杂交法检测染色体末端限制性片段(TRF)长度。结果 APS提高衰老HDF细胞活力(P<0.05),降低了SA-β-gal表达(P<0.05);衰老HDF细胞TRF长度明显缩短(P<0.05),而APS可使TRF缩短速度降低(P<0.05)。结论 APS可以通过减慢TRF缩短速度,提高衰老HDF细胞活力,发挥抗衰老作用。 展开更多

关键词 黄芪多糖 人胚肺二倍体成纤维细胞 衰老 染色体末端限制性片段

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齐墩果酸对HL60细胞bcl-2和bax表达的影响 被引量：6

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作者 薛芳喜 葛堂栋 +2 位作者 王迪迪 张鹏霞 王昭 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期437-439,共3页

目的探讨齐墩果酸(OA)对人急性早幼粒细胞白血病HL60细胞bcl-2和bax基因表达的影响。方法采用光学显微镜观察OA对体外培养HL60细胞的增殖抑制情况;并用RT-PCR法检测bcl-2和bax mRNA的表达。结果与空白组和二甲基亚砜(DMSO)对照组比较,80... 目的探讨齐墩果酸(OA)对人急性早幼粒细胞白血病HL60细胞bcl-2和bax基因表达的影响。方法采用光学显微镜观察OA对体外培养HL60细胞的增殖抑制情况;并用RT-PCR法检测bcl-2和bax mRNA的表达。结果与空白组和二甲基亚砜(DMSO)对照组比较,80μmol/LOA处理细胞后,细胞增殖受抑制;OA用药组bax基因mRNA含量增加,bcl-2基因mRNA含量减少。结论OA可以诱导HL-60细胞凋亡,其机制可能与bax基因表达增加及bcl-2基因表达降低有关。 展开更多

关键词 齐墩果酸 HL60 BCL-2家族 基因表达

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菟丝子醇提液对衰老模型大鼠肝细胞p16和cyclinD1基因表达的影响 被引量：4

8

作者 孙洁 李晶 +4 位作者 欧芹 魏晓东 朴金花 葛堂栋 王迪迪 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第21期4208-4210,共3页

目的研究菟丝子醇提液对衰老模型大鼠肝细胞p16和cyclinD1基因表达的影响,探讨菟丝子延缓衰老作用的机制。方法实验以50只Wistar大鼠为研究对象,采用D-半乳糖法制作衰老模型,采用经胃灌服法按照0.8 g.kg-1.d-1给药,采用半定量RT-PCR法... 目的研究菟丝子醇提液对衰老模型大鼠肝细胞p16和cyclinD1基因表达的影响,探讨菟丝子延缓衰老作用的机制。方法实验以50只Wistar大鼠为研究对象,采用D-半乳糖法制作衰老模型,采用经胃灌服法按照0.8 g.kg-1.d-1给药,采用半定量RT-PCR法测定大鼠肝组织p16和cyclinD1 mRNA的表达,免疫组化SABC法检测p16和cyclinD1蛋白的表达,并观察菟丝子醇提液对其影响。结果衰老模型大鼠p16 mR-NA及蛋白表达较青年组明显增高(P<0.01),而cyclinD1mRNA及蛋白表达降低(P<0.05)。菟丝子醇提液可降低p16基因表达(P<0.01),使cy-clinD1基因表达增强(P<0.05),并呈现时间渐进性改变。结论菟丝子醇提液通过影响细胞调控因子p16、cyclinD1表达延缓肝细胞的衰老。 展开更多

关键词 菟丝子醇提液 衰老模型大鼠 P16 CYCLIND1 肝细胞

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Ly294002对人白血病HL-60细胞的体外抑制作用 被引量：4

9

作者 王迪迪 葛堂栋 +1 位作者 杨玉 张鹏霞 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第22期5617-5619,共3页

目的研究磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)抑制剂Ly294002对人白血病HL-60细胞的影响。方法 MTT实验检测Ly294002对HL-60细胞增殖的抑制作用;透射电镜进行细胞形态学观察;RT-PCR检测Ly294002作用后,PI3K、Akt mRNA的表达。结果与未用药组比较Ly29... 目的研究磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)抑制剂Ly294002对人白血病HL-60细胞的影响。方法 MTT实验检测Ly294002对HL-60细胞增殖的抑制作用;透射电镜进行细胞形态学观察;RT-PCR检测Ly294002作用后,PI3K、Akt mRNA的表达。结果与未用药组比较Ly294002对HL-60细胞增殖具有抑制作用,且在24 h内随着作用浓度的增加而增强;透射电镜观察细胞出现凋亡形态学改变;RT-PCR检测用药组PI3K、Akt mRNA表达均下调(P<0.01)。结论 PI3K抑制剂Ly294002能通过PI3K/Akt信号通路抑制HL-60细胞增殖,50μmol/L的Ly294002作用白血病HL-60细胞24 h,其增殖抑制作用效果最佳。 展开更多

关键词 白血病 LY294002 PI3K AKT HL-60

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CAV1基因在五种白血病细胞中的表达 被引量：2

10

作者 马微 李丽 +3 位作者 杨永旭 葛堂栋 朴金花 张鹏霞 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第19期4754-4756,共3页

目的检测慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者原代肿瘤细胞、SUP-B15细胞、HL-60细胞、K562细胞、THP-1细胞中CAV1的表达情况。方法收集五种肿瘤细胞及正常人白细胞(WBC),使用QRT-PCR、Western印迹法方法分别检测各组细胞中CAV1 mRNA的相对含量... 目的检测慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者原代肿瘤细胞、SUP-B15细胞、HL-60细胞、K562细胞、THP-1细胞中CAV1的表达情况。方法收集五种肿瘤细胞及正常人白细胞(WBC),使用QRT-PCR、Western印迹法方法分别检测各组细胞中CAV1 mRNA的相对含量及CAV1蛋白表达情况。结果与WBC相比,各肿瘤细胞中CAV1 mRNA均为低表达,表达量由低到高依次为HL-60(0.097±0.02)、CLL(0.1±0.02)、THP-1(0.101±0.02)、K562(0.127±0.04)、SUP-B15(0.311±0.07);与WBC相比,各肿瘤细胞中CAV1蛋白表达均下调。结论与正常人WBC相比,CLL原代肿瘤细胞、HL-60、THP-1、K562、SUP-B15细胞中CAV1 mRNA及蛋白表达均降低,CAV1表达的异常可能出现在转录之前。 展开更多

关键词 CAV1 Real Time-PCR WESTERN印迹 慢性淋巴细胞白血病原代细胞株 HL-60 THP-1 K562 SUP-B15

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黄芪血清对衰老细胞抗氧化作用及p16表达影响的研究 被引量：9

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作者 赵蕾 魏晓东 +2 位作者 葛堂栋 刘淼 张鹏霞 《黑龙江医药科学》 2006年第5期4-5,共2页

目的:观察黄芪血清对HDF细胞SOD活性,M DA含量及p16mRNA表达的影响。方法:以黄芪水煎剂灌胃家兔获得含药血清,以含黄芪血清的DM EM培养基培养HDF细胞,同时以不含黄芪的家兔血清作空白对照,比色法测定HDF细胞的SOD活性及M DA含量,RT-PCR... 目的:观察黄芪血清对HDF细胞SOD活性,M DA含量及p16mRNA表达的影响。方法:以黄芪水煎剂灌胃家兔获得含药血清,以含黄芪血清的DM EM培养基培养HDF细胞,同时以不含黄芪的家兔血清作空白对照,比色法测定HDF细胞的SOD活性及M DA含量,RT-PCR检测p16 mRNA表达。结果:含黄芪血清培养基培养的HDF细胞与空白血清培养的HDF细胞比较SOD活性增加,p16表达减少。结论:含黄芪血清的培养基通过增加HDF细胞SOD活性,减少M DA含量及p16表达而起到抗衰老作用。 展开更多

关键词 黄芪 血清药理 HDF P1 6

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山茱萸多糖抗HDF衰老与cyclinD1表达的关系 被引量：14

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作者 欧芹 葛堂栋 +1 位作者 王迪迪 王跃新 《黑龙江医药科学》 2008年第1期1-3,共3页

目的:探讨山茱萸多糖对抗HDF细胞衰老作用及对细胞周期蛋白的作用。方法:体外培养HDF细胞,实验组从40代开始加多糖含药血清。在培养至43代、47代和50代采用MTT法检测细胞活力,RT-PCR法检测cyclinD1的mRNA表达,并与30代时进行比较。结果... 目的:探讨山茱萸多糖对抗HDF细胞衰老作用及对细胞周期蛋白的作用。方法:体外培养HDF细胞,实验组从40代开始加多糖含药血清。在培养至43代、47代和50代采用MTT法检测细胞活力,RT-PCR法检测cyclinD1的mRNA表达,并与30代时进行比较。结果:衰老组细胞活力下降,cyclinD1 mRNA表达升高;山茱萸多糖血清可提高细胞活力,降低HDF细胞cyclinD1 mRNA含量表达。结论:山茱萸多糖可能通过改变细胞周期调控因子的表达而发挥其抗HDF细胞衰老作用。 展开更多

关键词 山茱萸多糖 CYCLIND1 人二倍体成纤维细胞(HDF)

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齐墩果酸对白血病HL-60细胞PI3K、Akt、Cav-1表达的影响 被引量：3

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作者 王迪迪 马微 +2 位作者 葛堂栋 王明富 张鹏霞 《黑龙江医药科学》 2013年第6期1-2,6,共3页

目的:研究齐墩果酸(Oleanic acid,OA)对人白血病HL-60细胞PI3K、Akt、Cav-1表达的影响。方法:OA作用HL-60细胞后,采用透射电镜观察细胞形态,RT-PCR法检测HL-60细胞PI3K、Akt、Cav-1的mRNA表达。结果:OA作用于HL-60细胞后,细胞形态改变明... 目的:研究齐墩果酸(Oleanic acid,OA)对人白血病HL-60细胞PI3K、Akt、Cav-1表达的影响。方法:OA作用HL-60细胞后,采用透射电镜观察细胞形态,RT-PCR法检测HL-60细胞PI3K、Akt、Cav-1的mRNA表达。结果:OA作用于HL-60细胞后,细胞形态改变明显,出现凋亡小体,且PI3K、Akt、Cav-1的mRNA表达下调(P<0.01)。结论:OA可抑制HL-60细胞增殖,这可能与其下调HL-60细胞中PI3K、Akt、Cav-1的表达有关。 展开更多

关键词 齐墩果酸 HLL-60 PI3K AKT Cav-1

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板栗罐头加工工艺的研究 被引量：1

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作者 顾军 王振斌 +2 位作者 林琳 滕齐辉 葛堂栋 《莱阳农学院学报》 2003年第3期206-208,共3页

对板栗罐头加工过程中栗果褐变和糖液混浊现象的问题进行了研究,结果表明在煮制中添加0.9%EDTA-2Na、2%柠檬酸、1%NaHSO3等组成的护色液,用0.2%CaCl2进行硬化和用1%壳聚糖裹包,可以减少栗果褐变和糖液混浊现象,明显提高了板栗罐头的质量。

关键词 板栗 罐头 加工工艺 褐变 混浊

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衰老HDF细胞DNA损伤与HSP70mRNA表达及山茱萸多糖的作用 被引量：7

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作者 张慧丹 孙洁 +1 位作者 欧芹 葛堂栋 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第16期2007-2009,共3页

目的探讨山茱萸多糖(FCP)血清对抗人胚肺二倍体成纤维(HDF)细胞衰老的作用及热休克蛋白(HSP)70的调控机制。方法体外培养HDF细胞。根据HDF细胞代龄和施加因素分为4组,即青年组(32±3代)、多糖组(52±3代用1%多糖含药兔血清处理... 目的探讨山茱萸多糖(FCP)血清对抗人胚肺二倍体成纤维(HDF)细胞衰老的作用及热休克蛋白(HSP)70的调控机制。方法体外培养HDF细胞。根据HDF细胞代龄和施加因素分为4组,即青年组(32±3代)、多糖组(52±3代用1%多糖含药兔血清处理)、对照组(52±3代用1%正常兔血清处理)和衰老组(52±3代)。自45代开始加含多糖药血清并以空白血清培养作对照。观察细胞形态,MTT检测细胞活力,单细胞凝胶电泳检测DNA损伤,RT-PCR检测HSP70mRNA表达。结果与青年组比较,衰老组细胞活力明显下降(P<0.01),DNA损伤率增加(P<0.01),HSP70mRNA表达下降(P<0.01);多糖组细胞活力明显增高(P<0.01),DNA损伤下降(P<0.01),HSP70mRNA表达增加(P<0.01)。结论FCP血清可以通过调节HSP70的表达减轻细胞DNA损伤从而发挥抗HDF细胞衰老的作用。 展开更多

关键词 FCP HSP70 DNA损伤 HDF

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PTD4-Apoptin融合蛋白可溶性表达及其对Hela细胞的抑制作用 被引量：2

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作者 荆鑫鑫 刘鸿飞 +4 位作者 张涛 张强 葛堂栋 王明富 王跃新 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第20期5737-5739,共3页

目的构建PTD4-Apoptin融合蛋白的原核表达载体并表达蛋白,检测其对Hela细胞的生长抑制作用。方法人工合成Apoptin序列和PTD4序列,构建p GEX-6p-1-PTD4-Apoptin原核表达载体,使其在E.coli BL21(DE3)中表达。使用GST亲和层析柱纯化融合蛋... 目的构建PTD4-Apoptin融合蛋白的原核表达载体并表达蛋白,检测其对Hela细胞的生长抑制作用。方法人工合成Apoptin序列和PTD4序列,构建p GEX-6p-1-PTD4-Apoptin原核表达载体,使其在E.coli BL21(DE3)中表达。使用GST亲和层析柱纯化融合蛋白,并使用超滤管浓缩纯化后的目的蛋白,得到高浓度的融合蛋白。向Hela细胞中加入融合蛋白,检测其对Hela细胞的生长抑制作用。结果 PTD4-Apoptin融合蛋白在大肠杆菌中可溶性表达成功,对Hela细胞生长具有抑制作用,PTD4-Apoptin对Hela细胞抑制率达82.34%。结论成功构建PTD4-Apoptin融合蛋白表达载体,并表达可溶性的融合蛋白,PTD4-Apoptin对Hela细胞具有明显的抑制作用。 展开更多

关键词 APOPTIN PTD4 HELA

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以学生为主体的“混合式教学”模式在生物化学课程中的应用 被引量：2

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作者 李晶 葛堂栋 +1 位作者 王迪迪 孙洁 《黑龙江医药科学》 2023年第4期45-46,共2页

目的:探讨混合式教学模式在生物化学教学中可行性应用和效果评价。方法:选取佳木斯大学2021级临床医学专业60人为研究对象,分为实验组(卓越医师班30人)和对照组(临床5班30人)。对照组学生和其他未纳入研究的学生共同进行大班常规授课,... 目的:探讨混合式教学模式在生物化学教学中可行性应用和效果评价。方法:选取佳木斯大学2021级临床医学专业60人为研究对象,分为实验组(卓越医师班30人)和对照组(临床5班30人)。对照组学生和其他未纳入研究的学生共同进行大班常规授课,采用传统授课方式,实验组小班授课,采用混合式教学模式。采用SPSS 25.0软件进行数据统计分析两组的课堂效果和成绩评价。结果:实验组混合式教学模式在改善课堂效果、提高学生自主能力、开拓思维、增加学习兴趣、知识理解程度等方面得分较对照组高,实验组最终考核成绩为(88.430±2.020)分,对照组最终考核成绩(75.140±2.008)分,实验组明显高于对照组(P<0.05)。结论:混合式教学模式可以有效地改善生物化学的教学效果,在不断完善的基础上结合各医学专业自身特点,可以在不同专业的生物化学教学中予以应用。 展开更多

关键词 生物化学 混合式教学 多元化成绩评价

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PTD4-凋亡素融合蛋白对Hela细胞bak基因表达的影响

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作者 刘鸿飞 肖琬莉 +5 位作者 张涛 张强 田黎明 闫冬梅 葛堂栋 王明富 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第18期4419-4421,共3页

目的研究PTD4-凋亡素(apoptin)融合蛋白对Hela细胞bak基因表达的影响。方法原核表达系统表达PTD4-apoptin融合蛋白,使用CCK8试剂盒检测融合蛋白对Hela细胞的抑制作用;PTD4-apoptin融合蛋白作用Hela细胞24 h后,提取细胞总RNA和总蛋白,采... 目的研究PTD4-凋亡素(apoptin)融合蛋白对Hela细胞bak基因表达的影响。方法原核表达系统表达PTD4-apoptin融合蛋白,使用CCK8试剂盒检测融合蛋白对Hela细胞的抑制作用;PTD4-apoptin融合蛋白作用Hela细胞24 h后,提取细胞总RNA和总蛋白,采用RT-PCR和Western印迹检测bak基因在RNA水平和蛋白水平的表达。结果 PTD4-apoptin融合蛋白诱导Hela细胞bak mRNA和蛋白水平表达量较对照组均显著提高。结论 PTD4-apoptin蛋白可诱导Hela细胞凋亡,与bak基因参与凋亡调控相关。 展开更多

关键词 PTD4-apoptin BAK基因 细胞凋亡

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齐墩果酸聚乙二醇修饰自组装及其对白血病细胞K562的增殖抑制作用

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作者 赵彬男 毛晶 +3 位作者 葛堂栋 张鹏霞 王迪迪 朴金花 《山西医科大学学报》 CAS 2022年第10期1227-1234,共8页

目的用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)对齐墩果酸(oleanolic acid,OA)进行修饰,并探讨其衍生物对人慢性粒细胞白血病细胞K562的抑制作用。方法以OA和PEG为原料,酯化法、纳米沉淀法合成齐墩果酸聚乙二醇衍生物,核磁共振、电子显微镜... 目的用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)对齐墩果酸(oleanolic acid,OA)进行修饰,并探讨其衍生物对人慢性粒细胞白血病细胞K562的抑制作用。方法以OA和PEG为原料,酯化法、纳米沉淀法合成齐墩果酸聚乙二醇衍生物,核磁共振、电子显微镜、动态光散射检测衍生物表征。CCK-8法检测齐墩果酸聚乙二醇衍生物对K562细胞增殖抑制的影响,倒置显微镜检测齐墩果酸聚乙二醇衍生物对K562细胞形态的影响,流式细胞术检测齐墩果酸聚乙二醇衍生物对K562细胞凋亡的影响,Western blot检测K562细胞凋亡蛋白(Caspase-3、Caspase-9、PARP-1)及其剪切后蛋白表达。结果成功合成了齐墩果酸聚乙二醇自组装颗粒OAP5,粒径为(584.49±76.2)nm,结构为核-壳结构,电位趋近于0 mV。OAP5对白血病细胞K562具有增殖抑制作用,处理48 h后的IC_(50)为(16.10±0.64)μg/ml。OAP5处理K562细胞后,细胞密度降低,萎缩变形,折光性变差。OAP5能够促进K562细胞凋亡,剪切Caspase-3、剪切Caspase-9、剪切PARP-1表达增多(P<0.05)。结论OAP5能够通过诱导白血病细胞K562凋亡作用而抑制K562细胞增殖,为齐墩果酸抗肿瘤临床应用提供了依据。 展开更多

关键词 齐墩果酸 聚乙二醇 自组装 K562 凋亡

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过表达SecS对H_2O_2诱导大鼠H9c2心肌细胞氧化损伤的保护性作用

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作者 吕思勉 栾卓诚 +2 位作者 孙晗嫣 孙晗然 葛堂栋 《黑龙江医药科学》 2017年第6期114-115,117,共3页

目的:探讨SecS在H_2O_2诱导大鼠H9c2心肌细胞氧化损伤中的保护性作用。方法:根据转染及H_2O_2处理情况将H9c2心肌细胞分为4组:正常对照组,SecS过表达组,H_2O_2处理组和SecS过表达+H_2O_2处理组。MTT法检测各组细胞存活率,酶标仪检测SOD... 目的:探讨SecS在H_2O_2诱导大鼠H9c2心肌细胞氧化损伤中的保护性作用。方法:根据转染及H_2O_2处理情况将H9c2心肌细胞分为4组:正常对照组,SecS过表达组,H_2O_2处理组和SecS过表达+H_2O_2处理组。MTT法检测各组细胞存活率,酶标仪检测SOD活性和MDA水平。结果:与正常对照组比,H_2O_2处理组细胞存活率明显下降(P<0.01),SOD活性明显降低(P<0.05),MDA水平明显升高(P<0.01);与H_2O_2处理组相比,SecS+H_2O_2组细胞存活率明显上升(P<0.05),SOD活性明显上升(P<0.05),MDA水平显著降低(P<0.05)。结论:过表达SecS能够对抗H_2O_2引起的心肌细胞损伤,提高大鼠H9c2心肌细胞抗氧化能力,对心肌细胞氧化损伤有一定的保护作用。 展开更多

关键词 SecS 氧化应激 心肌细胞

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