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先天性心脏病患儿围手术期NT-proBNP、PCT变化及其临床意义
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作者 李莉 孙海燕 +4 位作者 李媛睿 窦敏 汤文 蒋黎敏 沈立松 《检验医学》 CAS 2023年第6期524-531,共8页
目的分析氨基末端B型钠尿肽原(NT-proBNP)、降钙素原(PCT)在简单型和复杂型儿童先天性心脏病(CHD)外科手术围手术期的变化及其临床意义。方法选取2020年1月—2021年11月上海交通大学医学院附属新华医院行外科手术的0~6岁CHD患儿96例,其... 目的分析氨基末端B型钠尿肽原(NT-proBNP)、降钙素原(PCT)在简单型和复杂型儿童先天性心脏病(CHD)外科手术围手术期的变化及其临床意义。方法选取2020年1月—2021年11月上海交通大学医学院附属新华医院行外科手术的0~6岁CHD患儿96例,其中简单型CHD 38例、复杂型CHD 58例。收集所有患儿临床资料、术前24 h(T1)和术后4 h(T2)、24 h(T3)、48 h(T4)NT-proBNP和PCT检测结果。分析围手术期NT-proBNP、PCT的变化趋势及其与临床变量的相关性。采用Logistic回归分析评估围手术期NT-proBNP、PCT预测患儿重症监护病房(ICU)停留时间、住院时间的价值。结果CHD患儿围手术期T3和T4的NT-proBNP、PCT水平显著高于T1和T2。T1、T2、T3、T4的NT-proBNP均与患儿年龄、体重呈负相关(P<0.01),且复杂型CHD患儿NT-proBNP水平显著高于简单型CHD患儿;T3和T4的NT-proBNP与体外循环时间、主动脉阻断时间呈正相关(P<0.05),T4的NT-proBNP与手术时长呈正相关(P<0.05)。T4的PCT与年龄、体重呈负相关(P<0.05),且复杂型CHD患儿PCT水平显著高于简单型CHD患儿。多因素Logistic回归分析结果显示,T3的NT-proBNP[比值比(OR)值=1.23]、T4的PCT(OR=1.13)是患儿ICU停留时间延长的独立影响因素;而T3的NT-proBNP(OR=1.12)、T4的PCT(OR=1.12)是住院时间延长的独立影响因素。结论NT-proBNP和PCT水平在CHD患儿围手术期先升高后下降,是患儿术后ICU停留时间和住院时间等短期预后的影响因素。 展开更多
关键词 先天性心脏病 降钙素原 氨基末端B型钠尿肽原 儿童 围手术期
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骨髓中CD4^+CD25^(high)Foxp3^+调节性T细胞与儿童急性B淋巴细胞白血病的相关性研究 被引量:3
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作者 蒋黎敏 徐翀 傅启华 《检验医学》 CAS 2012年第7期601-605,共5页
目的通过检测急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患儿骨髓中叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA的表达及CD4+细胞中调节性T细胞(Treg)比例,探讨Treg与儿童B-ALL发生及预后的关系。方法用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测10名正常儿童、35例初... 目的通过检测急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患儿骨髓中叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA的表达及CD4+细胞中调节性T细胞(Treg)比例,探讨Treg与儿童B-ALL发生及预后的关系。方法用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测10名正常儿童、35例初发B-ALL患儿及68例临床缓解患儿骨髓中Foxp3mRNA水平;用流式细胞术检测上述骨髓标本中CD4+CD25highFoxp3+Treg的比例;利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测骨髓中细胞因子白细胞介素10(IL-10)的表达情况。结果骨髓中Foxp3 mRNA表达水平在B-ALL初发患儿组是对照组的4.44倍,微小残留病(MRD)阳性组是阴性组的2.39倍;B-ALL初发患儿骨髓中Treg占CD4+T淋巴细胞的比例[中位数(M)=12.77%]较对照组(M=8.09%)增高,差异具有统计学意义(P<0.01);MRD阳性组Treg比例(M=14.74%)与MRD持续阴性组(M=11.30%)比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后MRD阳性组骨髓中IL-10水平[(24.69±11.73)pg/mL]显著高于MRD持续阴性组[(9.19±5.82)pg/mL,P<0.05]。结论 B-ALL初发和MRD阳性患儿骨髓中Foxp3 mRNA水平和Treg比例显著增高,且骨髓中IL-10水平与Treg的比例变化趋势相一致。Treg可作为评价B-ALL患儿预后和复发的指标,Treg可能是通过分泌抑制性细胞因子IL-10而发挥其抑制作用。 展开更多
关键词 调节性T细胞 叉状头/翅膀状螺旋转录因子 急性B淋巴细胞白血病 微小残留病
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不同抗体和透膜剂组合对胞浆抗原检测的影响
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作者 蒋黎敏 徐翀 +1 位作者 李莉 沈立松 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2004年第9期755-758,共4页
目的 探讨不同抗体和透膜剂组合对流式细胞术中胞浆抗原检测的影响。方法 通过单色直接标记法和流式细胞术,用不同抗体和透膜剂组合进行胞浆内抗原的检测。结果 急性B淋巴细胞性白血病(B-ALL)、急性髓细胞性白血病(AML)标本使用抗CD3抗... 目的 探讨不同抗体和透膜剂组合对流式细胞术中胞浆抗原检测的影响。方法 通过单色直接标记法和流式细胞术,用不同抗体和透膜剂组合进行胞浆内抗原的检测。结果 急性B淋巴细胞性白血病(B-ALL)、急性髓细胞性白血病(AML)标本使用抗CD3抗体(Becton Dickinson公司)进行胞浆内抗原检测时,出现假阳性的结果;B—ALL、急性T细胞性白血病(T—ALL)标本使用抗髓过氧化酶(MPO)抗体(Immunotech公司)和8E透膜剂组合可出现MPO假阳性的现象,而使用其他3种透膜剂时,MPO检测都为阴性;B—ALL和正常人标本使用抗CD22抗体(Immunotech公司)和FACS Permeabilization solution搭配进行胞浆抗原检测时,CD22抗原检测为假阴性;AML和T-ALL标本使用抗CD22抗体(Immunotech公司)和8E组合检测时,胞浆抗原CD22可出现假阳性。结论 流式细胞术不同抗体和透膜剂组合可产生不同的结果,应当谨慎选择,以便正确进行白血病的免疫分型和微小残留病的检测。 展开更多
关键词 胞浆 抗体 膜剂 抗原检测 CD2 抗C 假阳性 使用 组合 标记法
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长江口岸带柱状沉积物中磷的存在形态及其环境意义 被引量:44
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作者 侯立军 刘敏 +1 位作者 许世远 蒋黎敏 《海洋环境科学》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期7-12,共6页
通过对长江河口岸带柱状沉积物中P的分析 ,揭示了沉积物中P的存在形态和分布特征。柱状沉积物中P的存在形态主要有DP、Al P、Fe P、Ca P和OP等 5种 ,其中以Ca P(约占TP的 2 8%~ 5 2 % )和OP(约占TP的 43%~ 6 8% )为主。研究发现 ,在... 通过对长江河口岸带柱状沉积物中P的分析 ,揭示了沉积物中P的存在形态和分布特征。柱状沉积物中P的存在形态主要有DP、Al P、Fe P、Ca P和OP等 5种 ,其中以Ca P(约占TP的 2 8%~ 5 2 % )和OP(约占TP的 43%~ 6 8% )为主。研究发现 ,在近排污口的柱状沉积物中Al P和有机碳 (TOC)具有相似的变化趋势 ,且Al P含量明显高于非排污口处的朝阳柱样 ,反映了柱状沉积物中各形态P的分布特征受人类活动的影响比较明显。此外 。 展开更多
关键词 长江口岸带 柱状沉积物 磷形态 环境意义 河口沉积物
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流式细胞术分析户尘螨致敏的嗜碱性粒细胞活化试验及其临床意义 被引量:9
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作者 徐翀 王小蕊 +4 位作者 蒋黎敏 王连升 袁向亮 潘秀军 沈立松 《检验医学》 CAS 北大核心 2007年第3期245-250,共6页
目的建立流式细胞术(FCM)分析嗜碱性粒细胞活化试验(BAT)的方法并评估其在过敏性疾病诊断中的意义。方法以CD63/CD203c/CD45抗体组合,建立用FCM分析户尘螨致敏的嗜碱性粒细胞脱颗粒的方法。以皮肤点刺试验(SPT)作为金标准方法,将FCM检... 目的建立流式细胞术(FCM)分析嗜碱性粒细胞活化试验(BAT)的方法并评估其在过敏性疾病诊断中的意义。方法以CD63/CD203c/CD45抗体组合,建立用FCM分析户尘螨致敏的嗜碱性粒细胞脱颗粒的方法。以皮肤点刺试验(SPT)作为金标准方法,将FCM检测活化嗜碱性粒细胞与荧光酶联免疫吸附试验(FELISA)测定特异性IgE(sIgE)结果作比较,分析其临床应用价值。结果以CD45和CD203c联合设门,可以得到纯的嗜碱性粒细胞;CD63是活化嗜碱性粒细胞的最佳标志;Spearman相关系数显示,sIgE的Unicap分级与活化嗜碱性粒细胞呈中度相关;FCM检测活化嗜碱性粒细胞与FELISA测定sIgE结果在户尘螨过敏性疾病诊断中的差异无统计学意义(P>0.05),但前者的敏感度、符合率、阳性预测值以及阳性似然比各项指标都优于后者。结论通过FCM分析CD63的表达来确定活化嗜碱性粒细胞是诊断速发型超敏反应的一种有效、安全的体外检测方法。 展开更多
关键词 嗜碱性粒细胞活化 户尘螨 变态反应 CD63表达 流式细胞术
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上海地区儿童甲状腺功能检测指标参考区间的建立 被引量:11
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作者 李怀远 蒋黎敏 +2 位作者 钱悦平 傅启华 李冬 《检验医学》 CAS 2016年第12期1045-1049,共5页
目的建立上海地区儿童甲状腺功能检测指标——促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)和游离甲状腺素(FT4)的参考区间。方法选取2014年8月至2015年7月于上海地区9家医院就诊的4 d^17岁健康儿童720名,按年龄分为6组,每组120名。... 目的建立上海地区儿童甲状腺功能检测指标——促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)和游离甲状腺素(FT4)的参考区间。方法选取2014年8月至2015年7月于上海地区9家医院就诊的4 d^17岁健康儿童720名,按年龄分为6组,每组120名。血液收集后离心,血清-20℃冷冻保存,使用贝克曼库尔特Uni Cel Dx I 800免疫分析系统进行测定。依据美国临床实验室标准化协会(CLSI)C28-A3文件及国际临床化学和检验医学联合会(IFCC)的相关要求制定参考区间的合理方法和可靠依据,以非参数法确定TSH、FT3和FT4的95%参考区间(百分位数范围为2.5%~9 7.5%,可信区间为9 0%)。结果各组按年龄段划分参考区间为:A组(4 d~<1个月),TSH 0.53~18.91μIU/m L,FT3 2.42~5.67 pmol/L,FT4 11.85~33.81 pmol/L;B组(1~<12个月),TSH0.7 5~5.7 5μI U/m L,F T3 4.2 1~8.1 6 p m o l/L,F T4 9.4 0~1 9.5 4 p m o l/L;C组(1~<5岁),T S H0.6 3~6.2 0μI U/m L,F T3 3.5 4~6.9 0 p m o l/L,F T4 9.3 2~1 8.4 0 p m o l/L;D组(5~<1 0岁),T S H0.58~5.39μIU/m L,FT3 3.97~7.83 pmol/L,FT4 10.65~19.23 pmol/L;E组(10~<14岁),TSH0.3 9~5.3 6μI U/m L,F T3 4.2 7~8.5 5 p m o l/L,F T4 9.8 0~1 9.6 4 p m o l/L。F组(1 4~1 7岁),T S H0.48~5.06μIU/m L,FT3 3.14~6.15 pmol/L,FT4 9.57~18.27 pmol/L。A组新生儿与相邻的B组参考区间分布比较,差异有统计学意义(Z>3);各组内不同性别间TSH、FT3、FT4水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论建立了上海地区4 d^17岁健康儿童按年龄分组TSH、FT3和FT4的参考区间。利用以上参考区间能够解释儿童甲状腺功能的检测结果,有助于诊断、治疗和监测甲状腺功能减低症、甲状腺功能亢进症、甲状腺炎、甲状腺肿及甲状腺肿瘤等疾病。 展开更多
关键词 促甲状腺激素 游离三碘甲状腺原氨酸 游离甲状腺素 参考区间 儿童
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不同流量改良超滤法的临床应用 被引量:19
7
作者 王伟 朱德明 +3 位作者 徐羽中 蒋黎敏 黄惠民 沈立松 《中国胸心血管外科临床杂志》 CAS 2005年第4期258-261,共4页
目的探讨高流量改良超滤的临床应用效果及其对炎症反应的影响。方法40例先天性心脏病患者用随机数字表法分为两组,常规改良超滤(CMUF)组和高流量改良超滤(HMUF)组,每组20例。观察超滤时间、滤液量、红细胞压积(HCT)和循环指标变化,并检... 目的探讨高流量改良超滤的临床应用效果及其对炎症反应的影响。方法40例先天性心脏病患者用随机数字表法分为两组,常规改良超滤(CMUF)组和高流量改良超滤(HMUF)组,每组20例。观察超滤时间、滤液量、红细胞压积(HCT)和循环指标变化,并检测肿瘤坏死因子和白细胞介素6的浓度。结果40例患者均顺利完成手术,术毕HMUF组超滤时间(7.83±0.75min)短于CMUF组(13.86±1.95min,P<0.01),HMUF组滤出液量(440.00±91.86ml)多于CMUF组(372.22±56.52ml,P<0.01)。两组HCT、循环指标和术后炎症因子浓度的变化均无统计学意义。结论HMUF用于小儿体外循环后安全有效,且可以明显缩短超滤时间。 展开更多
关键词 高流量改良超滤 先天性心脏病 儿童
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改良超滤的时间对炎症因子的影响 被引量:13
8
作者 王伟 朱德明 +3 位作者 蒋黎敏 徐羽中 黄惠民 沈立松 《中国体外循环杂志》 2005年第1期4-6,9,共4页
目的 在高流量改良超滤时评估超滤时间对炎症因子的影响。方法 先天性心脏病患儿 40例,随机分成两组,对照组(C组)和实验组(L组)。记录患儿临床指标并测量肿瘤坏死因子和白介素 6的血清浓度。结果 40例患儿都顺利完成手术,术毕C组超... 目的 在高流量改良超滤时评估超滤时间对炎症因子的影响。方法 先天性心脏病患儿 40例,随机分成两组,对照组(C组)和实验组(L组)。记录患儿临床指标并测量肿瘤坏死因子和白介素 6的血清浓度。结果 40例患儿都顺利完成手术,术毕C组超滤时间(7. 83±0. 75)min, L组(14. 63±1. 06)min,C组滤出液量 (440. 00±91. 86)ml,L组为(766. 25±119. 85)ml。两组患儿临床指标没有显著差异,L组超滤前后炎症因子升高幅度明显低于C组, (P<0. 05)。结论 当延长超滤时间以增加滤液量可以降低炎症因子的上升幅度。 展开更多
关键词 炎症因子 改良超滤 患儿 临床指标 白介素6 对照组 影响 先天性心脏病 肿瘤坏死因子 升高
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儿童期急性白血病免疫分型诊断新方案的临床应用 被引量:7
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作者 徐翀 蒋黎敏 +2 位作者 吴政宏 李莉 沈立松 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2004年第7期568-571,582,共5页
目的 建立一种胞膜与胞浆抗原相结合、特异与敏感标志相结合的三色流式细胞术检测方法,研究儿童期急性白血病的免疫表型特点。方法 用CD45/SSC双参数点图区分白血病细胞和正常血缅胞后,先用系列特异和敏感指标确定白血病细胞的系列来源... 目的 建立一种胞膜与胞浆抗原相结合、特异与敏感标志相结合的三色流式细胞术检测方法,研究儿童期急性白血病的免疫表型特点。方法 用CD45/SSC双参数点图区分白血病细胞和正常血缅胞后,先用系列特异和敏感指标确定白血病细胞的系列来源,然后根据不同系列来源进一步检测。结果 CD45/SSC能明确区分白血病细胞和正常血细胞。胞浆抗原cCD79a、CCD3和MPO分别是B-ALL、T-ALL和AML的特异性抗原,且能够覆盖白血病分化的各阶段。CD19和CD7分别是B-ALL和T-ALL的系列敏感抗原。这两类抗原的结合在确定急性白血病的系列来源时特异、敏感、可靠,避免了仅用胞膜标记时因抗原跨系表达而获得可疑结果。结论 该方案可提高儿童期白血病免疫分型诊断的准确性,对患者的预后进行评估,是一种值得推广的免疫分型方案。 展开更多
关键词 儿童期 急性白血病 免疫分型 免疫表型 流式细胞术
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反复呼吸道感染患儿T细胞功能性极化状态 被引量:15
10
作者 虞坚尔 霍莉莉 蒋黎敏 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期664-667,共4页
目的观察反复呼吸道感染患儿间歇期外周血T细胞功能性极化状态。方法以反复呼吸道感染患儿外周血及健康儿童外周血为研究对象,采用全血PHA刺激培养,四色荧光标记流式细胞仪检测Th1(Tc1)及Th2(Tc2)百分比。结果反复呼吸道感染患儿Th1较... 目的观察反复呼吸道感染患儿间歇期外周血T细胞功能性极化状态。方法以反复呼吸道感染患儿外周血及健康儿童外周血为研究对象,采用全血PHA刺激培养,四色荧光标记流式细胞仪检测Th1(Tc1)及Th2(Tc2)百分比。结果反复呼吸道感染患儿Th1较正常降低(P<0.05),Th2升高、Th1/Th2比值下降(P<0.01);Tc1降低、Tc2升高、Tc1/Tc2比值下降(P>0.05)。结论反复呼吸道感染患儿间歇期存在Th功能性极化异常,Th2占优势;Tc功能性极化无明显异常。 展开更多
关键词 反复呼吸道感染 T细胞功能性极化 儿童
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儿童急性B淋巴细胞白血病微小残留病检测及其预后意义 被引量:4
11
作者 徐翀 关明 +2 位作者 何妙侠 蒋黎敏 郑建明 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期178-180,189,共4页
目的建立检测急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)微小残留病(MRD)的流式细胞术,评估监测MRD对于判断B-ALL预后的价值。方法用四色荧光抗体组合流式细胞术对33例确诊并接受SCMC-ALL-2005方案治疗的B-ALL患儿进行MRD检测,并随访5年,分析监测结果... 目的建立检测急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)微小残留病(MRD)的流式细胞术,评估监测MRD对于判断B-ALL预后的价值。方法用四色荧光抗体组合流式细胞术对33例确诊并接受SCMC-ALL-2005方案治疗的B-ALL患儿进行MRD检测,并随访5年,分析监测结果、复发率、5年无事件生存率。结果建立了正常骨髓细胞分布的分析模板;流式细胞术检测结果表明,18例MRD阳性患儿的白血病复发率为55.6%(10/18)、15例MRD阴性患儿复发率为13.3%(2/15),差异有统计学意义(P<0.05)。其5年无事件生存率分别为44%和93%,差异有统计学意义(χ2=6.37,P<0.05)。结论监测MRD对于B-ALL患儿预后评估有重要意义,并为治疗方案的选择提供依据。 展开更多
关键词 微小残留病 急性B淋巴细胞白血病 流式细胞术 预后
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儿童B系急性淋巴细胞性白血病微小残留病的相关因素及预后分析 被引量:4
12
作者 陈静 潘慈 +6 位作者 叶辉 董璐 蒋黎敏 汤静燕 薛惠良 顾龙君 王耀平 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2005年第3期222-224,共3页
目的了解检测儿童B系急性淋巴细胞性白血病(ALL)微小残留病(MRD)在临床上的意义,探讨其相关因素及预后的关系。方法用一种胞浆与胞膜、特异与敏感的标志相结合,CD45/SSC双参数图设门的三色流式细胞术(FCM)对67例儿童B系ALL在诱导治疗结... 目的了解检测儿童B系急性淋巴细胞性白血病(ALL)微小残留病(MRD)在临床上的意义,探讨其相关因素及预后的关系。方法用一种胞浆与胞膜、特异与敏感的标志相结合,CD45/SSC双参数图设门的三色流式细胞术(FCM)对67例儿童B系ALL在诱导治疗结束时(诱导第28~37d)进行MRD监测。结果67例随访病人低危组为18例,中危组为35例,高危组为14例,MRD在3组之间差异有显著性(P<0.005),高危组的MRD(+)率明显较低、中危组高(P<0.005)。MRD与起病时的性别、年龄、白细胞数之间无相关性(P>0.05)。MRD在早期治疗反应上也无明显的统计学差异(P>0.05)。而MRD与复发及中位无事生存期密切相关,MRD(+)组复发率明显较MRD()组高(P<0.05),MRD(+)组中位无事生存期也短于MRD()组(P<0.005)。结论检测MRD有助于了解疗效以及初步判断其预后以便调整治疗策略,是目前随访儿童ALL的有效方法。 展开更多
关键词 B系急性淋巴细胞性白血病 微小残留病 儿童
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淋巴细胞功能相关抗原-3(CD58)在儿童期急性B淋巴细胞白血病近期疗效判断中的应用 被引量:3
13
作者 徐翀 赵惠君 +4 位作者 蒋黎敏 袁晓军 李莉 汤静燕 沈立松 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第4期717-721,共5页
本研究评估CD58在急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)近期疗效判断中的价值。应用四色流式细胞分析技术观察135例儿童期B-ALL患者CD58分子的表达特点;建立用CD58/CD10/CD34/CD19抗体组合检测B-ALLMRD的方案;结合CD58的表达情况和MRD监测结果分... 本研究评估CD58在急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)近期疗效判断中的价值。应用四色流式细胞分析技术观察135例儿童期B-ALL患者CD58分子的表达特点;建立用CD58/CD10/CD34/CD19抗体组合检测B-ALLMRD的方案;结合CD58的表达情况和MRD监测结果分析CD58在B-ALL中的预后价值。结果表明135例B-ALL的平均CD58MFI为113.08±63.33,15例正常骨髓的CD19+CD10+细胞的平均CD58MFI为14.68±5.26,两者差异显著(P<0.01);51.9%(70/135)B-ALL患者的CD58分子强表达,可以用CD58为指标进行MRD检测;CD58/CD10/CD34/CD19抗体组合的有效频率仅次于TdT/CD10/CD34/CD19,为51.9%;CD58高表达组的MRD阳性率显著低于CD58低表达组(P<0.05)。结论CD58可以作为B-ALLMRD检测的指标,此结果丰富了MRD检测的组合;CD58的高表达可以作为B-ALL预后较好的指标。 展开更多
关键词 急性B淋巴细胞性白血病 CD58 微小残留病 淋巴细胞功能相关抗原
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人白血病细胞株对L-门冬酰胺酶敏感性与门冬酰胺合成酶表达水平的相关性 被引量:2
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作者 李本尚 何映谊 +5 位作者 罗长缨 江华 沈树红 蒋黎敏 张蓓 顾龙君 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期559-563,共5页
本研究探讨人白血病细胞株门冬酰胺合成酶(asparagine synthetase,AsnS)的表达水平及与白血病细胞株对L-Asparaginase(L-Asp)敏感性的关系。用实时定量PCR技术(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)检测Jurkat,HL-60,U937,NB4,THP-1,Nama... 本研究探讨人白血病细胞株门冬酰胺合成酶(asparagine synthetase,AsnS)的表达水平及与白血病细胞株对L-Asparaginase(L-Asp)敏感性的关系。用实时定量PCR技术(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)检测Jurkat,HL-60,U937,NB4,THP-1,Namalwa,Karpas299和K562等8种细胞株基础的和经L-Asp处理后的AsnS表达水平,用CCK-8实验检测细胞对L-Asp处理的敏感性。结果表明,8种细胞株之间AsnS的基础表达水平存在很大程度的变异,经L-Asp处理后细胞株的AsnS表达显著上调(p<0.05),AsnS低水平表达细胞对L-Asp相对敏感,而AsnS高表达细胞对L-Asp相对耐药。在8种细胞株中,U937对L-Asp高度敏感,其AsnS表达水平最低,而K562细胞株对L-Asp天然耐药,AsnS表达水平最高。结论:AsnS在天门冬氨酸耗竭后的细胞生物学行为中起着重要的作用,AsnS的表达水平反映了细胞对L-Asp的敏感性,L-Asp在AsnS低表达白血病的治疗中有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 白血病 门冬酰胺合成酶 左旋门冬酰胺酶 白血病细胞株
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荧光原位杂交法检测成熟B淋巴肿瘤细胞c-myc断裂 被引量:3
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作者 王坚敏 汤静燕 +6 位作者 沈立松 顾龙君 潘慈 陈静 宋得莲 蒋黎敏 李莉 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2008年第2期49-52,共4页
目的建立荧光原位杂交(FISH)方法检测8号染色体c-myc基因断裂,为临床筛选Burkitt’s淋巴瘤和成熟B型淋巴细胞白血病(B-ALL)提供方法。方法11例临床标本,FISH检测5例阴性,6例阳性。结果期待阴性的5例标本全部阴性,期待阳性的6例标本4例... 目的建立荧光原位杂交(FISH)方法检测8号染色体c-myc基因断裂,为临床筛选Burkitt’s淋巴瘤和成熟B型淋巴细胞白血病(B-ALL)提供方法。方法11例临床标本,FISH检测5例阴性,6例阳性。结果期待阴性的5例标本全部阴性,期待阳性的6例标本4例呈现阳性。结论用FISH法检测Burkitt’s淋巴瘤/B-ALL相关的myc基因断裂可行并基本可靠。 展开更多
关键词 荧光原位杂交 Burkitt’s 淋巴瘤 白血病 淋巴细胞 B型
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四硫化四砷STI571和除莠霉素诱导K562细胞凋亡的研究(英文) 被引量:1
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作者 叶启东 顾龙君 +4 位作者 赵金彩 陈文高 张蓓 蒋黎敏 沈立松 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2004年第1期15-18,F003,共5页
目的 目前慢性粒细胞性白血病 (CML)的化疗效果仍不理想 ,为寻找对CML敏感的药物 ,该研究探讨四硫化四砷、STI5 71和除莠霉素对CML细胞株K5 6 2的作用。方法 通过MTS方法检测三种药物在不同浓度 (0 .0 1 ,0 .1 ,1 .0 ,2 .0 ,5 .0 ,1 0... 目的 目前慢性粒细胞性白血病 (CML)的化疗效果仍不理想 ,为寻找对CML敏感的药物 ,该研究探讨四硫化四砷、STI5 71和除莠霉素对CML细胞株K5 6 2的作用。方法 通过MTS方法检测三种药物在不同浓度 (0 .0 1 ,0 .1 ,1 .0 ,2 .0 ,5 .0 ,1 0 .0 μmol/L)下对K5 6 2细胞活力的影响。采用瑞氏染色、荧光染色和琼脂糖凝胶电泳观察药物处理后细胞形态学的变化和细胞凋亡的发生。用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 用 5 .0 μmol/L的四硫化四砷、STI5 71和除莠霉素培养 3天 ,K5 6 2细胞活力明显下降 ,其吸光值分别为 0 .32± 0 .0 4 ,0 .4 9± 0 .0 1 ,0 .6 9± 0 .0 2 ,其中四硫化四砷和STI5 71对细胞的抑制作用强于除莠霉素 (P <0 .0 1 ) ,前两者间无明显差异 (P >0 .0 5 )。 1 .0 ,5 .0 ,1 0 .0 μmol/L的四硫化四砷对K5 6 2细胞的抑制作用呈时间依赖关系 (P <0 .0 1 )。小于 1 .0μmol/L的四硫化四砷对K5 6 2细胞活力无明显影响。四硫化四砷培养 2 4至 4 8小时后 ,K5 6 2细胞出现染色质浓缩、核碎片及凋亡小体等典型的凋亡形态学改变。用 5 .0 μmol/L的四硫化四砷、STI5 71和除莠霉素培养 72小时后 ,K5 6 2细胞的凋亡率分别为 6 8.8%、5 6 .7%和 35 .5 % ,2 .0与 3.0 μmol/L的四硫化四砷诱导K5 6 2细胞凋? 展开更多
关键词 四硫化四砷 STl571 除莠霉素 K562 细胞凋亡 慢性粒细胞性白血病 CML 化疗
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流式细胞术检测骨髓微量神经母细胞瘤细胞在临床中的应用 被引量:2
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作者 蔡娇阳 汤燕静 +8 位作者 蒋黎敏 宋得莲 潘慈 陈静 董璐 周敏 薛惠良 顾龙君 汤静燕 《中国循证儿科杂志》 CSCD 2006年第3期193-198,共6页
目的建立神经母细胞瘤(NB)患儿骨髓(BM)微量肿瘤病灶(MRD)的检测方法,分析其结果与预后的关系。方法应用CD45^FITC/CD81^PE/CD56^PECy5单抗组合通过流式细胞术(FCM)检测人NBTGW细胞株的免疫表型,并确定本实验室FCM的敏感度... 目的建立神经母细胞瘤(NB)患儿骨髓(BM)微量肿瘤病灶(MRD)的检测方法,分析其结果与预后的关系。方法应用CD45^FITC/CD81^PE/CD56^PECy5单抗组合通过流式细胞术(FCM)检测人NBTGW细胞株的免疫表型,并确定本实验室FCM的敏感度;比较Ⅲ~Ⅳ期NB患儿治疗前及治疗中BM细胞形态学观察与FCM检测BM中的CD45^-/CD81^+/CD56^+细胞阳性率,分析病程中MRD检测与预后的关系。结果①TGW细胞株表达CD56和CD81,不表达CD45,本实验室FCM敏感度为1×10^-4。②58例患儿共144份标本中BM细胞形态学观察分析提示BM转移者23份,FCM检测显示表达CD45^-/CD81^+/CD56^+细胞的标本数62份,BM细胞形态学观察和FCM法阳性检出率差异有统计学意义(P〈0.01)。③比较平均化疗4个疗程后BMMRD结果与预后关系:31例患儿初诊时BMMRD检测阳性,化疗4个疗程后11例患儿BMMRD转阴,随访至今无复发及进展,无瘤生存率(DFS)中位时间23个月;另20例患儿化疗4个疗程后BMMRD仍为阳性,其中11例患儿复发或进展,包括1例死亡,两组差异有统计学意义(P〈0.01)。④化疗后移植患儿外周血干细胞(PBSC)采集前BMMRD结果与预后的相关性:共有19例患儿接受化疗后行PBSC移植,14例患儿采集PBSC时BMMRD为阴性,其中2例患儿复发,自移植后始DFS中位时间9个月;5例患儿采集PBSC时BMMRD为阳性,均复发,两组差异有统计学意义(P〈0.05)。结论运用FCM检测NB患儿BMMRD敏感度高、特异性强。可协助NB患儿的诊断和评估临床疗效,BMMRD残留与NB预后相关。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 流式细胞术 微量残留病灶 预后
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四硫化四砷诱导K562细胞凋亡的机制研究 被引量:1
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作者 叶启东 顾龙君 +4 位作者 赵艳霞 赵金彩 陈文高 张蓓 蒋黎敏 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第5期759-763,共5页
为了探讨四硫化四砷(As4S4)诱导慢性粒细胞性白血病(CML)细胞株K562凋亡及机制,用台盼蓝染色和MTS方法观察四硫化四砷对K562细胞生长抑制的影响,用瑞氏染色检测药物处理后的细胞形态学变化和细胞凋亡发生,流式细胞术检测细胞凋亡率和细... 为了探讨四硫化四砷(As4S4)诱导慢性粒细胞性白血病(CML)细胞株K562凋亡及机制,用台盼蓝染色和MTS方法观察四硫化四砷对K562细胞生长抑制的影响,用瑞氏染色检测药物处理后的细胞形态学变化和细胞凋亡发生,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期改变,实时定量逆转录聚合酶链反应(realtimequantitativePCR)检测BCRABL、Bcl2、BclXL、Bad和Bax等mRNA的表达,Westernblot方法检测BCRABL、Akt和pAkt蛋白的表达。结果表明:四硫化四砷能明显抑制K562细胞活力,在0.5μmol/L浓度下培养24小时,细胞生长明显受抑制且有剂量和时间依赖关系。小于0.1μmol/L的四硫化四砷对K562细胞活力无明显影响。K562细胞经与四硫化四砷培养24至48小时后,出现典型的凋亡改变。与四硫化四砷培养12小时后,1.0μmol/L条件下,K562细胞凋亡率上升,大于2.0μmol/L浓度的四硫化四砷能明显诱导细胞凋亡,四硫化四砷能使K562细胞周期阻滞于G2/M期。四硫化四砷能使K562细胞BclXL的mRNA表达下调,但对Bcl2、Bad、Bax和BCRABL等的mRNA表达无影响。四硫化四砷能使K562细胞的pAkt蛋白表达下调,而BCRABL蛋白表达无变化。结论:四硫化四砷能有效地通过诱导凋亡抑制K562细胞生长,其机制可能与抑制凋亡途径因子BclX和pAkt等表达有关。 展开更多
关键词 四硫化四砷 K562细胞 细胞凋亡 BCR-ABL 融合基因
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儿童急性白血病细胞视网膜母细胞瘤蛋白的表达及临床意义 被引量:1
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作者 袁向亮 赵惠君 +4 位作者 蒋黎敏 徐翀 袁晓军 汤静燕 沈立松 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第5期913-918,共6页
本研究检测视网膜母细胞瘤蛋白(retinoblastoma protein,pRb)在不同类型儿童急性白血病细胞中的表达,并探讨其表达水平与细胞周期、危险度、微小残留病(minimal residual disease,MRD)监测、预后等临床诊断治疗监测指标的关系。对89例... 本研究检测视网膜母细胞瘤蛋白(retinoblastoma protein,pRb)在不同类型儿童急性白血病细胞中的表达,并探讨其表达水平与细胞周期、危险度、微小残留病(minimal residual disease,MRD)监测、预后等临床诊断治疗监测指标的关系。对89例初发小儿急性白血病患者(包括25例AML,10例T-ALL,54例B-ALL)及7例正常对照骨髓标本,采用流式细胞术(FCM)分别检测治疗前后视网膜母细胞瘤蛋白的表达情况,并对部分病例进行细胞周期分析。结果表明:①流式细胞术检测pRb的表达准确直观;②在各种类型的急性白血病中pRb的高水平表达具有普遍性,同一患儿白血病细胞pRb的表达明显高于非白血病细胞,在不同类型的急性白血病中pRb均有缺失表达;③pRb的表达水平与白血病细胞的细胞循环周期可能存在一定的相关性,pRb表达阳性的B-ALL中处于G1期的白血病细胞数显著高于pRb表达阴性的病例(92%vs77%);④B-ALL中,MRD阳性组pRb的表达量明显低于阴性组,且差值有统计学意义(P<0.05),并且治疗前后非白血病细胞的pRb表达水平是稳定的;⑤pRb的表达量与B-ALL早期治疗预后之间存在一定相关性,B-ALL预后不良组pRb的表达量低于预后良好组(P<0·05)。结论:pRb在儿童急性白血病细胞中存在高水平表达或缺失等异常形式的表达差异,pRb的表达与白血病细胞的细胞周期、MRD监测、早期治疗反应的预后评价等存在相关性,对于B-ALL的治疗监测及预后评估具有指导意义。 展开更多
关键词 急性白血病 儿童急性白血病 视网膜母细胞瘤蛋白 MRD监测
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肿瘤患儿外周血单个核细胞采集及其对受体造血恢复的影响 被引量:1
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作者 罗长缨 陈静 +6 位作者 潘慈 周敏 宋德莲 蒋黎敏 薛惠良 汤静燕 顾龙君 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期148-150,共3页
目的回顾分析26例白血病和实体瘤患儿外周血干细胞采集效果及其对受体造血恢复影响,筛选可能与采集效率提高和受体造血恢复相关的因素。方法总结26例供体的49次粒系集落刺激因子(G-CSF)动员后的外周血采集过程,统计分析供体动员剂量、... 目的回顾分析26例白血病和实体瘤患儿外周血干细胞采集效果及其对受体造血恢复影响,筛选可能与采集效率提高和受体造血恢复相关的因素。方法总结26例供体的49次粒系集落刺激因子(G-CSF)动员后的外周血采集过程,统计分析供体动员剂量、采集时外周血白细胞、收获的单个核细胞(MNC)和CD34+细胞数、受体造血恢复三者间的相关性。结果26例供体均能很好耐受动员和采集过程。采集物MNC和CD34+细胞中位数分别为4.5×108/kg和1.9×106/kg。动员剂量与采集物中MNC数呈正相关,与采集物CD34+细胞数无相关。采集当天供体外周血白细胞总数对采集细胞量无影响,而MNC水平与CD34+细胞采量正相关。结论受体的造血恢复与采集物中的CD34+细胞数可能存在相关性。因此这类患儿的采集时有必要动态监测其动员时的外周血CD34+细胞水平,确定最佳采集时间,以获取足够的CD34+细胞采量。 展开更多
关键词 造血干细胞采集 外周血 造血恢复 儿童 肿瘤
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