人乳头状瘤病毒18E6E7和TPA协同诱发人胚食管上皮细胞恶性转化的研究 被引量：28

1

作者 沈忠英 蔡维佳 +5 位作者 沈健 许锦阶 岑山 滕智平 胡智 曾毅 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期1-6,共6页

为了研究病毒和促癌物在食管癌形成中的作用，用带有人乳头状瘤病毒１８型Ｅ６Ｅ７片段的载体腺病毒（简称ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７ＡＡＶ）感染人胚食管上皮细胞，然后加ＴＰＡ协同作用，观察细胞转化。将人胚食管切碎，与ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ... 为了研究病毒和促癌物在食管癌形成中的作用，用带有人乳头状瘤病毒１８型Ｅ６Ｅ７片段的载体腺病毒（简称ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７ＡＡＶ）感染人胚食管上皮细胞，然后加ＴＰＡ协同作用，观察细胞转化。将人胚食管切碎，与ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７ＡＡＶ同孵育２小时，在加有１０％小牛血清的１９９培养液培养和传代，形成永生化细胞株，即人胚食管上皮细胞汕头株（ＳＨＥＥ）。实验分两组：一组ＳＨＥＥ细胞在传代至第５和１３代时，两次在培养基中加入ＴＰＡ（１２Ｏｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｙｌｐｈｏｒｂｏｌ１３ａｃｅｔａｔｅ）５ｎｇ／ｍｌ，每次诱导２周，所获得的细胞株称为人胚食管上皮癌细胞汕头株１号（ＳＨＥＥＣ１）；另一组ＳＨＥＥ细胞培养条件相同，未加ＴＰＡ，为对照组。细胞转化的形态表型由光学显微镜、电子显微镜和荧光显微镜检查；ＤＮＡ含量和细胞周期用流式细胞仪检测；用３５ｍｍ软琼脂培养皿接种１０３细胞（第２０代），每组５碟，计算集落形成率；裸鼠皮下接种１０６细胞检测致瘤性；用荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）和ＰＣＲ检测ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７。结果表明：细胞ＤＮＡ合成和增殖指数（ＰＩｘ），ＳＨＥＥＣ１组（４５％）高于ＳＨＥＥ组（３４％）；高倍体细胞数，ＳＨＥ? 展开更多

关键词 食管癌 病理 人胚食管 上皮细胞 HPV18E6E7 TPA

下载PDF 职称材料

DMSO和As_2O_3对人食管癌细胞增殖的抑制作用 被引量：19

2

作者 谭立军 陈新宇 +3 位作者 张岚 湯雪明 沈忠英 蔡维佳 《上海第二医科大学学报》 CAS CSCD 1999年第1期5-8,37,共5页

目的 抑制肿瘤细胞生长是治疗肿瘤的重要基础。本文比较二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）、三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）和维甲酸对人食管癌细胞生长抑制的影响。方法 用生长曲线、剂量－效应曲线、＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入、ＭＴＴ比色分析、细胞周期... 目的 抑制肿瘤细胞生长是治疗肿瘤的重要基础。本文比较二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）、三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）和维甲酸对人食管癌细胞生长抑制的影响。方法 用生长曲线、剂量－效应曲线、＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入、ＭＴＴ比色分析、细胞周期的流式术检测、ＰＣＮＡ及Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１免疫组化等多项指标反映细胞增殖改变。结果 二甲基亚砜和三氧化二砷对食管癌细胞株生长的抑制作用较传统的维甲酸效果更强。结论 展开更多

关键词 二甲基亚砜 三氧化二砷 维甲酸 食管癌 抑制作用

下载PDF 职称材料

不同剂量三氧化二砷对食管癌细胞的作用 被引量：10

3

作者 沈健 吴敏华 +1 位作者 蔡维佳 沈忠英 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2001年第2期106-109,共4页

目的 :研究不同浓度As2 O3对食管癌细胞系的作用。方法 :食管恶性转化上皮细胞 (SHEEC1)是我室用人乳头状瘤病毒 (HPV) 18和TPA诱发的细胞系 ,培养在培养瓶和 2 4孔板 ,用浓度 1,3和 5 μmol/L的As2 O3处理 2 ,4 ,8,16,2 4h ,电镜检查... 目的 :研究不同浓度As2 O3对食管癌细胞系的作用。方法 :食管恶性转化上皮细胞 (SHEEC1)是我室用人乳头状瘤病毒 (HPV) 18和TPA诱发的细胞系 ,培养在培养瓶和 2 4孔板 ,用浓度 1,3和 5 μmol/L的As2 O3处理 2 ,4 ,8,16,2 4h ,电镜检查细胞形态 ,光镜检查核分裂指数 (MI) ;用放射自显影检查 [3H] TdR掺入细胞 ;流式细胞仪检查增殖指数 (PI)和凋亡指数 (AI)。结果 :低剂量As2 O3( 1.0 μmol/L)组 [3H] TdR掺入细胞 ,MI,PI皆增加 ,提示SHEEC1增殖率提高 ;高剂量组 ( 3和 5 μmol/L)高AI和低PI,给药 2 4h后 ,电镜可见细胞凋亡和坏死。结论 :不同剂量氧化砷的作用不同 ,低剂量可引起食管癌细胞DNA合成增加和促进细胞增殖 ,高剂量则引起细胞凋亡和坏死。 展开更多

关键词 氧化砷 食管癌 细胞增 细胞凋亡 剂量

下载PDF 职称材料

人乳头状瘤病毒诱导人胚食管上皮永生化细胞恶性转化 被引量：7

4

作者 沈忠英 陈晓红 +4 位作者 沈健 蔡维佳 陈炯玉 黄天华 曾毅 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期97-101,共5页

为了证实HPV18E6E7基因诱导的人胚食管上皮永生化细胞 (SHEE) 6 1代 (SHEE6 1)部份细胞 (SHEE6 1A)已经恶性转化 ,以寻找监控细胞早期恶性转化的方法。对培养的SHEE第 10代 (SHEE10 )和 6 1代 (SHEE6 1)细胞 ,用光学显微镜和电子显微镜... 为了证实HPV18E6E7基因诱导的人胚食管上皮永生化细胞 (SHEE) 6 1代 (SHEE6 1)部份细胞 (SHEE6 1A)已经恶性转化 ,以寻找监控细胞早期恶性转化的方法。对培养的SHEE第 10代 (SHEE10 )和 6 1代 (SHEE6 1)细胞 ,用光学显微镜和电子显微镜观察细胞形态及生长形式 ;用流式细胞仪分析细胞周期 ;用染色体G带核型分析和间期核染色体 1、7、8号着丝粒探针荧光原位杂交 (FISH)检测细胞染色体改变 ;用增殖优势克隆优选法选出生长快的细胞群体 ,接种裸小鼠和SCID小鼠。结果 :光学显微镜下见SHEE6 1细胞大小不等 ,重叠生长 ;电子显微镜下见细胞核多型性和核仁增大等增殖表型 ;流式细胞仪检测 ,SHEE6 1增殖指数和DNA >4n细胞高于SHEE10 ;SHEE6 1细胞染色体众数出现 5 7～ 6 0、6 3～ 6 5两亚群 ,1、7、9、13、17等染色体出现较多 3体、4体或 5体 ;FISH间期核 1、7号着丝粒数增多 ;SHEE6 1克隆优选的细胞SHEE6 1A接种SCID小鼠成瘤。这表明 :SHEE6 1细胞形态及生长特性有了改变 ,接触抑制减弱 ,高倍体和不整倍体细胞增多 ,染色体数目明显改变 ,SHEE6 1A接种SCID小鼠产生浸润性肿瘤 ,可以判定SHEE6 1部份细胞已恶性转化。用克隆优选法筛选和染色体检测可以监控永生化细胞早期恶性转化。 展开更多

关键词 食管上皮 永生化 恶性转化 染色体 HPV 病变监测

下载PDF 职称材料

人乳头状瘤病毒诱导食管上皮永生化细胞的双相分化 被引量：6

5

作者 沈忠英 许丽艳 +5 位作者 陈铭华 蔡维佳 陈炯玉 洪超群 沈健 曾毅 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期210-214,共5页

研究中期永生化食管上皮细胞的表型、细胞遗传学和部份基因的改变 ,以阐明癌前病变的特征。SHEE是该院用人乳头状瘤病毒HPV18E6E7诱导的永生化上皮 ,传至 6 1代已开始有少量细胞恶性转化。对永生化中期 31代培养细胞用相差显微镜检查细... 研究中期永生化食管上皮细胞的表型、细胞遗传学和部份基因的改变 ,以阐明癌前病变的特征。SHEE是该院用人乳头状瘤病毒HPV18E6E7诱导的永生化上皮 ,传至 6 1代已开始有少量细胞恶性转化。对永生化中期 31代培养细胞用相差显微镜检查细胞形态改变和细胞生长状态 (细胞接触抑制和锚定生长 ) ;流式细胞仪检测细胞周期 ;做染色体众数分析 ;多重PCR检查c-myc、p5 3、bcl- 2和ras等基因。免疫组化检查细胞角蛋白和鬼臼毒素荧光标记检查肌动蛋白F(F -actin)。软琼脂培养的集落细胞接种SCID小鼠检查成瘤性。Westernblot方法检测细胞内HPVE6表达蛋白。结果 :培养细胞有两种不同分化形态 ,分化差的基底细胞和分化好的鳞状上皮 ;前者角蛋白和F -actin极少 ,后者含量丰富 ;细胞接触抑制和锚锭生长特性减弱。分析 10 0个细胞染色体众数分二干系 ,5 6条 (占 30 % )和 6 1条 (占 2 4% )染色体 ,核型分析属于超二倍体 ,亚三倍体。多重PCR检查 :c -myc、p5 3基因上调 ,bcl- 2和ras基因阳性。用优选生长在软琼脂上的克隆细胞接种SCID小鼠 ,未成瘤 ;HPV18E6表达蛋白阳性。以HPV18E6E7诱导的食管永生化上皮 31代细胞形态出现了双向分化 ,根据其形态表型 ,双染色体众数的细胞遗传学改变和某些癌基因上调等特性 。 展开更多

关键词 食管上皮 永生化 双相分比 细胞遗传学 癌前阶段 人乳头状瘤病毒

下载PDF 职称材料

氧化砷诱导食管癌细胞系细胞凋亡的形态学研究 被引量：3

6

作者 沈忠英 谭立军 +3 位作者 蔡维佳 沈健 陈彩云 汤雪明 《世界华人消化杂志》 CAS 1998年第S2期226-229,共4页

目的在氧化砷（As2O3）作用于食管癌细胞株EC8712过程中，用光镜和电镜观察培养细胞凋亡的形态改变方法ECh712于199培养基常规培养，以3μmolAs2O3作用于细胞，72h收获细胞，作光镜（HE染色，TUNEL标记）、透射电镜和流式细胞仪检查.结... 目的在氧化砷（As2O3）作用于食管癌细胞株EC8712过程中，用光镜和电镜观察培养细胞凋亡的形态改变方法ECh712于199培养基常规培养，以3μmolAs2O3作用于细胞，72h收获细胞，作光镜（HE染色，TUNEL标记）、透射电镜和流式细胞仪检查.结果3μmolAs2O3作用72h，出现许多凋亡细胞，培养细胞部分变圆，脱落.在光镜下HE染色观察2种凋亡细胞.一种核小；圆形，致密呈固缩核、和核碎,另一种胞质红染，染色质凝集，二者TUNEL标记阳性．流式细胞仪检测有凋亡峰出现（亚G1／G0峰）．电镜检查有二种凋亡类型.一呈典型凋亡细胞核改变；在早期染色质凝集成块状，细胞器保存完好.第二期，随着染色质改变，细胞核变圆，饱满，核膜完整，染色质靠边，大块染色质，构成车轮状或半月状.核膜变性解体，使染色质逸出．最后细胞变性坏死.凋亡小体易见，小块状球状，膜包或裸露.另一种固缩细胞，细胞皱缩，胞质致密，核电子密度高.结论光镜和电镜检查结果证实As2O3可以诱导食管癌细胞系ECh712细胞凋亡，因此As2O3可作为食管癌辅助治疗药物． 展开更多

关键词 食管肿瘤 细胞株 细胞凋亡 氧化砷 肿瘤细胞 培养的

下载PDF 职称材料

基于EMF与GEF的信息可视化系统的设计与实现

7

作者 蔡维佳 顾明 《南京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第z1期801-806,共6页

首先介绍了什么是信息可视化,并简要说明了其出现的原因,接着介绍了一个运行于Eclipse平台之上,基于EMF与GEF的信息可视化系统.重点介绍了此系统的特点与设计,突现出系统具有很强的灵活性,可定制性与扩展性,最后展示了系统的一个应用实例.

关键词 信息可视化 系统 设计 GEF EMF

下载PDF 职称材料

HSP70、P-糖蛋白、PCNA在食管鳞癌中的表达 被引量：10

8

作者 李淳 程继东 蔡维佳 《实用癌症杂志》 1999年第3期205-207,共3页

为了研究ＨＳＰ７０在食管鳞癌中的表达及与Ｐ糖蛋白、ＰＣＮＡ表达的关系，采用ＳＰ免疫组化法，检测了４０例食管鳞癌组织中ＨＳＰ７０、Ｐ糖蛋白及ＰＣＮＡ的表达情况。结果在食管鳞癌组织中，ＨＳＰ７０表达阳性率为５７．５％... 为了研究ＨＳＰ７０在食管鳞癌中的表达及与Ｐ糖蛋白、ＰＣＮＡ表达的关系，采用ＳＰ免疫组化法，检测了４０例食管鳞癌组织中ＨＳＰ７０、Ｐ糖蛋白及ＰＣＮＡ的表达情况。结果在食管鳞癌组织中，ＨＳＰ７０表达阳性率为５７．５％（２３／４０），Ｐ糖蛋白的阳性率为４０．０％，ＰＣＮＡ的阳性率为６２．５％。ＨＳＰ７０阳性等级与Ｐ糖蛋白的阳性等级具有相关性（Ｐ＜０．０５），而与ＰＣＮＡ的阳性等级具有密切相关性（Ｐ＜０．０１）。结果表明食管鳞癌是ＨＳＰ７０、Ｐ糖蛋白高表达的肿瘤。食管鳞癌中ＨＳＰ７０的表达与Ｐ糖蛋白的表达存在着一定相关性。在细胞增殖过程中，ＨＳＰ７０起着一定的作用，有可能成为判定食管鳞癌增殖的指标。 展开更多

关键词 食管肿瘤 热休克蛋白 P-糖蛋白 增殖细胞核抗原

下载PDF 职称材料

热休克蛋白70在食管鳞癌中的表达 被引量：1

9

作者 李淳 程继东 蔡维佳 《汕头大学医学院学报》 1998年第A12期5-6,共2页

研究热休克蛋白（HSP）70在食管鳞癌中的表达及与临床病理的联系。方法：用ABC免疫组化法，检测了40例食管鳞癌组织中HSP70的表达情况。结果：食管鳞癌组织中HSP70表达阳性率为57．5％（23／40）。HSP70表达在不同分化程度的癌组织中及... 研究热休克蛋白（HSP）70在食管鳞癌中的表达及与临床病理的联系。方法：用ABC免疫组化法，检测了40例食管鳞癌组织中HSP70的表达情况。结果：食管鳞癌组织中HSP70表达阳性率为57．5％（23／40）。HSP70表达在不同分化程度的癌组织中及在有、无淋巴结转移的病例中差异均无显著性（P＞0．05）。结论：食管鳞癌是HSP70高表达的肿瘤。食管鳞癌中的HSP70的表达与肿瘤的预后无关。 展开更多

关键词 食管肿瘤 热休克蛋白

下载PDF 职称材料

人食管粘膜原代培养上皮细胞生物学特征观察

10

作者 沈忠英 蔡维佳 沈健 《汕头大学医学院学报》 1997年第A00期1-4,共4页

关键词 食管粘膜 原代培养 上皮细胞 细胞生物学

下载PDF 职称材料

互联网时代的粉丝运营

11

作者 蔡维佳 《秦智》 2022年第1期0114-0116,共3页

互联网环境下,产品或品牌的粉丝运营就是运用恰当的手段完成粉丝的拉新、留存、促活和转化。专业化、精细化的粉丝运营在今天具有强大的市场需求,对产品和品牌的长期经营也具有不可小觑的作用。本文先是概述了粉丝运营的含义与重要性,... 互联网环境下,产品或品牌的粉丝运营就是运用恰当的手段完成粉丝的拉新、留存、促活和转化。专业化、精细化的粉丝运营在今天具有强大的市场需求,对产品和品牌的长期经营也具有不可小觑的作用。本文先是概述了粉丝运营的含义与重要性,接着介绍了三种粉丝类型及对应的运营要点,再接着从宏观层面梳理了粉丝运营的5个关键环节:开源、留存、促活、转化和节流,最后指出粉丝运营需要找到与粉丝相处的平衡点。 展开更多

关键词 粉丝运营 网红经济 粉丝变现 口碑营

下载PDF 职称材料

分析高中生如何增强自我学习迁移能力

12

作者 蔡维佳 《数理化解题研究（高中版）》 2017年第5X期21-21,共1页

随着素质教育和新课程标准改革的不断推广和普及,目前在教育教学过程中人们更加注重培养和发展学生的综合素质与能力,促进其全面发展.因此学生自身也应该加大对自身能力的提升,除了常规的学习之外,还应该积极地学习其他知识内容,增加自... 随着素质教育和新课程标准改革的不断推广和普及,目前在教育教学过程中人们更加注重培养和发展学生的综合素质与能力,促进其全面发展.因此学生自身也应该加大对自身能力的提升,除了常规的学习之外,还应该积极地学习其他知识内容,增加自身的知识储量,实现全面发展.本文主要是从学习迁移能力的含义、影响学生学习迁移能力的因素以及提高学生自我学习迁移能力的对策详细地分析和介绍了高中生对自我学习迁移能力的增强,这对促进高中生提高自身的学习迁移能力提供了有价值的参考依据. 展开更多

关键词 高中生 自我学习迁移能力 影响因素 提高对策

下载PDF 职称材料

氧化砷诱导食管癌细胞系细胞凋亡的研究(英文) 被引量：6

13

作者 沈忠英 沈健 +2 位作者 陈铭华 蔡维佳 陈彩云 《汕头大学医学院学报》 2001年第1期1-4,共4页

目的 :研究食管癌细胞系SHEEC1以三氧化二砷 (As2 O3 )诱导细胞凋亡光镜和电镜的形态改变。方法 :SHEEC1细胞常规培养在 199培养基 ,在 5 μmoL/LAs2 O3 作用 72h收获细胞以苏木精_伊红染色 ,TUNEL标记 ,透射电镜和流式细胞仪检查。结... 目的 :研究食管癌细胞系SHEEC1以三氧化二砷 (As2 O3 )诱导细胞凋亡光镜和电镜的形态改变。方法 :SHEEC1细胞常规培养在 199培养基 ,在 5 μmoL/LAs2 O3 作用 72h收获细胞以苏木精_伊红染色 ,TUNEL标记 ,透射电镜和流式细胞仪检查。结果 :光镜下凋亡细胞核致密 ,染色质片段化 ,胞浆红染 ,TUNEL标记阳性 ,流式细胞仪检查出现凋亡峰 (亚G1/G0 峰 )。电镜下可见两种死亡细胞 :一种是核固缩 ,有染色质凝集靠近核膜等典型凋亡改变 ;另一种细胞浆退行性变及细胞坏死改变。结论 :食管癌细胞系SHEEC1可以用As2 O3 引起凋亡 。 展开更多

关键词 氧化砷 食管癌 细胞凋亡 超微结构

下载PDF 职称材料

人乳头状瘤病毒18型E6E7基因诱导人胚食管上皮永生化 被引量：29

14

作者 沈忠英 岑山 +4 位作者 蔡维佳 滕智平 沈健 胡智 曾毅 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 1999年第2期121-123,共3页

目的为研究病毒和肿瘤的关系，用人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）１８型Ｅ６Ｅ７基因感染胎儿食管上皮，建立一株新的人食管上皮永生化细胞株（ＳＨＥＥ）。方法ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７腺病毒伴随病毒（ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７ＡＡＶ））载体的构建；... 目的为研究病毒和肿瘤的关系，用人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）１８型Ｅ６Ｅ７基因感染胎儿食管上皮，建立一株新的人食管上皮永生化细胞株（ＳＨＥＥ）。方法ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７腺病毒伴随病毒（ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７ＡＡＶ））载体的构建；胚胎食管组织培养，ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７ＡＡＶ感染，继续培养传代。用光镜、电镜检查其形态；聚合酶链反应（ＰＣＲ）、荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）检查该病毒片段；用软琼脂培养和裸鼠接种检查致瘤性。结果经过长时间的传代培养，ＳＨＥＥ的表型仍保留原代上皮细胞培养的特征，表现为单层生长和锚锭依赖性生长，在软琼脂培养不形成克隆，接种裸鼠未成瘤。ＳＨＥＥ细胞系电镜检查可见张力原纤维，免疫组织化学检查细胞角质蛋白阳性，证实为鳞状上皮来源。ＦＩＳＨ和ＰＣＲ检测显示有ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７基因。结论用ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７基因建立食管上皮永生化细胞株ＳＨＥＥ，支持ＨＰＶ１８可能和食管癌病因有关的观点，可进一步用以研究食管癌的病因和发病机制。 展开更多

关键词 食管上皮 聚合酶链反应 HPV18型

原文传递

人乳头状瘤病毒18型E6E7基因诱导胎儿食管永生化上皮的生物学特性 被引量：9

15

作者 沈忠英 沈健 +2 位作者 蔡维佳 岑山 曾毅 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期209-212,共4页

目的　ＳＨＥＥ细胞系是经人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）１８ 型Ｅ６Ｅ７ 基因诱导的永生化上皮细胞株，已传代超过５０ 代。研究胎儿食管上皮永生化的细胞株ＳＨＥＥ生物学特性，包括增殖，分化和调亡。方法　细胞于１９９ 培养基培养，用... 目的　ＳＨＥＥ细胞系是经人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）１８ 型Ｅ６Ｅ７ 基因诱导的永生化上皮细胞株，已传代超过５０ 代。研究胎儿食管上皮永生化的细胞株ＳＨＥＥ生物学特性，包括增殖，分化和调亡。方法　细胞于１９９ 培养基培养，用光镜、电镜和荧光显微镜研究其生长率、形态和染色体分析；用流式细胞仪研究其细胞增殖动力学；用免疫组织化学方法研究Ｋｉ６７ 和角蛋白和用末端转移酶标记（ＴＵＮＥＬ） 凋亡细胞。结果　细胞培养呈单层，锚定依赖和接触抑制生长。细胞生长曲线，增殖期３ ～８天，平顶期９ ～１０ 天，衰亡期１０ 天以后。增殖指数（ＰＩｘ）３４－０％ ，分裂指数（ＭＩ）２－４７％ （１－２０％ ～４－８０％ ） ，凋亡指数（ＡＩ）１－３０％ ～６－９０ ％ ，核染色体众数４６ 条为主（４４ ～５４ 条） 和细胞周期ＤＮＡ 呈２ 倍体核型分布。电镜可见胞浆有张力原纤维，角蛋白免疫组织化学阳性证实鳞状上皮有分化特征。细胞凋亡可发生在增殖期，特别在衰亡期增多。结论　从生物学行为看来，ＳＨＥＥ细胞株接近于其来源细胞，胎儿食管上皮基底层，保存其增殖能力和分化的潜力。细胞死亡（包括细胞凋亡）是细胞群体扩增调节重要的因素。 展开更多

关键词 食管上皮 生物学特性 人乳头状瘤18型 E6E7

原文传递

氧化砷诱导食管癌细胞凋亡细胞骨架的改变 被引量：3

16

作者 沈忠英 沈健 +2 位作者 蔡维佳 陈彩云 陈炯玉 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期369-370,共2页

关键词 食管癌 细胞凋亡 细胞骨架 氧化砷

原文传递

人永生化食管上皮细胞恶性转化的验证 被引量：7

17

作者 沈忠英 沈健 +2 位作者 蔡维佳 陈炯玉 曾毅 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期107-109,共3页

目的　检查永生化人胚食管上皮细胞系 (SHEE)的恶性表型、成瘤性和侵袭力 ,证实此细胞系传至 85代 (SHEE85 )已完全恶性转化。方法　培养的SHEE85细胞用光镜和电镜观察细胞形态 ;以流式细胞仪检查细胞周期 ;行细胞软琼脂培养 ;以裸小鼠... 目的　检查永生化人胚食管上皮细胞系 (SHEE)的恶性表型、成瘤性和侵袭力 ,证实此细胞系传至 85代 (SHEE85 )已完全恶性转化。方法　培养的SHEE85细胞用光镜和电镜观察细胞形态 ;以流式细胞仪检查细胞周期 ;行细胞软琼脂培养 ;以裸小鼠和SCID小鼠接种检测其成瘤性 ;以细胞培养于羊膜的体外方法和移植至SCID小鼠腹腔的体内方法测定其侵袭力。结果　SHEE85在光镜下细胞生长拥挤 ,大小不一 ;电镜下见细胞呈增殖状态。DNA组方图统计细胞增殖指数为 4 7% ,高倍体细胞 12 %。软琼脂培养多细胞大集落形成率 4 %。接种的 4只裸小鼠和 4只SCID小鼠皆成瘤。结论　SHEE85已完全恶性转化 ,并且有较强侵袭力。 展开更多

关键词 食管肿瘤 人乳头状瘤病毒 永生化 肿瘤侵袭性 食管上皮细胞恶性转化

原文传递

丁酸钠对人乳头状瘤病毒诱导的永生化食管上皮细胞恶性转化的促进作用 被引量：2

18

作者 沈忠英 沈健 +4 位作者 蔡维佳 陈铭华 吴贤英 郑瑞明 曾毅 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期327-330,共4页

目的　在人乳头状瘤病毒 (HPV) 18E6E7基因诱导人胚食管上皮细胞永生化的基础上 ,观察高、低剂量丁酸钠在细胞恶性转化过程中的促癌作用。方法　永生化食管上皮细胞SHEE先用高剂量丁酸钠 (80mmol/L) ,后用低剂量丁酸钠 (5mmol/L)各处理 ... 目的　在人乳头状瘤病毒 (HPV) 18E6E7基因诱导人胚食管上皮细胞永生化的基础上 ,观察高、低剂量丁酸钠在细胞恶性转化过程中的促癌作用。方法　永生化食管上皮细胞SHEE先用高剂量丁酸钠 (80mmol/L) ,后用低剂量丁酸钠 (5mmol/L)各处理 8周 ,再经无丁酸钠条件继续培养 14周。用相差显微镜、免疫组织化学SABC法和流式细胞仪检查细胞形态、增殖和凋亡状况 ;用Hoechst33342和碘化丙啶检查活细胞和死细胞 ;细胞软琼脂集落形成及移植裸小鼠和严重联合免疫缺陷小鼠检查成瘤性。结果　当细胞暴露在 80mmol/L丁酸钠 ,细胞死亡 ,只剩少量活细胞。在含 5mmol/L丁酸钠培养基中细胞出现第一增殖期 ;撤去丁酸钠 ,细胞进入危象期 ,细胞倍增时间延长 ,如老化细胞。度过危象期 ,细胞进入第二增殖期 ,细胞继续增生和异型增生。在第二增殖期末细胞出现恶变 ,软琼脂培养有大集落形成 ,移植裸小鼠和SCID小鼠成瘤。结论　SHEE永生化上皮由丁酸钠诱导的恶性变通过了两个阶段的死亡威胁 :高浓度丁酸钠引起细胞死亡 ,缺乏丁酸钠引起细胞危象。高剂量丁酸钠引起永生化细胞死亡 ,低剂量引起细胞增殖 。 展开更多

关键词 食管上皮细胞恶性转化 促进作用 乳头状瘤病毒 羟丁酸钠 HPV 食管肿瘤

原文传递

丁酸钠对食管永生化上皮细胞增殖、分化和凋亡的作用 被引量：10

19

作者 沈忠英 陈铭华 +4 位作者 蔡维佳 沈健 陈炯玉 洪超群 曾毅 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期121-124,共4页

目的　研究丁酸钠对永生化食管上皮的增殖、分化和凋亡的作用。方法　用HPV18E6E7诱发的人胚食管上皮永生化细胞株SHEE ,培养在 5 0ml培养瓶和 2 4孔培养板 ,实验组分别加入1mmol/L和 5mmol/L丁酸钠 ,对照组未加药 ,作用 4d。统计细胞... 目的　研究丁酸钠对永生化食管上皮的增殖、分化和凋亡的作用。方法　用HPV18E6E7诱发的人胚食管上皮永生化细胞株SHEE ,培养在 5 0ml培养瓶和 2 4孔培养板 ,实验组分别加入1mmol/L和 5mmol/L丁酸钠 ,对照组未加药 ,作用 4d。统计细胞克隆数 ,细胞超微结构用电镜检查 ;细胞周期和凋亡细胞数用流式细胞仪检查 ;Ki 6 7、细胞角蛋白用免疫组织化学SP法检查 ;激光共聚焦扫描显微镜检查用鬼臼毒素标记的F 肌动蛋白。结果　加入 1mmol/L和 5mmol/L丁酸钠 4d克隆形成率分别为 6 5 5 %和 2 5 5 % ,比对照组 73 5 %减少。细胞周期检查 1mmol/L组S期细胞明显减少 (4 6 % ) ,多停留在G0 /G1期 (83 8% )。与对照组比较 ,1mmol/L组细胞Ki 6 7表达降低 ,F 肌动蛋白和角蛋白表达增加 ,5mmol/L组细胞凋亡明显增多。结论　丁酸钠可以诱导SHEE细胞增殖停滞和细胞凋亡 ,并有促细胞分化作用。其与用药剂量和时间有关。 展开更多

关键词 羟丁酸钠 脱噬作用 细胞培养 细胞增殖 细胞分化 永生化食管上皮 细胞凋亡

原文传递