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水凝胶作为骨免疫调节性生物材料的研究进展
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作者 何露露 王航 解慧琪 《口腔疾病防治》 2023年第1期68-72,共5页
随着对生物材料、免疫系统与骨骼系统关系研究的不断深入,依据骨免疫学,通过合理设计材料的性质可调节植入材料引起的宿主反应,具有免疫调节性骨组织工程支架可诱导巨噬细胞及时从促炎M1型转换为抗炎M2型,促进骨整合。水凝胶在骨组织工... 随着对生物材料、免疫系统与骨骼系统关系研究的不断深入,依据骨免疫学,通过合理设计材料的性质可调节植入材料引起的宿主反应,具有免疫调节性骨组织工程支架可诱导巨噬细胞及时从促炎M1型转换为抗炎M2型,促进骨整合。水凝胶在骨组织工程中备受关注,水凝胶组成的不同,包括来源、组分含量及分子量、偶联连接蛋白、使用交联剂等均会影响免疫反应,对水凝胶的理化性质进行改性亦可影响免疫反应,如软光刻等处理水凝胶形成的不同表面微形貌,加入酶敏感序列、酯键及使用动态共价化学等避免水凝胶降解过快或过慢,添加制孔剂、3D打印等制备具有互通大孔的水凝胶,柔软可注射水凝胶等,可减少促炎因子表达,促进巨噬细胞分化为M2型及减少异物反应,促进骨再生。然而骨免疫反应机制尚未阐明,需要进一步研究不同理化性质的水凝胶对免疫调节的具体机制。 展开更多
关键词 水凝胶 理化性质 骨免疫学 骨再生 免疫反应 异物反应 巨噬细胞 交联
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人端粒酶逆转录酶真核表达质粒转染人成纤维细胞的体外培养及生物学特性研究 被引量:11
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作者 解慧琪 杨志明 +4 位作者 屈艺 李秀群 秦廷武 赵金梅 刘军 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2002年第3期195-199,共5页
目的  分析人端粒酶逆转录酶 (h TERT)真核表达质粒 p GRN14 5转染人成纤维细胞的生物学特性。方法 体外分离培养小儿包皮成纤维细胞 ,脂质体法将构建的 p GRN14 5转染人成纤维细胞 ,经潮霉素 B筛选 ,扩增培养阳性克隆。 RT- PCR法、... 目的  分析人端粒酶逆转录酶 (h TERT)真核表达质粒 p GRN14 5转染人成纤维细胞的生物学特性。方法 体外分离培养小儿包皮成纤维细胞 ,脂质体法将构建的 p GRN14 5转染人成纤维细胞 ,经潮霉素 B筛选 ,扩增培养阳性克隆。 RT- PCR法、TRAP- PCR法分析细胞端粒酶活性。流式细胞术检测细胞增殖周期及细胞凋亡率 ,对转染后细胞行染色体核型分析及免疫组织化学法检测胶原分泌能力。结果 转染后培养的人成纤维细胞形态与转染前相比无明显改变 ,转染细胞稳定地表达端粒酶活性 ,流式细胞术分析转染前后成纤维细胞的增殖周期无明显改变 ,细胞凋亡率较转染前降低。经 p GRN14 5转染的人成纤维细胞保持正常的二倍体核型 ,具有正常分泌 、 型胶原的能力。结论  p GRN14 5转染的人成纤维细胞稳定地表达端粒酶活性 ,细胞寿命明显延长。 展开更多
关键词 人端粒酶逆转录酶 真核表达质粒 体外培养 生物学特性 研究 组织工程 端粒酶 成纤维细胞 基因转染
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重建端粒酶活性延长ptsA58H质粒转染的人胚肌腱细胞寿命 被引量:14
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作者 解慧琪 屈艺 +2 位作者 李秀群 秦廷武 杨志明 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期276-280,I002,共6页
目的探讨以重建细胞端粒酶活性,达到延长经ptsA58H质粒转化的人胚肌腱细胞系(THETC)寿命的可行性。方法构建含人端粒酶逆转录酶(hTERT)cDNA的质粒pGRN145,体外转染THETC;通过形态学观察、平板克隆形成率检测、软琼脂培养、不同培养条件... 目的探讨以重建细胞端粒酶活性,达到延长经ptsA58H质粒转化的人胚肌腱细胞系(THETC)寿命的可行性。方法构建含人端粒酶逆转录酶(hTERT)cDNA的质粒pGRN145,体外转染THETC;通过形态学观察、平板克隆形成率检测、软琼脂培养、不同培养条件下细胞生长曲线的测定,免疫组化法染色分析胶原分泌类型,hTERTmRNA表达及端粒重复序列扩增-PCR法检测细胞端粒酶活性等,对转染前后的细胞生物学特性进行比较。结果经pGRN145质粒体外转染的THETC(telT)有端粒酶活性表达,并继续保持旺盛的增殖能力,寿命延长。telT保持原有的温度依赖性及血清营养依赖性生长的特点,并正常分泌I型胶原,无恶性转化趋向。结论重建端粒酶活性可以延长THETC寿命,为建立组织工程标准细胞系提供了新的实验手段。 展开更多
关键词 ptsA58H质粒 细胞寿命 组织工程 肌腱细胞 基因转染 端粒酶
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SV40与细胞永生化 被引量:14
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作者 解慧琪 杨志明 屈艺 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2000年第3期170-174,共5页
目的 探讨 SV40如何介导细胞永生化 ,与细胞永生化现象相关的因素及它们的作用。方法 复习近十年有关细胞永生化与复制衰老现象研究的文章 ,对 SV40介导的细胞永生化及其相关因素进行综述。结果细胞永生化涉及病毒 DNA的整合 ,端粒酶... 目的 探讨 SV40如何介导细胞永生化 ,与细胞永生化现象相关的因素及它们的作用。方法 复习近十年有关细胞永生化与复制衰老现象研究的文章 ,对 SV40介导的细胞永生化及其相关因素进行综述。结果细胞永生化涉及病毒 DNA的整合 ,端粒酶的活化 ,生长抑制因子的失活等多方面的因素 ,它们的作用机制密切相关。结论 细胞永生化的研究有助于更广义地理解细胞生物学现象 ,并可作为标准细胞在细胞工程及组织工程的研究中发挥作用。 展开更多
关键词 细胞永生化 SV40 端粒酶 组织工程
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组织工程化肌腱修复喙锁韧带术后的短串联重复位点检测 被引量:8
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作者 解慧琪 杨志明 +1 位作者 辛军平 李秀群 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2000年第4期237-240,共4页
目的 用短串联重复位点检测方法 ,评价组织工程化肌腱临床应用修复喙锁韧带损伤的效果。方法  1999年 9月采用人胚肌腱细胞与材料体外复合培养 ,构建组织工程化肌腱 ,修复喙锁韧带损伤。术后 6个月 ,行内固定取出术时 ,钳取微量组织... 目的 用短串联重复位点检测方法 ,评价组织工程化肌腱临床应用修复喙锁韧带损伤的效果。方法  1999年 9月采用人胚肌腱细胞与材料体外复合培养 ,构建组织工程化肌腱 ,修复喙锁韧带损伤。术后 6个月 ,行内固定取出术时 ,钳取微量组织作组织学观察 ,并提取 DNA,检测 D3S175 4及 Cyar0 4基因座。结果 患者术后功能恢复良好 ,无局部及全身免疫排斥反应 ,D3S175 4及 Cyar0 4基因座电泳分型中含有非自体的等位基因 ,证实植入的组织工程化肌腱存活。 展开更多
关键词 组织工程化肌腱 喙锁韧带 修复 短串联重复位点
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ptsA58H质粒转染人胚腱细胞的增殖特性及端粒酶活性分析 被引量:4
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作者 解慧琪 杨志明 +2 位作者 屈艺 秦廷武 李秀群 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2001年第3期171-175,共5页
目的 分析体外长期传代 pts A5 8H质粒转染人胚腱细胞的增殖能力及端粒酶活性。方法 选用连续传代培养的第 40代、第 70代、第 75代转化人胚腱细胞 ,免疫组化染色观察细胞分泌胶原类型 ,比较细胞生长曲线 ,并行染色体核型分析 ,流式... 目的 分析体外长期传代 pts A5 8H质粒转染人胚腱细胞的增殖能力及端粒酶活性。方法 选用连续传代培养的第 40代、第 70代、第 75代转化人胚腱细胞 ,免疫组化染色观察细胞分泌胶原类型 ,比较细胞生长曲线 ,并行染色体核型分析 ,流式细胞术检测细胞增殖周期 ,提取细胞总 RNA,RT- PCR二步法检测细胞人端粒酶逆转录酶 m RNA表达。结果 转化人胚腱细胞传代至 70代以后 ,细胞形态发生改变 ,出现复制衰老现象。细胞仍具有正常分泌 型胶原的能力 ,转化人胚腱细胞染色体呈异倍性 (2 n=94)。转化人胚腱细胞无人端粒酶逆转录酶m RNA特异扩增带 ,无端粒酶活性表达。结论 单纯 SV40转染不能使人胚腱细胞永生化 。 展开更多
关键词 组织工程 细胞永生化 端粒酶 胚腱细胞 细胞增殖
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组织工程肌腱研究进展 被引量:1
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作者 解慧琪 杨志明 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2001年第6期497-500,共4页
Tendon tissue engineering is one of the research fields with longhistory, which has achieved dramatic advances This paper reviewed some recent original articles, mainly in sources of seeding cells of tendon tissue eng... Tendon tissue engineering is one of the research fields with longhistory, which has achieved dramatic advances This paper reviewed some recent original articles, mainly in sources of seeding cells of tendon tissue engineering, the level of immunological reaction with allogeneic tendon cells, preparation and screening of scaffold materials with specific mechanical and degenerating properties, the interaction of cells, scaffold materials, and so on To establish the standard tendon cell line for research has significance in the study of the biological characteristics of tendon cells, the cell model for immortalization, and screening the various scaffold materials The immunological reaction of the tissue engineered tendon with allogeneic cells in the research and future clinical applications must be clarified It is requested by tissue engineering research that the scaffold materials with specific mechanical and degenerating properties and the three dimensional culture technique mimic microenviroment in vivo, including the mechnical stress and strain All of those should be extensivly studied to lay a solid foundation for ultimate clinical 展开更多
关键词 组织工程肌腱 种子细胞 支架材料
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第五届国际组织工程学会年会简介
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作者 解慧琪 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2003年第2期F003-F003,共1页
关键词 组织工程 功能基因 新型支架材料 组织工程产品
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组织工程肋骨移植修复胸壁巨大缺损 被引量:66
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作者 杨志明 赵雍凡 +3 位作者 解慧琪 黄富国 刘欣 李涛 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2000年第6期365-368,共4页
目的 应用组织工程技术构建的肋骨和带蒂皮瓣移位修复 1例 2 5岁女性患者胸壁巨大韧带样纤维瘤切除后 ,合并软组织、肋骨缺损的早期效果。方法 经髂骨穿刺抽取骨髓组织 ,按 Houghton法分离培养骨髓基质干细胞 ,经定向诱导分化为成骨... 目的 应用组织工程技术构建的肋骨和带蒂皮瓣移位修复 1例 2 5岁女性患者胸壁巨大韧带样纤维瘤切除后 ,合并软组织、肋骨缺损的早期效果。方法 经髂骨穿刺抽取骨髓组织 ,按 Houghton法分离培养骨髓基质干细胞 ,经定向诱导分化为成骨样细胞 ;用同种异体肋骨经去细胞、去抗原、部分脱钙和冻干处理 ,制成保存天然框架的生物衍生骨支架 ,将 5× 10 6 /ml骨髓基质干细胞与骨支架材料联合培养 6天 ;待完整切除肿瘤后 ,用膈肌瓣修复胸膜腔 ,组织工程肋骨修复 3根肋骨 ,同侧带蒂侧腹壁皮瓣移位修复胸壁软组织缺损。结果 手术经过顺利 ,伤口 期愈合。术后 3个月随访 ,植入组织工程肋骨在体内逐渐发育成成熟肋骨 ,心肺功能显著改善。结论 应用自体骨髓基质干细胞构建的组织工程肋骨在个体化治疗中显示了优越性。 展开更多
关键词 组织工程 胸壁肿瘤 胸壁巨大缺损 肋骨移植 修复
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生物衍生组织工程骨支架材料的制备及理化特性 被引量:43
10
作者 李彦林 杨志明 +2 位作者 解慧琪 秦廷武 黄富国 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 2002年第1期10-12,共3页
我们用物理化学方法处理自制的天然生物衍生骨支架材料 ,测试其理化性质及力学强度 ,为骨组织工程研究提供可供选择的支架材料。将猪肋骨进行一系列理化处理 ,制成完全脱蛋白骨 (FDB)、部分脱蛋白骨(PDPB)、部分脱钙骨 (PDCB)三种材料 ... 我们用物理化学方法处理自制的天然生物衍生骨支架材料 ,测试其理化性质及力学强度 ,为骨组织工程研究提供可供选择的支架材料。将猪肋骨进行一系列理化处理 ,制成完全脱蛋白骨 (FDB)、部分脱蛋白骨(PDPB)、部分脱钙骨 (PDCB)三种材料 ,用扫描电镜观察其形貌特征 ,用 X射线衍射分析、X射线能量散射分析材料成份 ,用微量凯氏定氮法测定蛋白质含量 ,并对材料的力学性能进行分析测定。结果发现 ,FDB、PDPB、PDCB三种材料皆保持原骨组织的天然网状孔隙系统。其钙 /磷比值依次为 1.81、1.74和 1.5 0。三种材料的蛋白质含量为0 .0 1%± 0 .0 2 % ,2 2 .41%± 0 .83%和 35 .75 %± 2 .2 1% ,力学强度大小为 :PDCB>PDPB>FDB。可见 ,用不同理化方法处理制得的三种生物衍生骨材料皆保存原骨组织的天然网状孔隙系统 ,所含有机及无机成分含量不同 ,力学性能亦有差异 ,尚需要进一步验证其细胞相容性和组织相容性。 展开更多
关键词 生物衍生骨 理化特性 支架材料 组织工程 X线
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生物衍生组织工程骨植骨的初步临床应用 被引量:59
11
作者 杨志明 黄富国 +2 位作者 秦廷武 解慧琪 李秀群 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2002年第5期311-314,共4页
目的 总结生物衍生组织工程骨用于骨科临床的初步结果。方法  2 0 0 0年 1月~ 2 0 0 2年 1月 ,用同种异体骨膜来源的成骨细胞 1× 10 6 / ml与生物衍生骨支架材料构建的组织工程骨 ,经体外培养 3~ 7天后 ,植入修复 5 2例各种类... 目的 总结生物衍生组织工程骨用于骨科临床的初步结果。方法  2 0 0 0年 1月~ 2 0 0 2年 1月 ,用同种异体骨膜来源的成骨细胞 1× 10 6 / ml与生物衍生骨支架材料构建的组织工程骨 ,经体外培养 3~ 7天后 ,植入修复 5 2例各种类型的骨缺损 ,其中骨囊性病变 7例 ,陈旧性骨折不愈合或畸形愈合 2 2例 ,新鲜粉碎性骨折伴骨缺损 15例 ,脊柱骨折后路植骨融合术 4例 ,牙槽骨植骨 3例 ,足跗中关节植骨融合 1例。植入组织工程骨总量为 349g,平均每例植入6 .7g。结果 术后全部病例获得随访 ,随访时间 10~ 2 8个月 ,平均随访 18.5个月。除 1例术后伤口乙级愈合外 ,5 1例均为甲级愈合。除 2例植骨延迟愈合外 ,其余 5 0例均在 3.0~ 4 .5个月内愈合。有 6例进行了 CD3、CD4、CD8及 ICAM- 1和 VCAM- 1检测 ,均未发现明显异常。结论 生物衍生组织工程骨具有良好的成骨能力 。 展开更多
关键词 组织工程骨 生物衍生支架材料 成骨细胞 临床应用
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生物衍生骨支架材料的体外细胞相容性实验研究 被引量:39
12
作者 李彦林 杨志明 +2 位作者 解慧琪 秦廷武 黄富国 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2001年第4期227-231,共5页
目的 评价不同处理方法制备的生物衍生骨支架材料的细胞相容性。方法 将支架材料 ,即复合型完全脱蛋白骨 (CFDB)、部分脱蛋白骨 (PDPB)和部分脱钙骨 (PDCB)与人胚骨膜来源的成骨细胞体外复合培养 ,采用倒置相差显微镜、激光共聚焦显... 目的 评价不同处理方法制备的生物衍生骨支架材料的细胞相容性。方法 将支架材料 ,即复合型完全脱蛋白骨 (CFDB)、部分脱蛋白骨 (PDPB)和部分脱钙骨 (PDCB)与人胚骨膜来源的成骨细胞体外复合培养 ,采用倒置相差显微镜、激光共聚焦显微镜、扫描电镜、流式细胞仪及碱性磷酸酶 (AL P)活性检测 ,观察支架材料的细胞相容性。结果 三种材料上皆有细胞附着生长 ,三种材料对细胞增殖影响大小为 PDCB>PDPB>CFDB;三种材料对成骨细胞的细胞周期影响较小 ,未见异倍体细胞 ;三种材料对成骨细胞 AL P活性的影响大小依次为PDCB>PDPB>CFDB。结论  CFDB、PDPB及 PDCB无细胞毒性、无致瘤性 ,皆有良好的细胞相容性 ,以 CFDB为最好。 展开更多
关键词 组织工程 生物衍生材料 成骨细胞 细胞相容性 实验研究
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组织工程化骨修复猕猴长段骨缺损的实验研究 被引量:24
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作者 阳富春 杨志明 +5 位作者 李秀群 周悦婷 林凡 秦廷武 罗静聪 解慧琪 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2003年第5期406-410,共5页
目的 探讨用生物衍生骨材料和骨髓基质干细胞 (MSCs)复合后构成的组织工程化骨对异体猕猴长段骨缺损的修复作用。 方法 于猕猴胫骨结节抽取 MSCs并使诱导分化为成骨样细胞 ,用 5 -溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U )标记 ,培养后与人源生物衍... 目的 探讨用生物衍生骨材料和骨髓基质干细胞 (MSCs)复合后构成的组织工程化骨对异体猕猴长段骨缺损的修复作用。 方法 于猕猴胫骨结节抽取 MSCs并使诱导分化为成骨样细胞 ,用 5 -溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U )标记 ,培养后与人源生物衍生骨材料体外复合构成组织工程化骨 ,植入 15只异体猕猴修复桡骨 2 .5 cm长段骨缺损作为实验组 ;用单纯生物衍生骨材料修复对侧同样骨缺损作为对照组 ;另取 2只猕猴双侧桡骨同样部位和大小骨缺损旷置作为空白组。术后 1、2、3、6和 12周时各处死 3只动物取材 ,空白组 12周取材 ,行大体观察、组织学和免疫组织化学检测。 结果 实验组和对照组术后 1、2和 3周移植物周围组织反应较明显 ,6周后明显减轻 ,12周时基本消失。实验组标记成骨样细胞于术后 6周仍存在 ,术后 12周基本消失 ;骨缺损部位骨样组织、软骨、编织骨和板层骨出现时间均较对照组早 ,且骨愈合时间提前 3~ 6周。实验组骨缺损以多点方式直接成骨 ,对照组则从两端以“爬行替代”方式成骨。空白组术后 12周骨缺损均无愈合。 结论 生物衍生骨材料和 MSCs复合构建的组织工程化骨异体植入修复猕猴长段骨缺损可超越骨段移植的“爬行替代”过程 ,使骨缺损能较快愈合。生物衍生骨材料和同种异体 MSCs复合组织工程? 展开更多
关键词 组织工程化骨 长段骨缺损 修复 猕猴 实验研究 异体移植 生物衍生材料 手术方法
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疯牛病病原体研究及动物源性医疗器械产品安全性思考 被引量:25
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作者 史新立 谭芳奕 +4 位作者 王召旭 奚廷斐 解慧琪 杨志明 戴建武 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1138-1144,共7页
目的介绍关于疯牛病的基本知识,并对哺乳动物源性医疗器械的安全性评价作简要介绍。方法查阅近年来对疯牛病、新克雅氏病、朊病毒的研究概况、检测方法、灭活方法,欧美等国对牛羊源性相关材料的控制措施以及国内对相关产品的管理方法相... 目的介绍关于疯牛病的基本知识,并对哺乳动物源性医疗器械的安全性评价作简要介绍。方法查阅近年来对疯牛病、新克雅氏病、朊病毒的研究概况、检测方法、灭活方法,欧美等国对牛羊源性相关材料的控制措施以及国内对相关产品的管理方法相关的文献,综合分析。结果疯牛病,又称牛海绵状脑病(bovinespongiformencephacitis,BSE)。该病与羊瘙痒病具有同源性,它们与人类克-雅氏病(Creutzfeldt-Jakobdisease,CJD)均是海绵状脑组织病变,由Prion蛋白引起。疯牛病主要以缓慢破坏哺乳动物中枢神经系统为特征。结论由于动物源性医疗器械产品在原材料方面存在疯牛病等人畜共患疾病的风险,同时Prion蛋白对传统的杀灭方法有较强抵抗性,因此,加强对这类产品的源头控制及灭活工艺等生产质量体系的管理是非常重要的,从而保证动物源性医疗器械产品的使用安全有效。 展开更多
关键词 疯牛病 Prion蛋白 克-雅氏病 医疗器械 疯牛病病原体灭活
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转化人胚肌腱细胞的体外培养及生物学特性研究 被引量:29
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作者 杨志明 解慧琪 +2 位作者 项舟 李胜富 魏启欧 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 1999年第2期99-104,共6页
目的研究经ptsA58H质粒转化的人胚肌腱细胞的生物学特性,探讨细胞生长特性与体外培养条件改变的关系。方法取人胚肌腱细胞和经ptsA58H质粒转化的人胚肌腱细胞,进行体外培养。对细胞进行形态学、超微结构及一般特征的观... 目的研究经ptsA58H质粒转化的人胚肌腱细胞的生物学特性,探讨细胞生长特性与体外培养条件改变的关系。方法取人胚肌腱细胞和经ptsA58H质粒转化的人胚肌腱细胞,进行体外培养。对细胞进行形态学、超微结构及一般特征的观察。在不同培养条件下进行生长曲线绘制,平板克隆实验和软琼脂培养以及免疫组织化学法胶原染色。结果在正常培养条件下,人胚肌腱细胞和转化人胚肌腱细胞的生长性状几乎无差异,且冻存复苏并不改变其生长特性。在39.5℃及35℃进行条件培养,转化细胞的生长特性发生改变。转化细胞能长期传代,增殖能力强,并存在接触抑制现象和血清营养依赖性,在软琼脂中不能生长,具有分泌Ⅰ型胶原的能力。结论经ptsA58H质粒转化的人胚肌腱细胞可长期连续传代。通过改变培养条件可控制其生长。无肿瘤细胞的生物学特点。 展开更多
关键词 人胚肌腱细胞 转化细胞 体外培养 生物学特性
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组织工程化肌腱对T淋巴细胞亚群及其受体的影响 被引量:17
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作者 曲彦隆 杨志明 +2 位作者 解慧琪 朱伟南 雷松 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2001年第2期113-117,共5页
目的 探讨组织工程化肌腱对 T淋巴细胞亚群及受体的影响 ,明确其组织相容性。方法 采用3月龄法国罗曼鸡 75只 ,随机分成五组 ,每组 15只。手术造成右足第 3趾屈趾深肌腱 2 .5 cm缺损后 ,分组。A组 :未手术组 ;B组 :自体肌腱移植组 ;C... 目的 探讨组织工程化肌腱对 T淋巴细胞亚群及受体的影响 ,明确其组织相容性。方法 采用3月龄法国罗曼鸡 75只 ,随机分成五组 ,每组 15只。手术造成右足第 3趾屈趾深肌腱 2 .5 cm缺损后 ,分组。A组 :未手术组 ;B组 :自体肌腱移植组 ;C组 :新鲜同种异体肌腱移植组 ;D组 :梯度降解材料复合腱细胞移植组 ;E组 :衍生肌腱材料复合腱细胞移植组。检测 CD4+ 、CD8+ 、CD2 8细胞阳性率及 T淋巴细胞相关抗原受体 (TCR)密度变化。通过刀豆蛋白 (Con A)诱导的淋巴细胞转化试验、直接淋巴细胞混合培养试验及间接淋巴细胞混合培养试验 ,了解机体对肌腱细胞的免疫反应水平。结果  D、E组与 B组比较 ,早期 CD4+ 、CD8+ 及 TCR轻度增高 ,2周后下降 ,无显著性差异 (P>0 .0 5 )。C组 CD4+ 、CD8+ 、CD2 8及 TCR阳性率与 D、E组比较 ,有显著性差异 (P<0 .0 5 )。结论 肌腱细胞为弱抗原细胞 ,抗原脱落或可溶性抗原分泌较少。 展开更多
关键词 组织工程肌腱 免疫反应 T淋巴细胞亚群 肌腱损伤 修复
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小肠黏膜下层复合上皮细胞及成肌细胞构建组织工程食管的初步研究 被引量:18
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作者 岑石强 李万里 +3 位作者 黄富国 杨志明 解慧琪 罗静聪 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1040-1043,共4页
目的初步探索利用小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)作为支架材料,复合食管鳞状上皮细胞与成肌细胞构建组织工程食管的可行性。方法4周龄无胸腺小鼠20只,体重20.0±2.5g,雌雄不限。体外分离、培养人胚胎食管鳞... 目的初步探索利用小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)作为支架材料,复合食管鳞状上皮细胞与成肌细胞构建组织工程食管的可行性。方法4周龄无胸腺小鼠20只,体重20.0±2.5g,雌雄不限。体外分离、培养人胚胎食管鳞状上皮细胞、成肌细胞,并行5-BrdU标记;制备SIS材料并切割成1cm×lcm大小,在SIS材料同一表面接种两种细胞,待细胞在材料表面贴附后将其植入裸鼠体内深筋膜下,于术后第3天及l、2、3周取材行组织学和抗角蛋白、平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin,SMA)免疫组织化学观察,以了解食管鳞状上皮细胞、成肌细胞在SIS材料上的增殖、分化情况和复合物在裸鼠体内的血管化情况。结果人胚胎食管鳞状上皮细胞、成肌细胞能够渗透、生长于SIS材料中,并形成数层结构。植入体内第3天可见细胞增殖为多层覆盖于材料表面,并分泌大量细胞间基质。第2周时已经形成7~8层细胞,并伴有血管长入。3周时细胞增殖为十几层,大量血管长入。通过5-BrdU标记抗体染色观察,示SIS支架材料上生长的细胞多为所植入细胞。抗角蛋白,SMA免疫组织化学染色示移植细胞能够在体内分化。结论成肌细胞与鳞状上皮细胞在SIS材料上的复合培养物,在体内能继续增殖分化形成多层细胞结构,并能快速血管化,可用于组织工程化食管的构建。 展开更多
关键词 组织工程食管 小肠黏膜下基质 食管鳞状上皮细胞 成肌细胞
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周围神经组织工程材料的预构 被引量:44
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作者 王光林 杨志明 +2 位作者 解慧琪 王翠莹 李胜富 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2000年第2期110-114,共5页
目的 研究具有雪旺细胞 (SC)活性的组织工程周围神经修复材料的构建方法。方法  1采用干 /湿相转化纺丝法 ,将分子量为 730 k D的聚乳酸 (PL A)制成外径为 2 .3m m、内径为 1.9m m、壁厚 0 .4mm、长4cm、孔隙率为 70 %、孔径为 2 0~ ... 目的 研究具有雪旺细胞 (SC)活性的组织工程周围神经修复材料的构建方法。方法  1采用干 /湿相转化纺丝法 ,将分子量为 730 k D的聚乳酸 (PL A)制成外径为 2 .3m m、内径为 1.9m m、壁厚 0 .4mm、长4cm、孔隙率为 70 %、孔径为 2 0~ 40 μm的中空纤维管和孔径为 10 0~ 2 0 0 μm、孔隙率为 85 %的 PL A无纺纤维布。2将 SC置入细胞外基质 (ECM)凝胶中 ,观察 SC在 ECM凝胶中的生长。 3SC/ ECM悬液浸入 PL A无纺纤维布中 ,观察 SC在 PL A支架材料中的生长。 4将 SC、SC/ ECM和 SC/ ECM/ PL A置入 PL A中空纤维管中 ,桥接大鼠坐骨神经长 10 mm缺损 ,观察 SC移植后存活情况。结果  1SC在 ECM凝胶中 ,细胞生长良好 ,1天后开始有细胞伸出两极 ,形态开始展开 ,3天后几乎全部细胞恢复成双极梭形状细胞 ,并开始分裂、增殖 ,直到 14天后随着凝胶的溃解 ,SC开始死亡 ,降解成碎片 ;当 ECM凝胶溃解后 ,加入 DMEM培养基 ,SC游出 ,贴壁生长。2 SC/ ECM悬液浸入 PL A无纺纤维布后 ,大部分细胞随 ECM凝胶状态的形成 ,滞留于 PL A纤维网孔中 ,1天后开始伸出两极 ,3天后可见网孔中大量双极梭形细胞 ,部分细胞沿着纤维生长 ,仅少数细胞脱落于培养瓶底贴壁生长。 3SC移植术后2 1天 ,Brd U免疫组织化学染色发现大量 展开更多
关键词 雪旺细胞 组织工程 周围神经缺损 修复
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转化人胚腱细胞在PLA和PLGA表面上的粘附特性研究 被引量:16
19
作者 秦廷武 解慧琪 +3 位作者 杨志明 秦建 蔡绍皙 徐世荣 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第2期154-158,共5页
为了定量研究转化人胚腱细胞(Transform ed hum an em bryonic tendon cells, THETCs)在聚乳酸(Polylactic acid, PLA)和聚乳酸与羟基乙酸共聚物 85/15(Po... 为了定量研究转化人胚腱细胞(Transform ed hum an em bryonic tendon cells, THETCs)在聚乳酸(Polylactic acid, PLA)和聚乳酸与羟基乙酸共聚物 85/15(Polylacticcoglycolic acid, PLGA 85/15)表面上的粘附特性,我们采用微管吸吮技术测定了单个THETC与PLA 膜(平均厚度18.6 μm )和PLGA85/15 膜(平均厚度17.3 μm )表面的粘附力学特性。结果显示,THETC与PLA 膜和PLGA85/15膜表面的粘附率和粘附力明显大于膜表面裱衬牛血清白蛋白(Bovine serum album in, BSA)实验组,同时小于膜表面裱衬聚赖氨酸(PolyDlysine, PDL)实验组,而且PLGA85/15 膜更易于THETC粘附。表明BSA 能抑制THETC在聚合物膜表面的粘附,而PDL能增强其粘附。提示PLGA85/15 预涂PDL是一种新型的THETC贴附基。 展开更多
关键词 转化人胚腱细胞 肌腱损伤 聚乳酸 PLGA
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外源性Ⅰ型胶原对人胚骨膜成骨细胞生物学特性的影响 被引量:22
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作者 杨志明 余希杰 +1 位作者 黄富国 解慧琪 《华西医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期1-4,共4页
目的 研究 型胶原对人胚骨膜来源成骨细胞生物学特性的影响 ,为 型胶原在组织工程人工骨中的应用提供依据。方法 在不同浓度 型胶原涂层上培养成骨细胞 ,用细胞计数法研究成骨细胞粘附情况 ,3 H- Td R掺入实验观察成骨细胞增殖能... 目的 研究 型胶原对人胚骨膜来源成骨细胞生物学特性的影响 ,为 型胶原在组织工程人工骨中的应用提供依据。方法 在不同浓度 型胶原涂层上培养成骨细胞 ,用细胞计数法研究成骨细胞粘附情况 ,3 H- Td R掺入实验观察成骨细胞增殖能力 ,通过检测成骨细胞胶原、骨钙素和碱性磷酸酶的合成情况 ,以不涂层 型胶原为对照组 ,比较骨膜来源成骨细胞成骨能力的改变。结果  型胶原对成骨细胞发挥以下作用 :1增加粘附细胞数量 ,且在 2 5 μg/ m l浓度达最大效应 ;2减弱成骨细胞增殖能力 ,且以 12 .5 μg/ ml以上浓度作用显著 ( P<0 .0 5 ) ;3轻度减弱成骨细胞 型胶原合成能力 ,以 2 5 μg/ ml以上浓度作用显著 ( P<0 .0 5 ) ;4增加骨钙素合成 ,以6 .2 5 μg/ m l以上浓度作用显著 ( P<0 .0 5 ) ,2 5 μg/ m l浓度达最大效应 ;5增加成骨细胞碱性磷酸酶活性 ,以 12 .5 μg/ml以上浓度作用显著 ( P<0 .0 5 )。结论  型胶原能促进成骨细胞的粘附与分化 ;支架材料上复合 型胶原涂层可增强成骨细胞的成骨能力 ; 型胶原最佳复合浓度为 2 5 μg/ 展开更多
关键词 成骨细胞 细胞外基质 Ⅰ型胶原 组织工程 生物学特性 人工骨
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