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弗氏柠檬酸杆菌的鉴定及其药敏试验
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作者 许国洋 付文贵 +6 位作者 付利芝 闫志强 高广亮 邓娟 戴玉娇 庞丽霞 翟少钦 《动物医学进展》 北大核心 2024年第4期92-96,共5页
为进一步明确分离自仔猪腹泻肛拭子样本的弗氏柠檬酸杆菌病原特性、耐药情况及其对小鼠的致病性,试验通过5%兔鲜血TSA培养基培养、生化指标测定、敏感药物和耐药基因筛选对其进行鉴定,并用其腹腔注射攻毒小白鼠,分析其对小鼠的致病性。... 为进一步明确分离自仔猪腹泻肛拭子样本的弗氏柠檬酸杆菌病原特性、耐药情况及其对小鼠的致病性,试验通过5%兔鲜血TSA培养基培养、生化指标测定、敏感药物和耐药基因筛选对其进行鉴定,并用其腹腔注射攻毒小白鼠,分析其对小鼠的致病性。结果显示,分离到的弗氏柠檬酸杆菌在血平板上生长时导致溶血现象。生化试验中,硝酸盐还原、山梨醇和葡萄糖发酵等9个检测指标为阳性;且该菌对氧氟沙星、诺氧沙星、万古霉素、青霉素和链霉素耐药,并携带aacA-aphD、ileS和vanA3种耐药基因。该菌对小鼠的致死率为60%,剖检发现小鼠肝脏、肺脏、肠道、肾脏和脾脏组织发生不同程度病理变化,其中,小鼠肝脏和肺脏组织的出血症状最为明显;组织病理学观察发现,肝脏组织可见多量中央静脉淤血,肝窦内可见淤血;肺脏组织可见大量血管淤血,大面积肺泡壁间质淤血;肠绒毛黏膜上皮与固有层轻度分离。试验结果可为弗氏柠檬酸杆菌致病机理的进一步研究提供参考,也可为仔猪潜在细菌性疫病防治提供了数据支撑。 展开更多
关键词 弗氏柠檬酸杆菌 分离鉴定 耐药基因 致病性
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表达PCV2 ORF2的重组T7噬菌体在猪体内的存留分析
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作者 杨柳 牟豪 +5 位作者 吕林丹 胡霞 许国洋 郑华 张邑帆 沈克飞 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第8期38-43,共6页
为了检测经颈部肌肉注射入猪体的、表达猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白(ORF2)的重组T7噬菌体(T7-ORF2)在体内的存留情况,本试验将PCV2抗原和抗体均为阴性的20日龄仔猪随机分为试验组和对照组,每组5只;试验组猪只以1.5mL/只剂量颈部肌肉注... 为了检测经颈部肌肉注射入猪体的、表达猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白(ORF2)的重组T7噬菌体(T7-ORF2)在体内的存留情况,本试验将PCV2抗原和抗体均为阴性的20日龄仔猪随机分为试验组和对照组,每组5只;试验组猪只以1.5mL/只剂量颈部肌肉注射增殖收获的T7-ORF2,对照组猪只以相同途径注射等体积的洗脱液;于注射前1 d、注射后10 h、1~7 d测量体温,观察猪只的临床症状和死亡情况;分别于注射后1 h、3 h、5 h、10 h、1 d、3 d、5 d和7 d采集猪只的血液和粪便样品,注射后10 h、1 d、3 d、5 d和7 d采集肝脏、脾脏和腹股沟淋巴结样品;将收集的各样品处理上清与宿主菌(大肠埃希菌BLT5403株)混合培养,通过细菌裂解分析T7-ORF2的感染性;以细菌裂解液提取的基因组DNA为模板进行PCR,检测ORF2基因;通过免疫组织化学检测T7-ORF2在肝脏、脾脏和腹股沟淋巴结中的分布和存留时间。结果显示,试验组猪只在试验期体温、采食、饮水和精神状态正常,无不良症状和死亡发生;注射后5 d能从血清和粪便中检测到感染性的T7-ORF2;注射后3 d能从肝脏、脾脏和腹股沟淋巴结中检测到感染性的T7-ORF2;从细菌裂解液中可扩增检测到PCV2 ORF2基因片段;免疫组织化学切片观察结果显示,T7-ORF2在机体中逐渐被清除,在脾脏中存留至少5 d,在肝脏和腹股沟淋巴结中存留至少7 d。结果表明,T7-ORF2可进入猪只的血液循环、肝脏、脾脏和腹股沟淋巴结中,并随粪便排出体外。本试验为利用T7-ORF2深入开发PCV2新型疫苗提供数据支撑。 展开更多
关键词 重组T7噬菌体 猪圆环病毒2型(PCV2) 肌肉注射 检测 疫苗
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鸡常见细菌性疾病及防治措施
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作者 郑华 闫志强 +1 位作者 许国洋 余远迪 《现代畜牧科技》 2024年第1期58-60,共3页
鸡是人类重要的食用禽类之一,其肉类和蛋类是人类的重要食品来源。由于鸡的生长环境和生活习性容易受到各种细菌的感染,导致鸡细菌性疾病是鸡养殖业中常见的疾病之一。该文通过对鸡常见细菌性疾病及其传播途径、药物和生物安全防治等方... 鸡是人类重要的食用禽类之一,其肉类和蛋类是人类的重要食品来源。由于鸡的生长环境和生活习性容易受到各种细菌的感染,导致鸡细菌性疾病是鸡养殖业中常见的疾病之一。该文通过对鸡常见细菌性疾病及其传播途径、药物和生物安全防治等方面进行综述,旨在喂养鸡业提供科学依据和参考,促进鸡养殖业的健康发展。 展开更多
关键词 细菌性疾病 传播途径 防治
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全基因组关联分析筛选鹅蛋品质相关分子标记 被引量:3
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作者 高广亮 张克山 +5 位作者 赵献芝 许国洋 谢友慧 周莉 张昌莲 王启贵 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第19期3894-3904,共11页
【目的】通过筛选与鹅蛋品质性状相关的分子标记和候选基因,为解析蛋品质性状的遗传机制及分子标记辅助选择提供理论支撑。【方法】采用同批次健康四川白鹅群体(209只)作为研究对象。收集了每只鹅在产蛋高峰期连续生产的5枚蛋,并测定了... 【目的】通过筛选与鹅蛋品质性状相关的分子标记和候选基因,为解析蛋品质性状的遗传机制及分子标记辅助选择提供理论支撑。【方法】采用同批次健康四川白鹅群体(209只)作为研究对象。收集了每只鹅在产蛋高峰期连续生产的5枚蛋,并测定了蛋重、蛋形指数、蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋壳重和蛋黄重量等6个蛋品质性状。基于前期209只四川白鹅(母鹅)2.896 Tb全基因组重测序数据(12.44×/个体),采用全基因组关联分析的方法,筛选与蛋品质性状相关的SNP位点和重要候选基因,并通过核酸飞行时间质谱方法检测了这些SNP位点的基因型频率。【结果】经过筛选过滤,共有9279339个SNPs和209个个体用于后续研究。GWAS研究发现,48个SNP位点与6个鹅蛋品质性状显著或建议性显著相关(阈值分别为5.43×10-9和1.09×10-7),并注释出27个蛋品质性状相关的候选基因,包括妊娠相关血浆蛋白A(pappalysin1,PAPPA)、蛋白丝氨酸/苏氨酸磷酸酶调节亚基2基因(serine/threonine-protein phosphatase 4 regulatory subunit 2,PP4R2)、乙醇胺磷酸转移酶1(ethanolamine phosphotransferase 1,EPT1)和离子型谷氨酸受体K2(glutamate receptor ionotropic,kainate 2,GRIK2)等,其中候选基因PAPPA参与蛋白质代谢,促进生长因子IGF生成,在PP4R2的11bp范围内存在5个SNPs与蛋壳厚度显著相关,另外在GRIK2上有6个SNPs与蛋黄重量显著相关,GRIK2和PP4R2分别与机体血钙维持功能以及胆固醇代谢相关。功能富集研究发现,候选基因主要参与了response to growth factor(GO:0070848)、intracellular chemical homeostasis(GO:0055082)、response to hormone(GO:0009725)和regulation of the monoatomic ion transport(GO:43269)等代谢通路。【结论】经GWAS方法筛选出PAPPA、GRIK2、ASCC3和EPT1分别作为蛋重、蛋黄重、蛋壳强度等蛋品质性状潜在功能基因,为鹅蛋品质性状的改良提供了分子遗传标记的理论参考。 展开更多
关键词 全基因组关联分析 分子标记辅助选择 蛋品质性状
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猪场舍内环境中葡萄球菌的分离鉴定及耐药分析
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作者 许国洋 翟少钦 +5 位作者 陈春林 徐登峰 邓娟 覃志初 何丹 付文贵 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2023年第23期53-57,133,共6页
为了明确重庆市某规模猪场舍内环境中葡萄球菌的病原特性及耐药情况,试验采用空气细菌培养自然沉降法和物体表面采样法采集猪场舍内环境样本20份,进行葡萄球菌的分离纯化,提取分离株基因组DNA,扩增16S rRNA基因序列,构建系统进化树,检... 为了明确重庆市某规模猪场舍内环境中葡萄球菌的病原特性及耐药情况,试验采用空气细菌培养自然沉降法和物体表面采样法采集猪场舍内环境样本20份,进行葡萄球菌的分离纯化,提取分离株基因组DNA,扩增16S rRNA基因序列,构建系统进化树,检测其生化指标,确定敏感药物,并分析病原菌耐药基因的携带情况。结果表明:分离纯化得到2种革兰氏阳性球菌,分别与头状葡萄球菌和沃氏葡萄球菌相似性较高(均为99%),在系统进化树中也分别与其聚为一簇,两种菌的硝酸盐还原、MR-VP和甘露醇等7种指标检测结果均为阳性,确定为头状葡萄球菌和沃氏葡萄球菌,均对多西环素、复方新诺明和阿奇霉素耐药;头状葡萄球菌携带vanA、rpoB、ermB和tetM 4种耐药基因,沃氏葡萄球菌携带ileS、rpoB、blaZ、ermC、aacA-aphD、tetK和tetM 7种耐药基因,两种菌均含有rpoB和tetM基因,并证实头状葡萄球菌和沃氏葡萄球菌的耐药类型与耐药基因具有相关性。说明该猪场舍内环境中存在头状葡萄球菌和沃氏葡萄球菌,在生猪养殖和人畜共患病防控方面应加强对环境中病原微生物的监测。 展开更多
关键词 猪舍 环境 头状葡萄球菌 沃氏葡萄球菌 分离 鉴定 耐药基因
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猪流行性腹泻病毒的遗传变异及疫苗研发现状 被引量:1
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作者 王永斌 付利芝 +1 位作者 杨柳 许国洋 《畜禽业》 2023年第8期15-18,共4页
猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒引发的一种高度传染性肠道疾病,可引起仔猪厌食、呕吐、水样腹泻等,是导致仔猪高发病率和死亡率的重要诱因。猪流行性腹泻病毒作为一种重要的猪冠状病毒,仍在不断进化和变异,免疫逃逸能力和传染性在不... 猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒引发的一种高度传染性肠道疾病,可引起仔猪厌食、呕吐、水样腹泻等,是导致仔猪高发病率和死亡率的重要诱因。猪流行性腹泻病毒作为一种重要的猪冠状病毒,仍在不断进化和变异,免疫逃逸能力和传染性在不断加强。目前,疫苗免疫仍是预防猪流行性腹泻的重要手段,越来越多的疫苗产品已被研制出来。针对猪流行性腹泻的病原特征及疫苗研发现状进行综述,旨在为该病的监测和防控提供理论依据。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻 病毒 流行特征 遗传变异 疫苗研发
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规模化养鸡场生物安全技术概述
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作者 郑华 许国洋 +1 位作者 闫志强 余远迪 《现代畜牧科技》 2023年第10期45-47,共3页
随着人口的增长和对禽肉需求的增加,规模化养鸡场在全球范围内得到广泛的发展。规模化养鸡场的生物安全问题也逐渐引起人们的关注。该文将重点探讨规模化养鸡场的生物安全问题,包括疾病传播、抗生素滥用、选址等方面,分析当前的现状和挑... 随着人口的增长和对禽肉需求的增加,规模化养鸡场在全球范围内得到广泛的发展。规模化养鸡场的生物安全问题也逐渐引起人们的关注。该文将重点探讨规模化养鸡场的生物安全问题,包括疾病传播、抗生素滥用、选址等方面,分析当前的现状和挑战,提出一些解决方案,以减少规模化养鸡场的生物安全风险。 展开更多
关键词 规模化养鸡场 生物安全 疾病传播 抗生素滥用 环境污染
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山羊淋巴结炎病原菌的分离鉴定及多重PCR检测方法的建立 被引量:22
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作者 许国洋 付利芝 +5 位作者 杨金龙 杨柳 徐登峰 张邑帆 沈克飞 张素辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期324-330,共7页
旨在对重庆地区山羊体表型淋巴结炎病原菌进行分离鉴定,并建立相应检测方法。无菌采集山羊患病部位脓液,进行病原菌分离鉴定,依据菌株16SRNA基因序列构建系统进化发育树,同时设计特异性引物,建立PCR检测方法。结果表明,从病料中主要分离... 旨在对重庆地区山羊体表型淋巴结炎病原菌进行分离鉴定,并建立相应检测方法。无菌采集山羊患病部位脓液,进行病原菌分离鉴定,依据菌株16SRNA基因序列构建系统进化发育树,同时设计特异性引物,建立PCR检测方法。结果表明,从病料中主要分离到3种病原菌,分别为伪结核棒状杆菌、化脓隐秘杆菌和金黄色葡萄球菌;依据伪结核棒状杆菌磷脂酶D、化脓隐秘杆菌16SRNA和金黄色葡萄球菌nuc保守核苷酸序列设计引物,建立的多重PCR检测方法,可以从3种菌株混合基因组中扩增出大小分别为507、1 378和278bp的对应菌株特异性序列,该方法最低检出浓度为103cfu·mL-1;对采集的80份临床样品进行多重PCR检测,发现伪结核棒状杆菌与金黄色葡萄球菌混合感染检出率为12.5%,伪结核棒状杆菌与化脓隐秘杆菌混合感染检出率为3.75%,三种菌混合感染检出率为7.5%。成功分离到山羊淋巴结炎的3种主要病原菌,并建立多重PCR检测方法,为该病的防控及治病机制研究奠定了基础。 展开更多
关键词 山羊 淋巴结炎 多重PCR 伪结核棒状杆菌 化脓隐秘杆菌 金黄色葡萄球菌
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山羊源化脓隐秘杆菌的分离与鉴定及自然感染病例的病理学观察 被引量:13
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作者 张素辉 付利芝 +2 位作者 朱买勋 许国洋 徐登峰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2251-2257,共7页
为了确诊自然感染疑似化脓隐秘杆菌引起的山羊淋巴结炎病例病原,进行了病原菌分离培养、染色镜检、生化试验和16SrRNA鉴定、动物试验、病理组织切片观察。该病原菌染色镜检为革兰阳性的丝状、杆状或棒状细菌,VITEK2Compact全自动微生物... 为了确诊自然感染疑似化脓隐秘杆菌引起的山羊淋巴结炎病例病原,进行了病原菌分离培养、染色镜检、生化试验和16SrRNA鉴定、动物试验、病理组织切片观察。该病原菌染色镜检为革兰阳性的丝状、杆状或棒状细菌,VITEK2Compact全自动微生物分析系统鉴定为化脓隐秘杆菌,可信度为88%,16SrRNA鉴定与化脓隐秘杆菌相似性高于99%,判定该病原菌为化脓隐秘杆菌;药敏试验结果显示该菌对β-内酰胺类药物和氟喹诺酮类药物有高度的敏感性,对磺胺类药物有一定的耐药性;病理切片观察到病羊心肌纤维变性,肺和肾小管管腔内有浆液-纤维素性变性,肝有炎性细胞浸润形成肝炎,肩前淋巴结脂肪变性,脾呈浆液-化脓性炎症。结果表明,本次致使山羊淋巴结炎的病原菌为化脓隐秘杆菌,且病羊病理组织学变化为主要脏器的化脓性炎症。 展开更多
关键词 山羊 化脓隐秘杆菌 细菌学鉴定 16SrRNA鉴定 病理切片观察
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重庆地区兔腹泻病原菌分离鉴定及检测方法的建立 被引量:10
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作者 许国洋 沈克飞 +4 位作者 徐登峰 付利芝 张素辉 王孝友 杨柳 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1097-1103,共7页
对重庆地区兔细菌性腹泻病原菌进行分离鉴定并建立相应检测方法,为该病的检测及防控奠定基础。通过临床诊断与细菌分离培养,对引起兔腹泻的病原菌进行分离,利用细菌通用引物扩增分离菌16S rDNA基因序列,测序分析后构建系统进化发育树。... 对重庆地区兔细菌性腹泻病原菌进行分离鉴定并建立相应检测方法,为该病的检测及防控奠定基础。通过临床诊断与细菌分离培养,对引起兔腹泻的病原菌进行分离,利用细菌通用引物扩增分离菌16S rDNA基因序列,测序分析后构建系统进化发育树。同时,依据各病原菌特异性序列设计引物,建立PCR检测方法。结果表明,共分离到4种病原菌,分子生物学鉴定为:铜绿假单胞菌、产气荚膜梭菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌;依据铜绿假单胞菌外毒素eta基因、产气荚膜梭菌a毒素基因、金黄色葡萄球菌耐热核酸酶nuc基因和大肠杆菌外膜蛋白eae基因设计特异性引物,成功建立多重PCR检测方法,可从4种病原菌基因组混合物中扩增出大小分别为1 043、324、200和609bp的目的条带,目的菌株最低检出浓度为103cfu·mL-1。对重庆地区200份临床样本进行检测,发现4种病原菌普遍存在,其中,金黄色葡萄球菌单独感染检出率高达37.6%,与大肠杆菌的混合感染检出率达28.0%。 展开更多
关键词 兔腹泻 病原菌 分离鉴定 多重PCR 混合感染 检出率
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重庆地区羊口疮病毒的分离鉴定及F1L基因的原核表达 被引量:7
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作者 杨钰 冯杰 +5 位作者 刘嫒 张素辉 许国洋 冯将 刘宗胜 鲜思美 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第6期1396-1401,共6页
本试验旨在对重庆地区羊口疮病毒(ORFV)进行分离培养及鉴定,并研究其F1L基因序列在大肠杆菌中的表达情况。利用MDBK细胞对疑似ORFV感染的羔羊痂皮中的病毒进行分离培养;对F1L基因序列进行PCR扩增,引入限制性内切酶NotⅠ和EcoRⅠ,构建重... 本试验旨在对重庆地区羊口疮病毒(ORFV)进行分离培养及鉴定,并研究其F1L基因序列在大肠杆菌中的表达情况。利用MDBK细胞对疑似ORFV感染的羔羊痂皮中的病毒进行分离培养;对F1L基因序列进行PCR扩增,引入限制性内切酶NotⅠ和EcoRⅠ,构建重组质粒pET-32a-F1L,转化至大肠杆菌BL21菌株后,对阳性菌株进行诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE检测和Western blotting鉴定。结果表明,所获得的毒株为ORFV,其F1L基因在大肠杆菌中的表达产物大小约为57.4ku,主要以包涵体形式存在,5h为最佳诱导表达时间,并具有良好的反应原性。 展开更多
关键词 羊口疮病毒 分离鉴定 F1L基因 原核表达
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基于PLO基因的山羊化脓隐秘杆菌PCR检测方法的建立与应用 被引量:5
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作者 沈克飞 杨柳 +3 位作者 付利芝 徐登峰 许国洋 张素辉 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期330-334,共5页
为建立特异的化脓隐秘杆菌PCR检测方法,基于化脓隐秘杆菌PLO基因设计4对引物,对12种细菌进行常规PCR扩增,以评价方法的特异性,并运用建立的PCR方法检测临床样本。结果显示只有使用F1/R1引物对的PCR方法能鉴别化脓隐秘杆菌,并能用于临床... 为建立特异的化脓隐秘杆菌PCR检测方法,基于化脓隐秘杆菌PLO基因设计4对引物,对12种细菌进行常规PCR扩增,以评价方法的特异性,并运用建立的PCR方法检测临床样本。结果显示只有使用F1/R1引物对的PCR方法能鉴别化脓隐秘杆菌,并能用于临床样本检测。 展开更多
关键词 化脓隐秘杆菌 PLO基因 PCR 特异性
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山羊化脓隐秘杆菌重庆分离株CbpA肝素结合结构域鉴定 被引量:3
13
作者 沈克飞 许国洋 +4 位作者 胡瑞思 徐登峰 杨睿 付利芝 张素辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期173-180,共8页
本研究旨在对山羊化脓隐秘杆菌重庆分离株的胶原结合蛋白(collagen-binding protein,Cbp)CbpA(CbpACQ)进行序列分析,鉴定其中2个潜在的肝素结合结构域NRB和B1。运用生物信息学软件分析CbpA-CQ基因及其编码产物。采用PCR扩增NRB和B1基因... 本研究旨在对山羊化脓隐秘杆菌重庆分离株的胶原结合蛋白(collagen-binding protein,Cbp)CbpA(CbpACQ)进行序列分析,鉴定其中2个潜在的肝素结合结构域NRB和B1。运用生物信息学软件分析CbpA-CQ基因及其编码产物。采用PCR扩增NRB和B1基因,将其克隆至原核表达载体pGEX-4T-1。融合蛋白GST-NRB和GST-B1在大肠杆菌DE3菌株中被诱导表达,使用Gluthathione-Sepharose 4B纯化。采用免疫印迹检测融合蛋白GST-NRB、GST-B1与HeLa细胞的黏附情况,以及肝素对融合蛋白黏附细胞的抑制情况。结果显示,重庆株CbpA有7个胶原结合蛋白B结构域,约占全长的55%,此结构域与化脓隐秘杆菌、链球菌属等细菌有同源性。重庆株CbpA与化脓隐秘杆菌的CbpA在进化树中聚集成一个进化支。从诱导菌裂解物上清中亲和纯化得到融合蛋白GST-NRB和GST-B1。GST-NRB、GST-B1呈剂量依赖性黏附HeLa细胞,肝素呈剂量依赖性抑制GST-NRB、GST-B1黏附HeLa细胞。结果表明尽管CbpA-CQ有很大变异性,但具有已知化脓隐秘杆菌CbpA的共同序列特征;其NRB和B1区域为肝素结合结构域。 展开更多
关键词 化脓隐秘杆菌 CbpA 黏附 肝素 肝素结合结构域
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GnIH基因多态性与鹅产蛋和体组成性状的关联分析 被引量:3
14
作者 高广亮 张克山 +4 位作者 许国洋 赵献芝 陈主平 周莉 王启贵 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2021年第5期204-210,共7页
为研究促性腺激素抑制激素基因(GnIH)的系列特征,以及其SNP多态性位点对四川白鹅产蛋和体组成等性状的影响,克隆了GnIH基因DNA序列,并与哺乳动物和其他禽类进行生物信息学分析;该基因DNA序列比对到鹅参考基因组序列筛选SNP位点,随后采用... 为研究促性腺激素抑制激素基因(GnIH)的系列特征,以及其SNP多态性位点对四川白鹅产蛋和体组成等性状的影响,克隆了GnIH基因DNA序列,并与哺乳动物和其他禽类进行生物信息学分析;该基因DNA序列比对到鹅参考基因组序列筛选SNP位点,随后采用Sanger方法直接测序PCR产物的方法,检测四川白鹅群体(208个体)中该基因序列,该序列包含3个外显子和2个内含子,CDS区长522 bp,173个氨基酸的前体蛋白GnIH氨基酸序。通过多重比对分析后,统计该基因在四川白鹅群体中SNP位点的基因型及其频率,进而与鹅产蛋和体组成等11个重要经济性状进行关联分析。获得了3735 bp的GnIH基因DNA序列,遗传进化分析显示,四川白鹅GnIH基因与绿头鸭的序列相似度最高(99%);序列比对到鹅参考基因组序列发现该基存在26个SNP位点;SNP位点基因型频率与性状关联分析结果表明:该基因11个SNP位点(g.811T>C、g.1892T>C、g.1320G>A、g.1809G>T、g.2164C>G、g.1708A>G、g.2164C>G、g.1809G>T、g.1892T>C、g.1929C>A和g.2164C>G)与初产蛋质量、体斜长、颈长、胸宽和胫围等性状显著或极显著相关(P<0.05或P<0.01),所有SNP位点而与48周产蛋数、64周产蛋数、出生质量、半潜水长、龙骨长、骨盆宽等无显著相关(P>0.05)。四川白鹅GnIH基因序列与绿头鸭亲缘关系最相近;本研究克隆的3735 bp的DNA序列中存在26个SNP位点,其中11个SNP位点可作为四川白鹅初产蛋质量、体斜长、颈长、胸宽和胫围等经济性状的潜在的分子标记之一。 展开更多
关键词 GnIH基因 SNPS 产蛋性状 体组成性状 分子标记辅助选择
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化脓隐秘杆菌候选抗原的免疫保护效果测试 被引量:4
15
作者 徐登峰 余远迪 +4 位作者 张素辉 付利芝 许国洋 赵扬扬 沈克飞 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期347-353,共7页
为鉴定化脓隐秘杆菌的新抗原,对被抗血清识别的化脓隐秘杆菌膜蛋白进行质谱分析,采用免疫印迹分析抗原性,ELISA方法测试被免疫小鼠的抗体水平,通过化脓隐秘杆菌攻毒测试免疫保护率。结果显示,铁ABC(ATP结合盒,ATP binding cassette)转... 为鉴定化脓隐秘杆菌的新抗原,对被抗血清识别的化脓隐秘杆菌膜蛋白进行质谱分析,采用免疫印迹分析抗原性,ELISA方法测试被免疫小鼠的抗体水平,通过化脓隐秘杆菌攻毒测试免疫保护率。结果显示,铁ABC(ATP结合盒,ATP binding cassette)转运体的底物结合蛋白是化脓隐秘杆菌的1个新保护性抗原,具有良好的抗原性和免疫原性。 展开更多
关键词 化脓隐秘杆菌 抗原 抗原性 免疫原性 保护率
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鸡β-防御素-13成熟肽的原核表达与抑菌活性分析 被引量:4
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作者 许国洋 包小玉 +5 位作者 范磊 刘明刚 张冬梅 周尧 熊涛 潘康成 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期479-482,共4页
为表达鸡β-防御素-13(Gal-13)成熟肽并分析其抑菌活性,本研究采用RT-PCR技术从广西黄鸡肝脏中扩增Gal-13全长基因,亚克隆其成熟肽基因并构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。结果显示,Gal-13全长为312 bp,编码60个氨... 为表达鸡β-防御素-13(Gal-13)成熟肽并分析其抑菌活性,本研究采用RT-PCR技术从广西黄鸡肝脏中扩增Gal-13全长基因,亚克隆其成熟肽基因并构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。结果显示,Gal-13全长为312 bp,编码60个氨基酸,经Blast比对后显示其与广西黄鸡Gal-13序列同源性高达100%。SDS-PAGE和western blot分析表明重组蛋白在大肠杆菌中得到大量表达,其分子量约为31 ku。抑菌试验检测结果显示,纯化后的重组蛋白对大肠杆菌BL21(DE3)和金黄色葡萄球菌具有一定的抑制作用。 展开更多
关键词 鸡β-防御素-13 原核表达 抑菌试验
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不同酵母菌制剂对断奶羔羊的临床应用效果研究 被引量:7
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作者 许国洋 付利芝 +4 位作者 徐登峰 李龙 陈朝红 王孝友 张素辉 《安徽农业科学》 CAS 2019年第6期97-99,共3页
[目的]分析临床常用酵母菌制剂对断奶羔羊生长性能及抗腹泻能力的影响,筛选增免促长有效药物。[方法]选取体重相近的断奶羔羊40只,随机分为4组,即3个试验组和1个对照组,通过拌料方式分别在日粮中添加福邦酵母、百利可和增速乐,正常饲喂... [目的]分析临床常用酵母菌制剂对断奶羔羊生长性能及抗腹泻能力的影响,筛选增免促长有效药物。[方法]选取体重相近的断奶羔羊40只,随机分为4组,即3个试验组和1个对照组,通过拌料方式分别在日粮中添加福邦酵母、百利可和增速乐,正常饲喂,连续用药30 d,对各组羔羊的平均日增重、血液生理生化指标进行测定,并对各组羔羊腹泻率进行统计。[结果]福邦酵母组断奶羔羊的平均日增重最高,与对照组差异极显著(P<0.01);福邦酵母组断奶羔羊的白细胞数目与红细胞数目均高于其他组,且与对照组差异均极显著(P<0.01);福邦酵母组谷丙转氨酶(ALT)最高,与其他组差异极显著(P<0.01);福邦酵母组白蛋白(ALB)与百利可组和对照组差异显著(P<0.05);福邦酵母组和百利可组的葡萄糖(GLU)均与增速乐组和对照组差异极显著(P<0.01);对各组断奶羔羊抗腹泻能力的检测发现,福邦酵母组断奶羔羊腹泻率最低。[结论]3种药物中福邦酵母在羔羊增免促长方面有较好的应用效果。 展开更多
关键词 酵母菌制剂 断奶羔羊 生长性能 抗腹泻 日增重
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三峡库区山羊化脓隐秘杆菌的自然感染情况 被引量:3
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作者 杨睿 张素辉 +2 位作者 徐登峰 许国洋 付利芝 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2018年第9期53-54,共2页
化脓隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogenes)属于隐秘杆菌属成员,是一种条件性致病菌。该菌主要寄生在牛、羊及野生反刍动物的上呼吸道、消化道等黏膜处,常与大肠杆菌、连球菌等混合感染,导致家畜发生肺炎、关节炎、皮下脓肿、流产、死胎... 化脓隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogenes)属于隐秘杆菌属成员,是一种条件性致病菌。该菌主要寄生在牛、羊及野生反刍动物的上呼吸道、消化道等黏膜处,常与大肠杆菌、连球菌等混合感染,导致家畜发生肺炎、关节炎、皮下脓肿、流产、死胎等现象,同时也可能引起人感染致病,给人类健康带来了重大的威胁[1-2]。 展开更多
关键词 大肠杆菌 感染情况 三峡库区 化脓 山羊 自然 上呼吸道 反刍动物
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不同样本对禽白血病ELISA检测结果的影响 被引量:3
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作者 许国洋 付利芝 +3 位作者 杨金龙 张素辉 沈克飞 谷山林 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第7期167-169,共3页
为了分析不同样本对应用ELISA法检测禽白血病阳性检出率的影响,试验将20只10日龄SPF鸡随机均分为试验组和对照组,试验组接种禽白血病病毒,对照组接种生理盐水,7 d后采集各组SPF鸡的肝脏组织、血清、泄殖腔拭子和骨髓进行ELISA检测,统计... 为了分析不同样本对应用ELISA法检测禽白血病阳性检出率的影响,试验将20只10日龄SPF鸡随机均分为试验组和对照组,试验组接种禽白血病病毒,对照组接种生理盐水,7 d后采集各组SPF鸡的肝脏组织、血清、泄殖腔拭子和骨髓进行ELISA检测,统计禽白血病的阳性检出率。结果表明:试验组SPF鸡的肝脏组织、血清和骨髓的禽白血病检测结果相对一致,阳性检出率为100%;而泄殖腔拭子的阳性检出率为70%,相对其他样本结果偏低。说明以泄殖腔拭子为样本时,其ELISA检测结果可能具有假阴性现象,综合考虑,以血清为样本进行禽白血病ELISA检测的阳性检出率更为可靠。 展开更多
关键词 禽白血病 ELISA SPF鸡 阳性检出率 假阴性 血清
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重庆株山羊口疮病毒的分离鉴定与F1L基因片段的克隆及序列分析 被引量:3
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作者 许国洋 付利芝 +3 位作者 杨金龙 沈克飞 杨珏 张素辉 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第12期155-158,298,共5页
为了对重庆地区山羊口疮病毒进行分离鉴定,初步分析克隆病毒F1L基因全长序列的结构与功能,试验采用MDBK细胞培养技术,分离纯化羊口疮病毒,并对其进行间接免疫荧光和扫描电镜分析,同时依据NCBI中公布的山羊口疮病毒基因序列设计引物,利用... 为了对重庆地区山羊口疮病毒进行分离鉴定,初步分析克隆病毒F1L基因全长序列的结构与功能,试验采用MDBK细胞培养技术,分离纯化羊口疮病毒,并对其进行间接免疫荧光和扫描电镜分析,同时依据NCBI中公布的山羊口疮病毒基因序列设计引物,利用PCR技术扩增F1L全长基因序列,测序后应用生物学软件进行分析。结果表明:扩增的F1L基因全长为1 023 bp,共编码340个氨基酸,与shanxi株(登录号HQ221964)同源性最高(98.4%),在遗传进化树中也与其聚为一簇,其对应的氨基酸序列中,α螺旋和β折叠结构较少,β转角和无规则卷曲结构较多;亲水性区域较多,抗原指数高,存在多处优势抗原表位。 展开更多
关键词 山羊口疮病毒 分离鉴定 F1L基因 克隆 序列分析 进化树
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