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Notch1信号途径在食管鳞癌细胞中的激活及对细胞周期的影响 被引量：1
1
作者 许培荣 范天黎 +4 位作者 刘冲 鲁照明 刘红涛 巩天晓 薛乐勋 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期908-913,共6页
目的观察Notch1信号途径在食管鳞癌EC9706细胞中的激活状态及其对细胞周期的影响。方法通过免疫细胞化学检测Notch1基因在食管鳞癌细胞株EC9706细胞中的表达,并通过免疫荧光方法研究Notch1基因在EC9706细胞中的激活状态。并且利用CCK-8... 目的观察Notch1信号途径在食管鳞癌EC9706细胞中的激活状态及其对细胞周期的影响。方法通过免疫细胞化学检测Notch1基因在食管鳞癌细胞株EC9706细胞中的表达,并通过免疫荧光方法研究Notch1基因在EC9706细胞中的激活状态。并且利用CCK-8试剂检测食管癌细胞的增殖状态。此外,采用RT-PCR和Western blot技术检测与细胞周期相关基因的表达,最后通过流式细胞仪进一步探索激活的Notch1信号途径对细胞周期的影响。结果转染pcNICD后的食管鳞癌细胞株中发现Notch1基因的表达。免疫荧光结果显示,转染pcNICD后的食管鳞癌细胞株中Notch1信号途径处于激活状态。与未处理和转染pcDNA3.1的EC9706细胞相比,稳定表达NICD的EC9706细胞的生长速率明显受到抑制(P<0.01)。此外,与未处理的和转染pcD-NA3.1的EC9706细胞相比,稳定表达NICD的EC9706细胞的CDK2,cyclin D1和E基因的mRNA和蛋白的表达明显下调(P<0.05)。转染pcNICD的EC9706细胞在G0/G1期的比率高达74.5%,而未处理的和转染pcDNA3.1的EC9706细胞在G0/G1期的比率分别为59.1%和59.0%。细胞周期分析显示瞬时表达NICD的EC9706细胞在G0/G1期比率的增加,提示激活的Notch1信号途径能够诱导细胞静止在G0/G1期。结论Notch1信号途径的激活引起食管鳞癌细胞的细胞周期静止,提示Notch1基因有可能成为治疗食管鳞癌的新靶点。 展开更多
关键词 Notch1信号途径 细胞周期 pcNICD载体 EC9706细胞
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垂体腺苷酸环化酶激活肽对大鼠脑缺血-再灌注后IL-1β表达的影响
2
作者 许培荣 路文革 白宏英 《中国实用神经疾病杂志》 2009年第7期21-23,共3页
目的探讨PACAP对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤后脑保护作用及保护机制。方法采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血-再灌注模型,对36只大鼠随机分为假手术组、缺血-再灌注组和PACAP组,在大鼠脑缺血2h后进行12h、24h再灌注,比较光镜下细... 目的探讨PACAP对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤后脑保护作用及保护机制。方法采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血-再灌注模型,对36只大鼠随机分为假手术组、缺血-再灌注组和PACAP组,在大鼠脑缺血2h后进行12h、24h再灌注,比较光镜下细胞损伤变性程度,应用免疫组化法检测IL-1β的表达。结果PACAP组大鼠脑标本光镜下细胞损伤变性程度与缺血-再灌注组相比明显减轻;IL-1β灰度值PACAP组分别为120±5、114±4,与缺血-再灌注组178±4、162±6比较,有显著性差异(P<0.01)。结论PACAP能抑制大鼠局灶性脑缺血-再灌注时IL-1β的表达,可能是其脑保护作用之一。 展开更多
关键词 PACAP 缺血-再灌注 IL-1β大鼠 垂体
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姜黄素阻断NF-κB信号通路促进食管鳞癌细胞凋亡的体外研究 被引量：18
3
作者 田芳 宋敏 +2 位作者 许培荣 刘红涛 薛乐勋 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第6期566-570,共5页
背景与目的:活化的核转录因子-kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路参与调控多种与炎症、抗凋亡、肿瘤形成和转化有关的基因表达。但在食管鳞癌中的作用尚不清楚。姜黄素具有抗感染、抗氧化等多种药理作用。本研究将探讨姜... 背景与目的:活化的核转录因子-kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路参与调控多种与炎症、抗凋亡、肿瘤形成和转化有关的基因表达。但在食管鳞癌中的作用尚不清楚。姜黄素具有抗感染、抗氧化等多种药理作用。本研究将探讨姜黄素是否能够通过阻断NF-κB信号通路对食管鳞癌细胞增殖、抗凋亡产生影响。方法:Western blot法检测EC9706和Eca109细胞中加入姜黄素(50μmol/L)培养不同时间后,pIκBα和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达情况。在EC9706和Eca109细胞中加入姜黄素培养72h,流式细胞仪检测凋亡细胞情况。MTT法检测姜黄素单独或与5-FU联合对细胞增殖的影响。结果:Western blot的结果显示,在姜黄素作用下EC9706和Eca109细胞中pIκBα和Bcl-2蛋白的表达水平随着时间的延长逐渐下降。在单独使用姜黄素后,就可促进EC9706和Eca109细胞的凋亡(P<0.05);当与5-FU联合使用时,可明显提高EC9706和Eca109细胞对化疗药物的敏感性,凋亡细胞显著增加(P<0.05)。姜黄素与5-FU联合应用48h和72h,可明显抑制EC9706和Eca109细胞的增殖,与单独使用姜黄素或5-FU组相比,细胞存活率显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:姜黄素可以通过抑制IκBα的磷酸化阻断NF-κB信号通路,促进细胞凋亡,抑制细胞增殖,增加细胞对5-FU的敏感性。 展开更多
关键词 食管肿瘤 EC9706细胞 ECA109细胞 姜黄素 NF-ΚB 信号通路 IΚBΑ Bcl-2 凋亡
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人食管鳞癌及正常食管组织中Notch1基因的mRNA及蛋白的表达 被引量：14
4
作者 鲁照明 刘红涛 +3 位作者 高媛 许培荣 鄢文海 薛乐勋 《华中师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2007年第2期263-267,共5页
采用RT-PCR方法,分别从人食管鳞癌及正常食管组织中扩增Notch1基因,结果表明Notch1基因在人食管鳞癌及正常食管组织中均有表达.此外,通过免疫组织化学方法检测不同病理特征的35例食管鳞癌、16例原位癌及35例癌周正常食管粘膜上皮组织Not... 采用RT-PCR方法,分别从人食管鳞癌及正常食管组织中扩增Notch1基因,结果表明Notch1基因在人食管鳞癌及正常食管组织中均有表达.此外,通过免疫组织化学方法检测不同病理特征的35例食管鳞癌、16例原位癌及35例癌周正常食管粘膜上皮组织Notch1蛋白表达的变化,结果显示:Notch1蛋白在正常食管粘膜上皮组织和原位癌中的阳性率分别为82.9%、68.7%,二者无显著性差异(P>0.05),但均显著高于食管鳞癌组织37.1%(P<0.05);食管鳞癌Notch1蛋白的低表达与肿瘤的直径、分期和发生部位无关(P>0.05),但与淋巴结转移有关(P<0.05).这表明在正常食管粘膜上皮组织中Notch1蛋白高表达,而在食管癌鳞中Notch1蛋白呈现低表达或不表达.该研究为进一步探明Notch1基因的表达对食管癌细胞的发生、发展的影响奠定了良好的基础. 展开更多
关键词 食管鳞癌 RT-PCR 免疫组织化学 NOTCH1表达
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Notch1信号途径在食管鳞癌细胞株EC9706的作用研究 被引量：11
5
作者 鲁照明 刘红涛 +2 位作者 许培荣 侯桂琴 薛乐勋 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第13期740-743,共4页
目的:研究Notch1基因在食管癌细胞株中的表达及其对食管鳞癌细胞EC9706凋亡的影响。方法:通过免疫细胞化学检测Notch1基因在EC9706细胞中的表达。通过RT-PCR扩增Notch1基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-Notch1,转染EC9706细胞,利用Western... 目的:研究Notch1基因在食管癌细胞株中的表达及其对食管鳞癌细胞EC9706凋亡的影响。方法:通过免疫细胞化学检测Notch1基因在EC9706细胞中的表达。通过RT-PCR扩增Notch1基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-Notch1,转染EC9706细胞,利用Western blotting检测转染pcDNA3.1-Notch1载体12h,24h,48h,72h的食管癌细胞株与转染空载体食管癌细胞株中Notch1的表达,并观察每一时期食管癌细胞株的凋亡情况。结果:在食管癌细胞株中Notch1基因低表达,此外,转染Notch1后的细胞株Notch1表达量与转染空载体相比有明显差异(F=80.442,P<0.05)。经组间两两比较,实验组食管癌细胞株的Notch1的表达量在12h时比对照组食管癌细胞株的表达量显著增高(P<0.01),前者约为后者的4.6倍。但48h至72h时Notch1表达量实验组与对照组食管癌细胞株无显著性差异(P>0.05)。进一步通过倒置显微镜发现48h至72h细胞出现大量凋亡的现象。上述结果说明12hNotch1表达量的增加,使食管癌细胞EC9706中的Notch1信号途径得以激活,该途径激活后导致48h到72h时的细胞大量凋亡。结论:Notch1在食管癌细胞中的激活引起细胞大量凋亡,提示Notch1基因有可能成为治疗食管癌的新靶点。 展开更多
关键词 NOTCH1 EC9706 免疫细胞化学 WESTERN BLOTTING
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NF-κB信号通路在食管鳞癌细胞系中的激活 被引量：15
6
作者 田芳 许培荣 +3 位作者 侯卫红 刘红涛 陈奎生 薛乐勋 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期11-14,共4页
目的核转录因子NF-kappaB(NF-κB)是一种重要的转录因子,参与调控多种与炎症、抗凋亡、肿瘤形成和转化有关的基因表达。本研究拟通过检测NF-κB信号通路在食管鳞癌细胞系中是否存在,分析NF-κB在食管鳞癌细胞中的激活状态及其对食管鳞... 目的核转录因子NF-kappaB(NF-κB)是一种重要的转录因子,参与调控多种与炎症、抗凋亡、肿瘤形成和转化有关的基因表达。本研究拟通过检测NF-κB信号通路在食管鳞癌细胞系中是否存在,分析NF-κB在食管鳞癌细胞中的激活状态及其对食管鳞癌细胞的生存及转化作用。方法采用免疫细胞化学法和Western blotting法检测两株食管鳞癌细胞系中NF-κB亚单位p50和p65,阻遏物IκBα及其上游激酶IKKβ的蛋白表达。并采用EMSA法检测两株食管鳞癌细胞核中NF-κB与DNA的结合活性。结果食管鳞癌细胞中存在激活的NF-κB信号通路,p50、p65、IκBα及其上游激酶IKKβ的蛋白在细胞质中均表达,并且p50/p65在细胞核中具有较高的DNA结合活性。结论本研究发现NF-κB信号通路在两种食管鳞癌细胞系被激活,提示激活的NF-κB信号通路可能在食管鳞癌发生中起重要作用。 展开更多
关键词 食管癌 NF-KB 信号传导通路
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EC9706和Eca109细胞中雷帕霉素靶蛋白信号通路激活状态观察 被引量：11
7
作者 侯桂琴 范天黎 +4 位作者 鲁照明 刘兰琦 许培荣 薛乐勋 王建人 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第2期223-225,共3页
目的:观察低分化的食管鳞癌细胞EC9706和高分化的食管鳞癌细胞Eca109中雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号转导通路的激活状态。方法:采用细胞免疫组织化学方法检测EC9706和Eca109细胞中mTOR及其下游靶分子p70S6K的表达和定位,并采用RT-PCR和West... 目的:观察低分化的食管鳞癌细胞EC9706和高分化的食管鳞癌细胞Eca109中雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号转导通路的激活状态。方法:采用细胞免疫组织化学方法检测EC9706和Eca109细胞中mTOR及其下游靶分子p70S6K的表达和定位,并采用RT-PCR和Westernblot方法分别从mRNA及蛋白水平检测此通路的活性。结果:在2种细胞中mTOR均有表达,且在EC9706细胞中的表达水平高于Eca109(P<0.05);EC9706细胞中mTOR下游靶点的磷酸化水平高于Eca109细胞(P<0.05)。结论:在2种食管鳞癌细胞中,mTOR信号通路均特异性激活;但激活状态与细胞的分化程度有关,细胞分化程度低者通路的激活水平较高。 展开更多
关键词 食管癌 雷帕霉素靶蛋白 p70S6激酶 EC9706细胞 ECA109细胞
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雷帕霉素对食管鳞癌细胞系EC9706的mTOR/p70S6K信号通路的影响 被引量：7
8
作者 侯桂琴 刘明月 +5 位作者 薛乐勋 鲁照明 范天黎 高媛 许培荣 刘兰琦 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期172-175,共4页
目的:观察雷帕霉素(rapamycin,rapa)对食管鳞癌细胞系EC9706的m TOR/p70S6K信号通路的影响。方法:采用免疫细胞化学证实mTOR/p70S6K信号通路的存在,然后通过DNA Ladder、RT-PCR、Western blot及流式细胞术分别从DNA、RNA、蛋白及细胞水... 目的:观察雷帕霉素(rapamycin,rapa)对食管鳞癌细胞系EC9706的m TOR/p70S6K信号通路的影响。方法:采用免疫细胞化学证实mTOR/p70S6K信号通路的存在,然后通过DNA Ladder、RT-PCR、Western blot及流式细胞术分别从DNA、RNA、蛋白及细胞水平研究rapa对细胞凋亡和信号通路的影响。结果:免疫细胞化学结果显示,在细胞核及细胞质中mTOR均呈阳性;rapa处理后有明显DNA Ladder产生,且mTOR的mRNA水平及蛋白水平下调。但是,mTOR下游的直接靶点p70S6K的mRNA水平及蛋白水平则升高,二者的变化程度均与rapa剂量的相关;流式细胞术检测结果表明,rapa可使细胞停滞于G_1期。结论:食管鳞癌细胞系EC9706中存在mTOR/p70S6K信号通路并且处于激活状态,rapa能明显促进细胞凋亡并抑制该通路激活,从而间接抑制翻译的进行。 展开更多
关键词 食管肿瘤 肿瘤 鳞状细胞 雷帕霉素 细胞凋亡
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改良的降落PCR与普通PCR结果比较 被引量：11
9
作者 张贵星 袁保梅 +1 位作者 许培荣 薛乐勋 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2003年第3期352-354,共3页
目的 :设计并验证一改良的降落ＰＣＲ(ＭＴＤ ＰＣＲ)程序。方法 :自盐藻ｂａｒｄａｗｉｌ中提取基因组ＤＮＡ作为ＰＣＲ模板 ,使用ＴａｑＤＮＡ聚合酶及ｐｆｕＤＮＡ聚合酶 ,运用普通ＰＣＲ和ＭＴＤ ＰＣＲ程序 ,扩增胡萝卜素生物合成... 目的 :设计并验证一改良的降落ＰＣＲ(ＭＴＤ ＰＣＲ)程序。方法 :自盐藻ｂａｒｄａｗｉｌ中提取基因组ＤＮＡ作为ＰＣＲ模板 ,使用ＴａｑＤＮＡ聚合酶及ｐｆｕＤＮＡ聚合酶 ,运用普通ＰＣＲ和ＭＴＤ ＰＣＲ程序 ,扩增胡萝卜素生物合成相关基因 (ｃｂｒ)上游启动子序列 ,并电泳比较ＰＣＲ扩增产物的特异性。结果 :使用普通Ｔａｑ酶进行ＰＣＲ ,普通ＰＣＲ程序产生2 0 0ｂｐ , 50 0ｂｐ和 1 2 72ｂｐ的 3条带 ,而ＭＴＤ ＰＣＲ程序仅克隆出 1 2 72ｂｐ的特异带 ;利用高保真的ｐｆｕＤＮＡ聚合酶作ＰＣＲ ,在ＭＴＤ ＰＣＲ泳道中也仅有 1 2 72ｂｐ 1条带 ,而普通ＰＣＲ除了产生 1 2 72ｂｐ的特异带外 ,还出现 1条 50 0ｂｐ的非特异带。结论 :无论使用普通Ｔａｑ酶或高保真酶ｐｆｕ,改良的ＭＴ ＰＣＲ程序均明显提高ＰＣＲ的特异性 ,提示它可用于克隆普通ＰＣＲ难以克隆的基因片段 。 展开更多
关键词 改良降落PCR PCR PCR特异性 PFU DNA聚合酶
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杜氏盐藻叶绿体转化载体pDS16S-CAT的构建 被引量：8
10
作者 潘卫东 袁保梅 +4 位作者 谢华 牛向丽 许培荣 薛乐勋 王建民 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2004年第1期25-28,共4页
目的 :利用同源重组方法 ,将外源基因氯霉素乙酰转移酶 (CAT)转入杜氏盐藻叶绿体中。方法 :以杜氏盐藻叶绿体 1 6SrRNA序列为同源片段 ,构建盐藻叶绿体表达载体 ,并利用基因枪法转化盐藻 ,使CAT基因得到表达。结果 :转化后的盐藻可以在... 目的 :利用同源重组方法 ,将外源基因氯霉素乙酰转移酶 (CAT)转入杜氏盐藻叶绿体中。方法 :以杜氏盐藻叶绿体 1 6SrRNA序列为同源片段 ,构建盐藻叶绿体表达载体 ,并利用基因枪法转化盐藻 ,使CAT基因得到表达。结果 :转化后的盐藻可以在含有氯霉素的培养基中生存 3～ 4周 ,表明CAT基因已转入盐藻叶绿体中并表达。结论 :盐藻叶绿体转化是可行的 ,为获得稳定转化的盐藻 。 展开更多
关键词 盐藻 叶绿体 16S RRNA 转化载体
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盐藻提取物抗氧化作用的实验研究 被引量：8
11
作者 薛乐勋 沈天怀 +2 位作者 马晓英 王建民 许培荣 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 1995年第2期117-118,共2页
盐藻提取物抗氧化作用的实验研究薛乐勋，沈天怀，马晓英，王建民，许培荣（河南医科大学医学实验中心郑州４５００５２）盐藻提取物（ＥｘｔｒａｃｔｓｏｆＤｕｎａｌｉｅｌｌａＳａｌｉｎａ，ＥＤＳ）是从海洋盐藻中提取的一种混合物... 盐藻提取物抗氧化作用的实验研究薛乐勋，沈天怀，马晓英，王建民，许培荣（河南医科大学医学实验中心郑州４５００５２）盐藻提取物（ＥｘｔｒａｃｔｓｏｆＤｕｎａｌｉｅｌｌａＳａｌｉｎａ，ＥＤＳ）是从海洋盐藻中提取的一种混合物，除含有大量类胡萝素外，还含有维生... 展开更多
关键词 盐藻提取物 抗氧化作用 实验 超氧化物歧化酶
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siRNA阻断NF-κB信号通路对食管鳞癌细胞增殖、耐药的影响 被引量：8
12
作者 田芳 田卫红 +2 位作者 许培荣 刘红涛 薛乐勋 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第1期41-44,共4页
目的:通过RNA干扰(RNAi)阻断食管鳞癌细胞中NF-κB信号通路,研究其与肿瘤细胞增殖、耐药的关系。方法:使用NF-κB p65 siRNA分别转染人食管鳞癌Eca109和EC9706细胞72h,以未转染的Eca109和EC9706细胞为对照,采用Western blot检测p65蛋白... 目的:通过RNA干扰(RNAi)阻断食管鳞癌细胞中NF-κB信号通路,研究其与肿瘤细胞增殖、耐药的关系。方法:使用NF-κB p65 siRNA分别转染人食管鳞癌Eca109和EC9706细胞72h,以未转染的Eca109和EC9706细胞为对照,采用Western blot检测p65蛋白的表达;MTT法检测转染NF-κBp65siRNA24h、48h、72h后Eca109和EC9706细胞的增殖情况及转染同时联合应用不同质量浓度5-Fu(0mg/L,16.35mg/L,32.7mg/L,327mg/L,3270mg/L,6540mg/L)对Eca109和EC9706细胞增殖的影响。结果:①NF-κB亚单位p65在Eca109和EC9706细胞质中高表达,p65siRNA可有效阻断p65蛋白表达。②MTT实验表明,转染组细胞存活率较未转染组明显下降(P<0.05);与化疗药5-Fu联用,转染组和未转染组细胞的增殖活性随着5-Fu浓度的增加有下降趋势,但在同一浓度,转染p65siRNA的细胞与未转染组相比,细胞增殖活性明显下降(P<0.05)。结论:应用RNAi技术可有效干扰p65的表达,抑制食管鳞癌细胞的增殖,增强对化疗药5-Fu的敏感性。因此,可将阻断NF-κB信号通路作为基因治疗的靶点。 展开更多
关键词 食管肿瘤 NF-KAPPAB RNA干扰 SIRNA
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杜氏盐藻硝酸盐还原酶cDNA片段的克隆与分析 被引量：8
13
作者 谢华 姜国忠 +4 位作者 吕玉民 牛向丽 许培荣 王建民 薛乐勋 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2004年第1期6-8,共3页
目的 :获得杜氏盐藻硝酸盐还原酶cDNA片段。方法 :根据Dunaliellatertiolecta、衣藻、团藻等生物硝酸盐还原酶 (nitratereductase ,NR)高度保守序列EGWWFKP、WNVMGMM设计一对简并引物 ,以含硝酸盐培养基培养的的盐藻cDNA为模板 ,进行PC... 目的 :获得杜氏盐藻硝酸盐还原酶cDNA片段。方法 :根据Dunaliellatertiolecta、衣藻、团藻等生物硝酸盐还原酶 (nitratereductase ,NR)高度保守序列EGWWFKP、WNVMGMM设计一对简并引物 ,以含硝酸盐培养基培养的的盐藻cDNA为模板 ,进行PCR扩增 ,产物克隆至T载体后转化大肠杆菌JM1 0 9,经筛选后测序 ,将测序结果推导成氨基酸序列 ,并与Dunaliellatertiolecta、团藻、衣藻、小球藻等进行同源性分析。结果 :在盐藻中所获得的cDNA片段 ,核苷酸长度为 381bp ,编码 1 2 7个氨基酸。推导的氨基酸序列与下列物种的硝酸盐还原酶进行同源性比较 :Dunaliellatertiolecta为 88.2 %同源 ,团藻为 78% ,衣藻为 6 7% ,小球藻为 5 9%。结论 :所克隆的序列为盐藻硝酸盐还原酶cDNA片段。 展开更多
关键词 杜氏盐藻 硝酸盐还原酶 CDNA 简并引物
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盐藻提取物对肿瘤病人的治疗价值 被引量：5
14
作者 王建人 孙国强 +9 位作者 薛乐勋 沈天怀 王建民 许培荣 荆宇红 马丽萍 魏丽远 常青 黄莹 刘建文 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 1995年第5期265-267,共3页
通过观察４４例肿瘤病人口服盐藻提取物（ＥＤＳ）来证明ＥＤＳ对肿瘤的治疗价值。病人每天３０ｍｇ一个月后，随着血中β－胡萝卜素（ＢＣ），维生素Ａ（ＶＡ）水平升高，肿瘤病人血肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）活性，淋巴毒素（ＬＴ）活性... 通过观察４４例肿瘤病人口服盐藻提取物（ＥＤＳ）来证明ＥＤＳ对肿瘤的治疗价值。病人每天３０ｍｇ一个月后，随着血中β－胡萝卜素（ＢＣ），维生素Ａ（ＶＡ）水平升高，肿瘤病人血肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）活性，淋巴毒素（ＬＴ）活性，淋巴细胞转化率（ＬＣＴ）显著提高；超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性；谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）活性显著升高，血脂质过氧化物（ＬＰＯ）水平显著降低。经过统计学处理，结果提示ＥＤＳ可以显著增强肿瘤病人的细胞免疫功能和抗氧化功能。 展开更多
关键词 免疫 盐藻 提取物 肿瘤 细胞免疫
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Notch1基因在食管鳞癌细胞株EC9706中的表达及其对细胞凋亡的影响 被引量：5
15
作者 鲁照明 刘红涛 +2 位作者 许培荣 侯桂琴 薛乐勋 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1074-1079,共6页
背景与目的:早期的研究显示,Notch1信号途径与肿瘤的发生密切相关,在细胞的生长、增殖、分化和凋亡中起着十分重要的作用。本研究旨在研究Notch1基因在食管鳞癌EC9706细胞中的表达及其对EC9706细胞凋亡的影响。方法:通过免疫细胞化学方... 背景与目的:早期的研究显示,Notch1信号途径与肿瘤的发生密切相关,在细胞的生长、增殖、分化和凋亡中起着十分重要的作用。本研究旨在研究Notch1基因在食管鳞癌EC9706细胞中的表达及其对EC9706细胞凋亡的影响。方法:通过免疫细胞化学方法检测Notch1基因在EC9706细胞中的表达。采用RT-PCR技术扩增Notch1基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-Notch1(命名为pcNICD),转染EC9706细胞,利用RT-PCR及Western blot检测稳定转染pcNICD载体、转染pcDNA3.1空载体及未处理的EC9706细胞中Notch1的表达,另通过流式细胞仪检测未处理、转染pcDNA3.1和转染pcNICD的EC9706细胞的凋亡。结果:EC9706细胞中发现Notch1基因的表达。与未处理的和转染pcDNA3.1的EC9706细胞相比,转染pcNICD的EC9706细胞中Notch1基因的mRNA和蛋白表达水平均明显增加,大约增加3倍(P<0.05);但未处理的和转染pcDNA3.1的EC9706细胞中Notch1的表达差异无统计学意义(P>0.05)。流式细胞检测结果显示,在未处理的和转染pcDNA3.1的EC9706细胞中,细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05);但与与未处理的和转染pcDNA3.1的EC9706细胞相比,转染pcNICD的EC9706细胞转染后24h、48h和72h时细胞凋亡率明显增加(P<0.01)。结论:Notch信号途径的激活引起食管鳞癌EC9706细胞的凋亡,提示Notch1基因有可能成为治疗食管鳞癌的新靶点。 展开更多
关键词 NOTCH1基因 食管肿瘤 细胞株EC9706 细胞凋亡
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FLT3靶向RNA干扰对HL-60细胞增殖凋亡及cyclinD1、cyclinA表达的影响 被引量：4
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作者 卢洁 盛光耀 +5 位作者 岳保红 邹湘 徐学聚 赵晓明 白松婷 许培荣 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期645-650,共6页
目的探讨FLT3靶向RNA干扰对HL-60细胞增殖、凋亡及cyclinD1、cyclinA表达的影响。方法体外构建FLT3靶向短发夹状干扰RNA(FLT3-shRNA),转染HL-60细胞,RT-PCR、流式细胞术(FCM)鉴定FLT3的表达;CCK-8法检测细胞增殖活力;FCM检测细胞周期;An... 目的探讨FLT3靶向RNA干扰对HL-60细胞增殖、凋亡及cyclinD1、cyclinA表达的影响。方法体外构建FLT3靶向短发夹状干扰RNA(FLT3-shRNA),转染HL-60细胞,RT-PCR、流式细胞术(FCM)鉴定FLT3的表达;CCK-8法检测细胞增殖活力;FCM检测细胞周期;AnnexinV染色法检测凋亡;RT-PCR及Western blot检测cyclinD1,cyclinA在mRNA、蛋白水平的表达。结果FLT3-shRNA转染可下调FLT3的表达,它对FLT3 mRNA和蛋白的抑制率分别达(81.66±10.25)%,(76.76±11.23)%。FLT3表达下降后细胞增殖活力受到抑制,转染48h抑制率达(31.66±2.97)%,72h达(33.10±3.43)%;细胞生长曲线低平,缺乏指数增殖特征。与对照组比,转染48h细胞周期重新分布,G0/G1期(58.48±6.17)%的明显上升,S期(27.72±5.10)%下降;细胞早期凋亡率(8.95±0.88)%上升;细胞内cyclinD1的mRNA、蛋白表达下降,cyclinA的表达无明显改变。结论FLT3靶向RNA干扰通过下调cyclinD1表达有效地抑制细胞增殖,具有潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 白血病 FLT3 RNA干扰 增殖 凋亡 HL-60细胞株
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食管鳞癌细胞中NF-κB与IκBα的mRNA、蛋白表达 被引量：7
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作者 田芳 侯卫红 +4 位作者 许培荣 王建民 陈华艳 薛乐勋 陈奎生 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期198-201,共4页
目的:核转录因子NF-kappaB(NF-κB)是一种重要的转录因子,参与调控多种与炎症、抗凋亡、肿瘤形成和转化有关的基因表达。本研究通过检测食管鳞癌细胞中NF-κB与IκBαmRNA、蛋白的表达及NF-κB的DNA结合活性,分析NF-κB在食管鳞癌细胞... 目的:核转录因子NF-kappaB(NF-κB)是一种重要的转录因子,参与调控多种与炎症、抗凋亡、肿瘤形成和转化有关的基因表达。本研究通过检测食管鳞癌细胞中NF-κB与IκBαmRNA、蛋白的表达及NF-κB的DNA结合活性,分析NF-κB在食管鳞癌细胞中的激活状态及其在食管鳞癌细胞的生存及转化中的作用。方法:采用West-ernblotting法检测两株食管鳞癌细胞胞质中NF-κB亚单位p50和p65、阻遏物IκBα及其磷酸化IκBα的蛋白表达,检测细胞核中p50和p65的蛋白表达并采用EMSA法检测其与DNA的结合活性。使用RT-PCR法检测p50、p65、IκBαmRNA的表达。结果:NF-κB的亚单位p50、p65、IκBα及磷酸化IκBα在食管鳞癌细胞质中均表达,p50、p65蛋白在细胞核中也表达并具有较高的DNA结合活性。RT-PCR结果表明,p50、p65、IκBα的mRNA在细胞中也存在过表达。结论:本研究发现NF-κB在两株食管鳞癌细胞系中被激活,基因的过表达及IκBα的磷酸化在维持NF-κB的活化中起着重要的作用。 展开更多
关键词 食管鳞癌 NF—κB IΚBΑ
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盐藻胞浆hsp70 cDNA的克隆及其mRNA的诱导表达 被引量：4
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作者 姜国忠 许培荣 +3 位作者 牛向丽 王建民 袁保梅 薛乐勋 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期43-49,共7页
用cDNA末端快速扩增方法克隆得到了一个2652bp的盐藻(Dunaliellasalina)胞浆hsp70cDNA全长,编码着650个氨基酸残基的多肽。推导的氨基酸序列有2个ATP酶结合位点和一个多肽结合区。由克隆得到的盐藻cDNA推导的氨基酸序列,经GenBankblast... 用cDNA末端快速扩增方法克隆得到了一个2652bp的盐藻(Dunaliellasalina)胞浆hsp70cDNA全长,编码着650个氨基酸残基的多肽。推导的氨基酸序列有2个ATP酶结合位点和一个多肽结合区。由克隆得到的盐藻cDNA推导的氨基酸序列,经GenBankblast后与数据库中胞浆hsp70序列一致。与莱茵衣藻(Chlamydomonasreinhardtii)、人、小麦(Triticumaestivum)和啤酒酵母(Saccharomyces.cerevisiae)胞浆hsp70的序列一致性分别为83%、80%、81.5%和80.5%。Northern印迹显示,90min后,mRNA量在40℃热休克时是光诱导时的3倍。光诱导则使hsp70mRNA积累相对迟缓。结果表明,所克隆得到的hsp70基因蛋白产物定位在盐藻细胞浆中,光诱导和热休克均可以使hsp70mRNA水平明显增高,但以热休克为显著。 展开更多
关键词 盐藻(Dunalilla salina) HSP70 RACE 热休克 光诱导
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妊娠期压力性尿失禁妇女盆底肌肉细胞外基质特征分析 被引量：5
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作者 冯洁 吴氢凯 +1 位作者 吴登龙 许培荣 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期981-985,共5页
目的研究妊娠期压力性尿失禁(SUI)妇女盆底肌肉细胞外基质的特征。方法选取行定期产前检查并阴道分娩的初产妇女71例,其中SUI组33例,非SUI组38例,于胎儿娩出后取会阴侧切处深部组织行HE染色、电子显微镜超微结构观察,Masson三色染色和EV... 目的研究妊娠期压力性尿失禁(SUI)妇女盆底肌肉细胞外基质的特征。方法选取行定期产前检查并阴道分娩的初产妇女71例,其中SUI组33例,非SUI组38例,于胎儿娩出后取会阴侧切处深部组织行HE染色、电子显微镜超微结构观察,Masson三色染色和EVG弹性纤维染色定量分析盆底肌肉组织胶原纤维和弹性纤维含量;另选择同期3名非妊娠女性作为非妊娠组。结果妊娠晚期妇女会阴深部组织平滑肌细胞不同程度空泡变性、肌纤维直径变细,细胞间质水肿。非SUI组盆底肌肉组织中横纹肌周围有丰富胶原包绕,结构紧密并见成束弹性纤维;SUI组盆底组织以平滑肌为主,细胞外胶原结构稀疏,弹性纤维稀少,平滑肌肌束内多量胶原分布。SUI组盆底肌肉组织胶原纤维相对含量和弹性纤维相对含量均显著小于非SUI组(P<0.05)。结论妊娠期SUI妇女盆底肌肉组织细胞外基质结构疏松,胶原纤维和弹性纤维含量下降,可能与SUI的发生有关。 展开更多
关键词 妊娠期压力性尿失禁 盆底肌肉 细胞外基质 胶原 弹性纤维
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仙人掌提取物对小鼠抗疲劳、耐缺氧能力的影响 被引量：17
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作者 徐霞 许世华 +5 位作者 邓延慧 薛华珍 许培荣 袁保梅 王桂红 薛乐勋 《河南医科大学学报》 北大核心 2001年第6期730-731,共2页
目的 :探讨仙人掌提取物对小鼠抗疲劳、耐缺氧能力的影响。方法 :①小鼠的抗疲劳实验 :鼠 40只 ,随机分为 2组 ,对照组每d灌胃生理盐水 ,实验组每d灌胃仙人掌提取物 40 0mg/kg ;于第 14d作游泳试验 ,测定游泳时间。②小鼠耐缺氧实验 :小... 目的 :探讨仙人掌提取物对小鼠抗疲劳、耐缺氧能力的影响。方法 :①小鼠的抗疲劳实验 :鼠 40只 ,随机分为 2组 ,对照组每d灌胃生理盐水 ,实验组每d灌胃仙人掌提取物 40 0mg/kg ;于第 14d作游泳试验 ,测定游泳时间。②小鼠耐缺氧实验 :小鼠 40只 ,随机分为 2组 ,灌胃方法同上 ,将小鼠放置于 2 5 0ml盛有 15g钠石灰磨口瓶中 ,测定小鼠的存活时间。结果 :实验组小鼠游泳时间和存活时间明显高于对照组 (P <0 0 5 )。结论 :仙人掌提取物可提高小鼠抗疲劳。 展开更多
关键词 仙人掌 提取物 抗疲劳 耐缺氧 小鼠
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