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内蒙古包头地区汉族人血管紧张素转换酶基因与糖尿病肾病的相关性研究 被引量:6
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作者 谢基明 王玉珍 +2 位作者 岳秀兰 秦文斌 雎天林 《内蒙古医学院学报》 2006年第1期14-18,共5页
目的:探讨血管紧张素转换酶(ACE)基因与糖尿病肾病(DN)发病的关系。方法:用PCR方法检测100例N IDDM病人及63例正常对照的ACE基因型。结果:ACE基因型及等位基因构成比在正常对照组和N IDDM组间无统计学差异;DD基因型及D等位基因频率在DN... 目的:探讨血管紧张素转换酶(ACE)基因与糖尿病肾病(DN)发病的关系。方法:用PCR方法检测100例N IDDM病人及63例正常对照的ACE基因型。结果:ACE基因型及等位基因构成比在正常对照组和N IDDM组间无统计学差异;DD基因型及D等位基因频率在DN组(0.06)与非DN组(0.02)之间无显著性差异。结论:ACE基因多态性与DN发病无关。 展开更多
关键词 血管紧张素转换酶基因 糖尿病肾病
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OLYMPUS AU 2700全自动生化分析仪性能评价 被引量:7
2
作者 谢基明 宿俊彪 +1 位作者 侯巍 冯笑梅 《内蒙古医学杂志》 2006年第8期719-722,共4页
目的:对OLYMPUS AU2700全自动生化分析仪进行性能的评价。方法:选用TP、ALT、GLU、BUN、TG和CHO等项目从测试速度的监测、试剂消耗估算、重复性、准确度、线性范围和对比实验等方面进行评价。结果:AU2700的精密度好,批内和批间CV均小于... 目的:对OLYMPUS AU2700全自动生化分析仪进行性能的评价。方法:选用TP、ALT、GLU、BUN、TG和CHO等项目从测试速度的监测、试剂消耗估算、重复性、准确度、线性范围和对比实验等方面进行评价。结果:AU2700的精密度好,批内和批间CV均小于我国推荐的RCV,准确度高,最大相对偏差为5.6%;线性实验表明标本的稀释度与测定的浓度值呈直线相关;与BECKMANCX7分析仪的相关系数在0.950以上。结论:该生化分析仪具有分析速度快、试剂消耗率低、重复性好、准确度高、线性范围宽等特点,能适应临床生化实验室和科研需要。 展开更多
关键词 全自动生化分析仪 性能评价
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Rab5a促进CpG诱导的巨噬细胞中炎性细胞因子和Ⅰ型干扰素的表达 被引量:3
3
作者 陈俊娜 孙晓琳 +7 位作者 董仕超 邹凯 刘欢 王岩 王雪 刘芳 谢基明 王玉珍 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期165-168,173,共5页
目的:采用稳定表达Rab5a及其显性负性突变体Rab5a N133I的巨噬细胞系RAW264.7,研究Rab5a及其突变体过表达后对Cp G诱导的炎性细胞因子和Ⅰ型干扰素的表达的影响。方法:通过脂质体法将Rab5a及其突变体Rab5a N133I的真核表达载体转染到RAW... 目的:采用稳定表达Rab5a及其显性负性突变体Rab5a N133I的巨噬细胞系RAW264.7,研究Rab5a及其突变体过表达后对Cp G诱导的炎性细胞因子和Ⅰ型干扰素的表达的影响。方法:通过脂质体法将Rab5a及其突变体Rab5a N133I的真核表达载体转染到RAW264.7细胞中,用G418选择性培养基进行筛选,建立稳定表达Rab5a、Rab5a N133I的细胞系。通过RT-PCR、Real time-PCR和Western blot方法鉴定稳定表达的细胞系。用Cp G刺激稳定表达Rab5a、Rab5a N133I的细胞系8 h后检测细胞因子TNF-α、IL-1β和IFN-β的表达量变化。结果:RAW264.7转染Rab5a真核表达载体后Rab5a的表达量显著高于对照质粒转染细胞(P<0.05)。Rab5a过表达后,在Cp G刺激作用下RAW264.7分泌的TNF-α、IL-1β显著升高(P<0.01),IFN-β的分泌也显著升高(P<0.05),而Rab5a N133I过表达后上述细胞因子的分泌均有所恢复。结论:Rab5a促进了Cp G诱导的巨噬细胞中炎性细胞因子和Ⅰ型干扰素的表达,Rab5a可能是TLR9信号通路的正向调控蛋白。 展开更多
关键词 RAB5A CPG TLR9 TNF-Α IL-1Β IFN-Β
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Rab7 GTPase负向调节巨噬细胞中poly I:C诱导的细胞因子的表达 被引量:2
4
作者 王玉珍 谢基明 +1 位作者 王宁飞 刘帅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期867-870,共4页
目的:通过构建Rab7的失活突变载体tRab7(Rab7T22N),研究Rab7失活突变后对poly I:C诱导的RAW264.7巨噬细胞中细胞因子的影响。方法:利用PCR定点突变法构建Rab7的失活突变载体Rab7T22N,将Rab7的真核表达载体及其突变体tRab7通过脂质体法... 目的:通过构建Rab7的失活突变载体tRab7(Rab7T22N),研究Rab7失活突变后对poly I:C诱导的RAW264.7巨噬细胞中细胞因子的影响。方法:利用PCR定点突变法构建Rab7的失活突变载体Rab7T22N,将Rab7的真核表达载体及其突变体tRab7通过脂质体法瞬时转染RAW264.7细胞,通过Western blot方法检测Rab7的表达情况。poly I:C刺激转染细胞不同时间后检测细胞因子IFN-β、IP10、TNF-α和IL-1β的表达变化。结果:Western blot检测结果显示,与转染空质粒的对照细胞相比,转染Rab7和tRab7的细胞中Rab7的蛋白水平显著增高。Rab7过表达后,抑制了巨噬细胞RAW264.7中poly I:C刺激后IFN-β、IP10、TNF-α和IL-1β的产生,而Rab7失活突变体tRab7(Rab7T22N)过表达后显著促进了IFN-β、IP10、TNF-α和IL-1β的表达。结论:Rab7抑制了poly I:C刺激的巨噬细胞中IFN-β、IP10、TNF-α和IL-1β的表达,该抑制作用依赖于其GTP结合活性。本研究为进一步阐明Rab7在TLR3信号转导通路中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 polyI:C Rab7 IFN-Β TNF-Α TLR3
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Rab5a促进LPS活化的巨噬细胞中细胞因子的表达 被引量:1
5
作者 孙晓琳 谢基明 +7 位作者 云小乐 张威 康鸿斌 万永青 刘竟然 巩培 赵世敏 王玉珍 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期295-299,共5页
目的:建立稳定表达Rab5a及其失活突变体Rab5a N133I巨噬细胞系,并分析Rab5a对LPS刺激的RAW264.7巨噬细胞中i NOS、TNF-α和IL-6表达的影响。方法:将Rab5a及其失活突变载体Rab5a N133I转染RAW264.7细胞,通过G418筛选稳定表达细胞系。通过... 目的:建立稳定表达Rab5a及其失活突变体Rab5a N133I巨噬细胞系,并分析Rab5a对LPS刺激的RAW264.7巨噬细胞中i NOS、TNF-α和IL-6表达的影响。方法:将Rab5a及其失活突变载体Rab5a N133I转染RAW264.7细胞,通过G418筛选稳定表达细胞系。通过Real-time PCR鉴定稳定表达细胞系。MTT法分析其生长特性,LPS刺激稳定表达细胞系不同时间,检测i NOS、TNF-α和IL-6的表达水平。结果:转染Rab5a/Rab5a N133I细胞Rab5a mRNA水平显著高于对照(P<0.05)。Rab5a过表达促进RAW264.7细胞增殖,而过表达Rab5a N133I细胞增殖显著慢于对照(P<0.05)。Rab5a过表达后,LPS诱导的RAW264.7细胞中i NOS、TNF-α和IL-6的表达显著增高(P<0.01)。然而,过表达Rab5a N133I对LPS诱导的i NOS、TNF-α和IL-6的表达没有显著影响。结论:Rab5a过表达显著促进了LPS活化的RAW264.7细胞中i NOS、TNF-α和IL-6的表达,这种促进作用依赖于其结合GTP的能力。 展开更多
关键词 RAB5A LPS 巨噬细胞 INOS TNF-Α IL-6
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2000年~2002年常见细菌的分离趋势分析
6
作者 赵建平 连建军 谢基明 《江西医学检验》 2003年第6期459-460,共2页
目的通过对本地区细菌分离情况的分析,进一步提高临床医生对合理选择抗生素的认识。方法细菌鉴定采用API系统和手工法,数据统计采用上海金仕达软件。结果分离的细菌以革兰阴性杆菌为主,其中大肠埃希菌占近1/3,以条件致病菌为主的凝固酶... 目的通过对本地区细菌分离情况的分析,进一步提高临床医生对合理选择抗生素的认识。方法细菌鉴定采用API系统和手工法,数据统计采用上海金仕达软件。结果分离的细菌以革兰阴性杆菌为主,其中大肠埃希菌占近1/3,以条件致病菌为主的凝固酶阴性葡萄球菌和真菌的感染呈增长趋势。结论由条件致病菌和真菌造成的院内感染不容忽视,应慎重合理地选择广谱抗生素。 展开更多
关键词 2000年~2002年 细菌分离 抗生素 革兰阴性杆菌 大肠埃希菌
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地塞米松对大鼠急性肝损伤的治疗作用及机制探讨 被引量:4
7
作者 李云旭 王玉珍 +3 位作者 王金玲 谢基明 康鸿斌 刘亚鹏 《内蒙古农业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2012年第3期136-140,共5页
目的:探讨地塞米松(dexamethasone,Dex)对脂多糖(LPS)联合D-半乳糖胺(D-GalN)诱导的大鼠急性肝损伤的治疗作用及部分机制探讨。方法:(1)随机将大鼠分为正常对照组、模型组、治疗组。Dex(10mg/kg)、LPS(50g/kg)和D-GalN(300mg/kg)进行腹... 目的:探讨地塞米松(dexamethasone,Dex)对脂多糖(LPS)联合D-半乳糖胺(D-GalN)诱导的大鼠急性肝损伤的治疗作用及部分机制探讨。方法:(1)随机将大鼠分为正常对照组、模型组、治疗组。Dex(10mg/kg)、LPS(50g/kg)和D-GalN(300mg/kg)进行腹腔注射,16h后观察血浆丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)及肝脏组织中肿瘤坏死因子-а(TNF-а)的含量,观察肝组织病理学变化;(2)随机将大鼠分为生理盐水组和地塞米松组,处理后观察10d内大鼠的存活率,制作生存曲线。结果:模型组ALT、AST、TNF-а表达水平较对照组明显升高,治疗组水平较生理盐水组有明显的降低,与对照组水平相近;地塞米松组大鼠的死亡率较生理盐水组显著降低。结论:地塞米松通过降低TNF-а的表达保护对LPS/D-GalN诱导的大鼠内毒素性肝损伤。 展开更多
关键词 地塞米松 内毒素 肝损伤 TNF-а
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Rab7基因沉默对LPS活化的巨噬细胞中NO/iNOS的影响 被引量:1
8
作者 刘帅 谢基明 +4 位作者 王玉珍 宋亮 王娜 李云旭 孙晓琳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第S1期1159-1162,共4页
目的:研究Rab7基因沉默后对LPS刺激的巨噬细胞系RAW264.7表达NO/iNOS的影响。方法:设计并化学合成三对靶向于Rab7基因的干扰RNA:siRNA1、siRNA2、siRNA3。应用脂质体法将siRNA瞬时转染RAW264.7细胞,通过Real-time PCR和Western blot方... 目的:研究Rab7基因沉默后对LPS刺激的巨噬细胞系RAW264.7表达NO/iNOS的影响。方法:设计并化学合成三对靶向于Rab7基因的干扰RNA:siRNA1、siRNA2、siRNA3。应用脂质体法将siRNA瞬时转染RAW264.7细胞,通过Real-time PCR和Western blot方法检测转染后Rab7的沉默效果。通过MTT法分析瞬时转染siRNA后RAW264.7细胞的生长特性。以LPS刺激Rab7基因沉默后的RAW264.7不同时间,检测NO和iNOS的表达量变化。结果:与对照相比,转染Rab7干扰序列siRNA3后,Rab7蛋白水平表达最低,Real-time PCR的结果显示,Rab7的mRNA水平降低50%(P<0.05)。Rab7基因沉默后48小时显著促进了巨噬细胞RAW264.7的生长(P<0.01)。Rab7干扰后,LPS刺激RAW264.7细胞12小时NO的表达显著增高(P<0.05)。RT-PCR的结果和Real-time PCR的结果证实,Rab7干扰后iNOS基因mRNA的表达显著高于对照(P<0.01)。结论:巨噬细胞RAW264.7中转染siRNA3沉默Rab7基因的效果最好。Rab7沉默后促进了LPS活化的巨噬细胞中NO和iNOS的表达。该研究为进一步阐明Rab7在TLRs信号通路中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 脂多糖 Rab7 SIRNA 诱导型一氧化氮合成酶 一氧化氮
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Rab7真核表达载体的构建及其在小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞中的表达 被引量:1
9
作者 蔡富娟 谢基明 +4 位作者 康鸿斌 孙晓琳 王娜 李云旭 王玉珍 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第5期436-440,共5页
目的构建Rab7的真核表达载体,研究其在小鼠巨噬细胞RAW264.7中的表达。方法 RT-PCR方法分析Rab7在组织和细胞中的表达。以RAW264.7细胞的cDNA为模板,根据GenBank公布的小鼠Rab7全长序列设计引物,扩增Rab7基因的开放阅读框。将其与真核... 目的构建Rab7的真核表达载体,研究其在小鼠巨噬细胞RAW264.7中的表达。方法 RT-PCR方法分析Rab7在组织和细胞中的表达。以RAW264.7细胞的cDNA为模板,根据GenBank公布的小鼠Rab7全长序列设计引物,扩增Rab7基因的开放阅读框。将其与真核表达载体pcDNA3.1(-)连接,构建pcDNA-Rab7重组质粒。用脂质体将Rab7真核表达载体瞬时转染RAW264.7细胞,RT-PCR和Western blot法鉴定Rab7的过表达。结果 Rab7重组载体测序结果与GenBank中报道的Rab7序列的同源性为100%。RT-PCR和Western blot结果显示Rab7真核表达载体瞬时转染RAW264.7细胞后,Rab7表达显著增高。结论成功构建了Rab7真核表达载体。为今后研究Rab7在巨噬细胞中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 Rab7 巨噬细胞 真核表达载体 过表达
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沙棘多糖对急性肝损伤小鼠氧化应激的抑制作用及其对BCL-2/Bax和PPAR-γ的调控 被引量:18
10
作者 刘芳 赵世敏 +7 位作者 张威 谢基明 邹凯 张晓慧 王雪 刘欢 陈俊娜 王玉珍 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期358-361,共4页
目的:以LPS/D-Gal N诱导的小鼠急性肝损伤作为模型,研究沙棘多糖对急性肝损伤的保护作用及其对BCL-2/Bax和PPAR-γ的调控。方法:C57BL/6系雄性小鼠随机分为六组:正常组(CTRL);模型组(L/G);地塞米松阳性对照组(DXM);沙棘多糖低(SPL)、中(... 目的:以LPS/D-Gal N诱导的小鼠急性肝损伤作为模型,研究沙棘多糖对急性肝损伤的保护作用及其对BCL-2/Bax和PPAR-γ的调控。方法:C57BL/6系雄性小鼠随机分为六组:正常组(CTRL);模型组(L/G);地塞米松阳性对照组(DXM);沙棘多糖低(SPL)、中(SPM)、高剂量组(SPH)。SPL、SPM和SPH组分别用50、100、200 mg/kg沙棘多糖溶液连续灌胃14 d,然后采用D-Gal N(700 mg/kg)联合LPS(10μg/kg)腹腔注射诱导急性肝损伤。建模4 h后采集血清和并收集肝脏组织,检测ALT、AST的活性和丙二醛(MDA)的含量。通过Western blot检测肝脏组织中SOD2及BCL-2和Bax的表达水平。通过免疫组织化学法测定肝脏PPAR-γ的表达。结果:ALT、AST水平在模型组显著升高(P<0.01),沙棘多糖预处理后剂量依赖地降低了ALT和AST水平(P<0.01);模型组的MDA比正常组显著升高(P<0.01),沙棘多糖各剂量组比模型组都有显著降低(P<0.01)。模型组的SOD比正常组显著降低(P<0.01),沙棘多糖各剂量组比模型组都有显著升高(P<0.01);沙棘多糖预处理后降低了Bax的表达水平,对BCL-2的表达没有明显的影响。沙棘多糖各剂量组中PPAR-γ的表达量与模型组相比明显降低。结论:沙棘多糖对LPS/D-Gal N诱导的氧化应激有抑制作用,其作用与上调SOD2的表达以及抑制Bax的表达有关。 展开更多
关键词 沙棘多糖 肝损伤 BCL-2 BAX PPAR-Γ
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沙棘多糖提取物对LPS/D-GalN诱导的小鼠肝损伤的保护作用及其对TLR4,SOCS3表达的调控 被引量:9
11
作者 王雪 张威 +6 位作者 刘欢 谢基明 董仕超 陈俊娜 王岩 刘芳 王玉珍 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1457-1460,共4页
目的:研究沙棘多糖提取物对LPS联合D-Gal N诱导的肝损伤的保护作用以及对肝脏TLR4,SOCS3蛋白表达的调控。方法:将C57BL/6系雄性小鼠随机分为6组,即空白对照组、模型组、地塞米松阳性对照组、沙棘多糖低、中、高剂量组;沙棘多糖低、中、... 目的:研究沙棘多糖提取物对LPS联合D-Gal N诱导的肝损伤的保护作用以及对肝脏TLR4,SOCS3蛋白表达的调控。方法:将C57BL/6系雄性小鼠随机分为6组,即空白对照组、模型组、地塞米松阳性对照组、沙棘多糖低、中、高剂量组;沙棘多糖低、中、高剂量组分别以50、100和200 mg/kg沙棘多糖溶液连续灌胃14 d。通过腹腔注射LPS(10μg/kg)和DGal N(700 mg/kg)建立急性肝损伤模型,阳性药物组在建模前腹腔注射地塞米松(10 mg/kg)。建模4 h后采集血清和肝脏组织,检测血清ALT和AST水平,HE染色观察沙棘多糖提取物对肝损伤的影响。Western blot检测TLR4,SOCS3的表达情况。结果:沙棘多糖提取物显著降低了LPS/D-Gal N诱导的小鼠血清中ALT和AST水平(P<0.01,P<0.05);HE染色观察显示,沙棘多糖明显减轻了肝细胞损伤和炎性细胞浸润。Western blot检测表明,沙棘多糖提取物抑制了LPS/D-Gal N诱导的TLR4的表达,但是对SOCS3的表达影响不明显。结论:沙棘多糖提取物有效抑制了LPS/D-Gal N诱导的肝损伤,这种保护作用可能是通过抑制TLR4的表达来发挥作用的,而非通过调控SOCS3来实现的。 展开更多
关键词 沙棘多糖 LPS D-GALN 肝损伤 TLR4 SOCS3
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益生菌L.Casei hang对大鼠急性肝损伤的保护作用及其对TLR4-ERK-PPAR-γ通路的影响 被引量:5
12
作者 谢基明 王玉珍 +6 位作者 张威 云小乐 巩培 刘竟然 赵世敏 康鸿斌 张和平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期910-913,922,共5页
目的:研究益生菌L.Casei Zhang(LCZ)对大鼠急性肝损伤的保护作用并探讨相关机制。方法:48只Wistar大鼠随机分为4组:对照组、模型组、益生菌组和地塞米松组。采用腹腔注射脂多糖(LPS)和D-氨基半乳糖(D-GalN)建立大鼠急性肝损伤模型。益... 目的:研究益生菌L.Casei Zhang(LCZ)对大鼠急性肝损伤的保护作用并探讨相关机制。方法:48只Wistar大鼠随机分为4组:对照组、模型组、益生菌组和地塞米松组。采用腹腔注射脂多糖(LPS)和D-氨基半乳糖(D-GalN)建立大鼠急性肝损伤模型。益生菌组在造模前连续30天灌服LCZ(1×109CFU)。地塞米松组在造模前腹腔注射地塞米松(10 mg/kg)。造模后16小时处死大鼠,检测血清中ALT和AST的变化、检测肝脏匀浆中TNF-α和NO的表达。采用免疫组化方法检测肝脏组织中TLR4和p-ERK的表达水平;采用RT-PCR和Western blot方法检测肝脏中PPAR-γ表达的变化。结果:益生菌组和地塞米松组血清ALT、AST以及肝脏中TNF-α和NO表达显著低于模型组。同时,组织切片显示,肝细胞坏死程度也显著减轻。免疫组化结果显示,与模型组相比,益生菌组和地塞米松组肝脏中TLR4和p-ERK水平也显著降低。PPAR-γ表达在模型组中显著降低,在益生菌组和地塞米松组表达又有所恢复。结论:益生菌L.Casei Zhang对LPS/D-GalN诱导的大鼠急性肝损伤有保护作用,该作用与抑制TLR4-ERK通路以及上调PPAR-γ的表达有关。 展开更多
关键词 益生菌 肝损伤 TLR4 P-ERK PPAR-Γ
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Lactobacillus casei Zhang对扑热息痛诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用 被引量:4
13
作者 张晓慧 颜妍 +5 位作者 赵世敏 王昕旭 刘春妍 谢基明 王玉珍 武春燕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1761-1764,共4页
目的:研究益生菌Lactobacillus casei Zhang(Lcz)对扑热息痛(APAP)所致小鼠急性肝损伤的保护作用及其机制。方法:C57BL/6小鼠被随机分为空白组(Ctrl)、APAP诱导急性肝损伤模型组(Acetaminophen,APAP)、阳性药物组(NAcetylcysteine,NAC)... 目的:研究益生菌Lactobacillus casei Zhang(Lcz)对扑热息痛(APAP)所致小鼠急性肝损伤的保护作用及其机制。方法:C57BL/6小鼠被随机分为空白组(Ctrl)、APAP诱导急性肝损伤模型组(Acetaminophen,APAP)、阳性药物组(NAcetylcysteine,NAC)、Lcz预防组(Lcz/APAP)和Lcz对照组(Lcz)。Lcz(1×10~9CFU/ml)连续灌胃30 d后,NAC组在APAP处理前1 h腹腔注射NAC(150 mg/kg)。APAP、NAC以及Lcz/APAP组均腹腔注射APAP(300 mg/kg)。APAP作用18 h后,采集血液和收集肝脏组织,检测血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的水平。通过Western blot检测肝脏组织中血红素氧化酶(HO-1)、超氧化物歧化酶2(SOD2)、Bcl-2以及TLR4的表达水平。结果:Lcz能抑制APAP诱导的急性肝损伤血清中ALT和AST水平。Lcz提高了HO-1、SOD2和Bcl-2的蛋白表达水平,而降低了APAP诱导的TLR4的表达。结论:益生菌Lcz对APAP诱导的小鼠急性肝损伤有保护作用,其保肝作用机制可能与其抗氧化和抗炎活性有关。 展开更多
关键词 LactobacilluscaseiZhang 扑热息痛 超氧化物歧化酶2 血红素氧化酶 BCL-2
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Rab7基因沉默对巨噬细胞中R848激活的细胞因子及MAPK信号通路影响 被引量:2
14
作者 邹凯 云小乐 +4 位作者 康鸿斌 王雪 张晓慧 谢基明 王玉珍 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期967-970,共4页
目的:本实验阐述了Rab7对Raw264.7巨噬细胞中R848激活TLR7(Toll like receptor-7)所产生的细胞因子的影响,并探讨Rab7对MAPK信号转导的影响。方法:使用Rab7刺激silence-Rab7-Raw264.7细胞,检测R848激活TLR7后产生的TNF-α、IL-6、IFN-α... 目的:本实验阐述了Rab7对Raw264.7巨噬细胞中R848激活TLR7(Toll like receptor-7)所产生的细胞因子的影响,并探讨Rab7对MAPK信号转导的影响。方法:使用Rab7刺激silence-Rab7-Raw264.7细胞,检测R848激活TLR7后产生的TNF-α、IL-6、IFN-α、IFN-β与IP-10,通过Western blot检测MAPK的磷酸化水平,分析Rab7对MAPK的信号转导的作用。结果:Rab7对TLR7激活后细胞因子的产生具有抑制作用,Rab7对MAPK信号通路具有抑制作用。结论:本实验结果进一步说明Rab7是TLR7信号转导通路的负向调控因子,并且参与到MAPK信号通路中。 展开更多
关键词 Rab7 TLR7 RAW264.7细胞 MAPK
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细胞分裂周期蛋白14生物学功能的研究进展 被引量:4
15
作者 刘儒 谢基明 孟峻 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期960-964,共5页
细胞分裂周期蛋白14(Cdc14)属于高度保守的丝、苏氨酸双特异性磷酸酶家族,能够下调周期素依赖性激酶(CDK)的活性,是重要的细胞周期调节蛋白,在真核生物细胞中广泛表达。Cdc14在不同的真核细胞中生物学功能相差甚远。在出芽酵母细胞中,Cd... 细胞分裂周期蛋白14(Cdc14)属于高度保守的丝、苏氨酸双特异性磷酸酶家族,能够下调周期素依赖性激酶(CDK)的活性,是重要的细胞周期调节蛋白,在真核生物细胞中广泛表达。Cdc14在不同的真核细胞中生物学功能相差甚远。在出芽酵母细胞中,Cdc14通过逆转CDK的活性,进而调节出芽酵母细胞有丝分裂退出网络;在裂殖酵母细胞中,Cdc14的同源物多聚腺苷酸因子Clp1对于裂殖酵母细胞有丝分裂的退出无明显影响;在人类细胞中,Cdc14的同源物人类Cdc14A(hCdc14A)可使CDK失活,控制有丝分裂的时间。基于国内外对Cdc14的研究成果,现针对Cdc14在出芽酵母细胞、非洲裂殖酵母细胞、秀丽隐杆线虫细胞、非洲爪蟾细胞、鸟类细胞、小鼠卵母细胞和人类细胞7种不同真核生物细胞中的分型、定位及其生物学功能等进行综述,为Cdc14的研究提供参考。 展开更多
关键词 有丝分裂 细胞分裂周期蛋白14 减数分裂 出芽酶酵母细胞 周期素依赖性激酶
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血清胱抑素C评价早期肾功能损害的临床意义探讨 被引量:17
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作者 谢基明 冀虎岗 +1 位作者 杨国香 王玉珍 《标记免疫分析与临床》 CAS 2013年第5期308-310,共3页
目的评价血清胱抑素C(Cys C)对早期肾功能损害诊断的临床意义。方法应用免疫比浊法测定136例肾脏病患者血清Cys C浓度,用Jaffe法测定血清SCr。以内生肌酐清除率(Ccr)测得的肾小球滤过率(GFR)作为诊断评价的金指标,比较Cys C、SCr浓度与... 目的评价血清胱抑素C(Cys C)对早期肾功能损害诊断的临床意义。方法应用免疫比浊法测定136例肾脏病患者血清Cys C浓度,用Jaffe法测定血清SCr。以内生肌酐清除率(Ccr)测得的肾小球滤过率(GFR)作为诊断评价的金指标,比较Cys C、SCr浓度与GFR的相关性,评估Cys C结果的临床敏感性、特异性和可靠性。结果血清Cys C、SCr浓度与GFR均呈显著相关(P<0.01);以Cys C与GFR的相关程度最密切;且Cys C与SCr显著相关(P<0.05)。结论血清Cys C是一个准确、可靠的反映肾小球滤过功能的指标,对诊断肾脏病患者早期肾功能损害具有指导意义。 展开更多
关键词 胱抑素C 肾功能损害 肾小球滤过率 血清肌酐 内生肌酐清除率 免疫比浊法
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小鼠Cdc14A基因真核表达载体的构建 被引量:2
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作者 刘儒 谢基明 +1 位作者 孟峻 李瑞林 《检验医学与临床》 CAS 2019年第13期1891-1893,共3页
目的构建小鼠pcDNA3.1-MYC-细胞分裂周期14A(Cdc14A)真核表达载体,并观察和验证其在真核细胞中的表达。方法将化学合成的目的基因Cdc14A定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,经酶切和测序鉴定正确后,采用脂质体法转染HEK293细胞,通过We... 目的构建小鼠pcDNA3.1-MYC-细胞分裂周期14A(Cdc14A)真核表达载体,并观察和验证其在真核细胞中的表达。方法将化学合成的目的基因Cdc14A定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,经酶切和测序鉴定正确后,采用脂质体法转染HEK293细胞,通过Westernblot检测细胞内Cdc14A的表达,并检测Cdc14A基因序列。结果pcDNA3.1-MYC-Cdc14A真核表达载体构建成功,将其转染HEK293细胞48h,提取细胞蛋白,采用Westernblot检测到细胞内Cdc14A的表达,并且测序结果与预期结果一致。结论成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-MYC-Cdc14A,为研究Cdc14A在小鼠一细胞期受精卵G2/M期转换中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 真核表达载体 细胞分裂周期14A HEK293细胞
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Rab7负向调控巨噬细胞中CpG诱导的细胞因子的表达 被引量:3
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作者 王娜 王玉珍 +3 位作者 万永青 谢基明 康鸿斌 刘春霞 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期681-684,共4页
目的:研究Rab7过表达及失活突变(Rab7T22N)对CpG刺激的RAW264.7巨噬细胞中分泌细胞因子的影响。方法:采用RT-PCR和Real-time PCR检测RAW264.7细胞中Rab7在CpG刺激下表达模式。将Rab7真核表达质粒及失活突变质粒Rab7T22N通过脂质体法转染... 目的:研究Rab7过表达及失活突变(Rab7T22N)对CpG刺激的RAW264.7巨噬细胞中分泌细胞因子的影响。方法:采用RT-PCR和Real-time PCR检测RAW264.7细胞中Rab7在CpG刺激下表达模式。将Rab7真核表达质粒及失活突变质粒Rab7T22N通过脂质体法转染RAW264.7细胞,G418稳定筛选,Western法鉴定表达效果。用CpG刺激稳定表达Rab7的RAW264.7细胞系,RT-PCR和Real-time PCR检测细胞因子IL-6、IL-1β、IFN-β的表达量变化。结果:CpG刺激RAW264.7后,Rab7 mRNA表达水平逐渐增高,在8小时达到高峰,表达增高近4倍。Rab7过表达后,CpG刺激后产生的IL-6、IL-1β、IFN-β显著降低。巨噬细胞中Rab7失活突变后,在CpG刺激后IL-6、IL-1β、IFN-β的表达又显著增加。结论:CpG促进RAW264.7巨噬细胞中Rab7 mRNA的表达,Rab7抑制了CpG刺激的巨噬细胞中IL-6、IL-1β、IFN-β的表达,该抑制作用的发挥与其酶活性的GTP结合有关。该研究为进一步阐明Rab7在CpG/TLR9信号通路中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 Rab7 CPG Rab7T22N RAW264.7细胞
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CYP4F2基因多态性与蒙古族冠心病的相关性研究 被引量:4
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作者 赵平 常培叶 +3 位作者 南景龙 蒋鹏 格日勒 谢基明 《心血管康复医学杂志》 CAS 2016年第1期18-21,共4页
目的:研究CYP4F2基因多态性与蒙古族冠心病的关系以及蒙古族冠心病患者的临床特点。方法:对入选对象进行问卷调查,采用高温连接酶检测反应技术对234例蒙古族冠心病患者(冠心病组)和221例非冠心病患者(正常对照组)进行基因扩增和基因分型... 目的:研究CYP4F2基因多态性与蒙古族冠心病的关系以及蒙古族冠心病患者的临床特点。方法:对入选对象进行问卷调查,采用高温连接酶检测反应技术对234例蒙古族冠心病患者(冠心病组)和221例非冠心病患者(正常对照组)进行基因扩增和基因分型,分析CYP4F2基因的2个单核苷酸多态性(SNP)位点rs1558139和rs2108622的多态性和蒙古族冠心病的关系。结果:与正常对照组比较,冠心病组男性比例(41.18%比67.95%)、吸烟史(32.13%比41.88%)、人体质量指数[BMI,(21.66±4.53)kg/m2比(25.34±5.37)kg/m2]和甘油三酯水平[(1.66±0.90)mmol/L比(1.92±1.38)mmol/L]均显著升高,而高密度脂蛋白胆固醇水平[(1.18±0.28)mmol/L比(1.07±0.29)mmol/L]显著降低,P<0.05或<0.01;冠心病组CYP4F2基因rs1558139和rs2108622的基因型频率和等位基因频率与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:蒙古族冠心病患者的临床特点是男性比例高、有吸烟史、高人体质量指数和高甘油三酯水平,CYP4F2基因rs1558139和rs2108622多态性与蒙古族冠心病无明显关系。 展开更多
关键词 基因 蒙古 多态性 单核苷酸
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乳腺癌MDA-MB-231细胞中Rab7a基因的网络分析 被引量:1
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作者 徐凤英 刘儒 +4 位作者 马丽 曲一帆 肖伟利 王玉珍 谢基明 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期464-469,共6页
目的:探讨三阴性乳腺癌(TNBC)MDA-MB-231细胞中Rab7a基因敲除后相关基因表达的变化,阐明Rab7a相关基因在TNBC中的作用。方法:选取对数生长期的乳腺癌ZR-75-30、MCF-7、T-47D、MDA-MB-231和HCC-1937细胞,采用Western blotting法检测乳腺... 目的:探讨三阴性乳腺癌(TNBC)MDA-MB-231细胞中Rab7a基因敲除后相关基因表达的变化,阐明Rab7a相关基因在TNBC中的作用。方法:选取对数生长期的乳腺癌ZR-75-30、MCF-7、T-47D、MDA-MB-231和HCC-1937细胞,采用Western blotting法检测乳腺癌ZR-75-30、MCF-7、T-47D、MDA-MB-231和HCC-1937细胞中Rab7a蛋白表达水平。慢病毒敲除TNBC MDA-MB-231细胞中Rab7a基因,分为阴性对照组和Rab7a基因敲除组,根据敲除的4种不同Rab7a序列分为KD1组、KD2组、KD3组和KD4组。采用qPCR法检测各组MDA-MB-231细胞中Rab7a基因敲除效率,全基因表达谱芯片检测Rab7a基因敲除效率最高组(KD2组)和阴性对照组差异基因,一体化通路分析(IPA)软件分析Rab7a基因与其他基因的相互作用。结果:在TNBC MDA-MB-231细胞中可见Rab7a蛋白表达。与阴性对照组比较,KD2组乳腺癌MDA-MB-231细胞中Rab7a基因敲除效率最高(P<0.01);与阴性对照组比较,KD2组乳腺癌MDA-MB-231细胞中有634个差异基因,其中上调基因和下调基因数均增多(P<0.01);差异基因分析,Rab7a基因敲除与癌症、细胞存活、细胞周期和细胞生长及转移等有密切联系;Rab7a的IPA网络图中eIF4F、IRS1和RPS6KB1表达下调,PRKAA1、IKBKE、VEGFA和转录因子ATF2表达上调。结论:Rab7a基因在TNBC MDA-MB-231细胞中以基因网络的形式发挥作用;Rab7a基因与多基因相互作用,参与癌细胞的病理过程。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 Rab7a 三阴性乳腺癌 MDA-MB-231细胞 一体化通路分析
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