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乳源外泌体对微生物的作用
1
作者 赵紫涵 谭楚敏 +1 位作者 吴希阳 谢秋玲 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第1期379-389,共11页
外泌体是纳米级(直径40~160 nm)的胞外囊泡,在细胞信号转导、免疫应答和抗原递呈过程中发挥作用,并存在于多种体液,包括血清、唾液、尿液、脑脊液和乳液等。乳外泌体携带蛋白质、miRNA等多种功能分子,很多与人体免疫功能相关。摄取乳液... 外泌体是纳米级(直径40~160 nm)的胞外囊泡,在细胞信号转导、免疫应答和抗原递呈过程中发挥作用,并存在于多种体液,包括血清、唾液、尿液、脑脊液和乳液等。乳外泌体携带蛋白质、miRNA等多种功能分子,很多与人体免疫功能相关。摄取乳液后,乳外泌体中的内容物可被人体肠道吸收,从而发挥健康作用。本文总结国内外有关乳源外泌体与微生物关系的研究报道以及本团队的研究成果,阐述外泌体的生物发生过程,主要组成成分,外泌体与病原微生物感染的关系以及乳外泌体对肠道微生物的作用,为研究乳外泌体对人体的营养和健康功效提供参考。 展开更多
关键词 外泌体 微生物 肠道菌群 牛乳 母乳
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纳豆激酶原基因的克隆及表达 被引量：16
2
作者 谢秋玲 孙奋勇 +2 位作者 廖美德 张玲 汪炬 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第6期19-21,共3页
从纳豆菌中克隆具有溶血栓性质的纳豆激酶原的基因 ,与质粒PBV2 2 0连接 ,转化大肠杆菌E .coliDH5α .挑取阳性克隆用EcoRⅠ /BamHⅠ双酶切鉴定得到一条约10 0 0bp的条带 .阳性克隆经温度诱导表达 ,用SDS_PAGE电泳鉴定 ,在 38kD处有一... 从纳豆菌中克隆具有溶血栓性质的纳豆激酶原的基因 ,与质粒PBV2 2 0连接 ,转化大肠杆菌E .coliDH5α .挑取阳性克隆用EcoRⅠ /BamHⅠ双酶切鉴定得到一条约10 0 0bp的条带 .阳性克隆经温度诱导表达 ,用SDS_PAGE电泳鉴定 ,在 38kD处有一条明显的带 ,占菌体蛋白的 2 0 %左右 ,同时还表明该蛋白以包涵体的形式蛋白分子量为存在 .包涵体经收集。 展开更多
关键词 纳豆激酶原 基因克隆 基因表达
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一种潜在的溶血栓药物——纳豆激酶 被引量：28
3
作者 谢秋玲 郭勇 林剑 《药物生物技术》 CAS CSCD 2001年第1期51-53,共3页
纳豆中提取出纳豆激酶 (Nattokinase ,简称NK)具有溶栓作用还兼具促进体内组织纤溶酶型激活剂 (tPA)合成的功效。NK是一个分子量小的单链肽 ,可利用枯草杆菌进行液体发酵生产 ,因此有望成为新一代的口服溶血栓药物。
关键词 纳豆激酶 溶血栓药物 纤溶酶型激活剂 枯草杆菌 单链肽
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杆状病毒表达系统在疫苗研究中的应用 被引量：8
4
作者 谢秋玲 张玲 +3 位作者 洪岸 陈小佳 孙奋勇 林剑 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期367-369,共3页
关键词 杆状病毒 基因表达系统 疫苗 恶性肿瘤 ELISA法
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中国仓鼠卵巢细胞表达系统在疫苗研制中的应用 被引量：6
5
作者 谢秋玲 陈小佳 +3 位作者 戴云 汪炬 洪岸 林剑 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期873-874,共2页
关键词 中国 仓鼠 卵巢细胞表达系统 疫苗 CHO 基因工程 疫苗
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纳豆激酶液体发酵条件的优化 被引量：61
6
作者 谢秋玲 郭勇 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第5期127-131,共5页
纳豆激酶是从日本传统食品纳豆中提取出来的一种具有溶血栓功能的酶．笔者从市售纳豆中分离出一株能产纳豆激酶的菌株，并对之进行液体培养，发现在ｐＨ７．０，接种量为２％，种龄２４ｈ，装液量１０ｍＬ／１００ｍＬ，碳源为木糖，浓... 纳豆激酶是从日本传统食品纳豆中提取出来的一种具有溶血栓功能的酶．笔者从市售纳豆中分离出一株能产纳豆激酶的菌株，并对之进行液体培养，发现在ｐＨ７．０，接种量为２％，种龄２４ｈ，装液量１０ｍＬ／１００ｍＬ，碳源为木糖，浓度为２％，氮源为大豆蛋白胨，浓度为３％的条件下，接种后第四天为产酶高峰期，最高产酶量可达到７８７．１尿激酶单位／ｍＬ发酵液． 展开更多
关键词 纳豆激酶 液体发酵 药理 激酶
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纳豆激酶的合成机制 被引量：4
7
作者 谢秋玲 郭勇 +2 位作者 林剑 戴云 蒲含林 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 2001年第3期110-114,共5页
目的 :探讨NK(纳豆溶酶 )合成机制 ,以提高NK产量 .方法 :通过液体发酵的方法比较不同氮源对NK合成的影响 ,并研究大豆提取物对NK合成的诱导作用 .结果 :NK是一个胞外酶 ,大豆蛋白胨是NK合成的最佳氮源 ;大豆沉淀蛋白所得上清液对NK合... 目的 :探讨NK(纳豆溶酶 )合成机制 ,以提高NK产量 .方法 :通过液体发酵的方法比较不同氮源对NK合成的影响 ,并研究大豆提取物对NK合成的诱导作用 .结果 :NK是一个胞外酶 ,大豆蛋白胨是NK合成的最佳氮源 ;大豆沉淀蛋白所得上清液对NK合成有诱导作用 .结论 :大豆蛋白分解后所得的小分子物质对NK的合成有诱导作用 。 展开更多
关键词 纳豆溶酶 酶合成 诱导 阻遏 合成机制 诱导酶 液体发酵
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纳豆激酶产生菌——纳豆菌对木糖和葡萄糖的利用 被引量：6
8
作者 谢秋玲 郭勇 林剑 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期9-12,共4页
在纳豆激酶 (Nattokinase,简称NK)发酵条件研究中 ,我们发现木糖是较葡萄糖更佳的产酶碳源。进一步的试验证明 ,NK的发酵菌种———Bacillussubtilisvar.natto在混合碳源中没有二次生长现象 ,对木糖和葡萄糖的吸收是同时的 ,且互不干扰 ... 在纳豆激酶 (Nattokinase,简称NK)发酵条件研究中 ,我们发现木糖是较葡萄糖更佳的产酶碳源。进一步的试验证明 ,NK的发酵菌种———Bacillussubtilisvar.natto在混合碳源中没有二次生长现象 ,对木糖和葡萄糖的吸收是同时的 ,且互不干扰 ,葡萄糖对木糖的吸收利用没有分解代谢阻遏。 展开更多
关键词 纳豆菌 纳豆激酶 木糖 葡萄糖 分解代谢阻遏
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昆虫细胞Sf9在四种生物反应器中的培养 被引量：5
9
作者 谢秋玲 郑云程 廖美德 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期96-100,共5页
昆虫细胞表达系统已广泛的应用于表达各种重组蛋白,研究昆虫细胞Sf9分别在4种生物反应器:转瓶、摇瓶、Bellocell反应器、发酵罐中进行悬浮培养.转瓶、摇瓶、Bellocell和发酵罐的细胞接种密度都是5×105/mL.对细胞数量、葡萄糖浓度... 昆虫细胞表达系统已广泛的应用于表达各种重组蛋白,研究昆虫细胞Sf9分别在4种生物反应器:转瓶、摇瓶、Bellocell反应器、发酵罐中进行悬浮培养.转瓶、摇瓶、Bellocell和发酵罐的细胞接种密度都是5×105/mL.对细胞数量、葡萄糖浓度以及主要代谢产物乳酸、氨的浓度进行检测.昆虫细胞经转瓶和摇瓶培养,细胞密度达到最高分别为:5.5×106、7.3×106/mL,是起始密度的11倍和14.6倍.昆虫细胞经Bellocell和发酵罐培养,细胞密度达到最高分别为:8.01×106、1.52×107/mL,是起始密度的16.02倍和30.4倍.昆虫细胞经四种生物反应器中的悬浮培养之后,都达到了很高的密度,尤其是经发酵罐培养达到如此高密度,为高效大规模表达药物蛋白,奠定重要的基础. 展开更多
关键词 昆虫细胞SF9 转瓶 摇瓶 Bellocell反应器 发酵罐
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溶血栓酶活性测定的一种新方法 被引量：7
10
作者 谢秋玲 林剑 张玲 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第4期582-583,共2页
根据血栓溶解会引起吸光度下降的特性 ,在细胞培养板上制作小血栓 ,利用酶标仪同时检测多个样品的吸光度变化 .发现反应初期 ,血栓吸光度的降低同时间呈线性关系 ,其回归方程的斜率k与酶活性成正比 .因此可用k来表示酶活性 .此方法与蛋... 根据血栓溶解会引起吸光度下降的特性 ,在细胞培养板上制作小血栓 ,利用酶标仪同时检测多个样品的吸光度变化 .发现反应初期 ,血栓吸光度的降低同时间呈线性关系 ,其回归方程的斜率k与酶活性成正比 .因此可用k来表示酶活性 .此方法与蛋白凝块溶解时间法 (CLT法 )相关性很好 .该法省时 ,成本低 ,是一种较好的。 展开更多
关键词 溶血栓活性 尿激酶 活性测定
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产纳豆激酶之菌种的分离与培养 被引量：8
11
作者 谢秋玲 郭勇 凌均建 《中南林学院学报》 CAS CSCD 1999年第4期50-52,共3页
纳豆激酶（Ｎａｔｔｏｋｉｎａｓｅ）是从日本传统食品纳豆中提取出来的一种具有溶血栓功能的酶．从市售纳豆中分离出一株能产ＮＫ的菌株，经鉴定为枯草芽孢杆菌Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ，其液体培养生长曲线呈Ｓ形，６～４８ ... 纳豆激酶（Ｎａｔｔｏｋｉｎａｓｅ）是从日本传统食品纳豆中提取出来的一种具有溶血栓功能的酶．从市售纳豆中分离出一株能产ＮＫ的菌株，经鉴定为枯草芽孢杆菌Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ，其液体培养生长曲线呈Ｓ形，６～４８ ｈ 为指数生长期，４８～９６ ｈ 为稳定生长期；产酶高峰期为稳定生长前期；大豆渣、豆浆、大豆蛋白胨及胰蛋白胨４ 种氮源中以大豆蛋白胨的产酶量最高，最高产酶量为６１０．７ 尿激酶单位／ｍ Ｌ 发酵液． 展开更多
关键词 纳豆激酶 枯草杆菌 菌种分离 菌种鉴定 菌种培养
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纳豆——一种多功能食品 被引量：57
12
作者 谢秋玲 郭勇 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期71-72,共2页
纳豆是日本的一种传统性食品，最近的研究发现，纳豆及其周围的粘稠物质中含有多种成分，使之成为具有抗肿瘤、抗氧化性、降血压、溶血栓、防止骨质疏松、促凝血等多种功能的食品，尤其适合老年人食用。
关键词 纳豆 功能性食品
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盐酸氨基葡萄糖胺诱导黑素瘤细胞分化的形态学观察 被引量：10
13
作者 谢秋玲 戴云 +4 位作者 孙奋勇 林剑 陈孝银 张美英 陈小佳 《安徽中医学院学报》 CAS 2002年第3期42-44,共3页
目的 :研究盐酸氨基葡萄糖 (GAH)对黑素瘤细胞分化的诱导作用。方法 :用GAH处理体外培养的黑素瘤细胞 ,观察细胞生长和形态的变化。结果 :细胞生长受到抑制 ,细胞形态发生改变 ,细胞由圆形变为梭形 ,核质比减小 ,核仁减少或消失 ,有些... 目的 :研究盐酸氨基葡萄糖 (GAH)对黑素瘤细胞分化的诱导作用。方法 :用GAH处理体外培养的黑素瘤细胞 ,观察细胞生长和形态的变化。结果 :细胞生长受到抑制 ,细胞形态发生改变 ,细胞由圆形变为梭形 ,核质比减小 ,核仁减少或消失 ,有些细胞胞内出现空泡 ;Giemsa染色显示实验组处于分裂期的细胞数远远少于对照组。结论 :黑素瘤细胞经GAH作用后有向正常细胞转化的趋势 。 展开更多
关键词 细胞分化 形态学 盐酸氨基葡萄糖 黑素瘤细胞
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一种海洋生物提取物的美白机理探讨 被引量：2
14
作者 谢秋玲 戴云 +2 位作者 林剑 陈小佳 余榕捷 《日用化学工业》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期85-86,共2页
一种海洋生物提取物GN具有美白的功效 ,从细胞水平探讨其作用机理 ,发现GN不是通过一种途径 ,而是通过多种途径起作用 :①抑制酪氨酸酶的活性 ;②可能阻碍黑素细胞的生长 ;
关键词 黑色素 酷氨酸酶 溶酶体 美白化妆品 海洋生物提取物 美白机理
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猪卵透明带-3β蛋白核心片断在E.coli中的表达 被引量：2
15
作者 谢秋玲 陈小佳 +5 位作者 朱伟杰 张玲 徐万祥 洪岸 李菁 高丝红 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期387-390,共4页
目的:探讨通过基因工程的方法在大肠杆菌中表达猪卵透明带蛋白pZP3b的核心片断。方法:采用PCR方法扩增原cDNA中编码第44-306个氨基酸的pZP3β核心片断的DNA序列,克隆入pET-3c载体进而在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)pLysS中表达。结果:表达的... 目的:探讨通过基因工程的方法在大肠杆菌中表达猪卵透明带蛋白pZP3b的核心片断。方法:采用PCR方法扩增原cDNA中编码第44-306个氨基酸的pZP3β核心片断的DNA序列,克隆入pET-3c载体进而在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)pLysS中表达。结果:表达的pZP3β核心蛋白占菌体总蛋白的15%,并经Western-blot鉴定为目的蛋白。结论:pZP3β核心片断在大肠杆菌中获得较高的表达,有利于产物的纯化,为后续阐明pZP3β核心区域的性质和相关抗生育研究打下了基础。 展开更多
关键词 猪卵透明带-3β 核心片断 大肠杆菌 表达
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基因重组hEGF融合蛋白的发酵条件优化 被引量：2
16
作者 谢秋玲 廖美德 +2 位作者 余榕捷 徐丽慧 林剑 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期600-602,635,共4页
对 h EGF融合蛋白基因工程菌的发酵条件进行优化。结果表明 ,当起始 p H为 6 .6～ 7.0 ,以 10 0 m l/ 5 0 0 ml的装液量 ,6 %接种量 ,37℃培养 2 h,加入 0 .1mmol/ L的 IPTG诱导 4 h后 ,收获菌体可得到较高的生物量和 h EGF融合蛋白表... 对 h EGF融合蛋白基因工程菌的发酵条件进行优化。结果表明 ,当起始 p H为 6 .6～ 7.0 ,以 10 0 m l/ 5 0 0 ml的装液量 ,6 %接种量 ,37℃培养 2 h,加入 0 .1mmol/ L的 IPTG诱导 4 h后 ,收获菌体可得到较高的生物量和 h EGF融合蛋白表达量。其中 IPTG诱导开始时间和菌体收获时间对蛋白表达有显著影响。 展开更多
关键词 表皮生长因子 发酵 优化
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纳豆激酶活性测定方法 被引量：41
17
作者 谢秋玲 郭勇 林剑 《广东药学》 CAS 2000年第6期8-10,共3页
对先后建立的纤维平板法等几种测定纳豆激酶活性的方法进行概括总结介绍。
关键词 纳豆激酶 溶血栓活性 纤维蛋白平板法 血清板法
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诱导剂对植物细胞培养生产次生代谢物的作用 被引量：11
18
作者 谢秋玲 郭勇 《生物工程进展》 CAS CSCD 1998年第4期50-52,57,共4页
诱导剂可以诱导植物产生植物抗毒素，因此成为植物细胞培养次生代谢物生产中提高产量的一种手段。本文介绍了有关诱导剂在植物细胞生产次生代谢物方面的研究概况，重点介绍了诱导剂的作用机理及第二信使的研究成果。
关键词 诱导剂 植物细胞培养 次级代谢物
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诱导剂对植物细胞生产次生代谢物的作用 被引量：4
19
作者 谢秋玲 郭勇 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 1998年第10期7-9,共3页
诱导剂可以诱导植物产生植物抗毒素，因此成为提高植物细胞次生代谢物产量的一种手段。本文介绍了有关诱导剂在植物细胞生产次生代谢物方面的研究概况。
关键词 诱导剂 植物细胞培养 次生代谢物 抗毒素
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重组人可溶性PDGFRβ/Fc在昆虫细胞Sf9中的表达 被引量：1
20
作者 谢秋玲 刘兰 +3 位作者 刘秀贵 张玲 徐丽慧 洪岸 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期743-748,共6页
【目的】利用昆虫细胞Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达血小板源性生长因子受体β(PDGFRβ)链膜外区与人IgGFc片段的可溶性受体融合蛋白sPDGFRβ/Fc,并检测重组蛋白的特异性和生物活性。【方法】采用Bac-to-Bac系统,构建重组转移质粒pFas... 【目的】利用昆虫细胞Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达血小板源性生长因子受体β(PDGFRβ)链膜外区与人IgGFc片段的可溶性受体融合蛋白sPDGFRβ/Fc,并检测重组蛋白的特异性和生物活性。【方法】采用Bac-to-Bac系统,构建重组转移质粒pFastbac-sPDGFRβ/Fc,转化到含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,使目的基因与杆状病毒基因组DNA发生位点特异性重组,获得重组病毒DNA,将其通过脂质体转染昆虫细胞Sf9获得重组病毒。将该重组病毒感染Sf9无血清细胞系,在Sf9细胞中表达sPDGFRβ/Fc,对表达产物进行Western blotting检测和Protein A亲合层析纯化,并进一步通过MTT法检测获得的重组蛋白生物学活性。【结果】重组病毒感染Sf9细胞后,经Western blotting分析,能检测到一条分子量约为97kDa的特异性条带,与目的蛋白大小相符。通过ProteinA亲和层析,获得了纯度达75%以上,表达量为1μg/mL细胞培养上清的重组融合蛋白,MTT结果显示该重组融合蛋白sPDGFRβ/Fc具有抑制PDGF刺激的Balb/c3T3细胞增殖的能力。【结论】具有生物活性的重组可溶性受体融合蛋白sPDGFRβ/Fc可在昆虫细胞中成功地得到表达。 展开更多
关键词 血小板源性生长因子受体 杆状病毒表达载体系统 昆虫细胞 重组蛋白 MTT法
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