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具核梭杆菌的研究进展 被引量:3
1
作者 谢立苹 李中华 邵世和 《北华大学学报(自然科学版)》 CAS 2003年第4期319-321,共3页
具核梭杆菌是一种G-专性无芽胞厌氧杆菌,在口腔乃至全身感染性疾病中检出率极高,与临床厌氧菌感染的关系十分密切.具核梭杆菌的致病性与它的黏附特性、代谢产物丁酸及宿主细胞因子水平有关.最近又有研究报道,该菌能够诱导外周血单个核... 具核梭杆菌是一种G-专性无芽胞厌氧杆菌,在口腔乃至全身感染性疾病中检出率极高,与临床厌氧菌感染的关系十分密切.具核梭杆菌的致病性与它的黏附特性、代谢产物丁酸及宿主细胞因子水平有关.最近又有研究报道,该菌能够诱导外周血单个核细胞和多形核细胞的凋亡,从而逃避免疫细胞的杀伤作用,引起机体的感染性疾病. 展开更多
关键词 具核梭杆菌 致病性 丁酸 细胞凋亡 细胞因子
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幽门螺杆菌cag致病岛CagⅠ蛋白的生物信息学分析 被引量:1
2
作者 谢立苹 姚逸正 +5 位作者 朱虹 徐驰 田树伟 梁广舒 倪颖 邵世和 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期835-840,共6页
目的用生物信息学分析方法对幽门螺杆菌(HP)cag致病岛中的CagⅠ蛋白进行综合分析,推断其结构和功能,并探索其在HP致病中的作用。方法用antherprot V5.0软件和网络数据库等分析预测其结构,BLAST程序搜索其同源序列;用PROSITE SCAN和Finge... 目的用生物信息学分析方法对幽门螺杆菌(HP)cag致病岛中的CagⅠ蛋白进行综合分析,推断其结构和功能,并探索其在HP致病中的作用。方法用antherprot V5.0软件和网络数据库等分析预测其结构,BLAST程序搜索其同源序列;用PROSITE SCAN和Fingerprint服务器分析推测其潜在的功能。结果 CagⅠ蛋白有361个氨基酸残基,分子量(Mr)为39 370,理论等电点为5.56;N'端20个氨基酸残基为信号肽,有三段跨膜区,二级结构和三级结构中螺旋结构为主体(约80%);CagⅠ为稳定的疏水蛋白,保守性很强,有N-糖基化作用位点、蛋白激酶C磷酸化位点、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和豆蔻酰化作用位点;存在膜蛋白、菌毛蛋白、转运蛋白、ATP/GTP酶、转录调节因子、分泌系统蛋白等多个蛋白质标签。结论 CagⅠ蛋白定位于HP外膜,是Ⅳ型分泌系统重要组成蛋白质,在信号转导和物质转运过程中充当信使或载体,可能具有水解酶及ATP/GTP酶活性。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 CAG致病岛 生物信息学 结构预测 功能分析
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精神病女患中晚期引产术的护理
3
作者 谢立苹 张俊菊 《吉林医学信息》 1994年第8期57-57,共1页
关键词 精神病 中晚期 引产术 护理
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幽门螺杆菌cag4蛋白的原核表达、纯化及鉴定 被引量:4
4
作者 王文凯 钟桥 +1 位作者 谢立苹 邵世和 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期347-351,共5页
目的:构建幽门螺杆菌cag4蛋白的原核重组体系,表达、纯化融合蛋白。方法:利用PCR技术从幽门螺杆菌NCTC11637中克隆了cag4基因;经T-A克隆,酶切鉴定,构建了原核表达载体pET-28a-cag4;经测序鉴定正确后,转化进入大肠埃希菌BL21(DE3)进行异... 目的:构建幽门螺杆菌cag4蛋白的原核重组体系,表达、纯化融合蛋白。方法:利用PCR技术从幽门螺杆菌NCTC11637中克隆了cag4基因;经T-A克隆,酶切鉴定,构建了原核表达载体pET-28a-cag4;经测序鉴定正确后,转化进入大肠埃希菌BL21(DE3)进行异源表达。利用IPTG体外诱导后,经SDS-PAGE和Western bolt鉴定目的蛋白表达后,采用Ni2+-NTA柱在变性条件下纯化目的蛋白,并对重组蛋白进行透析复性处理。将SDS煮沸法获得的溶壁微球菌肽聚糖掺入SDS-PAGE作为底物,进行酶谱分析。结果:成功扩增了cag4基因基因;重组质粒在大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达出pET-28a-cag4融合蛋白;优化了pET-28a-cag4原核表达体系的最适条件;Western bolt分析结果显示表达的基因重组蛋白与目的蛋白相符;酶谱分析显示其具有明显的肽聚糖水解活性。结论:幽门螺杆菌cag4蛋白具有溶菌糖基转移酶活性。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌cag4蛋白 原核表达 纯化 融合蛋白
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硒与结肠癌研究进展 被引量:2
5
作者 邵世和 谢立苹 霍龙 《北华大学学报(自然科学版)》 CAS 2003年第5期405-407,共3页
研究表明,硒与结肠癌的发生呈明显的负相关,其机制与硒能提高抗氧化损伤能力,调节DNA甲基化水平,诱导肿瘤细胞凋亡,提高机体免疫功能等因素有关.
关键词 结肠癌 谷胱甘肽 抗氧化损伤 DNA甲基化
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幽门螺杆菌Ⅳ型分泌系统cagX基因缺失株的构建与鉴定 被引量:1
6
作者 高小焕 邵世和 +1 位作者 段秀杰 谢立苹 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2011年第2期117-121,共5页
目的:构建幽门螺杆菌(H.pylori,Hp)IV型分泌系统cagX基因缺失株,为研究cagX基因的功能奠定基础。方法:利用基因同源重组原理,设计cagX基因上下游同源臂片段,应用PCR扩增目的基因片段,TA克隆后酶切鉴定,将纯化后的同源臂片段连接到含卡... 目的:构建幽门螺杆菌(H.pylori,Hp)IV型分泌系统cagX基因缺失株,为研究cagX基因的功能奠定基础。方法:利用基因同源重组原理,设计cagX基因上下游同源臂片段,应用PCR扩增目的基因片段,TA克隆后酶切鉴定,将纯化后的同源臂片段连接到含卡那霉素抗性基因的载体pBluescript SKⅡ(-),即cagX基因自杀质粒pBlueKM40-ΔcagX;自杀质粒电击转化HpNCTC 11637,通过卡那霉素筛选基因缺失株,后经PCR和DNA测序鉴定。结果:构建成功了幽门螺杆菌cagX基因自杀质粒,并转化至HpNCTC 11637内。结论:成功获得了幽门螺杆菌cagX基因缺失株Hp11637-ΔcagX。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 IV型分泌系统 同源重组 基因缺失
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幽门螺杆菌Cag致病岛hp0540基因的克隆表达及其多克隆抗体的制备
7
作者 韩军 邵世和 +3 位作者 谢立苹 黄世腾 田树伟 黄河 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2010年第4期282-285,291,共5页
目的:构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)Cag致病岛(Cag-pathogenicity island,Cag-PAI)编码的hp0540基因的原核表达系统,并制备其多克隆抗体。方法:应用PCR技术从Hp11637基因组DNA中扩增hp0540基因片段,克隆至pMD18-2T载体后,进... 目的:构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)Cag致病岛(Cag-pathogenicity island,Cag-PAI)编码的hp0540基因的原核表达系统,并制备其多克隆抗体。方法:应用PCR技术从Hp11637基因组DNA中扩增hp0540基因片段,克隆至pMD18-2T载体后,进行序列测定,并对其序列进行生物信息学分析;构建pET-28a-hp0540原核表达载体,转化表达宿主菌BL21DE3;经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE法鉴定目的蛋白的表达,并以Ni2+-NTA柱分离纯化目的蛋白;将纯化蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体并测定抗体效价。结果:成功克隆了hp0540基因,全长1 086 bp,编码361个氨基酸,与基因库公布的其他Hp菌株基因序列的核苷酸同源性为98%。工程菌诱导后SDS-PAGE显示新生表达蛋白带,相对分子质量约为39 000,经Ni2+-NTA柱纯化后可获得重组蛋白,重组蛋白免疫新西兰大白兔后获得效价为1∶160 000的多克隆抗体。结论:成功构建了hp0540基因的原核表达系统并制备了其多克隆抗体,为研究该基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 CAG致病岛 CagI 多克隆抗体
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幽门螺杆菌感染胃黏膜病变中组织硒含量与p16、PCNA关系的研究 被引量:5
8
作者 邵世和 李凡 +2 位作者 刘继斌 段秀杰 谢立苹 《广东微量元素科学》 CAS 2004年第1期19-24,共6页
为研究幽门螺杆菌感染的胃黏膜病变中组织硒含量与p1 6、PCNA表达相互关系 ,应用免疫组化染色法检测了 1 1 4例经胃镜及病理诊断证实的五种胃黏膜病变标本中p1 6及PCNA的表达 ;应用快速脲酶试验结合Warthin -Starry银染色确定了HP感染 ... 为研究幽门螺杆菌感染的胃黏膜病变中组织硒含量与p1 6、PCNA表达相互关系 ,应用免疫组化染色法检测了 1 1 4例经胃镜及病理诊断证实的五种胃黏膜病变标本中p1 6及PCNA的表达 ;应用快速脲酶试验结合Warthin -Starry银染色确定了HP感染 ;应用MK光纤压力密闭微波溶解炉及RF -1 5 0 1荧光分光光度计检测了组织硒含量。结果表明 ,各种HP感染的胃黏膜病变中 ,组织硒含量除DYS与GC无显著性差异外 (P >0 0 5 ) ,其余各组均有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,在CSG中升高明显 ,并随病变加重相对降低 (P <0 0 5 ) ,但高于正常组 (P <0 0 5 )。硒含量与PCNA表达呈负相关 (rs=-0 9898,P <0 0 5 ) ,而与p1 6表达呈正相关 (rs=0 91 4 3 ,P <0 0 5 )。p1 6表达HP阳性标本明显低于HP阴性标本 (P <0 0 1 ) ;PCNA表达HP阳性标本明显高于HP阴性标本(P <0 0 1 )。p1 6表达与PCNA表达呈负相关 (rs=-0 60 75 ,P <0 0 1 )。提示HP感染直接或间接地促进PCNA的表达 ,抑制p1 6的表达。HP感染的胃黏膜组织中硒含量明显升高 ,可能不仅是保护性的对抗活性氧增加的反应 。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 P16 PCNA
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SELEX 技术原理及应用进展 被引量:3
9
作者 董俊红 谢立苹 王振明 《潍坊医学院学报》 2005年第5期358-360,共3页
SELEX技术即指数富集配基的系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponcntial enrichment),它应用大容量的随机寡核苷酸文库并结合体外PCR扩增技术.
关键词 SELEX技术 适体 寡核苷酸
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腹水中分离出1株反硝化产碱菌
10
作者 王振明 董俊红 +3 位作者 谢立苹 安玉亮 苏芬 徐淼 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期780-780,共1页
关键词 腹水 反硝化产碱菌
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亚硒酸钠诱导结肠癌细胞凋亡的实验研究
11
作者 赵德生 谢立苹 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期352-353,共2页
目的 探讨硒对体外培养的人结肠癌细胞凋亡作用。方法 将不同浓度的亚硒酸钠 (Na2 Se O3)分别加入到接种有体外培养的人结肠癌细胞悬液的培养瓶中 ,于不同时间分别对各组进行流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果  Na2 Se O3可诱导结肠癌... 目的 探讨硒对体外培养的人结肠癌细胞凋亡作用。方法 将不同浓度的亚硒酸钠 (Na2 Se O3)分别加入到接种有体外培养的人结肠癌细胞悬液的培养瓶中 ,于不同时间分别对各组进行流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果  Na2 Se O3可诱导结肠癌细胞凋亡 ,且该作用与 Na2 Se O3浓度和作用时间有关。结论  Na2 Se O3有诱导细胞凋亡作用。该作用与时间有关 ,亦与 Na2 Se O3作用剂量有关 ,提示硒可能通过诱导肿瘤细胞凋亡而达到抗肿瘤的作用。 展开更多
关键词 亚硒酸钠 结肠癌 癌细胞 细胞凋亡 实验
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泌尿生殖道感染支原体的分布及耐药性分析 被引量:1
12
作者 吴振安 魏娜 谢立苹 《智慧健康》 2021年第4期122-124,共3页
目的了解支原体在泌尿生殖道感染中的分布状况及其耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供参考。方法采用支原体培养、鉴定、药敏试剂盒,对2018年-2019年1680例患者泌尿生殖道标本支原体培养、鉴定和药敏试验进行回顾性统计分析。结果 1680... 目的了解支原体在泌尿生殖道感染中的分布状况及其耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供参考。方法采用支原体培养、鉴定、药敏试剂盒,对2018年-2019年1680例患者泌尿生殖道标本支原体培养、鉴定和药敏试验进行回顾性统计分析。结果 1680份标本中支原体培养阳性564例,阳性率为33.57%,其中解脲脲原体阳性445例,占78.90%;人型支原体阳性32例,占5.67%;解脲脲原体+人型支原体阳性87例,占15.43%。女性和男性患者标本阳性率分别为34.49%和24.34%。解脲脲原体、人型支原体对美满霉素、强力霉素、交沙霉素的耐药率均低于15%;对诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、大观霉素和司帕沙星的耐药率均高于75%。结论泌尿生殖道支原体感染以解脲脲原体为主,两种支原体对各种抗菌药物的耐药性不同,临床医生应重视支原体的培养鉴定和药敏试验,根据药敏试验结果合理选用抗生素。经验用药建议选择美满霉素、强力霉素或交沙霉素。 展开更多
关键词 泌尿生殖道感染 支原体 耐药性
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95例逃跑病人原因分析与护理对策 被引量:11
13
作者 张俊菊 谢立苹 《实用护理杂志》 1994年第12期5-6,共2页
95例逃跑病人原因分析与护理对策吉林省洮南神经精神病医院(137100)张俊菊,谢立苹精神病人逃跑是专科护理常易发生的问题,也是病房管理中的重要内容。本文从护理角度对我院从1985—1993年6月5165例住院病人中... 95例逃跑病人原因分析与护理对策吉林省洮南神经精神病医院(137100)张俊菊,谢立苹精神病人逃跑是专科护理常易发生的问题,也是病房管理中的重要内容。本文从护理角度对我院从1985—1993年6月5165例住院病人中,逃跑病人95例,原因分析及护理对... 展开更多
关键词 精神病 护理
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异源表达的幽门螺杆菌cag4蛋白有溶菌糖基转移酶活性
14
作者 王文凯 钟桥 +1 位作者 谢立苹 邵世和 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期630-636,共7页
【目的】构建融合基因原核表达载体pET-28a-cag4,并表达重组融合蛋白cag4,分析重组融合蛋白的酶活性,为新型抗生素(或是抗菌药物)的研发提供作用靶位。【方法】本研究利用PCR技术从幽门螺杆菌NCTC11637中克隆了cag4基因;经T-A克隆,酶切... 【目的】构建融合基因原核表达载体pET-28a-cag4,并表达重组融合蛋白cag4,分析重组融合蛋白的酶活性,为新型抗生素(或是抗菌药物)的研发提供作用靶位。【方法】本研究利用PCR技术从幽门螺杆菌NCTC11637中克隆了cag4基因;经T-A克隆,酶切鉴定,构建了原核表达载体pET-28a-cag4;经测序鉴定正确后,转化进入大肠埃希菌BL21(DE3)进行异源表达。利用IPTG体外诱导后,经SDS-PAGE和WesternBolt鉴定目的蛋白表达后,采用Ni2+-NTA柱在变性条件下纯化目的蛋白,并对重组蛋白进行透析复性处理。将SDS煮沸法获得的溶壁微球菌肽聚糖掺入SDS-PAGE作为底物,进行酶谱分析。【结果】在大肠埃希菌BL21(DE3)中获得高效表达的重组蛋白;经SDS-PAGE和Western Bolt鉴定表达后,采用Ni2+-NTA柱在变性条件下纯化,并进行透析复性处理。将SDS煮沸法获得的溶壁微球菌肽聚糖掺入SDS-PAGE作为底物,进行酶谱分析,表明目的蛋白具有明显的肽聚糖水解活性;通过监测浊度下降速率,比较其在不同pH条件下活性的变化,即ΔA/(min.mg protein),结果表明,幽门螺杆菌cag4蛋白具有溶菌糖基转移酶活性。【结论】幽门螺杆菌cag4蛋白具有溶菌糖基转移酶活性。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 cag4蛋白 IV型分泌系统 异源表达 酶谱分析
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