mecA基因PCR扩增法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 被引量：17

1

作者 谢闺娥 徐霞 杨能 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2005年第6期438-438,441,共2页

目的应用m ecA基因PCR扩增法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(m eth ic illin res istan tstaphy lococcus aureus,M RSA)。方法临床分离的70株金黄色葡萄球菌,应用m ecA基因PCR扩增法鉴定M RSA,并与苯唑西林纸片扩散法进行比较。结果70... 目的应用m ecA基因PCR扩增法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(m eth ic illin res istan tstaphy lococcus aureus,M RSA)。方法临床分离的70株金黄色葡萄球菌,应用m ecA基因PCR扩增法鉴定M RSA,并与苯唑西林纸片扩散法进行比较。结果70株金黄色葡萄球菌用PCR扩增法和纸片扩散法有6株鉴定有差异,4株m ecA基因阳性而纸片扩散法鉴定为敏感,1株m ecA基因阳性纸片扩散法鉴定为临界耐药,1株m ecA基因阴性却表现为苯唑西林耐药,2种方法符合率为91.43%。结论m ecA基因PCR扩增法可以准确、快速判定M RSA,特别是对隐匿型或低水平耐药菌株的检出有重要的价值。 展开更多

关键词 MECA基因 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 PCR

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雷公藤红素对紫杉醇耐药乳腺癌细胞生长的抑制作用 被引量：4

2

作者 谢闺娥 杜晶春 徐霞 《广东药学院学报》 CAS 2016年第3期335-338,共4页

目的研究雷公藤红素对紫杉醇耐药乳腺癌细胞生长的作用及其机制。方法用MTT法检测雷公藤红素对紫杉醇耐药MCF-7/TAX细胞生长的影响;Annexin V-FITC/PI染色检测雷公藤红素对MCF-7/TAX凋亡的诱导作用;Caspase酶活性测定分析雷公藤红素作用... 目的研究雷公藤红素对紫杉醇耐药乳腺癌细胞生长的作用及其机制。方法用MTT法检测雷公藤红素对紫杉醇耐药MCF-7/TAX细胞生长的影响;Annexin V-FITC/PI染色检测雷公藤红素对MCF-7/TAX凋亡的诱导作用;Caspase酶活性测定分析雷公藤红素作用后,MCF-7/TAX细胞中Caspase-8、-9活化程度。结果 MCF-7/TAX对紫杉醇耐药指数达19.39;而雷公藤红素对MCF-7/TAX细胞的生长有高效抑制作用,且呈现明显的剂量依赖性,对其作用48 h的IC50为0.92μmol/L,MCF-7/TAX对雷公藤红素的敏感性高于MCF-7,耐药指数仅为0.77。雷公藤红素作用后,Annexin V染色阳性的MCF-7/TAX细胞较对照明显升高。Caspase酶活性测定结果显示,雷公藤红素作用24 h后,MCF-7/TAX细胞中Caspase-8、-9酶活性均显著升高。结论雷公藤红素能同时激活内外源性凋亡途径,诱导MCF-7/TAX细胞凋亡的发生,从而高效抑制紫杉醇耐药MCF-7/TAX乳腺癌细胞的生长。 展开更多

关键词 紫杉醇耐药 雷公藤红素 MCF-7/TAX 凋亡

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扁蒴藤素对紫杉醇耐药乳腺癌细胞生长的抑制作用 被引量：3

3

作者 谢闺娥 杜晶春 +1 位作者 董桂兰 徐霞 《贵阳医学院学报》 CAS 2016年第9期1029-1032,共4页

目的:研究扁蒴藤素对紫杉醇耐药乳腺癌细胞MCF-7/TAX生长的作用。方法:以乳腺癌细胞株MCF-7为对照,同时制作紫杉醇耐药乳腺癌细胞MCF-7/TAX;在两组细胞中分别给与7种浓度(0.25、0.5、1、2.5、5、10和20μmol/L)扁蒴藤素或紫杉醇培养48 h... 目的:研究扁蒴藤素对紫杉醇耐药乳腺癌细胞MCF-7/TAX生长的作用。方法:以乳腺癌细胞株MCF-7为对照,同时制作紫杉醇耐药乳腺癌细胞MCF-7/TAX;在两组细胞中分别给与7种浓度(0.25、0.5、1、2.5、5、10和20μmol/L)扁蒴藤素或紫杉醇培养48 h,用MTT法检测药物对MCF-7和MCF-7/TAX细胞作用的半数抑制浓度(IC50)值,并计算MCF-7/TAX细胞对紫杉醇或扁蒴藤素的耐药指数(RI);同时用Annexin VFITC/PI染色观察扁蒴藤素作用后MCF-7/TAX凋亡细胞比例。结果:MCF-7/TAX对紫杉醇RI达19.39,而扁蒴藤素对MCF-7/TAX细胞的生长有高效抑制作用,且呈现明显的剂量依赖性,对其作用48 h的IC50为0.52μmol/L,MCF-7/TAX对扁蒴藤素的RI仅为0.88;扁蒴藤素作用后,Annexin V染色阳性的MCF-7/TAX细胞比例较对照明显升高。结论:扁蒴藤素能抵抗紫杉醇耐药乳腺癌细胞的耐药性,激活MCF-7/TAX细胞凋亡,对其生长发挥高效抑制作用。 展开更多

关键词 紫杉醇耐药 扁蒴藤素 MCF-7/TAX 凋亡

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雷公藤红素对阿霉素耐药乳腺癌细胞生长的抑制作用研究 被引量：2

4

作者 谢闺娥 杜晶春 徐霞 《广州医药》 2017年第4期42-45,共4页

目的研究雷公藤红素对人阿霉素耐药MCF-7/ADR乳腺癌细胞生长的作用。方法采用MTT试验检测MCF-7/ADR细胞对阿霉素的耐药情况以及雷公藤红素对MCF-7/ADR细胞生长的影响;采用Annexin VFITC/PI双染试验分析雷公藤红素对MCF-7/ADR耐药细胞凋... 目的研究雷公藤红素对人阿霉素耐药MCF-7/ADR乳腺癌细胞生长的作用。方法采用MTT试验检测MCF-7/ADR细胞对阿霉素的耐药情况以及雷公藤红素对MCF-7/ADR细胞生长的影响;采用Annexin VFITC/PI双染试验分析雷公藤红素对MCF-7/ADR耐药细胞凋亡的诱导作用;应用流式细胞周期分析检测雷公藤红素对MCF-7/ADR耐药细胞周期的影响。结果 MCF-7/ADR细胞对阿霉素耐药指数达14.54;而雷公藤红素能有效抑制阿霉素耐药细胞MCF-7/ADR的生长,并呈现浓度依赖性,作用48 h的IC50是1.04μmol/L,MCF-7/ADR对雷公藤红素的耐药指数仅为0.87。2μmol/L雷公藤红素作用8 h后,Annexin V-FITC染色阳性的MCF-7/ADR细胞比例较对照显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。在1μmol/L雷公藤红素作用24 h后,G1期细胞比例由对照(59.22±3.78)%升高至(77.44±4.21)%,而S期细胞比例由对照(37.51±2.91)%降至(19.65±2.25)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论雷公藤红素能激活MCF-7/ADR细胞凋亡的发生,并诱导MCF-7/ADR发生G1/S细胞周期阻滞,从而对阿霉素耐药MCF-7/ADR细胞的生长发挥高效抑制作用。 展开更多

关键词 阿霉素耐药 雷公藤红素 MCF-7/ADR 凋亡 细胞周期

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PBP2a的分子生物学特性及其临床应用研究进展 被引量：3

5

作者 谢闺娥 徐霞 《国外医学（临床生物化学与检验学分册）》 2005年第5期293-295,共3页

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌是医院感染的重要病原菌之一,对常用的包括甲氧西林在内的多种抗生素广泛耐药,其主要耐药机制是mecA基因编码低亲和力的青霉素结合蛋白2a(PBP2a)蛋白所致。现就PBP2a的分子生物学特性及其在临床诊断和防治等临... 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌是医院感染的重要病原菌之一,对常用的包括甲氧西林在内的多种抗生素广泛耐药,其主要耐药机制是mecA基因编码低亲和力的青霉素结合蛋白2a(PBP2a)蛋白所致。现就PBP2a的分子生物学特性及其在临床诊断和防治等临床应用方面的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 PBP2A 分子生物学特性 临床应用 研究进展 医院感染 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 MECA基因

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SNS-032对紫杉醇耐药乳腺癌细胞生长的抑制作用研究

6

作者 谢闺娥 杜晶春 +1 位作者 董桂兰 徐霞 《海南医学》 CAS 2017年第3期345-347,共3页

目的研究细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂SNS-032对人紫杉醇耐药MCF-7/TAX乳腺癌细胞生长的作用。方法采用MTT试验检测MCF-7/TAX细胞对紫杉醇的耐药情况以及SNS-032对紫杉醇耐药MCF-7/TAX细胞生长的影响;采用Annexin V-FITC/PI双染试验检... 目的研究细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂SNS-032对人紫杉醇耐药MCF-7/TAX乳腺癌细胞生长的作用。方法采用MTT试验检测MCF-7/TAX细胞对紫杉醇的耐药情况以及SNS-032对紫杉醇耐药MCF-7/TAX细胞生长的影响;采用Annexin V-FITC/PI双染试验检测SNS-032对MCF-7/TAX耐药细胞凋亡的诱导作用。结果 MCF-7/TAX细胞对紫杉醇耐药指数达19.39;而SNS-032能显著抑制MCF-7/TAX耐药细胞的增殖,且具有明显的浓度依赖性,对其作用48 h的IC50为164.5 nmol/L,MCF-7/TAX对SNS-032的耐药指数仅为0.89。SNS-032作用后,Annexin V染色阳性的MCF-7/TAX细胞比例较对照明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 SNS-032能激活MCF-7/TAX耐药细胞凋亡的发生,从而对紫杉醇耐药MCF-7/TAX细胞的生长发挥高效抑制作用。 展开更多

关键词 紫杉醇耐药 SNS-032 MCF-7/TAX 凋亡

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JNJ-7706621对阿霉素耐药乳腺癌细胞生长的抑制作用研究

7

作者 谢闺娥 杜晶春 徐霞 《临床和实验医学杂志》 2017年第11期1061-1064,共4页

目的研究JNJ-7706621对人阿霉素耐药MCF-7/ADR乳腺癌细胞生长的作用。方法采用MTT试验检测JNJ-7706621对MCF-7/ADR耐药细胞生长的影响;采用TUNEL染色试验分析JNJ-7706621对MCF-7/ADR耐药细胞凋亡的激活作用;Caspase酶活性检测分析JNJ-77... 目的研究JNJ-7706621对人阿霉素耐药MCF-7/ADR乳腺癌细胞生长的作用。方法采用MTT试验检测JNJ-7706621对MCF-7/ADR耐药细胞生长的影响;采用TUNEL染色试验分析JNJ-7706621对MCF-7/ADR耐药细胞凋亡的激活作用;Caspase酶活性检测分析JNJ-7706621处理后,MCF-7/ADR细胞中Caspase-8、Caspase-9活化程度;应用流式细胞周期分析检测JNJ-7706621对MCF-7/ADR耐药细胞周期的影响。结果 JNJ-7706621能有效抑制阿霉素耐药细胞MCF-7/ADR的生长,并呈现明显的浓度依赖性,作用48 h的IC50仅为0.83μmol/L。2μmol/L JNJ-7706621作用24 h后,TUNEL染色阳性的MCF-7/ADR细胞比率较对照组显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);MCF-7/ADR细胞中Caspase-8、-9酶活性均显著升高,差异亦具有统计学意义(P<0.05)。在1μmol/L JNJ-7706621作用24 h后,G2/M期细胞比率由对照(7.1±1.3)%升高至(23.8±3.1)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 JNJ-7706621能同时激活内外源性凋亡途径,诱导MCF-7/ADR细胞凋亡的发生,并将MCF-7/ADR细胞周期阻滞在G2/M期,从而对阿霉素耐药MCF-7/ADR细胞的生长发挥有效抑制作用。 展开更多

关键词 乳腺癌细胞 阿霉素耐药 JNJ-7706621 MCF-7/ADR 凋亡 细胞周期

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6.0GyX射线辐照所致BALB/c小鼠造血系统损伤的动态检测 被引量：6

8

作者 金宇林 吴洁莹 +4 位作者 陆琰 陈劲松 李发涛 谢闺娥 吴韶清 《中国医药导报》 CAS 2017年第13期13-16,共4页

目的观察6.0 Gy X射线辐照对BALB/c小鼠造血系统的影响。方法将80只BALB/c小鼠随机分为对照组和辐照组,每组各40只。用直线加速器X射线对辐照组BALB/c小鼠进行一次性全身6.0 Gy X射线照射。照射后,每天记录小鼠体重和状况。辐照前和辐照... 目的观察6.0 Gy X射线辐照对BALB/c小鼠造血系统的影响。方法将80只BALB/c小鼠随机分为对照组和辐照组,每组各40只。用直线加速器X射线对辐照组BALB/c小鼠进行一次性全身6.0 Gy X射线照射。照射后,每天记录小鼠体重和状况。辐照前和辐照后1、3、5、7、14、21、28 d检测小鼠外周血血象和骨髓有核细胞数的变化。结果与对照组相比,辐照组小鼠辐照后体重下降(P<0.05),6 d后缓慢上升;外周血象中白细胞、红细胞、血小板和血红蛋白含量均下降(P<0.05),分别于照射后5、14、14、14 d下降至最低值,然后回升;骨髓有核细胞数急剧下降(P<0.05),于照射后5 d下降至最低值,而后逐渐上升。结论 6.0 Gy X射线辐照可引起BALB/c小鼠造血系统损伤,其机体有一定的自我修复机制。 展开更多

关键词 X射线 BALB/C小鼠 外周血 骨髓有核细胞

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抗MRSA-PBP2a转肽酶区蛋白单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用 被引量：3

9

作者 徐霞 唐晓华 谢闺娥 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期552-555,共4页

目的： 制备和鉴定抗MRSA-PBP2a转肽酶区蛋白单克隆抗体（mAb）, 初步建立检测PBP2a的乳胶凝集方法.方法： 以基因工程重组PBP2a转肽酶区蛋白为抗原, 免疫BALB/c小鼠, 制备鼠源性mAb, 间接ELISA鉴定IgG亚类、腹水效价及亲和常数, Wester... 目的： 制备和鉴定抗MRSA-PBP2a转肽酶区蛋白单克隆抗体（mAb）, 初步建立检测PBP2a的乳胶凝集方法.方法： 以基因工程重组PBP2a转肽酶区蛋白为抗原, 免疫BALB/c小鼠, 制备鼠源性mAb, 间接ELISA鉴定IgG亚类、腹水效价及亲和常数, Western blot检测mAb的特异性, 用所得mAb致敏聚苯乙烯乳胶, 建立检测PBP2a的乳胶凝集方法.结果： 筛选出2 株能稳定分泌抗PBP2a mAb的杂交瘤细胞株F1和F2, 免疫球蛋白亚类均为IgG1类; 腹水效价为0.5×10^6 ～1×10^6, 亲和力常数分别为1.57×10^8 M^-1和5.43×10^9 M^-1.Western blot显示F1、F2抗体均能有效识别重组PBP2a转肽酶区蛋白及MRSA临床分离株中的天然PBP2a, 用 mAb F2建立了乳胶凝集法, 敏感性达1 mg/L.结论： 获得2株特异性好、亲和力高、能稳定分泌抗PBP2a mAb的杂交瘤细胞株, 为研制MRSA快速鉴定试剂盒奠定了良好的基础. 展开更多

关键词 耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌 青霉素结合蛋白2A 单克隆抗体 乳胶凝集法

原文传递

人胎盘绒毛膜间充质干细胞分离培养:组织块法的优化 被引量：1

10

作者 金宇林 吴洁莹 +9 位作者 陆琰 陈劲松 李发涛 唐婕 刘东 梁绮华 李焱 汤雪薇 谢闺娥 吴韶清 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第21期3388-3393,共6页

背景:关于人胎盘绒毛膜间充质干细胞分离培养方法的研究很多,但是如何简便、快捷获得大量原代培养间充质干细胞的问题尚未解决。目的:探讨优化人胎盘绒毛膜间充质干细胞体外分离培养组织块法的最佳方法。方法:无菌条件下,取正常足月剖... 背景:关于人胎盘绒毛膜间充质干细胞分离培养方法的研究很多,但是如何简便、快捷获得大量原代培养间充质干细胞的问题尚未解决。目的:探讨优化人胎盘绒毛膜间充质干细胞体外分离培养组织块法的最佳方法。方法:无菌条件下,取正常足月剖宫产胎盘绒毛膜,用匀浆器处理组织块,采用组织块法贴壁分离培养人胎盘绒毛膜间充质干细胞,经初次培养的组织块进行再次接种培养。结果与结论:用电动匀浆器处理人胎盘绒毛膜省时省力,组织分散度和去除红细胞效果好。初次培养和再次培养获得细胞的平均时间分别为(17.73±1.14)d和(10.03±1.30)d。每个Φ100 mm培养皿获得的原代细胞分别为(6.97±0.98)×10~5个和(13.82±1.44)×10~5个。获得的贴壁细胞呈典型的成纤维细胞形态,呈平行或漩涡状生长,高表达CD90、CD73、CD105,而CD45、CD34、CD14、CD19、HLA-DR为阴性。细胞可向成骨、成脂方向诱导分化。结果表明优化的方法能够简便、快捷地处理人胎盘绒毛膜组织,获得大量的原代间充质干细胞。 展开更多

关键词 胎盘 绒毛膜 间质干细胞 细胞培养技术 组织工程 干细胞 培养 间充质干细胞 细胞培养 组织块法 优化 匀浆器 国家自然科学基金

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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a转肽酶区的克隆表达及纯化鉴定 被引量：6

11

作者 徐霞 谢闺娥 杜晶春 《生物技术通讯》 CAS 2006年第4期543-545,共3页

目的:对编码耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)青霉素结合蛋白2a(PBP2a)转肽酶区的mecA基因片段进行克隆、表达、纯化及鉴定。方法:根据基因文库登录的mecA基因的编码序列,设计合成了一对寡核苷酸引物,应用PCR技术从MRSA基因组DNA中扩增... 目的:对编码耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)青霉素结合蛋白2a(PBP2a)转肽酶区的mecA基因片段进行克隆、表达、纯化及鉴定。方法:根据基因文库登录的mecA基因的编码序列,设计合成了一对寡核苷酸引物,应用PCR技术从MRSA基因组DNA中扩增获得编码PBP2a转肽酶区的DNA片段,将此目的基因片段克隆至pET-His载体,经酶切鉴定、测序正确后,转化E.coliBL21(DE3)plysS;用IPTG进行诱导表达后,利用Ni2+亲和层析技术从表达蛋白中纯化目的蛋白;对表达的蛋白以MRSA胶乳凝集试剂盒进行鉴定。结果:成功构建了PBP2a转肽酶区原核表达载体,并获得了高效表达,制备了高纯度的目的蛋白。结论:获得了高纯度的PBP2a转肽酶区蛋白,为其进一步研究奠定了基础。 展开更多

关键词 青霉素结合蛋白2A 转肽酶区 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 MECA基因

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PBP2a多克隆抗体制备及其乳胶凝集检测法的建立 被引量：1

12

作者 唐晓华 谢闺娥 +1 位作者 黄亮 徐霞 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2007年第1期11-13,共3页

目的制备兔抗青霉素结合蛋白2a(penicillin binding protein 2a,PBP2a)抗体,建立检测PBP2a的乳胶凝集法。方法以重组PBP2a转肽酶区蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,ELISA和Western blot法检测所制备的抗血清效价和特异性,用纯化的多抗建立... 目的制备兔抗青霉素结合蛋白2a(penicillin binding protein 2a,PBP2a)抗体,建立检测PBP2a的乳胶凝集法。方法以重组PBP2a转肽酶区蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,ELISA和Western blot法检测所制备的抗血清效价和特异性,用纯化的多抗建立乳胶凝集法。结果纯化的重组蛋白免疫家兔能有效地刺激特异性抗体的产生,抗血清的效价达1∶25 600,Western blot显示该抗体能有效识别原核表达及MRSA临床分离株中的PBP2a,建立了乳胶凝集法,敏感性及特异性良好。结论成功制备了抗PBP2a抗体血清,初步建立了检测PBP2a的乳胶凝集法,为有效制备高特异的单克隆抗体进而研制MRSA快速鉴定试剂盒奠定了良好的基础。 展开更多

关键词 青霉素结合蛋白2A 多克隆抗体 兔 胶乳凝集法

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兔抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ抗体的制备与鉴定 被引量：1

13

作者 杨能 徐霞 谢闺娥 《热带医学杂志》 CAS 2006年第1期20-22,共3页

目的制备兔抗人心肌肌钙蛋白I抗体并进行鉴定。方法用人工合成的cTnI蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体,ELISA及Western blot方法检测制备的抗血清效价和特异性。结果此次获得的抗血清 ELISA方法检测抗体滴度达到了1:16 000,检测cTnI的灵... 目的制备兔抗人心肌肌钙蛋白I抗体并进行鉴定。方法用人工合成的cTnI蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体,ELISA及Western blot方法检测制备的抗血清效价和特异性。结果此次获得的抗血清 ELISA方法检测抗体滴度达到了1:16 000,检测cTnI的灵敏度最低为10μg/L。Western blot检测表明该抗体可有效识别原核细胞表达及大鼠心脏组织提取物中存在的cTnI蛋白。结论应用该方法成功制备了人cTnI的多克隆抗体,为进一步研究cTnI的结构与功能打下基础,并为有效制备高特异性的单克隆抗体提供借鉴。 展开更多

关键词 CTNI 多克隆抗体 兔

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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a 382～443片段的原核表达及鉴定

14

作者 徐霞 谢闺娥 杨能 《国际检验医学杂志》 CAS 2006年第6期491-492,共2页

目的对编码耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）及青霉素结合蛋白2a（PBP2a）382～443位氨基酸的mecA基因片段进行克隆、表达及鉴定。方法根据基因文库登录的mecA基因的编码序列，针对编码PBP2a382～443位氨基酸的mecA基因片段，设计合成... 目的对编码耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）及青霉素结合蛋白2a（PBP2a）382～443位氨基酸的mecA基因片段进行克隆、表达及鉴定。方法根据基因文库登录的mecA基因的编码序列，针对编码PBP2a382～443位氨基酸的mecA基因片段，设计合成4条寡核苷酸片段，再将4条片段人工拼接成目的基因片段，然后克隆至PET-His载体，经酶切鉴定、测序正确后，转化E.coli BL21（DE3）plysS，用IPTG进行诱导表达，并对表达的蛋白以MRSA胶乳凝集试剂盒进行鉴定。结果构建了相应的PET-His克隆，经诱导表达和鉴定，证实成功表达出目的蛋白。结论成功表达出PBP2a382～443片段，为其进一步的纯化和应用奠定了基础。 展开更多

关键词 甲氧西林抗药性 葡萄球菌 金黄色 载体蛋白质类 基因表达

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基于TBL的文献阅读研讨课在临床免疫学检验教学中的实践 被引量：1

15

作者 沈娟 谢闺娥 +1 位作者 徐霞 杜晶春 《基础医学教育》 2023年第8期670-673,共4页

临床免疫学检验是现代检验学领域中更新最快、最具活力的学科之一。医学文献是传递免疫学领域新发现和新理论的重要载体,因此,文献阅读有助于本科生更新专业知识体系,同时也符合医学专业本科教育的基本标准。文章将团队合作学习(TBL)模... 临床免疫学检验是现代检验学领域中更新最快、最具活力的学科之一。医学文献是传递免疫学领域新发现和新理论的重要载体,因此,文献阅读有助于本科生更新专业知识体系,同时也符合医学专业本科教育的基本标准。文章将团队合作学习(TBL)模式引入文献阅读研讨课,结合翻转课堂的混合式教学,在医学本科临床免疫学检验课程教学中允以实践,丰富了课程内容和教学方式的同时,也为本科生后续的毕业论文设计、研究生学习以及临床研究提供了科研基础。 展开更多

关键词 临床免疫学检验 医学检验技术 教学改革 TBL 文献阅读研讨课

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PBL教学法在临床免疫学检验理论课教学中的应用 被引量：19

16

作者 谢闺娥 杜晶春 徐霞 《检验医学与临床》 CAS 2018年第3期429-430,433,共3页

为探索以问题为导向(PBL)教学法在临床免疫学检验理论课教学中的应用效果,在该学院医学检验本科生理论课教学中开展PBL教学,主要通过布置问题、小组讨论、查找资料、总结汇报等途径对免疫学检验的理论知识进行学习和综合应用,并对PBL教... 为探索以问题为导向(PBL)教学法在临床免疫学检验理论课教学中的应用效果,在该学院医学检验本科生理论课教学中开展PBL教学,主要通过布置问题、小组讨论、查找资料、总结汇报等途径对免疫学检验的理论知识进行学习和综合应用,并对PBL教学在免疫学检验理论课教学中存在的问题和不足进行分析。结果显示,PBL教学法不仅能更好地促进学生对课程的理解、掌握及应用,还能锻炼学生自主学习、解决问题、团队精神等综合能力,在临床免疫学检验理论课教学中可发挥积极作用。 展开更多

关键词 PBL教学法 临床免疫学检验 理论课教学

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建立靶向CXCR7基因的CRISPR/Cas9基因编辑系统及其应用

17

作者 吴洁莹 孙逊沙 +4 位作者 李发涛 陈劲松 谢闺娥 李焱 吴韶清 《广州医药》 2020年第5期16-20,共5页

目的构建靶向CXCR7基因的CRISPR/Cas9基因编辑系统,并应用于HEK 293T细胞系。方法设计两对靶向CXCR7基因的sgRNAs,分别插入PX458载体中,并转化DH5α大肠埃希菌。经菌液PCR和测序验证,挑选序列正确的sgRNA-CXCR7-PX458质粒,转染HEK 293T... 目的构建靶向CXCR7基因的CRISPR/Cas9基因编辑系统,并应用于HEK 293T细胞系。方法设计两对靶向CXCR7基因的sgRNAs,分别插入PX458载体中,并转化DH5α大肠埃希菌。经菌液PCR和测序验证,挑选序列正确的sgRNA-CXCR7-PX458质粒,转染HEK 293T细胞,用流式分选转染阳性细胞,提取其DNA,PCR扩增后测序验证。结果经测序验证,成功构建了靶向CXCR7基因的CRISPR/Cas9系统,转染HEK 293T细胞后,测序鉴定发现成功编辑CXCR7基因。结论成功构建了靶向CXCR7的sgRNA-CXCR7-PX458质粒,可在HEK 293T上成功编辑CXCR7基因,为进一步的功能研究奠定基础。 展开更多

关键词 CRISPR/Cas9技术 基因编辑 CXCR7

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多参数流式细胞术在儿童急性B淋巴细胞白血病微量残留病检测中的应用 被引量：6

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作者 吴韶清 廖灿 +4 位作者 谢闺娥 孙新 黄以宁 叶铁真 赖冬波 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第7期1184-1186,共3页

目的:探讨多参数流式细胞术在儿童急性B淋巴细胞白血病微量残留病检测中的应用价值。方法:基于初诊儿童急性B淋巴细胞白血病相关的免疫表型,采用四色流式细胞术、CD45/SSC和CD45/CD19双参数散点图设门,以CD19-APC/CD45-PerCP/CD10-FITC/... 目的:探讨多参数流式细胞术在儿童急性B淋巴细胞白血病微量残留病检测中的应用价值。方法:基于初诊儿童急性B淋巴细胞白血病相关的免疫表型,采用四色流式细胞术、CD45/SSC和CD45/CD19双参数散点图设门,以CD19-APC/CD45-PerCP/CD10-FITC/CD34-PE为主的抗体组合检测53例68份完全缓解后儿童急性B淋巴细胞白血病的微量残留病细胞。结果:53例初发儿童急性B淋巴细胞白血病检测出18种白血病相关的免疫表型,98.11%患儿存在CD45、CD10、CD19、CD34表达量的异常。12例存在0.012%～0.55%的白血病细胞,为微量残留病阳性,5例保持初诊时的免疫表型异常,7例发生免疫表型变化,占58.33%,只用CD19-APC/CD45-PerCP/CD10-FITC/CD34-PE一组抗体组合发现10例微量残留病阳性(83.33%)。结论:根据儿童急性B淋巴细胞白血病初诊白血病相关的免疫表型,用CD19/CD45/CD10/CD34为主的抗体组合能够有效监测微量残留病。 展开更多

关键词 伯基特淋巴瘤 急性B淋巴细胞白血病 微量残留病 流式细胞术 儿童

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不同来源菌株中8种mcr亚型基因筛查及阳性菌株药敏分析

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作者 赖斯华 黄欢欢 +3 位作者 谢闺娥 曾文创 杨羚 徐霞 《国际检验医学杂志》 CAS 2020年第24期2970-2973,共4页

目的了解8种mcr亚型基因在不同来源临床标本细菌中的分布及阳性菌株的药敏情况。方法采用PCR法分别对128株粪便标本分离的耐黏菌素菌株和130株临床感染标本分离的耐碳青霉烯菌株检测8种mcr亚型基因及mcr阳性菌株的碳青霉烯酶基因,对阳... 目的了解8种mcr亚型基因在不同来源临床标本细菌中的分布及阳性菌株的药敏情况。方法采用PCR法分别对128株粪便标本分离的耐黏菌素菌株和130株临床感染标本分离的耐碳青霉烯菌株检测8种mcr亚型基因及mcr阳性菌株的碳青霉烯酶基因,对阳性基因扩增产物进行测序分析;对mcr阳性的菌株进行质谱鉴定和药敏分析;质粒接合实验验证mcr基因的可转移性;采用PCR法对质粒进行分型和检测12种毒力基因的存在情况。结果128株耐黏菌素菌株均没有发现mcr2、mcr3、mcr4、mcr5、mcr6、mcr7、mcr8基因;130株耐碳青霉烯菌株中没有发现mcr2、mcr3、mcr4、mcr5、mcr6、mcr7、mcr8基因。该mcr1阳性株不携带碳青霉烯酶基因,药敏结果显示多重耐药性,对黏菌素为中介,对磺胺类、喹诺酮、碳青霉烯类、绝大部分头孢类药物等耐药,产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)。mcr1阳性菌株质粒接合成功;mcr1阳性菌株携带6种质粒型及3种毒力基因。结论在肠道中耐黏菌素菌株和临床上耐碳青霉烯分离株中mcr1存在一定的流行率,其余7型的mcr基因流行率尚低;为探究mcr基因与ESBLs和碳青霉烯酶之间的关系提供一定的临床依据。 展开更多

关键词 mcr基因 肠道菌群 多黏菌素耐药 碳青霉烯耐药

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雷公藤红素对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231的抑制作用研究 被引量：2

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作者 史晓娜 徐霞 谢闺娥 《中国医药导报》 CAS 2021年第1期18-21,F0004,共5页

目的研究雷公藤红素对MDA-MB-231乳腺癌细胞的抗肿瘤作用及其机制。方法用MTT比色法检测雷公藤红素对MDA-MB-231生长的影响,并计算其半数抑制浓度(IC50)。其机制研究的实验均分为两组:对照组和处理组。对照组细胞未经任何处理,处理组细... 目的研究雷公藤红素对MDA-MB-231乳腺癌细胞的抗肿瘤作用及其机制。方法用MTT比色法检测雷公藤红素对MDA-MB-231生长的影响,并计算其半数抑制浓度(IC50)。其机制研究的实验均分为两组:对照组和处理组。对照组细胞未经任何处理,处理组细胞用2.0μmol/L雷公藤红素作用后,Annexin V-FITC荧光染色及TUNEL染色法检测凋亡细胞比率;免疫印迹法分析p-Akt、Akt、Survivin和Bcl-xL的蛋白表达水平。结果雷公藤红素能抑制MDA-MB-231的生长,作用48 h的IC50为0.93μmol/L。处理组Annexin V-FITC染色阳性的凋亡细胞比率和TUNEL染色阳性细胞比率均高于对照组,差异均有统计学意义(均P <0.05)。与对照组比较,处理组p-Akt、Survivin和Bcl-xL的蛋白表达下降,差异均有统计学意义(均P <0.05);两组Akt总蛋白表达比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论雷公藤红素通过调节Akt信号通路诱导MDA-MB-231凋亡的发生,进而抑制MDA-MB-231细胞的生长。 展开更多

关键词 雷公藤红素 乳腺癌 凋亡 AKT信号通路

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