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RBMX通过下调PKM2抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移、侵袭和糖酵解 被引量：1
1
作者 颜秋霞 曾鹏 +9 位作者 黄树强 谭翠钰 周秀琴 乔静 赵晓英 冯玲 朱振杰 张国志 胡鸿 陈彩蓉 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期9-16,共8页
目的探讨X连锁RNA结合基序蛋白(RBMX)对膀胱癌细胞(1376细胞和UC-3细胞)的增殖、迁移、侵袭的影响以及其在糖酵解中的作用。方法采用慢病毒表达系统和siRNA干扰技术,分别构建RBMX过表达和敲低的膀胱癌细胞模型(1376细胞和UC-3细胞)。采... 目的探讨X连锁RNA结合基序蛋白(RBMX)对膀胱癌细胞(1376细胞和UC-3细胞)的增殖、迁移、侵袭的影响以及其在糖酵解中的作用。方法采用慢病毒表达系统和siRNA干扰技术,分别构建RBMX过表达和敲低的膀胱癌细胞模型(1376细胞和UC-3细胞)。采用RT-qPCR和Westernblotting分别在mRNA水平和蛋白水平上检测细胞模型是否构建成功。通过EdU增殖实验和克隆形成实验检测过表达和敲低RBMX后细胞的生长和集落形成能力,同时通过Transwell实验分析过表达和敲低RBMX后对细胞迁移、侵袭能力的影响;随后,采用Westernblotting检测过表达和敲低RBMX后糖酵解关键蛋白PKM1(M1型丙酮酸激酶)和PKM2(M2型丙酮酸激酶)的表达变化;最后,利用葡萄糖和乳酸检测试剂盒分析过表达和敲低RBMX对膀胱癌细胞糖酵解的影响。结果RT-qPCR和Westernblotting结果显示,过表达RBMX膀胱癌细胞的mRNA和蛋白表达水平显著高于阴性对照组(P<0.05),敲低RBMX膀胱癌细胞的mRNA和蛋白表达水平显著低于阴性对照组(P<0.05)。过表达RBMX明显抑制膀胱癌细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭,敲低RBMX则作用相反。Westernblotting实验结果显示,过表达RBMX使PKM1表达上升,PKM2表达下降,敲低RBMX则作用相反。葡萄糖消耗及乳酸生成实验表明,过表达RBMX均能抑制膀胱癌细胞葡萄糖消耗及乳酸生成(P<0.05),敲低RBMX均能促进膀胱癌细胞葡萄糖消耗及乳酸生成(P<0.05)。结论RBMX通过下调PKM2抑制膀胱癌的发生发展和糖酵解能力,有望成为膀胱癌诊断和治疗的潜在分子靶标。 展开更多
关键词 X连锁RNA结合基序蛋白 M2型丙酮酸激酶 膀胱癌 PKM2 糖酵解
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褪黑素抑制人血管平滑肌细胞的巨噬样表型转化 被引量：1
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作者 李双 谭翠钰 +1 位作者 侯连杰 赵国军 《中南医学科学杂志》 CAS 2023年第6期808-812,共5页
目的探究褪黑素在人血管平滑肌细胞(VSMC)巨噬样表型转化中的作用。方法VSMC分为对照组、胆固醇组(水溶性胆固醇)、褪黑素组(水溶性胆固醇+褪黑素)。水溶性胆固醇诱导VSMC建立巨噬样表型转化模型。定量PCR检测VSMC巨噬样表型相关基因表... 目的探究褪黑素在人血管平滑肌细胞(VSMC)巨噬样表型转化中的作用。方法VSMC分为对照组、胆固醇组(水溶性胆固醇)、褪黑素组(水溶性胆固醇+褪黑素)。水溶性胆固醇诱导VSMC建立巨噬样表型转化模型。定量PCR检测VSMC巨噬样表型相关基因表达水平;油红O染色观察各组VSMC脂质吞噬能力;Edu染色观察各组VSMC增殖情况;细胞划痕实验观察VSMC迁移情况。结果10 mg/L水溶性胆固醇显著降低平滑肌收缩表型相关标志基因α-actin和α-tropomyosin mRNA表达,并显著升高巨噬细胞相关标志基因CD68和MAC2 mRNA表达,诱导VSMC巨噬样表型转化。0.5μmol/L褪黑素可抑制水溶性胆固醇引起的VSMC脂质蓄积和细胞增殖,但对VSMC迁移无影响。结论褪黑素抑制VSMC的巨噬样表型转化。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 血管平滑肌细胞 巨噬样表型转化 褪黑素
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木质素抑制金黄色葡萄球菌所致皮肤感染的机制研究:生物膜形成核心基因筛选与验证
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作者 黄树强 谭翠钰 +6 位作者 陈淼琪 袁晓珺 李志宏 陈婉茹 李芝鸿 张彤彤 徐令清 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1656-1666,共11页
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)生物膜形成常导致严重的皮肤感染。木质素是抑制SA生长的有效药物,分析木质素对SA生物膜形成的抑制作用和分子机制有助于为临床治疗皮肤感染提供指导。本研究通过结晶紫染色实验证实木质素对S... 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)生物膜形成常导致严重的皮肤感染。木质素是抑制SA生长的有效药物,分析木质素对SA生物膜形成的抑制作用和分子机制有助于为临床治疗皮肤感染提供指导。本研究通过结晶紫染色实验证实木质素对SA生物膜的形成有抑制作用。随后,基于公共数据库获取木质素抑制SA生物膜形成的相关基因,结合机器学习与分子对接方法筛选核心基因。同时,设计人体皮肤SA生长密度预测模型,分析人体皮肤SA生长密度与生物膜形成相关基因表达水平的相关性。最后,通过实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)实验验证核心基因的表达水平。结果显示,木质素最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)为16 mg/mL。随着木质素浓度升高,SA生物膜产量逐步减少。purA、trpB、hla、uhpT、leuC等核心基因拥有优越的与木质素结合的性能。人体皮肤预测模型显示,核心基因中trpB、leuC、leuD、dnaI与SA的皮肤生长密度评分呈负相关,而uhpT、hla、purA、dnaN与评分呈正相关。RT-qPCR结果表明,与未经处理的对照菌株相比,木质素处理后的菌株中hla、purA和uhpT基因的转录水平显著下降,而leuC和trpB基因的转录水平显著上升,与数据分析结果一致。本研究揭示了木质素对SA生物膜形成的靶向抑制作用,并阐明了其在SA皮肤感染中的治疗价值。 展开更多
关键词 木质素 金黄色葡萄球菌 生物膜 皮肤感染 生物信息学
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