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Tet-off系统调控人IFNγ基因在小鼠骨髓基质细胞中的表达 被引量：1
1
作者 谭银多 吕跃 +2 位作者 徐海鹏 陈晓勤 李晓青 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1573-1576,共4页
背景与目的:Tet-off系统是一个高效、低毒、具有严密开关功能的基因调控系统,本研究构建质粒pTre-IFNγ,初步探讨Tet-off系统调控人干扰素γ(interferon-gamma,IFNγ)基因在小鼠骨髓基质细胞中的表达。方法:SacⅡ、XbaⅠ双酶切载体pTre... 背景与目的:Tet-off系统是一个高效、低毒、具有严密开关功能的基因调控系统,本研究构建质粒pTre-IFNγ,初步探讨Tet-off系统调控人干扰素γ(interferon-gamma,IFNγ)基因在小鼠骨髓基质细胞中的表达。方法:SacⅡ、XbaⅠ双酶切载体pTre及目的基因,T4连接酶连接,重组体经双酶切、测序鉴定;脂质体介导pTet-off及pTre-IFNγ共转染小鼠骨髓基质细胞;RT-PCR法检测IFNγmRNA,ELISA法检测分泌到培养液中的IFNγ蛋白,分析共转染后IFNγ的分泌规律、共转染后48h中不同浓度盐酸四环素对IFNγ蛋白分泌的影响及在共转染后第48h加入盐酸四环素在不同时间阶段对IFNγ蛋白分泌的影响。结果:双酶切及测序证实质粒pTre-IFNγ构建成功;共转染后48hRT-PCR检测到IFNγmRNA表达;ELISA法示IFNγ蛋白分泌持续6天,第3天的分泌高峰为每1×106个细胞(720.09±241.51)pg;共转染后48h中蛋白分泌量随四环素浓度增加逐渐减少,10～100ng/ml四环素存在时蛋白分泌接近零;第48h时添加盐酸四环素后8h即能明显抑制IFNγ蛋白表达,延长作用时间,抑制效应加重。结论:Tet-off系统能迅速而高效地下调人IFNγ基因在小鼠骨髓基质细胞中的表达。 展开更多
关键词 pTre—IFNγ 构建 小鼠骨髓基质细胞 tet—off 调控
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自体白血病树突状细胞疫苗体内回输安全性和增强免疫功能作用研究 被引量：4
2
作者 耿其荣 吕跃 +6 位作者 夏建川 樊慧杰 徐海鹏 蒋湘俐 李晓青 谭银多 陈晓勤 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2006年第8期568-571,共4页
目的:观察体外诱导的自体白血病树突状细胞(dendriticcell,DC)疫苗体内回输的安全性,及对体内免疫状态的影响。方法:20例白血病患者接受体外诱导的自体白血病树突状细胞疫苗的静脉回输。留取患者血清及外周血细胞分别行流式小球微阵列术... 目的:观察体外诱导的自体白血病树突状细胞(dendriticcell,DC)疫苗体内回输的安全性,及对体内免疫状态的影响。方法:20例白血病患者接受体外诱导的自体白血病树突状细胞疫苗的静脉回输。留取患者血清及外周血细胞分别行流式小球微阵列术(cytokinebeadarray,CBA)分析血清Th1/Th2因子IFNγ、IL2、IL4、IL6、IL10和TNFα浓度,流式细胞学(flowcytometricmethod,FCM)分析外周血T细胞亚群表达变化。结果:体外诱导的自体白血病DC疫苗回输后,临床未观察到明显的不良反应。第一次DC疫苗回输前及回输后24h比较,血清Th1/Th2因子浓度均升高,其中IL2、IL4、IL6和IFNγ升高显著,t值分别为2.576、2.033、2.777和2.053,P值分别为0.01、0.042、0.005和0.040。T亚群分析显示,CD4/CD8比值及NK比率升高,t值为2.040和1.988,P值为0.041和0.043。结论:自体白血病DC疫苗静脉回输安全可行,并可刺激患者体内的免疫反应,增强患者的免疫功能。 展开更多
关键词 白血病 树突状细胞 免疫治疗 细胞因子
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Ezrin蛋白在鼻咽癌组织的表达及其与预后的关系 被引量：4
3
作者 蒋湘俐 吕跃 +2 位作者 耿其荣 陈晓勤 谭银多 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期731-732,共2页
目的探讨Ezrin蛋白在鼻咽癌组织的表达及对患者预后的预测价值。方法采用免疫组化的方法检测Ezrin在105例鼻咽癌组织中的表达,包括随访过程中发生复发或转移51例,无转移54例。结果Ezrin强阳性及阳性表达的患者远处转移率显著高于Ezrin... 目的探讨Ezrin蛋白在鼻咽癌组织的表达及对患者预后的预测价值。方法采用免疫组化的方法检测Ezrin在105例鼻咽癌组织中的表达,包括随访过程中发生复发或转移51例,无转移54例。结果Ezrin强阳性及阳性表达的患者远处转移率显著高于Ezrin阴性患者的转移复发率(66.6%,52.8%和24.2%);随访中复发转移患者的组织Ezrin异常表达率亦明显高于无复发转移组(47.1%vs22.2%,P<0.01)。Ezrin异常表达的患者平均无进展生存时间较无表达患者明显缩短。结论Ezrin对预测长期随访的鼻咽癌患者转移复发及无进展生存时间方面存在一定价值。 展开更多
关键词 EZRIN蛋白 鼻咽肿瘤 免疫组织化学 转移
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吉非替尼与厄洛替尼二线治疗EGFR基因敏感突变晚期NSCLC患者的疗效观察 被引量：3
4
作者 林钦雄 张秋团 +2 位作者 郑锐年 谭银多 王在国 《中国癌症防治杂志》 CAS 2016年第3期171-173,共3页
目的探讨吉非替尼与厄洛替尼二线治疗EGFR基因敏感突变非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的临床疗效和安全性。方法选择我院2013年3月至2015年2月收治的一线化疗失败的EGFR基因敏感突变晚期NSCLC患者50例,按随机数字... 目的探讨吉非替尼与厄洛替尼二线治疗EGFR基因敏感突变非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的临床疗效和安全性。方法选择我院2013年3月至2015年2月收治的一线化疗失败的EGFR基因敏感突变晚期NSCLC患者50例,按随机数字表法平均分为两组,一组接受吉非替尼(吉非替尼组)250 mg/d治疗,另一组接受厄洛替尼(厄洛替尼组)150 mg/d治疗,观察无进展生存时间(PFS)、总有效率(ORR)、疾病控制率(DCR)和药物的毒副反应。结果吉非替尼组和厄洛替尼组的中位PFS、ORR、DCR分别为(6.5±1.2)个月、60%、92%和(7.2±0.9)个月、56%、88%,差异均无统计学意义(P>0.05)。吉非替尼组和厄洛替尼组的毒副反应发生率分别为32%和60%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论吉非替尼和厄洛替尼均能有效地二线治疗EGFR基因敏感突变晚期NSCLC患者,疗效相当,但吉非替尼治疗的毒副反应发生率明显低于厄洛替尼。 展开更多
关键词 肺肿瘤 吉非替尼 厄洛替尼 EGFR基因 突变位点
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Tet-off系统对小鼠骨髓基质细胞中人IFN-γ基因表达的调控作用 被引量：1
5
作者 秦鑫添 吕跃 +2 位作者 谭银多 陈晓勤 耿其荣 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第1期46-51,共6页
背景与目的:本实验室已成功构建了质粒pTre-IFN-γ,并证实四环素基因调控系统(Tet-off system)能在体外调控人γ-干扰素(interferon-gamma,IFN-γ)基因在小鼠骨髓基质细胞(marrow stromal cells,MSCs)中的表达。本实验进一步研究Tet-of... 背景与目的:本实验室已成功构建了质粒pTre-IFN-γ,并证实四环素基因调控系统(Tet-off system)能在体外调控人γ-干扰素(interferon-gamma,IFN-γ)基因在小鼠骨髓基质细胞(marrow stromal cells,MSCs)中的表达。本实验进一步研究Tet-off系统体外调控的可逆性,以及其对小鼠MSCs中人IFN-γ基因表达的调控作用。方法:脂质体介导pTet-off和pTre-IFN-γ质粒共转染小鼠MSCs。用ELISA法检测MSCs培养液中人IFN-γ蛋白的分泌量。把共转染后的MSCs回输给BALB/c裸小鼠,用实时荧光定量RT-PCR方法检测各组BALB/c裸小鼠脾组织中的IFN-γmRNA含量。结果:用ELISA法可检测到共转染后的MSCs培养液中有IFN-γ蛋白分泌,分泌高峰在前72h内;共转染后84h加入含300ng/mL盐酸四环素的培养液培养12h,每1×107个细胞的分泌量为(67.11±22.14)pg,无四环素处理组为(319.96±29.04)pg,两组相比差异有统计学意义(P<0.001);去除四环素后,IFN-γ蛋白分泌显著增加(P=0.032)。用实时荧光定量RT-PCR可检测到回输共转染MSCs的各组BALB/c裸小鼠脾组织中均有IFN-γmRNA转录,不用四环素处理组最高,达(1.5±0.7)×105copy·(100mg)-1,定期四环素处理组为(6.9±5.3)×102copy·(100mg)-1(P<0.001),接受1次四环素处理组表达量介于前两者之间,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:Tet-off系统在体外和体内都可以迅速、有效地调控人IFN-γ基因在小鼠MSCs中的表达,而且调控是可逆的。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 Tet-off系统 IFN-Γ基因 调控 小鼠
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Ad/IFNγ转染的骨髓基质细胞的体内抗白血病作用 被引量：1
6
作者 徐海鹏 吕跃 +3 位作者 李晓青 谭银多 耿其荣 陈晓勤 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期790-792,共3页
目的观察Ad/IFNγ转染的骨髓基质细胞在小鼠体内表达IFNγ的特征及规律,并观察其抗白血病作用。方法Ad/IFNγ(MOI=50,MOI感染复数)体外转染骨髓基质细胞,并通过RT-PCR,ELISA检测骨髓基质细胞表达IFNγ;将K562细胞成瘤的裸鼠随机分为3组... 目的观察Ad/IFNγ转染的骨髓基质细胞在小鼠体内表达IFNγ的特征及规律,并观察其抗白血病作用。方法Ad/IFNγ(MOI=50,MOI感染复数)体外转染骨髓基质细胞,并通过RT-PCR,ELISA检测骨髓基质细胞表达IFNγ;将K562细胞成瘤的裸鼠随机分为3组,分别给予静脉回输Ad/IFNγ转染的骨髓基质细胞、Ad/LacZ转染的骨髓基质细胞以及未转染的骨髓基质细胞,每只裸鼠的回输量为2×106个细胞,以RT-PCR,ELISA检测IFNγ在裸鼠体内表达的规律并观察其抑瘤效应及生存期。结果RT-PCR,ELISA于体外均能检测到IFNγ的表达。体内研究发现,Ad/IFNγ-骨髓基质细胞组在体内检测到的IFNγ主要分布在肝、脾、骨髓和肿瘤中,但在血液中未能检测到IFNγ的表达。并且,Ad/IFNγ-骨髓基质细胞于体内有明显的抑瘤效应,并能够延长其生存期。结论骨髓基质细胞能够将外源性IFNγ基因携带至肝、脾、骨髓等造血组织,也能携带至肿瘤组织,基因修饰的骨髓基质细胞为我们提供了治疗白血病的新的前景。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 Ad/IFNγ 基因治疗 白血病
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吉西它滨联合顺铂与紫杉醇联合顺铂一线治疗晚期鼻咽癌的对比研究 被引量：1
7
作者 谭银多 《当代医学》 2013年第30期140-141,共2页
目的观察吉西它滨联合顺铂与紫杉醇联合顺铂治疗晚期鼻咽癌的疗效及毒副反应。方法将55例晚期鼻咽癌患者(包括常规治疗后肿瘤未控和远处转移的鼻咽癌患者)随机分为观察组32例和对照组33例,分别给予吉西它滨联合顺铂及紫杉醇联合顺铂化疗... 目的观察吉西它滨联合顺铂与紫杉醇联合顺铂治疗晚期鼻咽癌的疗效及毒副反应。方法将55例晚期鼻咽癌患者(包括常规治疗后肿瘤未控和远处转移的鼻咽癌患者)随机分为观察组32例和对照组33例,分别给予吉西它滨联合顺铂及紫杉醇联合顺铂化疗,28 d为一个周期,两组均化疗2周期以上。结果与对照组相比,观察组治疗总有效率有所提高,但差异无统计学意义(P>0.05)。两组毒副反应主要表现为消化道反应、骨髓抑制、肝肾功能损害,经过对症治疗后均缓解,未出现由于不能耐受不良反应而放弃治疗的患者,两组不良反应比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论吉西他滨应用于晚期鼻咽癌的治疗具有广阔的应用前景,可以作为晚期鼻咽癌的一种新的化疗方案,值得临床进一步研究。 展开更多
关键词 吉西他滨 顺铂 紫杉醇 晚期鼻咽癌
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希罗达用于维持一线治疗后晚期鼻咽癌患者的临床疗效观察 被引量：1
8
作者 谭银多 李壮华 +1 位作者 黎焕君 潘学兵 《肿瘤药学》 CAS 2014年第6期460-463,共4页
目的：探讨希罗达在晚期鼻咽癌患者一线治疗后的维持治疗中的疗效。方法选取2003年1月至2008年12月我院收治的65例晚期鼻咽癌患者，以上患者均已进行4~6周期的一线治疗，采用随机数字表法将其分为观察组（45例）和对照组（20例）。观察... 目的：探讨希罗达在晚期鼻咽癌患者一线治疗后的维持治疗中的疗效。方法选取2003年1月至2008年12月我院收治的65例晚期鼻咽癌患者，以上患者均已进行4~6周期的一线治疗，采用随机数字表法将其分为观察组（45例）和对照组（20例）。观察组患者给予希罗达800~1000 mg·m-2治疗，2次/d，持续给药；对照组患者不采用希罗达治疗，观察和比较两组患者的总生存率（OS）、无进展生存率、总有效率与不良反应的发生情况。结果对照组无疾病进展生存期为7个月（95％置信区间为5.6~9.8个月），中位生存期为15.7个月（95％置信区间为13.2~18.4个月）；观察组无疾病进展生存期为12.5个月（95％置信区间为8.4~17.6个月），中位生存期为34.3个月（95％置信区间为25.6~43.4个月），均显著长于对照组（P〈0.05）。两组患者的OS均随治疗时间的延长而下降，观察组患者6~12个月、12~18个月的OS均显著高于对照组，差异均有统计学意义（P〈0.05）。观察组的总有效率为75.6％，显著高于对照组（50.0％），差异具有统计学意义（P〈0.05）。观察组患者手足综合征、胃肠道反应、肝肾功能异常的发生率均显著高于对照组，差异有统计学意义（P〈0.05）。结论晚期鼻咽癌患者在一线治疗结束后给予希罗达维持治疗，能够有效地延长患者的生存时间，提高疗效，但不良反应的发生率也升高，临床上应当酌情应用。 展开更多
关键词 晚期鼻咽癌 希罗达 维持治疗
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