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隐球菌抗原MP98的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位的预测及鉴定 被引量:2
1
作者 谷明莉 邓安梅 +5 位作者 周晔 陈燕 陈波 仲人前 温海 陈孙孝 《现代检验医学杂志》 CAS 2008年第2期1-4,共4页
目的鉴定隐球菌抗原MP98中的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位。方法应用数据库SYFPEITHI预测隐球菌MP98中可能存在的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位,经流式细胞术分析各抗原肽与HLA-A*0201的亲合力,经时间分辨荧光法检测外周血单个核细胞(PBM... 目的鉴定隐球菌抗原MP98中的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位。方法应用数据库SYFPEITHI预测隐球菌MP98中可能存在的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位,经流式细胞术分析各抗原肽与HLA-A*0201的亲合力,经时间分辨荧光法检测外周血单个核细胞(PBMCs)对各抗原肽产生的增殖反应,经细胞毒性实验研究各抗原肽诱导的特异性T细胞的细胞毒杀伤活性,逐步鉴定MP98的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位。结果位于MP98氨基酸序列肽5(436-444aa)与HLA-A*0201分子具有较高的亲合力,并都能刺激HLA-A*0201阳性个体者PBMC增殖,并诱导产生具有特异性杀伤活性的CTL。结论肽5GMFDGLSGV(436-444aa)是MP98上HLA-A*0201限制性CD8+CTL的优势表位,可作为隐球菌疫苗设计的候选表位。 展开更多
关键词 隐球菌 细胞毒性T细胞 抗原表位 疫苗
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QLFATINSTL(93-102aa)是隐球菌抗原MP98 CTL优势表位 被引量:1
2
作者 谷明莉 邓安梅 +5 位作者 周晔 陈燕 陈波 仲人前 温海 陈孙孝 《临床军医杂志》 CAS 2008年第1期10-13,共4页
目的鉴定隐球菌抗原MP98中的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位。方法应用数据库SYFPEITHI预测隐球菌MP98中可能存在的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位,经流式细胞术分析各抗原肽与HLA-A*0201的亲合力,经时间分辨荧光法检测外周血单个核细胞(PBM... 目的鉴定隐球菌抗原MP98中的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位。方法应用数据库SYFPEITHI预测隐球菌MP98中可能存在的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位,经流式细胞术分析各抗原肽与HLA-A*0201的亲合力,经时间分辨荧光法检测外周血单个核细胞(PBMCs)对各抗原肽产生的增殖反应,经细胞毒性实验研究各抗原肽诱导的特异性T细胞的细胞毒杀伤活性,逐步鉴定MP98的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位。结果位于MP98氨基酸序列肽3(93-102aa)与HLA-A*0201分子具有较高的亲合力,并都能刺激HLA-A*0201阳性个体PBMC增殖,并诱导产生具有特异性杀伤活性的CTL。结论肽3 QLFATINSTL(93-102aa)是抗原MP98上HLA-A*0201限制性CD8+CTL的优势表位,可作为隐球菌疫苗设计的候选表位。 展开更多
关键词 隐球菌 细胞毒性T细胞 抗原表位
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原发性干燥综合征患者单核源性树突状细胞对聚肌苷酸胞苷酸刺激的反应性
3
作者 谷明莉 孙懿 +3 位作者 秦琴 黄元兰 陈孙孝 邓安梅 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第15期2233-2236,共4页
目的观察原发性干燥综合征(pSS)患者外周血单核源性树突状细胞在聚肌苷酸胞苷酸(polyI∶C)刺激下释放干扰素等炎性因子的能力。方法用白细胞介素(IL)-4和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子从pSS患者外周血单核细胞中诱导出树突状细胞,并用50... 目的观察原发性干燥综合征(pSS)患者外周血单核源性树突状细胞在聚肌苷酸胞苷酸(polyI∶C)刺激下释放干扰素等炎性因子的能力。方法用白细胞介素(IL)-4和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子从pSS患者外周血单核细胞中诱导出树突状细胞,并用50μg/mL polyI∶C进行刺激,在刺激后第6、12、24小时以ELISA法检测细胞培养基上清液中干扰素(IFN)-α、IFN-β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-12和IL-23的浓度,以RT-PCR检测树突状细胞内Toll样受体3(TLR3)分子的表达。结果在polyI∶C作用下,pSS患者单核源性树突状细胞释放IFN-α、IFN-β及TNF-α等因子的能力显著强于来自健康个体的单核源性树突状细胞。虽然pSS患者及健康个体单核源性树突状细胞内TLR3的表达在polyI∶C刺激作用下均随时间逐渐降低,但pSS患者TLR3的降低相对缓慢。结论 pSS患者单核源性树突状细胞对polyI∶C刺激呈现高反应性,且这种高反应性可能与TLR3信号作用异常有关。单核源性树突状细胞的这种特征可能与pSS的发病机制有关。 展开更多
关键词 原发性干燥综合征 单核源性树突状细胞 天然免疫 聚肌苷酸胞苷酸 TOLL样受体 细胞因子
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隐球菌保护性肽表位GMFDGLSGV多聚体重组表达及鉴定
4
作者 谷明莉 钱琤 +4 位作者 周晔 陈波 陈孙孝 邓安梅 仲人前 《现代检验医学杂志》 CAS 2008年第3期6-8,共3页
目的重组表达隐球菌保护性肽表位GMFDGLSGV二聚体、四聚体、八聚体,以进一步探讨其免疫效应。方法选取隐球菌抗原表位GMFDGLSGV,引入Th表位PADRE及木马肽序列(RKKRRQRRR),并以RVKR序列作为接头,分别合成隐球菌保护性肽表位GMFDGLSGV二... 目的重组表达隐球菌保护性肽表位GMFDGLSGV二聚体、四聚体、八聚体,以进一步探讨其免疫效应。方法选取隐球菌抗原表位GMFDGLSGV,引入Th表位PADRE及木马肽序列(RKKRRQRRR),并以RVKR序列作为接头,分别合成隐球菌保护性肽表位GMFDGLSGV二聚体、四聚体、八聚体全基因序列,经PCR扩增后分别插入融合表达载体pGEX-4T-1,将重组质粒转入大肠埃希氏菌BL21并以IPTG诱导表达,进一步经GST亲合层析柱纯化,经SDS-PAGE和Western-blot鉴定重组表达蛋白。结果成功构建了隐球菌保护性表位GMFDGLSGV二聚体、四聚体、八聚体的表达质粒,并经IPTG诱导表达了大小约为32000,36000,42000的融合蛋白。结论隐球菌保护性肽表位GMFDGLSGV多聚体的重组表达为进一步开发隐球菌疫苗提供有价值的依据。 展开更多
关键词 隐球菌 表位多聚体 重组表达
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隐球菌保护性肽表位GMFDGLSGV多聚体的免疫原性研究
5
作者 谷明莉 钱 +4 位作者 周晔 陈波 陈孙孝 邓安梅 仲人前 《临床军医杂志》 CAS 2008年第2期169-171,共3页
目的探讨纯化的隐球菌抗原肽GMFDGLSGV二聚体、四聚体、八聚体重组蛋白激发细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocyte,CTL)免疫应答的能力,为新型隐球菌疫苗的研制打下基础。方法通过细胞增殖和细胞毒性实验,研究纯化的GMFDGLSGV单体... 目的探讨纯化的隐球菌抗原肽GMFDGLSGV二聚体、四聚体、八聚体重组蛋白激发细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocyte,CTL)免疫应答的能力,为新型隐球菌疫苗的研制打下基础。方法通过细胞增殖和细胞毒性实验,研究纯化的GMFDGLSGV单体、二聚体、四聚体、八聚体重组蛋白刺激外周血单个核细胞(PBMC)产生的增殖反应和细胞毒活性,初步鉴定重组多聚体的免疫原性。结果10例HLA-A*0201阳性个体PBMC对八聚体的平均SI为37.4±3.07;增殖反应明显高于四聚体(平均SI为20.1±1.37)、二聚体(平均SI为14.1±1.06)、单体(平均SI为11.4±0.68)以及阴性对照(平均SI为1±0.10)引起的细胞增殖反应(P<0.01)。在抗原肽诱导的CTL细胞毒活性中,HLA-A*0201阳性个体PBMC对八聚体、四聚体、二聚体、单体及阴性对照组均表现不同程度的杀伤活性,平均活性分别为48.1±4.28、23.9±2.20、16.3±1.27、13.1±1.10、1.0±0.1(P<0.01)。结论本研究得到的重组优化八聚体具有较好的免疫原性,能有效刺激PBMC产生细胞增殖反应和细胞毒活性,为进一步开发有效的隐球菌疫苗打下了基础。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 多聚体 疫苗
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结核杆菌抗原多表位融合蛋白的重组表达与鉴定 被引量:10
6
作者 吴传勇 娄加陶 +6 位作者 蒋廷旺 钱 周晔 陈燕 谷明莉 邓安梅 仲人前 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1281-1285,共5页
目的构建含有6个编码结核杆菌抗原HLA-A0201限制性CD8+CTL表位基因序列的重组质粒,并在大肠杆菌中诱导表达。方法选取结核杆菌抗原Rv0309、Rv0173、Ag85A、Ag85C的6个HLA-A0201限制性CD8+CTL表位,引入Th表位PADRE及木马肽序列,并以RVKR... 目的构建含有6个编码结核杆菌抗原HLA-A0201限制性CD8+CTL表位基因序列的重组质粒,并在大肠杆菌中诱导表达。方法选取结核杆菌抗原Rv0309、Rv0173、Ag85A、Ag85C的6个HLA-A0201限制性CD8+CTL表位,引入Th表位PADRE及木马肽序列,并以RVKR序列作为接头,合成全基因序列,经PCR扩增后插入融合表达载体pGEX-4T-1,将重组质粒转入大肠杆菌BL21并以IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western印迹鉴定重组表达蛋白。结果成功构建了结核杆菌多表位蛋白的表达质粒,并经IPTG诱导表达了大小约为40000的融合蛋白。结论多表位融合蛋白的重组表达为进一步开发新型结核疫苗打下了基础。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 表位 疫苗 合成
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结核杆菌抗原Ag85C的HLA-A*0201限制性CD8^+CTL表位的预测及鉴定 被引量:7
7
作者 吴传勇 娄加陶 +7 位作者 蒋廷旺 钱 周晔 陈燕 陈波 谷明莉 邓安梅 仲人前 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期349-354,共6页
目的:预测及鉴定结核杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)抗原Ag85C的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位,为基于表位的结核疫苗研究提供依据。方法:应用SYFPEITHI数据库预测结核杆菌抗原Ag85C序列中可能存在的HLA-A*0201限制性T细胞表位,利... 目的:预测及鉴定结核杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)抗原Ag85C的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位,为基于表位的结核疫苗研究提供依据。方法:应用SYFPEITHI数据库预测结核杆菌抗原Ag85C序列中可能存在的HLA-A*0201限制性T细胞表位,利用T2细胞株分析各预测的抗原肽与HLA-A*0201分子的亲合力,选取高亲合力肽诱导特异性CTL细胞,检测各高亲合力肽刺激其特异性CTL细胞分泌的IFN-γ水平、在体外的CTL增殖反应以及细胞杀伤毒性,逐步鉴定出Ag85C的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位。结果:SYFPEITHI数据库从Ag85C序列中预测到14条能够结合HLA-A*0201分子的抗原肽,其中3个抗原肽(170~178 aa、317~325 aa和144~153 aa)显示与T2细胞上HLA-A*0201分子有高结合力,而抗原肽FLTREMPAWL(144~153 aa)能够诱导大多数HLA-A*0201阳性结核患者及PPD(+)健康志愿者产生特异性CTL细胞,并分泌大量的IFN-γ,能够诱导CTL体外发生增殖,能够产生特异性杀伤活性。结论:成功鉴定出抗原肽FLTREMPAWL(144~153 aa)结核杆菌抗原Ag85C的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位,可作为结核疫苗设计的候选表位,为进一步研发新型有效的抗结核疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 抗原 表位 T淋巴细胞 细胞毒性
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结核分枝杆菌保护性肽表位KLIANNTRV多聚体重组表达及鉴定 被引量:7
8
作者 蒋天舒 周晔 +5 位作者 吴传勇 陈燕 陈波 谷明莉 仲人前 邓安梅 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期170-172,177,共4页
目的重组表达结核分枝杆菌保护性肽表位KLIANNTRV二聚体、四聚体、八聚体,以进一步探讨其免疫效应。方法选取结核分枝杆菌抗原表位KLIANNTRV,引入Th表位PADRE及木马肽序列(RKKRRQRRR),并以RVKR序列作为接头,分别合成结核分枝杆菌保护性... 目的重组表达结核分枝杆菌保护性肽表位KLIANNTRV二聚体、四聚体、八聚体,以进一步探讨其免疫效应。方法选取结核分枝杆菌抗原表位KLIANNTRV,引入Th表位PADRE及木马肽序列(RKKRRQRRR),并以RVKR序列作为接头,分别合成结核分枝杆菌保护性肽表位KLIANNTRV二聚体、四聚体、八聚体全基因序列,经PCR扩增后分别插入融合表达载体pGEX-4T-1,将重组质粒转入大肠杆菌BL21并以IPTG诱导表达,进一步经GST亲合层析柱纯化,经SDS-PAGE和Western-blot鉴定重组表达蛋白。结果成功构建了结核分枝杆菌保护性表位KLIANNTRV二聚体、四聚体、八聚体的表达质粒,并经IPTG诱导表达了大小约为20000、32000、54000的融合蛋白。结论结核分枝杆菌保护性肽表位KLIANNTRV多聚体的重组表达为进一步开发结核疫苗提供有价值的依据。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 表位 重组表达 纯化
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原发性胆汁性肝硬化患者外周血T淋巴细胞亚群检测的意义 被引量:8
9
作者 陈燕 龙波 +6 位作者 姚定康 周晔 蒋天舒 谷明莉 陈波 仲人前 邓安梅 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期34-35,共2页
目的探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血T淋巴细胞亚群及细胞因子的特点及意义。方法以35例健康人作为对照组,用流式细胞术分析了35例确诊的PBC患者外周血T淋巴细胞亚群及其分泌IL-4和IFN-γ情况。结果PBC患者组CD4+T细胞升高,CD8+... 目的探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血T淋巴细胞亚群及细胞因子的特点及意义。方法以35例健康人作为对照组,用流式细胞术分析了35例确诊的PBC患者外周血T淋巴细胞亚群及其分泌IL-4和IFN-γ情况。结果PBC患者组CD4+T细胞升高,CD8+T细胞下降,CD4+T/CD8+T比值上升(P<0.05);PBC患者CD4+T细胞IFN-γ表达显著升高(P<0.05),而IL-4水平与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论在PBC发病机制中,CD4+T细胞和TH1亚群细胞起重要作用。 展开更多
关键词 细胞因子 T淋巴细胞 原发性胆汁性肝硬化 流式细胞术
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颗粒溶素的表达纯化及生物学活性分析 被引量:6
10
作者 钱琤 陈孙孝 +6 位作者 周晔 王燕 谷明莉 陈波 陈燕 邓安梅 仲人前 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期829-833,共5页
目的:采用原核表达系统对颗粒溶素(granulysin,GNLY)进行体外表达,纯化及活性鉴定。方法:以体外培养的人外周血单个核细胞(PBMC)为模板,RT-PCR扩增编码GNLY的cDNA片段,插入pMD-18-T载体,测序正确后再亚克隆到质粒pET28a(+)中,构建重组... 目的:采用原核表达系统对颗粒溶素(granulysin,GNLY)进行体外表达,纯化及活性鉴定。方法:以体外培养的人外周血单个核细胞(PBMC)为模板,RT-PCR扩增编码GNLY的cDNA片段,插入pMD-18-T载体,测序正确后再亚克隆到质粒pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET28a(+)-GNLY,转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS,IPTG诱导表达融合蛋白,包涵体经变复性后用Ni亲和层析纯化,CFU法测定蛋白活性。结果:成功地将GNLY cDNA片段插入载体pET28a(+)中,构建了表达质粒pET28a(+)-GNLY。经诱导在原核表达系统中以包涵体形式高效表达了相对分子质量为9 000的融合蛋白,变复性纯化后的GNLY蛋白经CFU法检测,发现其具有细胞毒活性且细胞毒作用具有剂量依赖性。结论:本实验利用原核表达系统成功地表达了具有生物学活性的GNLY,为研究其功能、作用机制及临床应用奠定了基础。 展开更多
关键词 颗粒溶素 基因表达 生物学活性
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丙型肝炎患者不同病毒载量与病毒学应答及肝功能改变的相关性 被引量:5
11
作者 方超萍 张薇薇 +7 位作者 孙小波 张军 卫涛 秦琴 张倩 谷明莉 贾音 邓安梅 《现代检验医学杂志》 CAS 2012年第5期18-21,共4页
目的观察丙型肝炎患者HcVRNA载量与病毒学应答及转氨酶、胆红素含量的变化,探讨其相互关系及意义。方法回顾性分析2011年1月~2012年3月间长海医院门诊就诊和住院的103例丙型肝炎患者资料,其中男64例,女39例,年龄18~70岁。应用实... 目的观察丙型肝炎患者HcVRNA载量与病毒学应答及转氨酶、胆红素含量的变化,探讨其相互关系及意义。方法回顾性分析2011年1月~2012年3月间长海医院门诊就诊和住院的103例丙型肝炎患者资料,其中男64例,女39例,年龄18~70岁。应用实时荧光定量PCR检测治疗前、治疗后4,12,24和48周血清中HCVRNA水平,肝功能酶学和胆红素指标(ALT,AST及TBIL,DBIL)。根据治疗前HCVRNA含量高低与病毒学应答与否分为高载量应答组、高载量无应答组和低栽量应答组。结果18例低HCVRNA载量的患者治疗后均有病毒学应答。高载量应答组ALT,AST治疗前显著高于其他两组(P〈0.01),治疗后迅速下降,而后保持在正常水平;低载量应答组ALT,AST始终在正常范围内;而高载量无应答组ALT,AST治疗前后下降不明显,始终在高于正常范围波动。高栽量无应答组治疗前DBIL显著高于有应答的两组(P〈0.01),且治疗期间持续高于正常范围;TBIL虽也升高,但与高栽量应答组比较差异有统计学显著性意义(P〈0.01),与低栽量应答组比较差异无统计学显著性意义(P〉0.05)。结论高HCVRNA载量的患者,伴ALT,AST显著升高,病毒学应答较好;而ALT,AST轻微升高,且伴有DBIL显著升高者病毒学应答常常较差。低HCVRNA栽量的患者均有病毒学应答,其病毒学应答与肝功能酶学和胆红素值无明确相关。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒RNA 病毒学应答 转氨酶 胆红素 实时荧光定量PCR
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重症肌无力患者外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值和血小板/淋巴细胞比值的临床意义 被引量:6
12
作者 刘挺挺 李虎 +4 位作者 马炜 陈燕 谷明莉 张蕾 邓安梅 《现代检验医学杂志》 CAS 2016年第1期65-68,共4页
目的探讨重症肌无力(MG)患者外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)和血小板/淋巴细胞比值(PLR)的临床意义。方法选取2013年1月~2014年12月期间长海医院收治的54例MG患者及体检的57名健康成人归为MG组及对照组。比较两组及不同... 目的探讨重症肌无力(MG)患者外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)和血小板/淋巴细胞比值(PLR)的临床意义。方法选取2013年1月~2014年12月期间长海医院收治的54例MG患者及体检的57名健康成人归为MG组及对照组。比较两组及不同临床分型MG患者的WBC计数、NLR及PLR,通过受试者工作曲线(ROC)曲线下的面积评价各指标对MG的诊断价值。结果MG组的WBC计数、NLR及PLR分别为(6.85±0.37)×10^9/L,2.48±0.19和118.79±6.38,显著高于对照组(5.87±0.12)×10^9/L,1.59±0.06和102.01±3.45(P〈0.05)。WBC计数、NLR及PLR的ROC曲线下面积分别为0.559,0.717和0.58]。Ⅲ或Ⅳ型的PLR显著高于Ⅰ型,Ⅱ型(P〈0.05)。结论MG患者的NLR和PLR均显著升高,NLR的诊断价值更高,PLR可能与疾病严重程度有关。 展开更多
关键词 重症肌无力 中性粒细胞/淋巴细胞比值 血小板/淋巴细胞比值 炎症
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非小细胞肺癌患者外周血循环肿瘤细胞的检测及与病理分期关系 被引量:12
13
作者 陈燕 李虎 +7 位作者 秦琴 谷明莉 张薇薇 徐玉莲 方超萍 邓安梅 石磊 钱琤 《临床军医杂志》 CAS 2014年第2期192-194,共3页
目的探讨非小细胞肺癌患者外周血循环肿瘤细胞(CTCs)检测的临床意义。方法采用CellSearch系统检测30例非小细胞肺癌患者外周血中循环肿瘤细胞数,并与15例肺良性疾病患者、30例健康志愿者(对照组)进行比较。结果CTCs>0的非小细胞肺癌... 目的探讨非小细胞肺癌患者外周血循环肿瘤细胞(CTCs)检测的临床意义。方法采用CellSearch系统检测30例非小细胞肺癌患者外周血中循环肿瘤细胞数,并与15例肺良性疾病患者、30例健康志愿者(对照组)进行比较。结果CTCs>0的非小细胞肺癌患者为20例(66.7%),肺良性疾病患者为4例(26%),健康志愿者为0例;CTCs>5的分别为:9(30%)、0、0例;CTCs>10的分别为:4(13%)、0、0例,均有统计学差异(P<0.05)。不同临床分期患者比较,Ⅰ、Ⅱ期患者外周血中的CTCs的阳性百分率(29.6%)显著低于Ⅲ、Ⅳ期患者(58.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用CellSearch系统,可以早期检测非小细胞肺癌患者外周血CTCs,有望成为一种实用的循环肿瘤细胞检测技术。 展开更多
关键词 肺肿瘤 循环肿瘤细胞 CellSearch系统 非小细胞肺癌
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原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞中IL-37表达增高及临床意义 被引量:5
14
作者 李腾达 陈燕 +7 位作者 龙曙萍 谷明莉 刘鹏 吴林洪 邓顺江 张薇薇 钱铮 邓安梅 《现代检验医学杂志》 CAS 2017年第1期12-15,共4页
目的检测原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中IL-37的表达水平,进一步探究其在PBC致病过程中的临床意义。方法收集2013年6月~2015年8月于长海医院确诊的42例PBC患者和38例同期体检的健康对照者外周血,采用蔗糖密度梯... 目的检测原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中IL-37的表达水平,进一步探究其在PBC致病过程中的临床意义。方法收集2013年6月~2015年8月于长海医院确诊的42例PBC患者和38例同期体检的健康对照者外周血,采用蔗糖密度梯度离心法分离PBMCs,以实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PBMCs中IL-37的mRNA表达水平,以酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中IL-37,IL-6,IL-17,TNF-α,TGF-β,IL-18和IL-23的蛋白水平,同时记录PBC患者的病理性分期。对IL-37与IL-6,TNF-α,IL-17,TGF-β,IL-18,IL-23进行Pearson相关性分析,对IL-37与PBC疾病分期进行Spearman秩相关性分析。结果实验组与对照组IL-37的mRNA水平和蛋白水平分别为2.81±0.94 vs 1.09±0.56,356.14±169.36 pg/ml vs 86.68±48.23 pg/ml,差异具有统计学意义(t=9.811,9.462,P均<0.000 1)。相关性分析表明:IL-37与IL-17,TNF-α,IL-6,TGF-β呈正相关(r=0.561 2,0.661 9,0.672 1,0.765 3;P值均<0.001),与疾病分期(Ⅰ~Ⅳ)呈正相关(r_s=0.348 9,P<0.05)。结论 IL-37可能参与了PBC的致病过程,对疾病预测与诊断有重要意义。 展开更多
关键词 原发性胆汁性肝硬化 白细胞介素-37 白细胞介素-17 白细胞介素-6 表皮生长因子-β
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隐球菌脑膜炎患者血清外泌体CD93表达增高及意义 被引量:5
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作者 李腾达 刘鹏 +6 位作者 龙曙萍 刘云 黄元兰 张薇薇 郭杰 谷明莉 邓安梅 《现代检验医学杂志》 CAS 2017年第6期23-25,共3页
目的检测隐球菌脑膜炎患者血清中外泌体表达CD93的水平,进一步探究其临床意义。方法实验组为2012年11月~2016年12月在上海长海医院和长征医院确诊的38例隐球菌脑膜炎患者的血清,诊断标准为脑脊液染色新生隐球菌阳性或培养阳性;对照组为... 目的检测隐球菌脑膜炎患者血清中外泌体表达CD93的水平,进一步探究其临床意义。方法实验组为2012年11月~2016年12月在上海长海医院和长征医院确诊的38例隐球菌脑膜炎患者的血清,诊断标准为脑脊液染色新生隐球菌阳性或培养阳性;对照组为同期收集的38例健康人血清。血清外泌体的分离采用超高速离心法;外泌体表面抗原的鉴定采用磁珠捕获结合流式细胞仪检测法;血清中细胞因子用ELISA法进行蛋白定量。实验组与对照组检测值的比较采用两独立样本的t检验,两变量之间的相关性以Pearson系数表示。结果流式结果表明,实验组血清外泌体中CD93的表达水平高于对照组为(79.11±19.31vs 23.98±6.56)%,差异具有统计学意义(t=16.66,P<0.000 1)。IFN-γ在实验组与对照组血清中的表达水平为(39.78±10.77vs 58.98±16.99)pg/ml,差异具有统计学意义(t=5.884,P<0.0001);IL-17在实验组与对照组血清中的表达水平为(16.32±4.03vs 3.11±0.87)pg/ml,差异具有统计学意义(t=19.75,P<0.000 1);IL-1β在实验组与对照组血清中的表达水平为(57.12±12.98vs 13.45±4.78)pg/ml,差异具有统计学意义(t=19.46,P<0.000 1)。实验组血清中CD93+exosomes所占的百分比与IFN-γ,IL-17,IL-1β的蛋白表达量呈正相关(r=0.488,0.456,0.532,均P<0.01)。结论隐球菌脑膜炎疾病过程中,CD93在外泌体的表达可能通过影响CD4+T细胞参与了该病病程。 展开更多
关键词 隐球菌脑膜炎 外泌体 CD93 白介素-1Β 白介素-17
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原发性免疫性血小板减少症患者颗粒溶素、颗粒酶B、穿孔素的表达及临床意义 被引量:4
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作者 叶辛 石磊 +4 位作者 谷明莉 陈燕 张薇薇 邓安梅 钱宝华 《现代检验医学杂志》 CAS 2014年第1期20-23,共4页
目的研究颗粒溶素(granulysin,GNLY)、颗粒酶B(granzymeB,GrB)及穿孔素(perforin,PFP)三种免疫分子在原发性免疫性血小板减少症(primaryimmunethromboeytopenia,ITP)患者外周血单个核细胞(peripheralbloodmononucle—arce... 目的研究颗粒溶素(granulysin,GNLY)、颗粒酶B(granzymeB,GrB)及穿孔素(perforin,PFP)三种免疫分子在原发性免疫性血小板减少症(primaryimmunethromboeytopenia,ITP)患者外周血单个核细胞(peripheralbloodmononucle—arcells,PBMC)中的表达及其临床意义。方法使用实时荧光定量PCR(RFQ_PCR)和免疫印迹法(westernblot,WB)检测30例ITP患者和40例健康人PBMC中GNLY,GrB及PFP的mRNA和蛋白含量。分析ITP患者三种蛋白含量与IL-2,IL-4,IL-10和IFN-γ的相关性。结果与健康对照组比较,ITP患者PBMC中GrB,PFPmRNA(1.78±0.13VS1.0O±0.03;1.96±0.11VS1.O0±0.04)及蛋白含量(2.05±0.19VS1.02±0.10;2.03±0.23VS0.92±0.15)均升高(t=23.016~45.594,P值均〈0.01),而GNLY变化差异无统计学意义(P〉0.05)。ITP患者中GrB,PFP蛋白表达水平与血小板数量呈负相关(r=-0.401,-0.486,P〈0.05),与IL-2(r=0.515,0.565),IFN-γ(r=0.478,0.544)水平呈正相关(P〈0.05),与IL-4,IL-10无相关性(P〉0.05)。结论GrB及PFP可能参与ITP的发病机制,为探讨ITP的病因和治疗提供了新线索。 展开更多
关键词 原发性免疫性血小板减少症 颗粒酶B 颗粒溶素 穿孔素
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热适应/热射病大鼠血清中microRNA let-7b的变化及意义 被引量:3
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作者 李腾达 谷明莉 +7 位作者 邓顺江 孙懿 张薇薇 郭杰 刘云 黄元兰 钱琤 邓安梅 《现代检验医学杂志》 CAS 2017年第2期19-22,共4页
目的探究热适应/热射病大鼠模型血清中microRNA let-7b表达的变化及其与HSP70,IL-6,TNF-αTGF-β和IL-12的相关性,分析其临床意义。方法在第二军医大学实验动物中心选取肛温、体重、用龄基本一致的雄鼠60只随机均分为对照组、热适应组... 目的探究热适应/热射病大鼠模型血清中microRNA let-7b表达的变化及其与HSP70,IL-6,TNF-αTGF-β和IL-12的相关性,分析其临床意义。方法在第二军医大学实验动物中心选取肛温、体重、用龄基本一致的雄鼠60只随机均分为对照组、热适应组、热射病组,于仿真热气候动物舱中建立热适应/热射病大鼠模型后采集心尖血并分离血清。以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清中microRNA let-7b,以酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中HSP70,IL-6,TNF-α,TGF-β和IL-12的蛋白水平。三组间计量资料的比较采用Kruskal-Wallis H检验,以Spearman秩相关系数表示热射病组两变量之间的相关性。结果 miRNA let-7b在对照组、热适应组、热射病组的M分别为0.99,1.04和1.93,Q分别为0.30,0.25和0.44,差异具有统计学意义(x^2=38.95,P<0.001),组间两两比较结果显示let-7b在对照组与热适应组表达差异无统计学意义(P>0.05),在对照组与热射病组、热适应组与热射病组表达差异具有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析显示热射病组let-7b/与HSP70,TNF-α和IL-6呈正相关,差异具有统计学意义(r_s=0.579,0.498和0.609,P<0.05)。结论 miRlet-7b可能参与了热射病病理过程,为临床监测高温湿环境下患者的状态提供了潜在的评价指标。 展开更多
关键词 MICRORNA let-7b 热射病 热适应 热休克蛋白 肿痛坏死因子-α
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自身免疫性胰腺炎患者血清外泌体中CD69表达升高及意义 被引量:3
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作者 李腾达 龙曙萍 +6 位作者 黄元兰 刘鹏 张薇薇 郭杰 刘云 谷明莉 邓安梅 《现代检验医学杂志》 CAS 2018年第2期8-10,共3页
目的探究自身免疫性胰腺炎(AIP)患者血清外泌体中CD69的表达情况,初步探讨其对疾病病理过程的影响。方法收集2012年10月~2016年12月来长海医院就诊的35例AIP患者血清和同期就诊的35例健康个体血清,分别作为实验组和对照组。以ELISA法检... 目的探究自身免疫性胰腺炎(AIP)患者血清外泌体中CD69的表达情况,初步探讨其对疾病病理过程的影响。方法收集2012年10月~2016年12月来长海医院就诊的35例AIP患者血清和同期就诊的35例健康个体血清,分别作为实验组和对照组。以ELISA法检测血清中的细胞因子浓度,以磁珠结合抗体的方法在流式细胞仪中检测血清中外泌体表面分子的表达情况,两组之间计量资料的比较采取两独立样本t检验,两变量之间的相关性以Pearson系数表示。结果流式细胞仪分析显示,实验组血清中外泌体CD69表达水平高于对照组(85.76±19.45vs 17.01±5.89)%,差异有统计学意义(t=20.01,P<0.0001);实验组中CD69+的外泌体所占百分比与血清中IL-4,IFN-γ,TGF-β表达量呈正比(r=0.456,0.678,0.548,均P<0.05),CD69-的外泌体所占百分比与血清中IL-4,IFN-γ,IL-10,TGF-β呈反比(r=-0.589,-0.399,-0.784,-0.657,均P<0.05)。结论 CD69在外泌体的表达可能通过影响CD4+T细胞功能参与了AIP病程,是该病潜在的监测指标和治疗靶点。 展开更多
关键词 自身免疫性胰腺炎 外泌体 CD69 IL-4 TGF-Β
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原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞中Tim-1表达增高及其意义 被引量:3
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作者 李腾达 刘挺挺 +4 位作者 吴林洪 邓顺江 陈燕 谷明莉 邓安梅 《现代检验医学杂志》 CAS 2016年第4期41-43,共3页
目的 检测原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血Tim-1,IFN-γ和IL-4的表达水平,分析其相关性,初步探讨Tim-1在PBC诊治中的临床意义。方法 收集2013年6月-2015年11月来长海医院就诊的32例PBC患者和32例同期就诊的健康成人的外周血,分离... 目的 检测原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血Tim-1,IFN-γ和IL-4的表达水平,分析其相关性,初步探讨Tim-1在PBC诊治中的临床意义。方法 收集2013年6月-2015年11月来长海医院就诊的32例PBC患者和32例同期就诊的健康成人的外周血,分离外周血单个核细胞(PBMC),反转录酶-聚合酶链锁反应(RT-PCR)法检测PBMC中Tim-1 mRNA,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血浆中Tim-1蛋白表达量,对Tim-1和IFN-γ,IL-4之间的关系进行Pearson相关性分析。结果患者组和对照组Tim-1 mRNA分别为0.63±0.40和0.36±0.32,差异具有统计学意义(t=3.005,P=0.003,P〈0.01)。患者组与对照组Tim-1蛋白表达水平分别为62.72±38.60和35.66±30.55 pg/ml(t=3.11,P=0.002 8),IFN-γ表达水平分别为200.81±18.06和79.23±20.02 pg/ml(t=25.51,P〈0.000 1),IL-4表达水平分别为99.22±14.67和30.18±20.56 pg/ml,差异均具有统计学意义(t=15.46,P〈0.000 1)。Pearson相关分析结果提示Tim-1与IFN-γ呈负相关(r=-0.552,P=0.001 1),与IL-4呈正相关(r=0.652,P〈0.000 1)。结论Tim-1可能参与了PBC的发病机制,是该病潜在的标志物和治疗靶点。 展开更多
关键词 原发性胆汁性肝硬化 T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-1 免疫功能 干扰素-Γ 白介素-4
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隐球菌性脑炎患者颗粒酶B、颗粒溶素、穿孔素的表达及临床意义 被引量:6
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作者 周晔 邓安梅 +4 位作者 谷明莉 陈燕 陈波 陈孙孝 仲人前 《中国实验诊断学》 北大核心 2010年第1期64-68,共5页
目的研究颗粒酶B(granzymeB,GrB)、颗粒溶素(granulysin,GNLY)及穿孔素(perforin,又称pore-forming pro-tein,PFP)三种免疫效应分子在隐球菌性脑膜炎(cryptococcal meningitis)外周血单个核细胞中的表达及其临床意义。方法首先用密度梯... 目的研究颗粒酶B(granzymeB,GrB)、颗粒溶素(granulysin,GNLY)及穿孔素(perforin,又称pore-forming pro-tein,PFP)三种免疫效应分子在隐球菌性脑膜炎(cryptococcal meningitis)外周血单个核细胞中的表达及其临床意义。方法首先用密度梯度离心法分离得到25例隐球菌性脑膜炎患者和30例健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),其次用免疫印迹(westernblot)的方法检测其中的GrB、GNLY、及PFP的蛋白含量,用实时荧光定量(RFQ)-PCR方法测定其中GrB、GNLY、及PFP的mRNA含量。并分析隐球菌性脑膜炎患者蛋白含量与一些免疫指标的相关性。结果与健康对照组比较,隐球菌性脑膜炎患者PBMC中GNLY、PFP蛋白含量和mRNA均明显降低,而GrB无明显变化。隐球菌性脑膜炎患者中GNLY蛋白表达水平与血清IgG、IFN-γ水平成正相关(r=0.477,P<0.05;r=0.534,P<0.05),与IL-10水平成负相关(r=-0.505,P<0.05)。结论GNLY、PFP可能参与隐球菌性脑膜炎的疾病进程,这为探讨隐球菌性脑膜炎的病情监控和有效治疗提供了新的线索。 展开更多
关键词 隐球菌性脑膜炎 颗粒酶B 颗粒溶素 穿孔素
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