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基于马赛克HA序列的H9亚型禽流感灭活疫苗的免疫效力分析 被引量：2
1
作者 李丽 唐国毅 +8 位作者 冯贺龙 薛玉涵 任助 王国康 贾妙妙 商雨 罗青平 邵华斌 温国元 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期3569-3577,共9页
H9亚型禽流感在我国家禽中广泛流行,给养禽业造成巨大经济损失的同时,也严重威胁着公共卫生安全。H9亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)具有高度遗传变异性,导致流行株和疫苗株之间抗原匹配性差,从而影响疫苗的临床保护效果,急... H9亚型禽流感在我国家禽中广泛流行,给养禽业造成巨大经济损失的同时,也严重威胁着公共卫生安全。H9亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)具有高度遗传变异性,导致流行株和疫苗株之间抗原匹配性差,从而影响疫苗的临床保护效果,急需研发一种高效、具有交叉保护性的通用型H9亚型禽流感疫苗。马赛克疫苗是针对遗传多样性病原体设计,通过整合所有抗原序列获得一条抗原表位覆盖最广泛的嵌合蛋白,并制备疫苗。本研究参考mosaic疫苗设计原则,设计、优化并合成了一条H9亚型禽流感病毒的mosaic血凝素(hemagglutinin,HA)基因序列,采用反向遗传操作技术,以H1N1亚型流感病毒PR8株为骨架,以mosaic H9 HA序列替换PR8株的HA片段,获得重组病毒rPR8-HAm/H9。将其制备为灭活疫苗并免疫SPF雏鸡,监测抗体水平、攻毒保护效果,评价其交叉保护效果。结果表明,重组病毒rPR8-HAm/H9灭活疫苗免疫SPF雏鸡,可诱导机体产生较高水平的HI抗体和中和抗体,可显著抑制攻毒后病毒的脱落,对H9N2 AIV JM0305株的攻毒保护率为80%。rPR8-HAm/H9灭活疫苗可以对异源H9N2 AIV JM0305株产生较好的交叉攻毒保护,为研发基于马赛克技术的禽流感通用疫苗提供了前期基础。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H9亚型 mosaic疫苗 交叉保护性
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禽腺病毒4型荧光定量PCR检测方法的建立与初步评估 被引量：3
2
作者 王国康 卢琴 +6 位作者 贾妙妙 李丽 冯贺龙 邵华斌 罗青平 曾驰 温国元 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2022年第2期22-26,共5页
为了对禽腺病毒4型(FAdV-4)引发的鸡心包积水-肝炎综合征的病原学监测和疫情诊断提供技术支撑,本研究经对部分发表在NCBI的禽腺病毒4型序列进行比对,在其六邻体基因上找到一段相对保守序列,并设计出PCR引物和TaqMan探针。以FAdV-4 HB151... 为了对禽腺病毒4型(FAdV-4)引发的鸡心包积水-肝炎综合征的病原学监测和疫情诊断提供技术支撑,本研究经对部分发表在NCBI的禽腺病毒4型序列进行比对,在其六邻体基因上找到一段相对保守序列,并设计出PCR引物和TaqMan探针。以FAdV-4 HB1510株作为标准品,通过反应条件优化,建立了FAdV-4荧光定量PCR检测方法,并对其敏感性、特异性和重复性进行了分析。结果显示,该方法的灵敏度为10 EID_(50)/mL,为常规PCR方法的10倍;组内和组间重复性良好;与鸡减蛋综合征病毒、大肠杆菌等禽类病原的核酸无交叉反应。通过对65份临床样品进行检测,FAdV-4荧光定量PCR和常规PCR的检测符合率为90.7%。因此,FAdV-4荧光定量PCR的快速、敏感、特异等优点使其在禽腺病毒4型的早期检测及预防、控制等方面有较好的应用前景。 展开更多
关键词 禽腺病毒4型 TAQMAN探针 荧光定量PCR 检测
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低致病性与高致病性H7N9亚型禽流感病毒分子特征及受体结合能力分析 被引量：3
3
作者 薛玉涵 任助 +9 位作者 商雨 唐国毅 贾妙妙 鲁岳峰 李琼琼 李慧敏 罗青平 温国元 潘兹书 赵宗正 《湖北农业科学》 2020年第7期212-216,F0003,共6页
对2017年从鸡病料中分离到的2株H7N9亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)A/chicken/Hubei/093/2017(H7N9)和A/chicken/Hubei/207/2017(H7N9)(CK93和CK207)进行了全基因组测序。对血凝素(Hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(Neuramini... 对2017年从鸡病料中分离到的2株H7N9亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)A/chicken/Hubei/093/2017(H7N9)和A/chicken/Hubei/207/2017(H7N9)(CK93和CK207)进行了全基因组测序。对血凝素(Hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)序列保守性、HA糖基化位点、NA耐药位点和6个内部基因的关键氨基酸位点进行了分析,同时测定了2株毒株的受体结合能力。结果显示,CK93毒株HA裂解位点为PEIPKGR↓GLF,为低致病性AIV特征;而CK207毒株裂解位点为PKP⁃KRTAR↓GLF,为高致病性AIV特征。HA第226位氨基酸在CK93毒株为亮氨酸(226L),而在CK207毒株为谷氨酰胺(226Q)。但受体结合能力测定发现,CK93和CK207都具有结合α-2,3唾液酸受体和α-2,6唾液酸受体的特性,说明Q226L并非影响病毒受体结合特性的决定性因素。本研究结果提示应加强对H7N9亚型禽流感病毒变异监测预防其突变可能造成流行的风险。 展开更多
关键词 H7N9亚型禽流感病毒 分子特征分析 受体结合特性
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新城疫病毒作为人和动物传染病疫苗载体的研究进展 被引量：1
4
作者 王国康 李丽 +5 位作者 贾妙妙 樊三铃 冯贺龙 商雨 曾驰 温国元 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第5期176-182,共7页
新城疫病毒(NDV)是一种有囊膜的、单股负链RNA病毒,属副黏病毒科、正肺病毒属。其作为新城疫(ND)的病原,可引起包括家禽、水禽、候鸟在内的多种家禽和鸟类发病死亡。反向遗传学技术发展至可操作负链非节段RNA病毒之后,NDV已被作为疫苗... 新城疫病毒(NDV)是一种有囊膜的、单股负链RNA病毒,属副黏病毒科、正肺病毒属。其作为新城疫(ND)的病原,可引起包括家禽、水禽、候鸟在内的多种家禽和鸟类发病死亡。反向遗传学技术发展至可操作负链非节段RNA病毒之后,NDV已被作为疫苗载体用于开发各种疫苗。本文简要综述了NDV的基本信息、分子生物学特征以及其反向遗传系统,重点概述了NDV作为人和动物疫苗载体的研究进展。 展开更多
关键词 新城疫病毒 反向遗传技术 载体 疫苗
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基于新城疫病毒NP蛋白的间接ELISA抗体检测方法的建立 被引量：4
5
作者 贾妙妙 王国康 +5 位作者 李丽 王红琳 罗青平 邵华斌 曾驰 温国元 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期475-479,共5页
采用原核表达纯化方法,获得建立新城疫病毒(NDV) LaSota株的核衣壳蛋白(NP)。将其作为包被抗原,通过优化反应条件,建立NDV间接ELISA抗体检测方法,并对其敏感性、重复性和特异性进行测定分析。该方法的检测灵敏度是血凝抑制试验(HI)的50... 采用原核表达纯化方法,获得建立新城疫病毒(NDV) LaSota株的核衣壳蛋白(NP)。将其作为包被抗原,通过优化反应条件,建立NDV间接ELISA抗体检测方法,并对其敏感性、重复性和特异性进行测定分析。该方法的检测灵敏度是血凝抑制试验(HI)的50倍,与H9亚型禽流感病毒等其他禽源病毒或细菌的阳性血清无交叉反应,组间重复性试验的变异系数小于6%。200份养殖场采集的鸡血清检测结果表明,ELISA方法与HI试验的检测符合率为97%。表明该方法可用于临床鸡血清的新城疫抗体检测。 展开更多
关键词 新城疫病毒 NP蛋白 抗体间接ELISA
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基于全基因组序列合成的禽副黏病毒Ⅱ型反向遗传操作系统的建立 被引量：1
6
作者 王国康 李丽 +4 位作者 贾妙妙 冯贺龙 曾驰 罗青平 温国元 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期464-471,共8页
为建立禽副黏病毒Ⅱ型(avian paramyxovirus 2,APMV-2)的反向遗传操作平台,对NCBI已经公布的12条APMV-2全基因组序列进行分析比对,选取较为保守的F8株为模板,将该毒株基因组中特有的10处核苷酸突变为其他毒株共有的一致序列,增加一段大... 为建立禽副黏病毒Ⅱ型(avian paramyxovirus 2,APMV-2)的反向遗传操作平台,对NCBI已经公布的12条APMV-2全基因组序列进行分析比对,选取较为保守的F8株为模板,将该毒株基因组中特有的10处核苷酸突变为其他毒株共有的一致序列,增加一段大部分毒株共有的非编码区序列,获得了1株新的APMV-2(命名为Y2株)的全基因组序列。通过人工合成和克隆的方法,构建并获得了Y2株全长cDNA克隆质粒和3个分别表达NP、P和L的辅助质粒。将4个重组质粒共转染至感染痘病毒的BHK-21细胞,成功拯救出APMV-2Y2株。生物学特性测定结果显示,Y2株的鸡胚最低致死剂量的平均致死时间(MDT)大于168h,1日龄雏鸡的脑内致病指数(ICPI)为0.09,判定为弱毒株,鸡胚尿囊液的病毒含量为10^(8.83) EID_(50)/mL,HA效价为9log_(2)。病毒增殖曲线测定结果显示,Y2株感染BHK-21细胞后60h滴度达到峰值。APMV-2Y2株反向遗传操作系统的建立为该病原的致病机理研究及新型禽用疫苗研发提供了依据。 展开更多
关键词 禽副黏病毒Ⅱ型 反向遗传技术 新城疫病毒 人工合成
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爸爸给我发“稿费”
7
作者 贾妙妙 《小学生导刊（中年级版）》 2003年第18期33-33,共1页
爸爸尽管很忙很累,但每天都要检查我的作业。记得读三年级时,我模仿唐诗《春晓》,在日记本上写了一首歪诗:“春眠不觉晓,处处蚊子咬。打上‘敌敌畏’,
关键词 敌敌畏
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