铁死亡抑制剂在缺血性脑卒中中的作用

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作者 田青 贾芳 贾宇臣 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1531-1538,共8页

铁死亡是一种依赖铁的、以铁过载和脂质过氧化为特点的新型的细胞程序性死亡方式,与凋亡、坏死和自噬等其他细胞死亡方式有诸多不同之处。近年来,铁死亡在神经系统疾病中的研究备受关注,例如缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)、阿尔茨... 铁死亡是一种依赖铁的、以铁过载和脂质过氧化为特点的新型的细胞程序性死亡方式,与凋亡、坏死和自噬等其他细胞死亡方式有诸多不同之处。近年来,铁死亡在神经系统疾病中的研究备受关注,例如缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)、阿尔茨海默症、帕金森病和亨廷顿病等。研究发现,铁死亡参与并加重IS的病理过程,铁死亡抑制剂能够有效改善IS的预后。因此,本文主要就铁死亡参与IS的发病机制以及铁死亡抑制剂在IS中的应用进行了综述,以期为IS的防治提供新的具有潜在价值的干预靶点。 展开更多

关键词 铁死亡 缺血性脑卒中 铁过载 脂质过氧化 铁死亡抑制剂

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花生子叶节外植体遗传转化体系的建立 被引量：4

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作者 贾宇臣 王利 +3 位作者 陈琦 李连国 李巧玲 刘德虎 《科学技术与工程》 2011年第14期3142-3146,共5页

为了建立花生的高效遗传转化体系,利用花生子叶节高效再生体系,以农杆菌介导法,用含有表达质粒pBOG3VP7的根癌农杆菌进行外源基因转化,优化花生的遗传转化体系。通过对影响农杆菌介导的花生遗传转化的诸多因素进行的优化,试验表明:侵染... 为了建立花生的高效遗传转化体系,利用花生子叶节高效再生体系,以农杆菌介导法,用含有表达质粒pBOG3VP7的根癌农杆菌进行外源基因转化,优化花生的遗传转化体系。通过对影响农杆菌介导的花生遗传转化的诸多因素进行的优化,试验表明:侵染菌液添加100μmol/L AS,结合负压处理,农杆菌侵染10 min,共培养3 d,延后选择2 w。对抗性植株进行PCR和PCR-Southern检测,11株中有6株PCR反应呈阳性,其中有3株Southern杂交有特异性目标带出现。结果表明,外源基因已经整合到了花生基因组上。 展开更多

关键词 花生 遗传转化 农杆菌介导

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流式细胞术的培训实践及技术平台建设探讨 被引量：4

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作者 贾宇臣 陈雅婧 +1 位作者 牛燕 康毅敏 《基础医学教育》 2021年第1期28-30,共3页

流式细胞分析技术(flowcytometry,FCM),又称流式细胞术,是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的技术,具有广泛的科研应用价值。采用理论与实践并举,结合讨论的教学方式,在教师队伍开设针对性的培训课程,对深刻... 流式细胞分析技术(flowcytometry,FCM),又称流式细胞术,是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的技术,具有广泛的科研应用价值。采用理论与实践并举,结合讨论的教学方式,在教师队伍开设针对性的培训课程,对深刻理解并在科研工作中有效利用该技术具有及其重要意义。同时以教学促科研,以科研促技术,以技术促平台建设,以期建立和完善一个高水平的流式细胞术技术服务平台。 展开更多

关键词 基础医学 流式细胞术 实验教学

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流式细胞术细胞周期分析小鼠肺组织样本制备方法的优化研究 被引量：1

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作者 贾宇臣 王利 +2 位作者 郑源强 赵凯 陈琦 《现代检验医学杂志》 CAS 2011年第6期63-65,共3页

目的 寻找细胞周期分析更好的样本处理方法.方法 以小鼠肺组织作为标本,采用四种方法（剪碎法、研磨法、剪碎结合酶消化法、研磨结合酶消化法）制备单细胞悬液,胎盘蓝染色检测细胞的存活率,经不同时间固定后的样本利用流式细胞仪进行细... 目的 寻找细胞周期分析更好的样本处理方法.方法 以小鼠肺组织作为标本,采用四种方法（剪碎法、研磨法、剪碎结合酶消化法、研磨结合酶消化法）制备单细胞悬液,胎盘蓝染色检测细胞的存活率,经不同时间固定后的样本利用流式细胞仪进行细胞周期分析.结果 剪碎法结合酶消化法制备的单细胞悬液效果最佳;单细胞固定后两周内细胞各个时期所占比例基本相同.结论 小鼠肺组织单细胞制备采用剪碎法联合酶消化法优于其他三种方法,样本经固定处理后可以进行流式批量检测. 展开更多

关键词 流式细胞术 单细胞悬液 肺组织 细胞周期分析

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新生小鼠不同部位皮肤毛囊早期发育差异的比较 被引量：1

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作者 贾宇臣 陈琦 +2 位作者 李少伟 郑源强 王利 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2014年第3期84-87,I0014-I0015,共6页

目的：观察出生后小鼠不同部位皮肤毛囊早期发育生长差异及细胞色素C的表达分布。方法对新生1～9日龄的KM小鼠背部、尾部和触须部皮肤取材，进行HE染色，用二步法免疫组织化学对组织进行细胞色素C进行表达分布检测。结果新生小鼠不同部... 目的：观察出生后小鼠不同部位皮肤毛囊早期发育生长差异及细胞色素C的表达分布。方法对新生1～9日龄的KM小鼠背部、尾部和触须部皮肤取材，进行HE染色，用二步法免疫组织化学对组织进行细胞色素C进行表达分布检测。结果新生小鼠不同部位皮肤毛囊发育差异很大，这种差异不仅体现在形态差异上，而发育时间的差异也十分明显。小鼠出生后背部皮肤和尾部皮肤的毛囊发育都经过了一个非线性的发育和生长期，过了非线性的发育和生长期才开始快速生长，相比较尾部发育略迟于背部。触须部毛囊发育特征和背部尾部差异很大，一出生便可看到较成熟的触毛，没有经过稳定期便开始发育。结论通过形态学比较，结合CytC表达分布水平，发现新生小鼠不同部位皮肤毛囊早期发育存在形态和时间上的差异。 展开更多

关键词 毛囊 细胞色素C 毛囊发育差异

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高校实验室科研服务平台实验教学探索与实践 被引量：1

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作者 贾宇臣 王利 《当代医学》 2012年第9期158-159,共2页

依托开放性实验室,集中资源建设研究生公共科研平台,提高研究生的科研质量,更好地完成研究生的教育科研工作,针对目前情况我们进行了因地制宜的改革与实践。首先,对即将开展研究生课题的学生进行有针对性的短期培训,加强研究生对科研的... 依托开放性实验室,集中资源建设研究生公共科研平台,提高研究生的科研质量,更好地完成研究生的教育科研工作,针对目前情况我们进行了因地制宜的改革与实践。首先,对即将开展研究生课题的学生进行有针对性的短期培训,加强研究生对科研的认知,培养科研理念,从而带动他们的创新能力;其次,通过实验操作使之了解每个实验的实际用途、意义及规范的操作;再次,定期组织研究生研讨会和专题报告,尽可能的少走不必要的科研弯路,了解本研究领域的研究动态,在有限的资金和时间里收获更多的科研成果。 展开更多

关键词 开放性实验室 教学改革 创新能力

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轮状病毒G3血清型抗原蛋白VP7在马铃薯中的表达

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作者 贾宇臣 李刚强 +2 位作者 徐秒云 刘德虎 李连国 《内蒙古农业大学学报（自然科学版）》 CAS 2005年第4期39-42,共4页

采用RT-PCR方法扩增得到轮状病毒外壳蛋白G3VP7基因,其5′端和3′端分别与马铃薯Y病毒(PVY)的前导序列和PVY 3′端的非编码区序列相连接,将拼接好的目的片段克隆到植物表达载体pB I121质粒上,利用三亲融合法将重组质粒转入农杆菌,农杆... 采用RT-PCR方法扩增得到轮状病毒外壳蛋白G3VP7基因,其5′端和3′端分别与马铃薯Y病毒(PVY)的前导序列和PVY 3′端的非编码区序列相连接,将拼接好的目的片段克隆到植物表达载体pB I121质粒上,利用三亲融合法将重组质粒转入农杆菌,农杆菌介导转化植株,经PCR、PCR-Southern b lot、Southern b lot和ELISA鉴定,确定VP7基因已转入马铃薯基因组,并得以正确表达,为以植物为生物反应器生产口服疫苗奠定了基础。 展开更多

关键词 轮状病毒 VP7基因 转基因植物 口服疫苗

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蓝莓花青素通过下调p53基因DNA甲基化抑制口腔癌KB细胞增殖及诱导细胞凋亡 被引量：28

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作者 陈琦 李少伟 +1 位作者 贾宇臣 王利 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期566-573,共8页

文章从内蒙古野生蓝莓(Vaccinium uliginosum Lim)中提取花青素,观察其对口腔癌细胞株KB的增殖及凋亡的作用,探讨其作用机制与p53基因甲基化的相关性。利用含0.1%盐酸的甲醇提取花青素,用高效液相色谱-质谱(High performance liquid chr... 文章从内蒙古野生蓝莓(Vaccinium uliginosum Lim)中提取花青素,观察其对口腔癌细胞株KB的增殖及凋亡的作用,探讨其作用机制与p53基因甲基化的相关性。利用含0.1%盐酸的甲醇提取花青素,用高效液相色谱-质谱(High performance liquid chromatography-mass spectrometry,HPLC-MS)鉴定花青素的成分。利用四甲基偶氮唑蓝(Methylthiazolyl-tetrazolium,MTT)比色法、流式细胞术、免疫荧光法、免疫细胞化学法和Western blot法分析蓝莓花青素对KB细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡和p53蛋白表达的影响;利用甲基化特异性PCR法(Methylation-specific PCR,MSP)分析蓝莓花青素诱导细胞凋亡与p53基因甲基化的关系。结果显示,内蒙古自治区的野生蓝莓中至少存在14种花青素成分;蓝莓花青素呈剂量依赖的方式抑制KB细胞增殖,诱导细胞周期阻滞在G2/M期,而且能诱导细胞凋亡;蓝莓花青素处理后Caspase-9蛋白和细胞色素C的表达明显增加;Western blot结果表明蓝莓花青素可以诱导KB细胞中p53蛋白表达上调;MSP结果表明随蓝莓花青素浓度增加,未甲基化的p53的比例增加,说明p53的甲基化状态有所下调。 展开更多

关键词 花青素 抗癌 蓝莓 口腔癌 DNA甲基化

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蓝莓花青素诱导结肠癌LS174T细胞凋亡和抑制其增殖 被引量：11

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作者 侯锐 王利 +2 位作者 李少伟 贾宇臣 陈琦 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第11期1467-1471,共5页

目的观察蓝莓花青素对结肠癌LS174T细胞增殖的抑制作用及凋亡的诱导及探究蓝莓花青素的抗癌机制。方法体外培养结肠癌LS174T细胞,加入不同浓度的蓝莓花青素(25、50、100和200μg/m L)处理,利用CCK法、Hoechst染色检测不同浓度的蓝莓花... 目的观察蓝莓花青素对结肠癌LS174T细胞增殖的抑制作用及凋亡的诱导及探究蓝莓花青素的抗癌机制。方法体外培养结肠癌LS174T细胞,加入不同浓度的蓝莓花青素(25、50、100和200μg/m L)处理,利用CCK法、Hoechst染色检测不同浓度的蓝莓花青素对LS174T细胞增殖和凋亡的影响;实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测细胞相关凋亡基因P53、CCND3、P73、SFN、caspase-8和FAM200a mRNA的表达;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测细胞caspase-8和P73的表达。结果蓝莓花青素呈时间和剂量依赖性抑制了结肠癌LS174T的增殖(P<0.05);蓝莓花青素呈现剂量依赖性诱导癌细胞凋亡;CCND3、P73和SFN mRNA表达水平上调(P<0.05),caspase-8、FAM200a和P53 mRNA表达水平下调(P<0.05);caspase-8蛋白表达下调,P73蛋白表达上调。结论蓝莓花青素抑制结肠癌ls174t细胞增殖,诱导凋亡与P73蛋白表达上调和caspase-8蛋白表达下调相关。 展开更多

关键词 花青素 抗癌 结肠癌 蓝莓

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线栓法制备大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型的改良及探讨 被引量：22

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作者 赵凯 张国华 +1 位作者 贾宇臣 李宁 《中国卒中杂志》 2012年第12期916-921,共6页

目的探讨建立一种操作简便、稳定性好、成功率高的大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型。方法 60只清洁级成年健康Wistar雄性大鼠,随机分为传统组和改良组各30只,传统组参照ZeaLonga法制备大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型,改良组主要针对三个方面... 目的探讨建立一种操作简便、稳定性好、成功率高的大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型。方法 60只清洁级成年健康Wistar雄性大鼠,随机分为传统组和改良组各30只,传统组参照ZeaLonga法制备大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型,改良组主要针对三个方面进行改良以提高成功率,涉及线栓头端的处理、插入线栓的方式以及插入线栓位置的选择等。通过神经功能评分及脑组织学检查来验证模型稳定性和成功率。结果制模后改良组(2.35±1.23)与传统组(1.24士1.50)神经功能评分相比差异有显著性(t=2.852;P=0.007)。改良组实验动物模型制作成功率(63.33%)、存活动物模型制作成功率(73.08%),与传统组(20.00%和33.33%)相比较差异均有显著性(x^2值分别为11.589和6.848,P值分别为0.001和0.009)。结论改良组模型神经功能评分、存活动物模型制作成功率和实验动物模型制作成功率均高于传统组,是较为理想的制备大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型的方法。 展开更多

关键词 线栓法 脑缺血 再灌注 动物模型

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儿茶酚胺抑素在自发性高血压大鼠交感神经活化中的作用 被引量：7

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作者 郭建强 李素娟 贾宇臣 《中国现代医学杂志》 CAS 2019年第5期12-16,共5页

目的探讨儿茶酚胺抑素(Catestatin)在高血压发展过程中的变化规律及其对交感神经活性的作用。方法以自发性高血压大鼠(SHR)(SHR组)及其相应的正常大鼠(WKY)(WKY组)作为研究对象。在大鼠不同的发育阶段(6、12和16周龄)检测心率、血压及血... 目的探讨儿茶酚胺抑素(Catestatin)在高血压发展过程中的变化规律及其对交感神经活性的作用。方法以自发性高血压大鼠(SHR)(SHR组)及其相应的正常大鼠(WKY)(WKY组)作为研究对象。在大鼠不同的发育阶段(6、12和16周龄)检测心率、血压及血浆Catestatin水平。以心率作为交感神经活性的标志。酶联免疫吸附测定Catestatin的浓度,尾套法检测大鼠的血压及心率。结果 SHR组各个周龄的血压、心率均高于相应周龄的WKY组大鼠。SHR组血浆Catestatin浓度高于WKY组(P <0.05),随着周龄的增加,SHR组血浆Catestatin浓度逐渐升高,6周龄为(1.60±0.54)ng/ml,12周龄为(1.76±0.26)ng/ml,16周龄为(3.03±0.57)ng/ml。而WKY组大鼠则保持不变,6周龄为(1.10±0.28)ng/ml,12周龄为(1.05±0.21)ng/ml,16周龄为(1.17±0.12)ng/ml,两组血浆Catestatin的浓度变化趋势有差异(P <0.05)。12周SHR组大鼠尾静脉注射Catestatin,30 min后心率由(417.6±20.9)次/min降到(378.1±15.6)次/min(P <0.05);但血压未下降。结论Catestatin具有抑制心率的作用,可能具有代偿性抑制交感活性的作用。 展开更多

关键词 高血压 儿茶酚胺抑素 交感神经活性 大鼠 近交SHR

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IgA肾病患者单核细胞趋化蛋白-1含量及其意义 被引量：3

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作者 张亚昱 高进 +2 位作者 张铎 苏秀兰 贾宇臣 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期322-324,共3页

目的探讨IgA肾病患者血液、尿液中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的含量变化及其临床意义。方法选取20例8～18岁IgA肾病患者为实验组,20例健康体检者为对照组。用流式细胞仪检测两组血液中CD14+单核细胞的含量;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检... 目的探讨IgA肾病患者血液、尿液中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的含量变化及其临床意义。方法选取20例8～18岁IgA肾病患者为实验组,20例健康体检者为对照组。用流式细胞仪检测两组血液中CD14+单核细胞的含量;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血液、尿液MCP-1的含量,并进行比较。结果 IgA肾病患者血液中CD14+单核细胞的含量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。其尿液中MCP-1的含量较对照组明显增高,差异有统计学意义(P<0.01),而其血液MCP-1的含量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IgA肾病的发病与趋化因子MCP-1有关。监测尿液MCP-1的浓度可望作为临床上评价IgA肾病肾小管间质功能的一项无创伤性指标。 展开更多

关键词 单核细胞趋化蛋白-1 IGA肾病 儿童

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通过生物信息学方法筛选肺鳞癌潜在关键基因 被引量：2

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作者 陈雅婧 贾宇臣 +1 位作者 郑源强 石艳春 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1091-1094,共4页

目的:通过分析肺鳞癌及癌旁组织差异表达基因,初步筛选潜在生物标志物。方法:从公共基因表达数据库(GEO)下载肺鳞癌的芯片数据集。利用R语言limma包对原始数据进行预处理并筛选差异表达基因,通过R语言的clusterProfiler包对差异表达基... 目的:通过分析肺鳞癌及癌旁组织差异表达基因,初步筛选潜在生物标志物。方法:从公共基因表达数据库(GEO)下载肺鳞癌的芯片数据集。利用R语言limma包对原始数据进行预处理并筛选差异表达基因,通过R语言的clusterProfiler包对差异表达基因进行GO和KEGG分析。利用STRING在线软件分析差异基因表达蛋白之间的相互作用,并通过Cytoscape筛选关键基因,进而用GEPIA在线软件验证关键基因的表达情况。结果:通过分析共得到734个差异表达基因,其中290个基因在肺鳞癌中上调,444个基因下调。GO分析显示差异表达基因主要参与的生物过程包括细胞外结构组织、体液水平调节、中性粒细胞介导的免疫应答等。KEGG分析显示差异表达基因主要富集在补体系统、细胞周期、DNA复制等信号通路。通过蛋白互作分析筛选出的关键基因包括PCNA、FOS、PTPRC、MMP9、CDK1、CCL2、IL6、GMPS、CCNB1、TOP2A。经验证PCNA、MMP9、CDK1、GMPS、CCNB1、TOP2A在肺鳞癌中表达增高,FOS、PTPRC、CCL2、IL6在癌组织中表达降低。结论:通过生物信息学筛选差异表达基因和信号通路可能有助于肺鳞癌的分子机制研究,筛选得到的核心基因可能成为肺鳞癌的诊断及治疗靶点。 展开更多

关键词 肺鳞癌 基因芯片 差异表达基因 生物信息学

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流式细胞术在检测细胞内活性氧中的应用 被引量：2

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作者 赵凯 陈琦 +1 位作者 王利 贾宇臣 《现代检验医学杂志》 CAS 2012年第1期99-100,103,共3页

目的流式细胞术检测细胞内活性氧（reactive oxygen species，ROS）的水平。方法将新生1天20只乳鼠随机分为3组（试验组15只，阴性和阳性对照组各5只），取乳鼠海马组织制备成单细胞悬液，经蓝莓花色苷、双氧水处理后，加入二氯荧光素... 目的流式细胞术检测细胞内活性氧（reactive oxygen species，ROS）的水平。方法将新生1天20只乳鼠随机分为3组（试验组15只，阴性和阳性对照组各5只），取乳鼠海马组织制备成单细胞悬液，经蓝莓花色苷、双氧水处理后，加入二氯荧光素一双乙酸盐（DCF-DA）孵育，13（2F-DA进入细胞后可被ROS氧化生成发荧光的2’，7’-二氯荧光素（DCF）52，通过流式细胞仪检测DCF荧光水平的变化，同时设立阴性及阳性对照。结果蓝莓花色苷物质可以降低H2O2刺激诱导的胞内ROS的产生，以1umol／L效果最为明显。结论利用流式细胞仪检测过氧化物刺激后胞内产生的活性氧是一种简单、准确、稳定的方法。 展开更多

关键词 流式细胞术 活性氧 二氯荧光素 双乙酸盐(DCF-DA) 蓝莓花色苷

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肠毒素大肠杆菌LT—B基因转基因马铃薯口服免疫原性研究 被引量：2

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作者 王利 赵凯 +2 位作者 陈琦 姜丽丽 贾宇臣 《科学技术与工程》 2011年第27期6560-6563,共4页

探讨马铃薯表达的产肠毒素大肠杆菌热敏肠毒素B亚基口服免疫原性,选择4周龄的昆明白小鼠。转基因马铃薯块茎经冷冻干燥后,研磨成粉状,以灌胃给药的方式对小鼠进行免疫。分0.2 g、0.4 g和0.6 g三个剂量组,免疫三次,每周一次。对照组用5μ... 探讨马铃薯表达的产肠毒素大肠杆菌热敏肠毒素B亚基口服免疫原性,选择4周龄的昆明白小鼠。转基因马铃薯块茎经冷冻干燥后,研磨成粉状,以灌胃给药的方式对小鼠进行免疫。分0.2 g、0.4 g和0.6 g三个剂量组,免疫三次,每周一次。对照组用5μg细菌中表达的抗原蛋白腹腔注射免疫小鼠,空白组小鼠饲喂普通鼠粮。利用ELISA方法对小鼠血清、粪便特异性抗体表达进行分析。结果有45%小鼠经转基因马铃薯口服免疫后可诱导特异性的免疫应答。与细菌表达的抗原免疫反应相比,血清IgG反应和黏膜sIgA反应略强或相当。说明产肠毒素大肠杆菌转基因植物疫苗免疫动物可诱导特异的系统免疫应答和黏膜免疫应答。为利用植物生产预防大肠杆菌性腹泻可食用的口服疫苗,保护儿童免受细菌性腹泻的侵染奠定了基础。 展开更多

关键词 植物疫苗 腹泻 产肠毒素大肠杆菌热敏肠毒素 B 亚基 免疫原性

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综合运用各种方法,提高医学生物化学教学效果 被引量：3

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作者 李薇 王海生 +3 位作者 邓秀玲 扈瑞平 贾宇臣 薛昕 《中国继续医学教育》 2017年第17期35-36,共2页

医学生物化学是医学专业学生的必修课,但由于其涉及内容广泛且抽象,使得学好本门课程并不容易。随着医学生物化学知识体系的不断发展,传统的教学方法已不能够满足本课程教学的需求。本文从教学方法的角度对如何提高本课程的教学效果进... 医学生物化学是医学专业学生的必修课,但由于其涉及内容广泛且抽象,使得学好本门课程并不容易。随着医学生物化学知识体系的不断发展,传统的教学方法已不能够满足本课程教学的需求。本文从教学方法的角度对如何提高本课程的教学效果进行了初步探讨,阐述了问题教学法、案例教学法、启发式教学法和多媒体教学法的特点及对教学效果的促进作用。教师应及时跟综本学科发展的最新进展,将最新的研究成果融入课堂,综合并灵活地运用各种教学方法,激发学生的学习兴趣,针对不同专业方向的学生特点,对不同的教学内容要采用不同的教学方法,可以提高课堂教学效果。 展开更多

关键词 医学生物化学 教学方法 教学效果

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脑缺血/再灌注损伤小鼠生物学特性及稳定性 被引量：1

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作者 赵凯 陈晓雪 +1 位作者 陈雅婧 贾宇臣 《科学技术与工程》 北大核心 2021年第21期8822-8827,共6页

建立稳定的脑缺血/再灌注损伤小鼠模型,对于研究缺血性脑病具有至关重要的意义。为了建立一种易操作、成功率高、稳定性好的脑缺血再灌注损伤小鼠模型,使用70只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级健康雄性C57小鼠,随机分成假... 建立稳定的脑缺血/再灌注损伤小鼠模型,对于研究缺血性脑病具有至关重要的意义。为了建立一种易操作、成功率高、稳定性好的脑缺血再灌注损伤小鼠模型,使用70只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级健康雄性C57小鼠,随机分成假手术组(n=10)、颈总动脉(common carotid artery,CCA)进线组(n=30)及颈外动脉(external carotid artery,ECA)进线组(n=30),参照Zea Longa法,在线栓的选取、血管分离及处理、线栓插入方式等方面进行探讨,通过神经功能缺损评分、TTC染色检查脑梗死体积及苏木素/伊红染色观察脑组织形态学上的病理改变来分析确证模型成功率及稳定性。结果表明:ECA进线组神经功能缺损评分在2~3分比率占70.0%,CCA进线组占43.3%;ECA组和CCA组术后存活率分别为90%和66.7%,两组之间存在显著性差异(P<0.05);脑梗死体积和组织病理学,ECA进线组与CCA进线组之间均无差异(P>0.05)。采用颈外动脉进线方式与颈总动脉进线相比,脑梗死体积同样稳定且存活率更高。 展开更多

关键词 脑卒中 缺血再灌注损伤 稳定性 线栓法

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维生素D受体mRNA在卵巢癌细胞增殖中的作用 被引量：8

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作者 薛昕 叶纪诚 +2 位作者 贾宇臣 李薇 李存保 《内蒙古医学院学报》 2010年第3期289-293,共5页

目的:探讨维生素D受体mRNA在人卵巢癌细胞生长和增殖中的作用机制。方法:选用人卵巢癌细胞株HO8910进行体外培养,培养时添加不同浓度的1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2D3],作用24、48、72h后,采用MTT比色法测定细胞生长抑制率;采用流式细胞... 目的:探讨维生素D受体mRNA在人卵巢癌细胞生长和增殖中的作用机制。方法:选用人卵巢癌细胞株HO8910进行体外培养,培养时添加不同浓度的1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2D3],作用24、48、72h后,采用MTT比色法测定细胞生长抑制率;采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)进行细胞周期分析;采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)mRNA的表达。结果:不同浓度的1,25(OH)2D3对HO8910细胞生长均起到抑制作用(P<0.05),并呈浓度和时间依赖关系;1,25(OH)2D3能增加G0/G1期细胞比例,降低S、G2/M期细胞比例(P<0.05),从而降低细胞增殖指数PI(P<0.05);能够上调VDRmRNA的表达(P<0.05),从而抑制卵巢癌细胞增殖。结论:1,25(OH)2D3对于人卵巢癌细胞株HO8910的增殖具有显著的抑制作用,其机制可能是通过上调VDRmRNA的表达来实现的。 展开更多

关键词 维生素D受体 细胞周期 1 25二羟维生素D3

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山羊骨髓间充质干细胞的分离培养 被引量：1

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作者 王利 陈琦 +2 位作者 贾宇臣 郑源强 李少伟 《畜牧与饲料科学》 2014年第12期4-6,共3页

旨在对山羊的骨髓间充质干细胞（BMSCs）进行分离培养。将分离得到的BMSCs进行传代培养，采用RT-PCR法检测其干细胞转录因子oct4和sox2基因，以验证其干细胞特性；在此基础上绘制BMSCs的生长曲线，对其生物学特性进行直观了解。结果表... 旨在对山羊的骨髓间充质干细胞（BMSCs）进行分离培养。将分离得到的BMSCs进行传代培养，采用RT-PCR法检测其干细胞转录因子oct4和sox2基因，以验证其干细胞特性；在此基础上绘制BMSCs的生长曲线，对其生物学特性进行直观了解。结果表明，分离到的山羊BMSCs原代细胞呈现出成纤维样，并能够表达oct4和sox2基因，证明了其干细胞特性；其生长曲线呈“S”型，在1～2 d时为潜伏期，第3天时进入指数生长期，第7天时进入平台期。结果提示，分离得到的细胞具有BMSCs的特性，能够用于后续的相关试验研究。 展开更多

关键词 山羊 骨髓间充质干细胞 RT-PCR 生长曲线

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TERT基因修饰的绵羊脂肪间充质干细胞多向诱导分化的研究

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作者 孙毅 朱淑芬 +5 位作者 王婧超 韩霞 王利 陈琦 贾宇臣 李少伟 《四川医学》 CAS 2016年第9期971-973,共3页

目的探讨TERT基因修饰的绵羊脂肪间充质干细胞在体外多向分化的能力,验证TERT基因对绵羊脂肪间充质干细胞永生化的作用。方法将TERT-ADSCs进行传代培养,选取P3和P30进行成骨和成神经的诱导分化,通过组织学染色和特异性表达基因的RT-PCR... 目的探讨TERT基因修饰的绵羊脂肪间充质干细胞在体外多向分化的能力,验证TERT基因对绵羊脂肪间充质干细胞永生化的作用。方法将TERT-ADSCs进行传代培养,选取P3和P30进行成骨和成神经的诱导分化,通过组织学染色和特异性表达基因的RT-PCR鉴定,对TERT-ADSCs的多向分化能力进行鉴定。结果 TERT-ADSCs可以稳定传至P30,P3和P30成骨诱导后,可见明显的骨结节突起,茜素红染色后呈红褐色,且表达特异性基因CBFA和Osteocalcin。成神经诱导后细胞呈三角或树突状形态,甲苯胺蓝染色后可见尼氏体存在,且表达特异性基因NSE和GFAP。结论绵羊TERT-ADSCs传至多代后仍然具有多向分化的潜能,为ADSCs永生化研究提供了理论基础。 展开更多

关键词 TERT—ADSCs 传代培养 诱导分化 RT—PCR

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