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产蛋前期和产蛋期籽鹅组织内参基因的稳定性 被引量：6
1
作者 计红 王忠伟 +3 位作者 郭景茹 王建发 赫荣贺 杨焕民 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期2260-2266,共7页
【目的】分析比较使用广泛的7个候选内参基因在产蛋前期和产蛋期籽鹅组织中的表达情况,筛选籽鹅组织基因表达分析中最佳的内参基因及其数目。【方法】应用实时定量反转录PCR技术,分别检测28S rRNA、18S rRNA、GAPDH、ACTB、HPRT1、SDH和... 【目的】分析比较使用广泛的7个候选内参基因在产蛋前期和产蛋期籽鹅组织中的表达情况,筛选籽鹅组织基因表达分析中最佳的内参基因及其数目。【方法】应用实时定量反转录PCR技术,分别检测28S rRNA、18S rRNA、GAPDH、ACTB、HPRT1、SDH和TUB在产蛋前期与产蛋期健康籽鹅肝脏、肾脏、心脏、腿肌和卵巢组织中的表达情况,采用绝对定量方法确定基因拷贝数,然后分别使用geNorm和NormFinder程序进行数据分析。【结果】产蛋前期籽鹅各组织中7个内参基因表达稳定度的顺序分别为:GAPDH=HRPT1(0.195)>TUB(0.244)>28SrRNA(0.414)>18S rRNA(0.495)>ACTB(0.541)>SDH(0.610);产蛋期籽鹅各组织中7个内参基因表达稳定度的顺序分别为:GAPDH=28S rRNA(0.128)>TUB(0.181)>ACTB(0.192)>SDH(0.221)>HRPT1(0.316)>18S rRNA(0.362),且7个基因的配对差异分析分别为V2/3(产蛋前期)=0.084、V2/3(产蛋期)=0.069,内参基因的最适数目均为2个。【结论】产蛋前期和产蛋期籽鹅组织目的基因的表达分析中相对适合的内参基因分别为GAPDH和HRPT1、GAPDH和28S rRNA。 展开更多
关键词 籽鹅 内参基因 实时定量反转录PCR geNorm程序 NormFinder程序
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籽鹅卵泡颗粒细胞烯醇化酶过表达模型的建立及其对孕酮分泌的影响 被引量：4
2
作者 张伟宏 计红 +2 位作者 王江璐 赫荣贺 杨焕民 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2014年第1期85-88,共4页
目的:建立α-烯醇化酶(ENO1)腺病毒过表达载体转染原代培养籽鹅卵泡颗粒细胞模型,探讨ENO1过表达对颗粒细胞孕酮分泌的影响。方法:采用ENO1腺病毒过表达载体以梯度感染复数值(MOI)100、250、350、400pfu/cell转染原代培养籽鹅卵泡颗粒细... 目的:建立α-烯醇化酶(ENO1)腺病毒过表达载体转染原代培养籽鹅卵泡颗粒细胞模型,探讨ENO1过表达对颗粒细胞孕酮分泌的影响。方法:采用ENO1腺病毒过表达载体以梯度感染复数值(MOI)100、250、350、400pfu/cell转染原代培养籽鹅卵泡颗粒细胞,于转染后24 h、48 h,荧光倒置显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)表达。双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)研究ENO1过表达对颗粒细胞孕酮分泌的影响。结果:最佳转染条件是,当MOI为350 pfu/cell,转染48 h后,转染率达100%;通过荧光定量PCR与Western blot法,检测到ENO1 mRNA与蛋白均过表达(P<0.01);与培养液组和腺病毒空载体组相比较,ENO1过表达使颗粒细胞孕酮分泌量极显著增加(P<0.01)。结论:ENO1过表达会使体外原代培养的籽鹅卵泡颗粒细胞孕酮分泌量增加。 展开更多
关键词 ENO1 过表达 孕酮 颗粒细胞
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ENO1过表达对籽鹅卵泡颗粒细胞凋亡基因Bcl-2表达的影响 被引量：1
3
作者 王江璐 计红 +4 位作者 张伟宏 赫荣贺 郭景茹 郭丽 杨焕民 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第7期10-13,共4页
本试验将原代培养的籽鹅卵泡颗粒细胞转染ENO1腺病毒过表达载体,应用实时荧光定量PCR方法检测ENO1过表达对颗粒细胞Bcl-2mRNA表达量的影响。结果发现ENO1过表达使卵泡颗粒细胞Bcl-2mRNA表达量极显著增加(P<0.01)。提示ENO1可能通过使... 本试验将原代培养的籽鹅卵泡颗粒细胞转染ENO1腺病毒过表达载体,应用实时荧光定量PCR方法检测ENO1过表达对颗粒细胞Bcl-2mRNA表达量的影响。结果发现ENO1过表达使卵泡颗粒细胞Bcl-2mRNA表达量极显著增加(P<0.01)。提示ENO1可能通过使Bcl-2基因表达量增加,从而抑制籽鹅卵泡颗粒细胞凋亡,促进卵泡的发育。 展开更多
关键词 籽鹅 ENO1过表达 BCL-2基因 颗粒细胞
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抗应激复合添加剂对模拟运输应激大鼠血液相关生化指标的影响 被引量：3
4
作者 赫荣贺 甄莉 +3 位作者 郭景茹 张伟宏 王江璐 杨焕民 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期268-272,共5页
将30只清洁级Wistar大鼠随机分为试验组、普通对照组及应激对照组。试验组用自拟抗应激复合添加剂(维生素C+维生素E+碳酸氢钾+γ-氨基丁酸,羧甲基纤维素钠助悬)进行灌胃,2对照组灌胃0.5%羧甲基纤维素钠(CMC)溶液。1周后利用摇床模拟运... 将30只清洁级Wistar大鼠随机分为试验组、普通对照组及应激对照组。试验组用自拟抗应激复合添加剂(维生素C+维生素E+碳酸氢钾+γ-氨基丁酸,羧甲基纤维素钠助悬)进行灌胃,2对照组灌胃0.5%羧甲基纤维素钠(CMC)溶液。1周后利用摇床模拟运输应激,检测大鼠血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、血糖(GLU)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、糖皮质激素(GC)以及部分细胞因子(IL-2、IL-4、IL-6和TNF-α)等应激血清标志物水平。结果显示,大鼠经2 h模拟运输应激后,各项指标均有不同程度升高,而自拟抗应激添加剂对运输应激引起的CK、ACTH、GC、IL-2、IL-4和IL-6水平升高有明显的抑制作用;表明自拟的抗应激复合添加剂对抵抗大鼠运输应激具有较好的效果。 展开更多
关键词 大鼠 运输应激 抗应激添加剂 生化指标 细胞因子
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