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基膜聚糖通过抑制1型辅助T细胞分化提高耐药性卵巢癌治疗效果
1
作者 陈萍 吴若琳 +2 位作者 高星 赵元琳 袁媛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期687-695,共9页
目的探讨基膜聚糖(LUM)在卵巢癌顺铂耐药中的作用机制,并初步探索其对1型辅助T(Th1)细胞分化的影响。方法通过基因表达数据集(GEO)筛选卵巢癌顺铂耐药株及敏感株中差异表达的基因,通过实时定量PCR检测其表达水平。利用小干扰RNA(siRNA)... 目的探讨基膜聚糖(LUM)在卵巢癌顺铂耐药中的作用机制,并初步探索其对1型辅助T(Th1)细胞分化的影响。方法通过基因表达数据集(GEO)筛选卵巢癌顺铂耐药株及敏感株中差异表达的基因,通过实时定量PCR检测其表达水平。利用小干扰RNA(siRNA)敲低人卵巢癌细胞中LUM表达,并用Western blot法验证敲低效率。通过流式细胞术检测敲低LUM对顺铂处理后的卵巢癌细胞系周期及凋亡的影响。通过蛋白质相互作用(PPI)网络筛选LUM潜在靶蛋白,并用分子对接验证其相互作用。肿瘤免疫评估资源数据库(TIMER)筛选LUM对卵巢癌系分泌细胞因子的影响,并利用ELISA与实时定量PCR验证。流式细胞术分析LUM对共培养的CD4^(+)T细胞分化的调控作用。结果GEO数据显示LUM在顺铂耐药株中显著上调,且其表达水平与患者预后相关。LUM在卵巢癌顺铂耐药细胞株中表达水平较高,且顺铂治疗能促进LUM的表达。敲低LUM增加顺铂诱导的卵巢癌细胞的凋亡和细胞周期阻滞,提高药物敏感性。靶基因筛选表明,LUM可能通过与Src同源域磷酸酶2(SHP2)相互作用调控卵巢癌细胞对顺铂的敏感性。另外,TIMER分析结果提示高表达LUM抑制Th1细胞分化,在卵巢癌耐药株中敲低LUM促进Th1细胞分化,通过调控γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素12(IL-12)分泌影响免疫细胞的肿瘤杀伤力。结论LUM在卵巢癌顺铂耐药中表达上调,可能通过调控SHP2相关信号通路降低卵巢癌细胞顺铂敏感性。LUM还通过调控卵巢癌细胞细胞因子分泌,进而抑制Th1细胞分化,促进肿瘤耐药性产生,可能是卵巢癌治疗新的潜在靶点。 展开更多
关键词 基膜聚糖(LUM) 卵巢癌 顺铂 1型辅助T(Th1)细胞
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IDH1突变通过影响软骨分化促进软骨肿瘤的发生
2
作者 袁媛 高星 +2 位作者 杨莹 赵元琳 张秀敏 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第13期2359-2363,共5页
目的:研究IDH1突变在软骨肿瘤发生过程中对软骨分化能力的影响。方法:利用Sanger测序法,检测收集的人软骨肿瘤石蜡标本中IDH1的突变情况;诱导小鼠胚胎间充质干细胞向成骨细胞分化,转染IDH1 R132H位点突变的质粒,观察细胞分化情况;分离培... 目的:研究IDH1突变在软骨肿瘤发生过程中对软骨分化能力的影响。方法:利用Sanger测序法,检测收集的人软骨肿瘤石蜡标本中IDH1的突变情况;诱导小鼠胚胎间充质干细胞向成骨细胞分化,转染IDH1 R132H位点突变的质粒,观察细胞分化情况;分离培养IDH1突变小鼠的原代软骨细胞,Real-time PCR方法检测软骨分化标志分子Sox9和Col-II以及软骨细胞肥大标志分子Runx2和Col-X基因的表达水平;构建软骨组织特异性突变的IDH1-KI小鼠,采用阿尔新蓝-茜素红全骨架染色,研究IDH1突变如何影响软骨细胞的分化功能。结果:IDH1突变是软骨肿瘤中常见的遗传学改变;IDH1 R132H位点突变之后,细胞分泌的2-HG浓度显著增高;加入成骨细胞分化诱导液之后,胚胎间充质干细胞能够向成骨细胞分化,而当IDH1 R132H位点突变后,干细胞无法正常分化;IDH1突变小鼠的软骨细胞中,软骨分化标志性分子Sox9和Col-II基因表达无差异,然而软骨细胞肥大标志性分子Runx2和Col-X基因表达显著高于野生组小鼠,利用5 mmol/L的2-HG刺激模拟IDH1突变,得到相似结果;IDH1-KI小鼠整个骨骼中软骨含量明显增多,且有明显的骨化异常。结论:IDH1突变促进了软骨细胞的生长,抑制了软骨到成骨的分化过程。 展开更多
关键词 软骨肿瘤 IDH1突变 软骨分化
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病理形态学数字化教学的利弊探讨 被引量：24
3
作者 叶菁 袁媛 +3 位作者 赵元琳 高星 李静 王哲 《中华神经外科疾病研究杂志》 CAS 2016年第1期66-68,共3页
目的探讨病理形态学数字化教学的利与弊。方法结合多年的教学经验和科室实际情况,本文主要讨论病理形态学数字化教学的优势和存在的主要问题,并探讨其在病理形态学化教学中的应用方式。结果作为一种崭新的形态学教学手段,数字化教学应... 目的探讨病理形态学数字化教学的利与弊。方法结合多年的教学经验和科室实际情况,本文主要讨论病理形态学数字化教学的优势和存在的主要问题,并探讨其在病理形态学化教学中的应用方式。结果作为一种崭新的形态学教学手段,数字化教学应作为病理形态学教学的重要辅助手段。结论数字化教学能够将多个教学环节有机地结合在一起,大大提高了病理形态学教学质量,激发了学生的学习积极性。 展开更多
关键词 病理学 形态学 数字化 教学
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突变型异柠檬酸盐脱氢酶1(IDH1)水平与人脑胶质瘤细胞增殖和血管增生正相关 被引量：3
4
作者 石剑宽 赵元琳 +5 位作者 袁媛 王超 谢忠林 高星 肖黎明 叶菁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期360-363,共4页
目的研究人胶质瘤中异柠檬酸盐脱氢酶1突变体(IDH1R132H)表达水平与肿瘤细胞增殖活性和血管形成之间的关系。方法采用测序法和免疫组织化学染色法检测IDH1突变情况和IDH1(R132H)表达水平,采用免疫组织化学染色法分析胶质瘤Ki-67标记指数... 目的研究人胶质瘤中异柠檬酸盐脱氢酶1突变体(IDH1R132H)表达水平与肿瘤细胞增殖活性和血管形成之间的关系。方法采用测序法和免疫组织化学染色法检测IDH1突变情况和IDH1(R132H)表达水平,采用免疫组织化学染色法分析胶质瘤Ki-67标记指数,采用CD34免疫组织化学染色分析人胶质瘤组织中的血管数量,通过统计学方法,分析胶质瘤中IDH1(R132H)表达水平与肿瘤Ki-67标记指数和血管数量的相关性。结果 IDH1在Ⅱ级、Ⅲ级胶质瘤及继发性胶质母细胞瘤中突变率较高,且IDH1(R132H)表达水平与胶质瘤Ki-67和微血管密度存在明显的正相关。结论 IDH1在Ⅱ、Ⅲ级胶质瘤和继发胶质母细胞瘤中表达水平高,且突变型IDH1(R132H)的表达水平可能在胶质瘤的增殖和血管形成中发挥重要作用。 展开更多
关键词 胶质瘤 IDH1 细胞增殖 血管增生
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二甲双胍抑制脂多糖诱导的THP-1细胞源性泡沫细胞形成 被引量：2
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作者 谢忠林 袁媛 +5 位作者 石剑宽 史小飞 高星 赵元琳 叶菁 冯旭阳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期168-172,共5页
目的探讨二甲双胍(Met)对脂多糖(LPS)诱导的THP-1来源泡沫细胞的形成、脂滴形态以及脂滴表面蛋白分子表达的影响。方法采用100 ng/m L佛波酯(PMA)处理THP-1细胞48 h后,诱导其分化成为巨噬细胞;再利用50μg/m L氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL... 目的探讨二甲双胍(Met)对脂多糖(LPS)诱导的THP-1来源泡沫细胞的形成、脂滴形态以及脂滴表面蛋白分子表达的影响。方法采用100 ng/m L佛波酯(PMA)处理THP-1细胞48 h后,诱导其分化成为巨噬细胞;再利用50μg/m L氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)和1μg/m L LPS促进THP-1细胞来源的巨噬细胞形成泡沫细胞,在此过程中用(0、100、200)μmol/L Met进行处理,采用油红O染色分析Met对泡沫细胞形成的影响;采用BODIPY493/503染色,荧光显微镜观察泡沫细胞内脂滴的形态和数量;抽提细胞内脂类,通过定量试剂盒测定细胞甘油三酯(TG)的含量;采用Western blot分析脂滴表面蛋白中脂肪分化相关蛋白(ADRP)、47 k Da的尾连蛋白(TIP47)的表达水平。结果与ox-LDL和LPS组相比,采用100μmol/L、200μmol/L Met处理后能够降低泡沫细胞内的脂滴大小和数量,定量分析显示细胞内TG含量明显降低,并存在剂量依赖关系,其中200μmol/L Met能够降低泡沫细胞中约25%的TG储积。Western blot结果显示,Met能够降低泡沫细胞中ADRP的表达水平,但对TIP47的表达水平无影响。结论 Met能够抑制LPS诱导的THP-1细胞源性泡沫细胞形成,并抑制脂质蓄积,同时下调细胞内ADRP的表达水平。 展开更多
关键词 二甲双胍 THP-1细胞 泡沫细胞 脂肪分化相关蛋白(ADRP)
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阿托伐他汀钙对非酒精性脂肪肝脂质储积的影响 被引量：16
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作者 曹开宇 高星 +4 位作者 袁媛 赵元琳 张笑言 张琎 冯旭阳 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期418-423,共6页
目的探讨阿托伐他汀钙对非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)的肝脏脂质储积的影响。方法利用不同程度的高脂饮食建立正常体重和超重的小鼠NAFLD模型,阿托伐他汀每天20 mg/kg灌胃10天,HE染色观察肝脏组织学形态... 目的探讨阿托伐他汀钙对非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)的肝脏脂质储积的影响。方法利用不同程度的高脂饮食建立正常体重和超重的小鼠NAFLD模型,阿托伐他汀每天20 mg/kg灌胃10天,HE染色观察肝脏组织学形态,脂质定量试剂盒检测肝脏脂质含量,血生化检测小鼠肝脏功能变化。收集临床数据,回顾性分析101例NAFLD患者,按体重指数分为正常体重(18.5≤BMI<24,n=48)和超重组(BMI≥24,n=53),分别检测阿托伐他汀钙治疗前后患者肝功能、血浆脂肪指标,并通过肝脏常规超声检查评估脂肪肝严重程度的变化。结果 35%高脂饮食的小鼠体重和正常饮食的小鼠体重相比,差异无显著性;58%高脂饮食小鼠体重较正常饮食小鼠体重显著增加。阿托伐他汀每天20 mg/kg灌胃10天后,HE染色显示58%高脂饮食小鼠脂肪肝程度较35%高脂饮食小鼠减轻更为显著。肝脏脂肪含量检测显示35%高脂饮食小鼠及58%高脂饮食小鼠肝脏总胆固醇(total cholesterol,TC)和甘油三酯(triglyceride,TG)含量均较前下降,且58%高脂饮食小鼠比35%高脂饮食小鼠下降更为明显。临床治疗数据分析显示,患者每天服用20 mg阿托伐他汀钙治疗6个月后,正常体重组和超重组患者血浆TC、TG均较治疗前有不同程度的下降,且超重组血中TC和TG下降较正常组更为明显。肝脏常规超声结果也显示阿托伐他汀钙能够明显降低患者肝脂肪变程度,且超重组患者受益更为明显。结论阿托伐他汀钙可用于NAFLD的治疗,且对超重患者脂肪肝的改善效果更为明显。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪肝 阿托伐他汀钙 超重 胆固醇 甘油三酯
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小鼠AChR(m97-116)肽段-CD205融合单链抗体的表达及活性检测
7
作者 孙超 袁媛 +5 位作者 郑鹏飞 高星 赵元琳 李乐 常婷 李柱一 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2015年第1期4-8,共5页
目的构建小鼠AChR(m97-116)肽段-CD205融合单链抗体原核表达载体,表达融合单链抗体(m97-116-scFv205),检测其对未成熟树突状细胞(iDC)的亲和力,为通过iDC诱导AChR特异性免疫耐受提供实验基础。方法分离培养小鼠原代骨髓祖细胞,经粒细胞... 目的构建小鼠AChR(m97-116)肽段-CD205融合单链抗体原核表达载体,表达融合单链抗体(m97-116-scFv205),检测其对未成熟树突状细胞(iDC)的亲和力,为通过iDC诱导AChR特异性免疫耐受提供实验基础。方法分离培养小鼠原代骨髓祖细胞,经粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)10ng/mL和白细胞介素4(IL-4)10ng/mL刺激培养,经脂多糖(LPS)1ng/mL诱导24h后,高倍显微镜及扫描电镜观察细胞形态;流式细胞术(FCM)检测细胞表面相关分子表达,对iDC表型进行鉴定;构建原核表达载体m97-116-scFv205-pET22b(+),0.1 mmol/mL异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)18℃诱导表达18h,镍(Ni)柱纯化,SDSPAGE和Western blot检测融合单链抗体m97-116-scFv205表达及纯化;FCM检测其与iDC的亲和力。结果形态学观察提示培养细胞为DC,FCM结果显示培养细胞符合iDC表型;SDS-PAGE和Western blot在上清中检测到m97-116-scFv205可溶性表达;亲和力检测显示m97-116-scFv205与iDC具有较高亲和力。结论成功构建并表达m97-116-scFv205融合单链抗体,该抗体与iDC具有较高的亲和力,为下一步靶向iDC诱导AChR特异性免疫耐受治疗重症肌无力奠定了良好的实验基础。 展开更多
关键词 重症肌无力 未成熟树突状细胞 融合单链抗体 CD205
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Perilipin 5在肝细胞癌中的表达及对HepG2细胞脂质代谢和生物学行为的影响 被引量：5
8
作者 张琎 高星 +5 位作者 曹开宇 肖黎明 赵元琳 杨莹 杨日升 叶菁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期1-7,共7页
目的:探讨脂滴包被蛋白5(perilipin 5,Plin5)在肝细胞癌中的表达变化,以及对肝癌细胞HepG2脂质含量、氧化应激和生物学行为的影响。方法:采用免疫组化染色和RT-qPCR分析人肝细胞癌组织中Plin5的表达。通过腺病毒感染,在HepG2细胞中过表... 目的:探讨脂滴包被蛋白5(perilipin 5,Plin5)在肝细胞癌中的表达变化,以及对肝癌细胞HepG2脂质含量、氧化应激和生物学行为的影响。方法:采用免疫组化染色和RT-qPCR分析人肝细胞癌组织中Plin5的表达。通过腺病毒感染,在HepG2细胞中过表达Plin5,检测其对肝癌细胞活力、迁移和侵袭能力的影响。利用BODIPY 493/503染色和脂质定量分析确定Plin5对HepG2细胞脂质含量的影响,并利用试剂盒检测过表达Plin5的HepG2细胞中脂质过氧化和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:与正常肝组织比较,人肝细胞癌组织中Plin5的表达明显降低(P <0. 05)。过表达Plin5能够抑制HepG2细胞的活力,降低HepG2细胞的体外迁移和侵袭能力(P <0. 01)。进一步研究发现,过表达Plin5能够促进HepG2细胞中的脂质蓄积,并降低氧化应激水平。结论:肝细胞癌中Plin5呈低表达。Plin5能够促进肝癌细胞中脂质蓄积,降低氧化应激水平,从而抑制肝癌细胞的迁移和生长。 展开更多
关键词 脂滴包被蛋白5 肝细胞癌 氧化应激 脂质代谢 生物学行为
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氧化低密度脂蛋白对THP-1巨噬细胞吞噬和分泌功能的影响 被引量：2
9
作者 郑鹏飞 袁媛 +2 位作者 高星 赵元琳 冯旭阳 《现代生物医学进展》 CAS 2015年第4期649-652,共4页
目的:探讨氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)对巨噬细胞源性泡沫细胞吞噬功能和炎症相关因子分泌功能的影响。方法:利用佛波酯(phorbol ester,PMA)诱导THP-1细胞分化形成巨噬细胞,之后采用ox-LDL处理48小时后... 目的:探讨氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)对巨噬细胞源性泡沫细胞吞噬功能和炎症相关因子分泌功能的影响。方法:利用佛波酯(phorbol ester,PMA)诱导THP-1细胞分化形成巨噬细胞,之后采用ox-LDL处理48小时后,诱导其形成泡沫细胞。利用中性红吞噬实验,分析泡沫细胞形成前后吞噬功能的变化;通过ELISA法,检测细胞培养上清中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)含量,观察ox-LDL对THP-1巨噬细胞功能的影响。结果:细胞形态学结果表明,我们成功利用ox-LDL诱导THP-1巨噬细胞形成泡沫细胞;进一步发现ox-LDL诱导THP-1巨噬细胞表面的清道夫受体CD36表达升高,并促进细胞吞噬功能增加,进一步促进细胞内胆固醇含量显著升高(P<0.05);同时,ox-LDL能够刺激巨噬细胞大量分泌TNF-α(P<0.05)。结论:ox-LDL通过增强清道夫受体CD36表达,提高巨噬细胞的吞噬功能,引起大量胆固醇聚集,产生细胞毒性损伤,并促进TNF-α炎性因子的大量分泌。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 巨噬细胞 泡沫细胞 氧化低密度脂蛋白
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医学本科生科研素质培养实践 被引量：8
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作者 覃君慧 叶菁 +5 位作者 王瑞安 袁媛 高星 赵元琳 杨莹 谷雨 《中华医学教育探索杂志》 2019年第11期1112-1117,共6页
本文旨在探讨医学本科生早期接触科研对其科研素养的培养方式和效果影响。结合教师的科研项目,每年从主动申请的三年级本科学员中筛选3~5名学员参加科室不同课题组的项目。根据学员意愿,或参加科研项目中的部分实验,或单独完成小课题,... 本文旨在探讨医学本科生早期接触科研对其科研素养的培养方式和效果影响。结合教师的科研项目,每年从主动申请的三年级本科学员中筛选3~5名学员参加科室不同课题组的项目。根据学员意愿,或参加科研项目中的部分实验,或单独完成小课题,或就某个问题在教师指导下撰写综述。近10年有25名学员参加了病理学教研室的本科生早期科研活动,共发表论文19篇。参加实验研究的学员,绝大部分都能进行科学实验,并具有一定的独立性,科研思维和动手能力得到锻炼;撰写综述的学员,不仅拓宽了知识面,还培养了文献检索、阅读、综合写作和批判性思维能力。因此,早期科研素养培养有利于调动学生参与科研的积极性与主动性,参加实验研究和专题综述可以在不同层面提升医学本科生的科研能力与科学素养。 展开更多
关键词 医学生 科研素养 批判性思维 论文写作
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