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连翘叶片原生质体分离及瞬时转化 被引量：1
1
作者 赵峥畑 张晓璐 +3 位作者 程堂仁 王佳 张启翔 潘会堂 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2023年第4期130-136,146,共8页
【目的】研究高效分离连翘叶片原生质体的条件,并以PEG介导进行瞬时转化,为连翘基因的同源表达提供技术。【方法】以金叶连翘(Forsythia koreana‘Suwon Gold’)组培苗幼嫩叶片为材料,采用4因素3水平L9(3^(4))正交试验,分析纤维素酶质... 【目的】研究高效分离连翘叶片原生质体的条件,并以PEG介导进行瞬时转化,为连翘基因的同源表达提供技术。【方法】以金叶连翘(Forsythia koreana‘Suwon Gold’)组培苗幼嫩叶片为材料,采用4因素3水平L9(3^(4))正交试验,分析纤维素酶质量浓度(15,20,25 g/L)、离析酶质量浓度(3,5,7 g/L)、甘露醇浓度(0.2,0.4,0.6 mol/L)及酶解时间(5,7,9 h)对原生质体分离的影响,探索最优酶解条件,并在此条件下分离原生质体,之后以PEG介导转化pSuper1300::GFP质粒,研究其遗传转化效果。【结果】L_(9)(34)正交试验结果显示,不同处理的金叶连翘叶片原生质体产量为1.17×10^(6)~5.71×10^(6) g^(-1),影响最大的因素为离析酶质量浓度,且4个因素对产量均有极显著影响;原生质体活力为81.19%~90.69%,影响最大的因素为离析酶质量浓度,且其对活力的影响达到显著水平。最佳酶解条件为:在20 g/L纤维素酶、5 g/L离析酶、0.2 mol/L甘露醇的混合液中酶解9 h,在此条件下原生质体产量为5.57×10^(6) g^(-1),活力为86.79%。PEG介导法结果显示,以GFP为报告基因,在转化后的金叶连翘原生质体中可以检测到绿色荧光信号。【结论】获得金叶连翘叶片原生质体分离的最佳条件,且在此条件下原生质体产量、活力较高,能够成功进行瞬时转化。 展开更多
关键词 原生质体分离 连翘叶片 瞬时转化 GFP
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连翘属种质资源抗寒性评价 被引量：3
2
作者 徐洋 赵峥畑 +6 位作者 吴雨桐 申建双 张启翔 程堂仁 王佳 潘会堂 杨晓辉 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期33-39,共7页
为评价连翘属(Forsythia)植物资源的抗寒性,筛选抗寒种质,以10个连翘属种和品种为材料,测定了露地越冬期间1年生枝条的相对电导率、可溶性糖质量分数、可溶性蛋白质量分数、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性的变化和越冬... 为评价连翘属(Forsythia)植物资源的抗寒性,筛选抗寒种质,以10个连翘属种和品种为材料,测定了露地越冬期间1年生枝条的相对电导率、可溶性糖质量分数、可溶性蛋白质量分数、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性的变化和越冬期间枝条水培萌发的情况,越冬后调查了植物的田间表现。利用隶属函数法对10种连翘抗寒性综合评价排序由强到弱为:东北连翘、‘Courtaneur’、‘Courtasol’、朝鲜连翘、‘Kumsum’、连翘、‘Spectabilis’、‘Goldrausch’、‘Lynwood’、‘Courtalyn’。越冬后10种连翘的田间表现和上述排序结果基本相符合。 展开更多
关键词 连翘属 抗寒性 隶属函数 田间表现 综合评价
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连翘GLK基因家族鉴定及响应光照表达分析 被引量：1
3
作者 赵峥畑 张晓璐 +3 位作者 程堂仁 王佳 张启翔 潘会堂 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 2022年第5期759-769,共11页
【目的】探究GLK基因家族在黄叶型连翘叶片呈色及响应光照度中的作用。【方法】通过生物信息学方法鉴定连翘GLK家族成员,分析其系统进化、基因结构和启动子顺式作用元件,结合转录组数据和实时荧光定量PCR技术筛选与连翘叶色相关及响应... 【目的】探究GLK基因家族在黄叶型连翘叶片呈色及响应光照度中的作用。【方法】通过生物信息学方法鉴定连翘GLK家族成员,分析其系统进化、基因结构和启动子顺式作用元件,结合转录组数据和实时荧光定量PCR技术筛选与连翘叶色相关及响应光照度的关键基因。【结果】从连翘基因组中鉴定到44个GLK基因家族成员,命名为FsGLK1~FsGLK44,分为5个亚族,同一亚族具有相似的保守结构域,所有FsGLK基因的启动子区域均具有多个光响应元件。转录组数据表明,5个FsGLK基因在绿叶和黄叶型连翘中差异表达,其中FsGLK9、FsGLK19、FsGLK27在绿叶型连翘中优势表达,FsGLK34、FsGLK41在黄叶型连翘中优势表达。FsGLK19、FsGLK32、FsGLK41在黄叶型连翘全光和遮光处理条件下差异表达。结合实时荧光定量分析发现,FsGLK19明显受黑暗条件诱导表达。【结论】连翘中有44个FsGLK基因,其中FsGLK19可能是黄叶型连翘呈色及响应光照度的关键基因。 展开更多
关键词 黄色叶连翘 GLK 基因家族 进化分析 基因表达
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金钟连翘与东北连翘种间杂交F1代表型性状遗传分析 被引量：6
4
作者 徐洋 吴雨桐 +3 位作者 赵峥畑 申建双 张启翔 潘会堂 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期344-353,共10页
为了阐明连翘属植物主要观赏性状和抗寒性的遗传特点,以金钟连翘品种‘Lynwood’(Forsythia intermedia‘Lynwood’)和东北连翘(F.mandschurica)杂交获得的F1代群体为研究对象,对杂交群体的花冠口直径、花裂片长度、抗寒性等12个表型性... 为了阐明连翘属植物主要观赏性状和抗寒性的遗传特点,以金钟连翘品种‘Lynwood’(Forsythia intermedia‘Lynwood’)和东北连翘(F.mandschurica)杂交获得的F1代群体为研究对象,对杂交群体的花冠口直径、花裂片长度、抗寒性等12个表型性状进行测定,并对这些性状进行相关性分析和混合遗传模型分析。结果表明:金钟连翘与东北连翘杂交群体的表型性状变异丰富,各表型性状均出现大于高亲或小于低亲的超亲个体。除花裂片长度、花裂片宽度、叶片长度外,其他性状的变异度均超过15%,达到中等水平以上。各性状之间存在一定的相关性,其中抗寒性与着花密度呈极显著正相关,与花冠口直径、植株冠幅呈极显著负相关关系。混合遗传模型分析显示,花裂片长度、花裂片宽度、花裂片长宽比、叶片长度、叶片宽度、叶片长宽比、当年生枝条长度、抗寒性由微效多基因控制,花冠口直径和植株冠幅由一对加性—显性主基因控制,着花密度由两对加性—显性主基因控制,株高由两对等加性—显性主基因控制。花冠口直径、冠幅、着花密度和株高的主基因遗传力分别为76.05%、60.3%、72.22%和64.75%。研究结果为定向培育综合性状优良的连翘新品种提供了依据。 展开更多
关键词 连翘属 表型性状 种间杂交 遗传分析
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