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CRISPR/Cas技术在农业育种中的应用
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作者 陈新 李鑫虹 +1 位作者 马艳春 赵庆臻 《农业与技术》 2024年第4期23-26,共4页
农业生产是保障粮食安全的关键。农业育种技术的提高对于提高农产品产量和品质至关重要。近年来飞速发展起来的成簇规律间隔短回文重复序列-相关核酸酶(clustered regularly iinterspersed short palindromic repeats-CRISPR associated... 农业生产是保障粮食安全的关键。农业育种技术的提高对于提高农产品产量和品质至关重要。近年来飞速发展起来的成簇规律间隔短回文重复序列-相关核酸酶(clustered regularly iinterspersed short palindromic repeats-CRISPR associated protein, CRISPR/Cas)技术作为基因编辑技术的主要手段,在农业育种实践中发挥着越来越重要的作用。本文综述了植物CRISPR/Cas技术在农业育种尤其是粮食作物与经济作物育种中的进展,为进一步利用CRISPR/Cas技术进行新品种培育提供一定的理论基础。 展开更多
关键词 基因编辑 CRISPR/Cas技术 育种
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地椒的组织培养及植株再生 被引量:9
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作者 赵庆臻 闫华超 +1 位作者 程霜 孙震晓 《植物生理学通讯》 CSCD 北大核心 2002年第4期357-357,共1页
关键词 药用价值 地椒 组织培养 植株再生
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植物RNA沉默机制的研究进展 被引量:3
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作者 赵庆臻 赵双宜 夏光敏 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第1期104-110,共7页
RNA沉默是真核生物中普遍存在的抵抗病毒复制表达、抑制转座子转座及调控基因表达的监控机制。植物中的RNA沉默 (转录水平的基因沉默PTGS)在RdRP的作用、transitiveRNAi的双向延伸、沉默效应的系统性传播等方面与动物中有所不同 ,且植... RNA沉默是真核生物中普遍存在的抵抗病毒复制表达、抑制转座子转座及调控基因表达的监控机制。植物中的RNA沉默 (转录水平的基因沉默PTGS)在RdRP的作用、transitiveRNAi的双向延伸、沉默效应的系统性传播等方面与动物中有所不同 ,且植物中的内源性miRNA在数量和种类上也更具多样性。 展开更多
关键词 RNA沉默 转录后基因沉默 RNA指导的RNA聚合酶 小干扰RNA MIRNA
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介导植物干旱应答的RING finger类型泛素连接酶的研究进展
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作者 孙雯雯 陈新 +1 位作者 马艳春 赵庆臻 《中文科技期刊数据库(全文版)自然科学》 2023年第4期88-94,共7页
干旱是影响植物生长和农作物产量的重要环境因素。泛素连接酶E3是蛋白质泛素化修饰的关键酶之一,对于植物生长发育和干旱胁迫应答具有重要的调控作用。RING finger类型泛素连接酶是其成员最多的一种类型。本文主要概述了植物对干旱胁迫... 干旱是影响植物生长和农作物产量的重要环境因素。泛素连接酶E3是蛋白质泛素化修饰的关键酶之一,对于植物生长发育和干旱胁迫应答具有重要的调控作用。RING finger类型泛素连接酶是其成员最多的一种类型。本文主要概述了植物对干旱胁迫的响应机制及植物中的RING finger类型E3,并详细综述了RING finger类型E3介导植物干旱胁迫应答的研究进展,可以供大家参考。 展开更多
关键词 RING FINGER 泛素连接酶 干旱 脱落酸
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大麦黄矮病毒运动蛋白基因克隆及原核表达 被引量:1
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作者 曲宇杰 赵庆臻 +1 位作者 卢娇 曹雪松 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第23期13947-13948,共2页
[目的]构建大麦黄矮病毒运动蛋白(BYDV-MP)基因的原核表达载体,并在E.coli-BL21中进行高效表达。[方法]根据GenBank中收录的大麦黄矮病毒PAV6株系的基因序列设计合成1对引物,应用RT-PCR技术从感染大麦黄矮病毒的叶片中扩增得到大麦黄矮... [目的]构建大麦黄矮病毒运动蛋白(BYDV-MP)基因的原核表达载体,并在E.coli-BL21中进行高效表达。[方法]根据GenBank中收录的大麦黄矮病毒PAV6株系的基因序列设计合成1对引物,应用RT-PCR技术从感染大麦黄矮病毒的叶片中扩增得到大麦黄矮病毒(BYDV)的运动蛋白(MP)基因,利用基因重组技术构建pGEX-4T-1-MP,将其转化至大肠杆菌表达菌株E.coli-BL21(DE3)中,用IPTG诱导重组质粒pGEX-4T-1-MP在E.coli-BL21中进行表达。[结果]对重组质粒进行酶切分析及序列测定,鉴定正确后,与GeneBank中收录的大麦黄矮病毒PAV6株系的MP基因序列比对分析,同源性达100%。在IPTG诱导下,高效表达出相对分子质量约43 kD的蛋白,蛋白质电泳(SDS-PAGE)结果表明,表达的蛋白条带与预期的GST-MP融合蛋白相符。[结论]成功构建了pGEX-4T-1-MP的原核表达载体,在E.coli-BL21中高效表达了MP,为进一步研究该蛋白的结构和功能奠定基础。 展开更多
关键词 运动蛋白 原核表达 融合蛋白 重组质粒 基因重组
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小麦TaUBC基因泛素结合酶活性分析 被引量:4
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作者 张祥云 赵思语 +3 位作者 温潇 王宁 郭彦 赵庆臻 《聊城大学学报(自然科学版)》 2018年第3期79-85,共7页
已报道的RNA水平研究表明TaUBC可能是小麦产量相关基因,生物信息学分析显示该基因属于泛素结合酶家族.荧光定量PCR显示TaUBC在小麦根茎叶中均有表达.为了验证TaUBC蛋白是否具有泛素结合酶活性,本文利用原核系统表达野生型TaUBC及三种点... 已报道的RNA水平研究表明TaUBC可能是小麦产量相关基因,生物信息学分析显示该基因属于泛素结合酶家族.荧光定量PCR显示TaUBC在小麦根茎叶中均有表达.为了验证TaUBC蛋白是否具有泛素结合酶活性,本文利用原核系统表达野生型TaUBC及三种点突变TaUBC^(C21S)、TaUBC^(C85S)、TaUBC^(C107S)蛋白,并对这些蛋白进行体外泛素化活性分析.结果证实TaUBC是一个有活性的泛素结合酶.另外,点突变C85S使得TaUBC丧失E2活性,C21S和C107S则对活性没有影响,证明其UBC结构域中第85位Cys是结合泛素的关键作用位点. 展开更多
关键词 TaUBC 泛素结合酶 点突变 体外泛素化反应
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果糖1,6-二磷酸酯酶研究进展 被引量:6
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作者 李清平 张秀飞 +2 位作者 梁明 郭彦 赵庆臻 《聊城大学学报(自然科学版)》 2021年第2期73-80,共8页
果糖1,6-二磷酸酯酶(FBPase)是糖异生途径中的关键酶,广泛分布于植物、动物及微生物中,研究其功能调控的分子机制具有重要的生物学意义。酵母细胞中只有一种FBPase,它会通过液泡途径或蛋白酶体途径等不同方式降解;高等植物及动物中则有... 果糖1,6-二磷酸酯酶(FBPase)是糖异生途径中的关键酶,广泛分布于植物、动物及微生物中,研究其功能调控的分子机制具有重要的生物学意义。酵母细胞中只有一种FBPase,它会通过液泡途径或蛋白酶体途径等不同方式降解;高等植物及动物中则有不同亚型的FBPase,分别在植物光合作用及蔗糖和淀粉的合成以及人类血糖调控等过程中发挥重要作用。综述了不同物种中FBPase的分布、生理功能及调控机理的研究进展,旨在为该酶的深入研究提供理论基础。 展开更多
关键词 FBPASE 糖异生 代谢物降解 调控机理
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Cloning and Phylogenetic Analysis of Ubiquitinconjugating Enzyme Gene TaUBC4 in Different Wheat Cultivars
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作者 袁建龙 郝英存 +1 位作者 张祥云 赵庆臻 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2014年第7期1100-1104,共5页
[Objective] This study aimed to clone ubiquitin-conjugating enzyme gene TaUBC4 from different wheat cultivars and thus analyze their phylogenetic relationship.[Method] The UBC4 coding sequences were cloned through rev... [Objective] This study aimed to clone ubiquitin-conjugating enzyme gene TaUBC4 from different wheat cultivars and thus analyze their phylogenetic relationship.[Method] The UBC4 coding sequences were cloned through reverse transcription PCR (RT-PCR) from 21 wheat varieties.After sequencing,the UBC4 sequence in wheat cultivar Zhongguochun (GenBank accession No:M28059) was selected as the reference gene,to analyze the mutation frequency and evolutionary distance in the CDSs and corresponding amino acid sequences of the different wheat cultivars.Moreover,the phylogenetic tree based on the amino acid sequences of these TaUBC4 genes were constructed,involving the homologous sequences of TaUBC4 in eight other monocots.[Result] TaUBC4 sequence was highly conserved because the similarity in DNA sequences of the wheat varieties was over 94%,while that in amino acid sequence was over 96%.And the amino acid sequence difference only can be seen at two sites among some varieties.Phylogenetic tree constructed revealed the evolutionary relationships among these wheat varieties.[Conclusion] This study reveals the polymorphism and evolutionary characteristics in the nucleotide and amino acid sequences in different wheat varieties,which lays foundation for investigating the evolution and biological function of TaUBC4 gene.In addition,the phylogenetic tree constructed provides theoretical references for the classification of the wheat varieties with complicated background. 展开更多
关键词 WHEAT Ubiquitin conjugating enzyme TaUBC4 Phylogenetic analysis
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GID/CTLH复合体的研究进展
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作者 张秀飞 李清平 +3 位作者 孙雯雯 陈新 王璐文 赵庆臻 《聊城大学学报(自然科学版)》 2022年第3期78-85,共8页
GID/CTLH复合体是真核细胞中特有的具有E3泛素连接酶活性的大分子量蛋白复合体,深入分析其结构与功能具有重要的生物学意义。酵母GID复合体能帮助细胞快速应对微环境中营养状态的改变,同时在糖代谢调控中发挥重要作用;哺乳动物中的CTLH... GID/CTLH复合体是真核细胞中特有的具有E3泛素连接酶活性的大分子量蛋白复合体,深入分析其结构与功能具有重要的生物学意义。酵母GID复合体能帮助细胞快速应对微环境中营养状态的改变,同时在糖代谢调控中发挥重要作用;哺乳动物中的CTLH复合体能够迅速接收细胞外的不同信号,协调细胞发生可逆的变化,从而适应不断变化的环境,同时该复合体也涉及细胞内多个不同的生理途径的调控。本文综述了GID/CTLH复合体蛋白亚基的结构域、组成及功能的研究进展,旨在为该蛋白复合体的深入研究提供理论基础。 展开更多
关键词 GID复合体 CTLH复合体 泛素连接酶 亚基组成 生物学功能
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植物蛋白的体外泛素化检测方法 被引量:2
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作者 赵庆臻 刘利静 +1 位作者 谢旗 于菲菲 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期764-772,共9页
泛素激活酶(E1)、泛素耦联酶(E2)和泛素连接酶(E3)是蛋白质泛素化修饰的关键酶。在真核基因组上有大量基因编码这些泛素化相关的酶类或蛋白。检测这些泛素化修饰酶及其底物蛋白的生化特性和特异性是分析其生物学功能的重要内容。该文提... 泛素激活酶(E1)、泛素耦联酶(E2)和泛素连接酶(E3)是蛋白质泛素化修饰的关键酶。在真核基因组上有大量基因编码这些泛素化相关的酶类或蛋白。检测这些泛素化修饰酶及其底物蛋白的生化特性和特异性是分析其生物学功能的重要内容。该文提供了一种简便快速检测体外泛素化反应的方法,不仅可通过检测对DTT敏感的硫酯键的形成来判断E2的活性、检测E3的体外泛素化活性,而且可以检测E2-E3和E3-底物的特异性。所用蛋白主要来源于拟南芥(Arabidopsisthaliana),包括分属于绝大多数E2亚家族的成员,可用于不同RING类型E3的活性检测。该方法不仅可以采用多种E2进行E3活性分析,而且可以分析不同组合的E2-RINGE3、RINGE3-底物的泛素化活性等,亦可应用于真核生物蛋白质尤其是植物蛋白的体外泛素化活性分析。 展开更多
关键词 体外泛素化 泛素耦联酶(E2) 泛素连接酶(E3)
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花部标本制作的新方法
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作者 刘莲芬 钱关泽 赵庆臻 《生物学通报》 北大核心 2001年第7期41-41,共1页
关键词 植物标本 花部标本 制作方法
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快速高效检测植物体内蛋白泛素化修饰研究方法 被引量:1
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作者 刘利静 赵庆臻 +1 位作者 谢旗 于菲菲 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期753-763,共11页
UPS参与植物中绝大多数的信号转导通路。其中,一些激素的受体本身就是E3泛素连接酶,如茉莉酸(JA)受体COI1和生长素(auxin)受体TIR1都是F-box蛋白,它们通过特异性介导相应转录抑制子的泛素化降解来传递激素信号,但对于整个UPS体系而言,... UPS参与植物中绝大多数的信号转导通路。其中,一些激素的受体本身就是E3泛素连接酶,如茉莉酸(JA)受体COI1和生长素(auxin)受体TIR1都是F-box蛋白,它们通过特异性介导相应转录抑制子的泛素化降解来传递激素信号,但对于整个UPS体系而言,由于技术的限制,迄今为止仅见少量泛素连接酶与特异性底物间生化机制的报道。用大肠杆菌(Escherichiacoli)表达蛋白实施泛素连接酶泛素化修饰底物的体外实验是验证泛素连接酶/底物对的常用方法,但由于体外实验缺乏某些蛋白必需的转录后修饰,导致实验结果有时存在假阴性。利用农杆菌注射烟草(Nicotianabenthamiana)瞬时表达蛋白的方法,建立高效的植物体内检测蛋白泛素化系统,可以快速检测蛋白泛素化,包括检测泛素连接酶和底物的特异性相互作用、底物蛋白的自身泛素化、泛素连接酶对底物降解的促进作用、26S蛋白酶体抑制剂MG132对底物降解的抑制作用以及用植物内源表达蛋白进行体外泛素化反应。 展开更多
关键词 体内泛素化检测 E3泛素连接酶 烟草瞬时表达系统
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