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丙氨酰谷氨酰胺二肽对人脐静脉内皮细胞ECV304缺氧缺糖损伤的保护作用 被引量:3
1
作者 赵敬湘 赵玉芬 +3 位作者 怀文辉 吴振 唐果 王字玲 《国际药学研究杂志》 CAS 2009年第1期6-11,43,共7页
目的观察丙氨酰谷氨酰胺二肽(丙谷二肽)对人脐静脉内皮细胞ECV304缺氧缺糖损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法在以低氧低糖培养人脐静脉内皮细胞ECV304为细胞损伤模型的基础上,以噻唑蓝(MTT)比色法优化丙谷二肽的最佳作用浓度... 目的观察丙氨酰谷氨酰胺二肽(丙谷二肽)对人脐静脉内皮细胞ECV304缺氧缺糖损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法在以低氧低糖培养人脐静脉内皮细胞ECV304为细胞损伤模型的基础上,以噻唑蓝(MTT)比色法优化丙谷二肽的最佳作用浓度,显微镜观察细胞形态变化,流式细胞术检测线粒体膜电位。自动生化分析仪测定乳酸脱氢酶(LDH)活性,比色法检测谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的浓度,RT-PCR方法检测细胞内肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、热休克蛋白70(HSP70)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA的表达。结果丙谷二肽能够使细胞在缺氧缺糖应激下存活率增加,线粒体损伤减轻,LDH分泌降低,GSH产生增加,HSP70和HIF-1αmRNA的表达增加。结论丙谷二肽对细胞缺氧缺糖损伤有明显的保护作用,这种保护作用可能与保护线粒体、维持细胞膜结构完整、上调细胞中应激基因HSP70和HIF-1α的表达有关。 展开更多
关键词 丙谷二肽 缺氧 缺糖 人脐静脉内皮细胞
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戊巴比妥钠静脉麻醉对比格犬血液流变特性与静脉血气的影响 被引量:3
2
作者 赵敬湘 王波 +4 位作者 尤国兴 王权 孙振威 赵莲 周虹 《中国输血杂志》 CAS 北大核心 2016年第4期361-363,共3页
目的探讨戊巴比妥钠静脉麻醉对比格犬血液流变学特性和静脉血气的影响。方法比格犬30只,分别在麻醉前清醒状态和麻醉后15 min,于前肢内测皮下头静脉采血4 m L/只做血液流变学参数测定,取200μL/只立即做血气分析测定。结果戊巴比妥钠静... 目的探讨戊巴比妥钠静脉麻醉对比格犬血液流变学特性和静脉血气的影响。方法比格犬30只,分别在麻醉前清醒状态和麻醉后15 min,于前肢内测皮下头静脉采血4 m L/只做血液流变学参数测定,取200μL/只立即做血气分析测定。结果戊巴比妥钠静脉麻醉前后比格犬外周静脉血中Hb(g/L)为16.31±1.07 vs 13.13±0.94,Hct(%)为49.99±3.27 vs 40.25±2.88(P<0.01);不同切应力下的全血粘度(m Pa·s)分别为10(s-1)∶7.11±0.88vs 5.03±1.39,50(s-1)∶4.47±0.42 vs 3.50±0.53,150(s-1)∶3.73±0.36 vs 2.92±0.33(P<0.01);红细胞聚集指数为47.72±2.20 vs 43.18±3.23,聚集时间(s)为0.272±0.034 vs 0.430±0.124(P<0.01);血乳酸(Lac)浓度(mmol·L-1)为1.46±0.56 vs 1.03±0.44(P<0.01),静脉血氧分压(PvO2)(mm Hg)为48.69±8.45 vs 55.39±8.16,静脉血氧饱和度(SvO2)(%)为84.56±7.00 vs 90.53±3.46(P<0.01)。结论戊巴比妥钠静脉麻醉可能在一定程度上改善实验动物的血流灌注,提示在失血性休克复苏血流灌注指标评价时应考虑戊巴比妥钠麻醉的影响。 展开更多
关键词 麻醉 血液流变学 静脉血气 血流灌注 动物实验 比格犬
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血小板输注相关的免疫调节 被引量:6
3
作者 赵敬湘 王字玲 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期901-906,共6页
血小板制剂已被广泛应用于预防和治疗因血小板减少和/或血小板功能缺陷引起的出血。尤其是随着恶性肿瘤以及白血病大剂量化疗的应用,造血干细胞移植广泛开展,血小板输注更成为重要的辅助疗法。
关键词 血小板输注 输血相关免疫调节 CD40-CD40L
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填充毛细管电色谱的研究现状 被引量:1
4
作者 赵敬湘 杨更亮 宋秀荣 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 2000年第2期197-203,共7页
总结了国内外填充毛细管柱的制备方法 。
关键词 毛细管电色谱 电渗流 填充电色谱柱 CEC
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黏附分子在血小板诱导肿瘤转移中的作用 被引量:2
5
作者 赵敬湘 王字玲 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期255-257,共3页
关键词 血小板 肿瘤 转移 黏附分子
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骨髓间充质干细胞亲和肽的筛选 被引量:1
6
作者 赵敬湘 杨丽平 +5 位作者 刘大庆 秦立蓬 王韫芳 白慈贤 南雪 裴雪涛 《自然科学进展》 北大核心 2006年第11期1478-1481,共4页
采用噬菌体肽库技术,用分离培养的大鼠骨髓间充质干细胞筛选噬菌体环七肽库,通过酶联免疫吸附实验挑选出亲和性强的克隆.测序分析相应的基因组成,推导多肽序列,获得骨髓间充质干细胞高亲和性多肽,并合成FITC标记的亲和肽(FITC-CSTNPKVL... 采用噬菌体肽库技术,用分离培养的大鼠骨髓间充质干细胞筛选噬菌体环七肽库,通过酶联免疫吸附实验挑选出亲和性强的克隆.测序分析相应的基因组成,推导多肽序列,获得骨髓间充质干细胞高亲和性多肽,并合成FITC标记的亲和肽(FITC-CSTNPKVLC),流式细胞仪检测结果显示,合成多肽对筛选细胞具有良好的亲和力。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 噬菌体肽库 测序分析
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NK细胞的选择性扩增 被引量:1
7
作者 赵敬湘 王字玲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期177-180,共4页
选择性扩增是对NK细胞免疫生物学特性和受体-配体相互作用深入研究的基础上提出来的。NK细胞不是均质性群体,表达不同膜表面分子的NK细胞在分泌细胞因子和杀伤活性等方面有所不同。另外,在NK细胞的KIR受体与HLA位点不相合的肿瘤免疫治疗... 选择性扩增是对NK细胞免疫生物学特性和受体-配体相互作用深入研究的基础上提出来的。NK细胞不是均质性群体,表达不同膜表面分子的NK细胞在分泌细胞因子和杀伤活性等方面有所不同。另外,在NK细胞的KIR受体与HLA位点不相合的肿瘤免疫治疗中,不相合NK细胞的数量明显影响治疗的效果。因此有必要对NK细胞进行选择性扩增以提高NK细胞的杀伤效果。本文中总结了目前调节不同NK细胞亚群扩增的影响因素,从而为NK细胞选择性扩增的可行性奠定基础。 展开更多
关键词 自然杀伤细胞 选择性扩增
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肿瘤对自然杀伤细胞的杀伤敏感性研究 被引量:1
8
作者 赵敬湘 王字玲 《生物技术通讯》 CAS 2009年第1期114-117,共4页
自然杀伤细胞(NK细胞)是机体抗肿瘤的第一道防线,是机体天然免疫的主要承担者,也是获得性细胞免疫的核心调节细胞。NK细胞对肿瘤的杀伤活性与其细胞表面受体和肿瘤细胞表面的配体密切相关,由于肿瘤细胞表面配体表达不同致使对NK细胞杀... 自然杀伤细胞(NK细胞)是机体抗肿瘤的第一道防线,是机体天然免疫的主要承担者,也是获得性细胞免疫的核心调节细胞。NK细胞对肿瘤的杀伤活性与其细胞表面受体和肿瘤细胞表面的配体密切相关,由于肿瘤细胞表面配体表达不同致使对NK细胞杀伤的敏感性有很大差异,临床疗效不一。我们简要介绍了影响肿瘤细胞对NK细胞杀伤敏感性的机制,对目前提高肿瘤细胞敏感性的策略和方法进行了总结。 展开更多
关键词 自然杀伤细胞 MHCⅠ类链相关分子A/B 肿瘤 敏感性
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血小板输注对肿瘤生长及免疫调节作用
9
作者 赵敬湘 宋直鈺 +2 位作者 魏广智 汤永永 王字玲 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第S1期92-92,共1页
关键词 血小板输注 免疫调节作用 小鼠黑色素瘤 小鼠肺 细胞亚群 肺转移 尾静脉 流式细胞术 瘤细胞 免疫细胞
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肿瘤患者血小板计数及聚集能力检测
10
作者 赵敬湘 李方 +4 位作者 魏广智 鞠艳芳 刘哲峰 王全立 王字玲 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期253-254,共2页
目的研究恶性肿瘤患者化疗前后的血小板计数和聚集性变化特点。方法空腹抽取98名肿瘤患者和48名正常人静脉血,肝素抗凝后,测定Plt;并以ADP为激活剂体外测定ADP诱导的血小板最大聚集率。结果72.4%的肿瘤患者化疗前、56.2%正常人Plt>20... 目的研究恶性肿瘤患者化疗前后的血小板计数和聚集性变化特点。方法空腹抽取98名肿瘤患者和48名正常人静脉血,肝素抗凝后,测定Plt;并以ADP为激活剂体外测定ADP诱导的血小板最大聚集率。结果72.4%的肿瘤患者化疗前、56.2%正常人Plt>200×109/L。患者经过化疗后血小板数减少,>200×109/L的比例降为30.6%。化疗后肿瘤患者血小板最大聚集率为(70.87±8.60)%,正常人为(66.06±8.61)%,两者相比差异有统计学意义(t=2.11,P<0.05)。结论肿瘤患者的Plt较正常人高,虽然经过化疗Plt减少,但聚集性仍较正常人高。 展开更多
关键词 肿瘤 血小板 聚集能力 血小板最大聚集率 血小板计数
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明胶酶在脑胶质瘤大鼠中的活性
11
作者 赵敬湘 杨丽平 +5 位作者 王韫芳 秦立蓬 白慈贤 施双双 南雪 裴雪涛 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第34期82-85,i0002,共5页
目的:通过观察脑胶质瘤大鼠动物模型中明胶酶的活性变化,为以明胶酶为靶点的脑胶质瘤治疗奠定实验基础。方法:实验于2004-10/2005-12在解放军军事医学科学院野战输血研究所干细胞生物学研究室完成。9L大鼠胶质瘤细胞购自广州南方医科大... 目的:通过观察脑胶质瘤大鼠动物模型中明胶酶的活性变化,为以明胶酶为靶点的脑胶质瘤治疗奠定实验基础。方法:实验于2004-10/2005-12在解放军军事医学科学院野战输血研究所干细胞生物学研究室完成。9L大鼠胶质瘤细胞购自广州南方医科大学。①选取清洁级健康成年雄性Fisher344大鼠27只,24只建立大鼠脑胶质瘤模型,造模后随机数字表法分为建模后7,14,21,28d组,6只/组,每组3只用于灌注固定做免疫组化分析,另3只用于反转录多聚酶链反应和明胶酶谱分析。剩余3只大鼠作为正常对照。②采用反转录多聚酶链反应技术、免疫组织化学和明胶酶谱等方法检测胶质瘤中明胶酶2(matrixmetalloproteinase2,MMP-2)和明胶酶9(matrixmetalloproteinase2,MMP-9)的活性变化。结果:实验选取清洁级健康成年雄性Fisher344大鼠27只,全部进入结果分析。①MMP-2和MMP-9mRNA的表达:9L胶质瘤细胞中均可见MMP-2和MMP-9mRNA的表达,MMP-2的表达量高于MMP-9;大鼠脑胶质瘤组织中可见两者mRNA的表达,而正常脑组织MMP-2mRNA低表达,检测不到MMP-9mRNA的表达;随着肿瘤的生长,MMP-9mRNA的表达量增高。②MMP-2和MMP-9免疫组织化学观察结果:9L胶质瘤细胞的免疫组化显示,MMP-2和MMP-9均呈现阳性染色,主要为胞浆和胞膜染色;肿瘤组织MMP-2和MMP-9染色阳性,为胞浆染色,在血管内皮和肿瘤侵袭边缘细胞胞阳性染色明显。随脑胶质瘤的生长,MMP-2和MMP-9染色程度加深。③MMP-2和MMP-9酶活性检测结果:9L细胞无血清培养上清中可见Pro-MMP2(Mr72000)与Pro-MMP9(Mr92000)及其活化形式activeMMP-2(Mr66000)与activeMMP-9(Mr83000)的表达,MMP-2的表达量较高;MMP-2酶原与活化的MMP-2在脑胶质瘤组织中明显表达,而在正常脑组织低表达。MMP-9酶原与活化的MMP-9在脑肿瘤组织中表达,正常脑组织中未检测到其表达。④MMP-2和MMP-9在肿瘤组织中的定位情况:脑胶质瘤组织冰冻切片原位明胶酶谱结果显示,肿瘤组织因表达活性的明胶酶降解载片上的明胶,致使不被染色,肿瘤部位很透亮。对侧脑组织因不表达明胶酶,不能降解明胶,被染黑。结论:脑胶质瘤模型中表达高活性的MMP-2和MMP-9,且与胶质瘤生长速度密切相关。 展开更多
关键词 脑肿瘤 神经胶质瘤 明胶酶类 免疫组织化学
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雷公藤有效成分制备的研究进展 被引量:14
12
作者 曹伟平 杨更亮 +2 位作者 张红医 宋秀荣 赵敬湘 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期186-188,共3页
简要介绍了近年来有关中药雷公藤有效成分的制备方法及研究进展 。
关键词 雷公藤 有效成分 制备 中药 研究进展
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CD147对白血病细胞U937侵袭能力的影响 被引量:7
13
作者 黄灵芝 刘淑静 +3 位作者 赵敬湘 苏醒 周虹 王字玲 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期247-253,共7页
本研究探讨CD147对白血病细胞U937侵袭能力的影响。将U937细胞按照不同的处理方式分为以下4组:正常U937细胞组(对照组),脂多糖(LPS,50μg/ml)诱导组(LPS组),CD147单克隆抗体(10μg/ml)阻断组(CD147mAb组),LPS诱导及CD147单克隆抗体阻断... 本研究探讨CD147对白血病细胞U937侵袭能力的影响。将U937细胞按照不同的处理方式分为以下4组:正常U937细胞组(对照组),脂多糖(LPS,50μg/ml)诱导组(LPS组),CD147单克隆抗体(10μg/ml)阻断组(CD147mAb组),LPS诱导及CD147单克隆抗体阻断组(LPS+CD147mAb组)。使用RT-PCR和流式细胞术分别检测各组中CD147的mRNA和蛋白表达情况;应用RT-PCR和明胶酶谱法分析基质金属蛋白酶(MMP)的表达及活性;采用体外细胞侵袭实验检测细胞运动和侵袭能力的变化;将DAPI标记的U937细胞经尾静脉注入SCID小鼠体内观察细胞在各组织器官中的转移情况。实验结果显示,LPS在体外能够诱导白血病细胞U937表面CD147的表达,同时增强MMP-2和MMP-9的表达、活化和分泌;使用CD147抗体阻断CD147后,MMP-2和MMP-9的分泌及活性下降;U937细胞经LPS诱导后,其体外侵袭能力增强;U937细胞经尾静脉注入SCID小鼠后发生肺部浸润和转移,并检测到CD147、MMP-2和MMP-9的表达增强,CD147抗体在一定程度上能够抑制上述现象。结论:LPS可诱导U937细胞表面CD147分子表达增加,CD147通过上调U937细胞MMP-2和MMP-9的分泌和活性促进U937细胞的侵袭和转移。 展开更多
关键词 CD147 基质金属蛋白酶 白血病 U937细胞 肿瘤转移
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毛细管电泳分离雷公藤有效成分(英文) 被引量:5
14
作者 宋秀荣 杨更亮 +2 位作者 赵敬湘 孙汉文 李志伟 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 2001年第2期183-187,共5页
用胶束毛细管电泳法分离和测定雷公藤中雷公藤内酯醇和雷公藤内酯酮的含量 .在优化分离条件下 ,2种有效成分的线性范围分别为 0 .0 5349~ 4 .33g/L和 0 .0 186 2~ 3.4 6g/L ;最低检测限分别为0 .0 5349g/L和 0 .0 186 2 g/L .得到满... 用胶束毛细管电泳法分离和测定雷公藤中雷公藤内酯醇和雷公藤内酯酮的含量 .在优化分离条件下 ,2种有效成分的线性范围分别为 0 .0 5349~ 4 .33g/L和 0 .0 186 2~ 3.4 6g/L ;最低检测限分别为0 .0 5349g/L和 0 .0 186 2 g/L .得到满意的分离效果 . 展开更多
关键词 毛细管电泳 雷公藤内酯醇 雷公藤内酯酮 有效成分分离 含量测定 中药材
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毛细管区带电泳法测定中药金银花中绿原酸的含量 被引量:26
15
作者 王德先 赵敬湘 +1 位作者 杨更亮 张婷 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期432-432,共1页
关键词 中药 金银花 绿原酸 毛细管区带电泳法
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基于CFSE染色的小鼠淋巴细胞体内示踪方法的建立 被引量:3
16
作者 汤永永 唐颖 +7 位作者 张玉华 段文元 赵敬湘 魏广智 张秀媛 李鹏飞 穆思媛 王字玲 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期850-853,共4页
目的确定CFSE标记小鼠淋巴细胞的条件,建立简单快速、稳定可行的淋巴细胞体内示踪方法。方法利用流式细胞术分别检测不同浓度CFSE、不同悬浮溶液(1640培养基、PBS溶液)对小鼠淋巴细胞标记效果的影响,确定合适的标记条件;输注同品系CFSE... 目的确定CFSE标记小鼠淋巴细胞的条件,建立简单快速、稳定可行的淋巴细胞体内示踪方法。方法利用流式细胞术分别检测不同浓度CFSE、不同悬浮溶液(1640培养基、PBS溶液)对小鼠淋巴细胞标记效果的影响,确定合适的标记条件;输注同品系CFSE标记的小鼠淋巴细胞,于不同时间点检测受鼠主要脏器内CFSE+细胞在淋巴细胞中的比例,并确定供鼠细胞的注射剂量;按照合适的注射剂量分别在注射后不同时间点测定供鼠细胞在受鼠体内的分布,考察本方法的稳定性及阳性信号的持续时间。结果 PBS组CFSE+细胞平均荧光强度分别为596、793、1123、1596、1737,明显高于1640培养基组(P<0.05);1640培养基组CFSE+细胞死亡率分别为8.7%、8.4%、8.6%、9.0%(P>0.05),而PBS组CFSE+细胞死亡率随着CFSE终浓度的上升而增加(P<0.05);按照不同剂量输注同品系淋巴细胞24h后,在受鼠各组织中检测到CFSE+细胞;每只小鼠尾静脉注射5×106个CFSE+淋巴细胞后,到d63仍可在组织中检测到阳性信号细胞。结论以PBS作为孵育液、CFSE终浓度选择10μmol/L对小鼠淋巴细胞标记、注射剂量为细胞5×106个/只,可使CFSE+细胞信号在同系小鼠体内持续2个月。 展开更多
关键词 CFSE 淋巴细胞 流式细胞术 细胞标记
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高海拔地区献血者红细胞增多症患病比例及其影响因素的调查分析 被引量:5
17
作者 王瑛 张玉华 +4 位作者 赵敬湘 李鹏龙 刘佳 赵莲 周虹 《中国输血杂志》 北大核心 2017年第3期296-299,共4页
目的了解高原献血人群中高原红细胞增多症(HAPC)发病情况及其影响因素。方法收集2015年5-7月在海拔3 000-4 000 m地方献血的289名献血者基本信息、既往病史、体格检查等资料,获得其HAPC患病比例,采用t检验、Wilcoxon秩和检验及Logistic... 目的了解高原献血人群中高原红细胞增多症(HAPC)发病情况及其影响因素。方法收集2015年5-7月在海拔3 000-4 000 m地方献血的289名献血者基本信息、既往病史、体格检查等资料,获得其HAPC患病比例,采用t检验、Wilcoxon秩和检验及Logistic回归等统计方法做单因素或(和)多因素分析。结果收缩压(mm Hg),有、无HAPC的献血者为115.42±14.38vs 121.56±8.42(P<0.01);汉族、藏族与其他少数民族献血者中患HAPC的比例为64.89%(170/262)vs 62.50%(5/8)vs 21.05%(4/19)(P<0.01);从事脑力劳动、不吸烟的献血者患HAPC的比例为81.08%(30/37)、73.25%(178/243),高于体力劳动者和吸烟者(P<0.05);献血者ABO血型中,A、B、O和AB型者患HAPC的比例为45.21%(33/73)vs 63.33%(57/90)vs 69.31%(70/101)vs 70.00%(14/20)(P<0.01)。此外,除单因素分析获得的收缩压、民族、工作性质、吸烟及血型外,经多因素分析显示:年龄(OR=1.333)、舒张压(OR=1.377)、脉搏(OR=1.161)等在HAPC的发生中也有一定影响。结论年龄、民族、工作性质、吸烟、血压、脉搏、ABO血型可能为诱发HAPC的因素,高原采血尤其是应急采血需关注献血者相关资料及参数变化。 展开更多
关键词 高原红细胞增多症 HAPC影响因素 高原献血者 民族 血压 血型 高原采血
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高渗氯化钠右旋糖酐70注射液的制备及质量标准研究 被引量:2
18
作者 赵莲 王波 +4 位作者 王广义 赵敬湘 赵晓宇 张玉华 周虹 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第16期1237-1239,共3页
目的制备高渗氯化钠右旋糖酐70注射液,建立其质量控制标准。方法拟定处方及制备工艺。依据《中国药典》2000年版建立质量标准并对3批产品进行检查。结果3批产品均符合所建立的质量标准。结论处方及制备工艺合理,质量控制方法可靠。
关键词 高渗氯化钠右旋糖酐70注射液 制备工艺 质量标准
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GST-GP302融合蛋白在大肠杆菌中的表达及其抗血清的制备 被引量:2
19
作者 苏丽 赵敬湘 +3 位作者 王波 张玉华 管利东 王字玲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期282-283,287,共3页
目的 :在大肠杆菌中表达血小板糖蛋白GPIbα之vWF结合区(GP30 2 )与谷胱甘肽S 转移酶GST的融合蛋白并制备其抗血清。方法 :将GP30 2片断插入GST融合表达载体 pGEX 4T 1,重组载体酶切鉴定后 ,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达获得GST GP30 2... 目的 :在大肠杆菌中表达血小板糖蛋白GPIbα之vWF结合区(GP30 2 )与谷胱甘肽S 转移酶GST的融合蛋白并制备其抗血清。方法 :将GP30 2片断插入GST融合表达载体 pGEX 4T 1,重组载体酶切鉴定后 ,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达获得GST GP30 2融合蛋白 ,SDS PAGE分析表达产物。包涵体经变性复性后免疫新西兰白兔 ,制备抗血清 ,ELISA、Westernblot检测重组抗原的免疫活性。结果 :重组质粒酶切鉴定表明 ,GP30 2基因已正确插入到 pGEX 4T 1中 ,经IPTG诱导后 ,表达出相对分子质量 (Mr)约为 5 90 0 0的融合蛋白 ,获得了ELISA效价为 1× 10 -5的多克隆抗体。Westernblot证明所制备的多抗可以与血小板糖蛋白特异性结合。结论 :GP30 2片断在大肠杆菌中的成功表达及制备得到的多克隆抗体 。 展开更多
关键词 血小板GPIbα 大肠杆菌 表达 多克隆抗体
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人源性抗血小板噬菌体抗体库的构建 被引量:2
20
作者 王字玲 赵敬湘 +2 位作者 苏丽 王波 赵莲 《中国输血杂志》 CAS CSCD 2002年第6期371-374,共4页
目的 应用噬菌体表面呈现表达系统构建一个经血小板主动免疫的人抗体组合文库 ,并筛选与人血小板结合的噬菌体抗体 (Fab片段 )。方法 从一反复输注血小板并出现血小板输注无效的患者的外周血分离淋巴细胞 ,提取mRNA ,逆转录合成cDNA ... 目的 应用噬菌体表面呈现表达系统构建一个经血小板主动免疫的人抗体组合文库 ,并筛选与人血小板结合的噬菌体抗体 (Fab片段 )。方法 从一反复输注血小板并出现血小板输注无效的患者的外周血分离淋巴细胞 ,提取mRNA ,逆转录合成cDNA ,用半巢式PCR扩增重链Fd和κ轻链基因。依次将PCR产物插入载体pComb3相应的位点 ,构建噬菌体抗体Fab组合文库。并以人血小板膜蛋白包被 96孔板 ,对抗体库进行 3轮吸附 洗脱 扩增的亲和选择 ,获得与人血小板膜抗原结合的噬菌体抗体 (Fab片段 )库。结果 半巢式PCR有效地扩增出重链Fd和κ轻链基因 ,以此构建了噬菌体呈现文库。通过特异性筛选 ,获得可与人血小板特异结合的Fab噬菌体抗体次级库。结论 构建的人抗体组合文库通过筛选得到与人血小板特异结合的噬菌体抗体 (Fab片段 )次级库。其对抗血小板抗体药物研究、与血小板相关抗体有关的疾病研究、血小板血型抗原表位研究、进而进行血小板血型分型研究等 。 展开更多
关键词 血小板 血小板抗体 噬菌体抗体 人源性单克隆抗体 人抗体组合文库
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