足尺钢框架结构中楼板火灾行为数值分析 被引量：5

1

作者 王勇 郭文轩 +4 位作者 李凌志 简晓红 马帅 张耕源 赵行行 《工程力学》 EI CSCD 北大核心 2021年第7期133-146,共14页

为研究受火跨位置和数量对结构中混凝土楼板火灾行为影响,基于Vulcan软件,采用厚板单元和梁柱杆单元,结合EC2材料高温本构模型,对钢框架结构中受火顶层楼板(角区格和中区格)和第二层楼板(四区格)的温度和变形进行数值模拟,分析了混凝土... 为研究受火跨位置和数量对结构中混凝土楼板火灾行为影响,基于Vulcan软件,采用厚板单元和梁柱杆单元,结合EC2材料高温本构模型,对钢框架结构中受火顶层楼板(角区格和中区格)和第二层楼板(四区格)的温度和变形进行数值模拟,分析了混凝土膨胀应变对火灾下结构中楼板受火区格变形的影响规律,考察了受火板格薄膜机理、裂缝分布和钢梁内力发展规律。结果表明:楼板温度和变形计算结果与试验结果总体吻合较好,且混凝土膨胀应变对结构中受火区格跨中变形有决定性影响,即膨胀应变取值较大时,计算变形较大;边界条件对受火板格薄膜机理和裂缝分布有决定性影响,且受火板格可分为环型、对边U型和对角U型三种薄膜机理;受火板格附近钢梁弯矩和轴力逐渐增加,且钢梁轴力增加幅度相对较大。 展开更多

关键词 钢框架 火灾 数值模拟 楼板 薄膜机理 内力

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刻蚀不锈钢丝固相微萃取-气相色谱法检测海水中多氯联苯 被引量：1

2

作者 宋明 赵行行 《应用海洋学学报》 CSCD 北大核心 2023年第1期128-133,共6页

用氢氟酸刻蚀不锈钢丝制作了固相微萃取(solid-phase microextraction,SPME)纤维,与气相色谱(gas chromatography,GC)联用直接测定了海水水样中的痕量多氯联苯(polychlorinated biphenyls,PCBs),优化了萃取时间、萃取温度、搅拌速率、... 用氢氟酸刻蚀不锈钢丝制作了固相微萃取(solid-phase microextraction,SPME)纤维,与气相色谱(gas chromatography,GC)联用直接测定了海水水样中的痕量多氯联苯(polychlorinated biphenyls,PCBs),优化了萃取时间、萃取温度、搅拌速率、解吸温度和解吸时间对SPME的萃取效率的影响。本方法的线性范围可达两个数量级,PCB28和PCB52的线性范围是1.0~100.0 ng/L,其他8种PCBs的线性范围是0.5~50.0 ng/L(除PCB198外,r 2均在0.99以上),检出限为0.01~0.10 ng/L。单个纤维间及纤维与纤维间的相对标准偏差分别为2.4%~7.2%和4.9%~8.7%。实际海水样品的加标回收率为80.9%~106.0%。微萃取纤维机械强度高、耐海水腐蚀、寿命长、制作成本低,该方法适用于测定海水水样中的痕量PCBs。 展开更多

关键词 海洋化学 固相微萃取 多氯联苯 不锈钢丝 海水样品

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乡村振兴背景下特色农产品品牌包装设计方法研究——以江苏省常州市刘巷村为例

3

作者 赵行行 杨雅婷 熊仁国 《艺术科技》 2023年第21期169-171,共3页

目的:现阶段,乡村振兴战略正深入实施,国家投入大量资源帮助农村培育可持续发展的产业。各地乡村应抓住机遇,在科学规划的基础上推动农特产品商业化、产业化,打造完整的农特产品开发销售产业链,使之成为乡村振兴、农民致富的重要推动力... 目的:现阶段,乡村振兴战略正深入实施,国家投入大量资源帮助农村培育可持续发展的产业。各地乡村应抓住机遇,在科学规划的基础上推动农特产品商业化、产业化,打造完整的农特产品开发销售产业链,使之成为乡村振兴、农民致富的重要推动力。包装设计是乡村品牌建设的重点,是宣传品牌理念、促进产品销售的重要环节。当前,农产品包装设计仍存在缺乏品牌内涵、审美单一、材质不环保等问题,基于此,文章以江苏省常州市刘巷村为例,着重研究乡村振兴背景下特色农产品品牌包装设计的方法。方法:文章广泛搜集整理农产品包装设计相关理论和实践作品,采用文献研究法、案例分析法、田野调查法等研究方法,对农产品包装设计展开研究。结果:文章聚焦刘巷村水芹、翠冠梨两大绿色产品,为其打造独特的农产品品牌,升级农产品包装设计,在农产品与消费者间搭建桥梁,以期达到宣传品牌理念、推广农特产品、增加农民收入、促进乡村经济发展、推进乡村振兴的目的。结论:包装作为农产品与消费者沟通的桥梁,在宣传乡村品牌、促进乡村经济建设中具有举足轻重的地位。随着时代的发展,农产品包装应呈现出更具文化内涵、更具创新精神、更加绿色环保的新面貌。 展开更多

关键词 乡村振兴 农产品 品牌设计 包装设计

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“互联网+”视域下乡村品牌构建创新设计策略研究——以花山村为例

4

作者 杨雅婷 赵行行 熊仁国 《艺术科技》 2023年第20期183-185,共3页

目的:在体验经济盛行的今天,众多乡村自发探索自己的品牌,期望振兴乡村文化、乡村产业、乡村生态。但由于相关工作人员缺乏品牌整体联动逻辑、参与的设计工作者未能身体力行地感受乡村在地文化的独特美感,因此国内大多数乡村设计的呈现... 目的:在体验经济盛行的今天,众多乡村自发探索自己的品牌,期望振兴乡村文化、乡村产业、乡村生态。但由于相关工作人员缺乏品牌整体联动逻辑、参与的设计工作者未能身体力行地感受乡村在地文化的独特美感,因此国内大多数乡村设计的呈现效果未能展现出其自然生态风貌和地方独特文化,最终走上同质化道路。方法:文章在设计赋能乡村振兴的理论、方法与路径研究——以钟楼十村为例的背题下,针对乡村文化品牌提出以“互联网+设计”全新角度的设计创新策略,探究体验经济时代乡村品牌的潜在价值。只有因地制宜地打造自身特色,优化乡村资源配置,才能给游客带来不同的惊喜体验,才能让公众记住并成为在地文化的传播者,最终提升品牌价值,激活乡村潜在资源。结果:文章以江苏省常州市金坛区花山村为例,针对其从无到有展现在地文化品牌视觉提炼的过程,启发相关设计工作者,探究更符合时代特性的乡村品牌设计方法,从设计思维角度多方面、多维度跨界赋能乡村振兴。结论:强调“互联网+设计”视角下更需要针对性地推送市场营销信息及精准化品牌视觉形象、加强旅游者及公众体验性情感互动,从而完善从品牌到产品再到服务多空间联动的新型乡村振兴模式,彻底盘活乡村潜在资源,重塑乡村品牌。 展开更多

关键词 “互联网+” 乡村振兴 乡村品牌 创新 花山村

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人肠道来源大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因突变株的构建 被引量：1

5

作者 洪伟 赵行行 +6 位作者 吴昌学 饶凤琴 程玉梅 张婷 齐晓岚 禹文峰 官志忠 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第12期1370-1376,共7页

目的:使用嗜热二型内含子基因失活系统(Thermotargetron)失活人肠道来源大肠杆菌(HSM174 DE3)β-半乳糖苷酶基因(LacZ),构建lacZ失活突变株。方法:使用分子克隆方法,构建lacZ基因失活质粒pHK-TT1A-lacZ426a、pHK-TT1A-lacZ1879a、pHK-TT... 目的:使用嗜热二型内含子基因失活系统(Thermotargetron)失活人肠道来源大肠杆菌(HSM174 DE3)β-半乳糖苷酶基因(LacZ),构建lacZ失活突变株。方法:使用分子克隆方法,构建lacZ基因失活质粒pHK-TT1A-lacZ426a、pHK-TT1A-lacZ1879a、pHK-TT1A-lacZ1880a及pHK-TT1A-lacZ1155s,将基因失活质粒转化大肠杆菌HSM174菌株(E.coli HSM174),转化子培养时提高温度至48℃,诱导TeI3c/4c二型内含子“归巢”活性,采用蓝白斑及PCR筛选lacZ基因失活突变株。结果:随机挑选20株克隆菌株的PCR结果显示,lacZ426a、lacZ1879a、lacZ1880a及lacZ1155s基因失活效率分别为60%、75%、60%及75%;白斑克隆基因失活效率为100%。结论:Thermotargetron系统可高效的实现E.coli HSM 174菌株lacZ基因失活,并可能具有在中温菌中广泛应用的潜力。 展开更多

关键词 基因失活系统 二型内含子 大肠杆菌 Β-半乳糖苷酶基因 基因失活 质粒 分子克隆

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大肠杆菌fliC基因失活突变株的构建及其特征 被引量：2

6

作者 赵行行 程玉梅 +3 位作者 陈娴 崔古贞 齐晓岚 洪伟 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期27-32,56,共7页

构建编码大肠杆菌鞭毛蛋白基因(fliC)失活突变株,并探究其生物被膜形成改变后在应激状态下的生物学特征。使用Thermotargetron靶向基因失活系统,构建fliC基因失活突变株(ΔfliC420s),测定ΔfliC420s与野生型菌株的生长速率、运动能力、... 构建编码大肠杆菌鞭毛蛋白基因(fliC)失活突变株,并探究其生物被膜形成改变后在应激状态下的生物学特征。使用Thermotargetron靶向基因失活系统,构建fliC基因失活突变株(ΔfliC420s),测定ΔfliC420s与野生型菌株的生长速率、运动能力、生物被膜形成能力、自溶速率、pH敏感性及对抗生素耐受性的变化。ΔfliC420s相比野生型菌株,生长速率未受影响,在半固体培养基中运动能力缺失,生物被膜形成能力明显降低,菌体自溶速率加快,pH敏感性增强,以及对D-环丝氨酸、红霉素、诺氟沙星的耐受性降低。大肠杆菌fliC基因在细菌生物被膜形成和对外界压力的抵抗中具有重要作用。 展开更多

关键词 大肠杆菌 fliC基因 生物被膜 基因失活 Thermotargetron

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脑卒中舌态的动态变化规律及辨证施护导向 被引量：3

7

作者 姚菊峰 尹燕 +1 位作者 董怡 赵行行 《当代护士（下旬刊）》 2014年第4期108-109,共2页

舌诊为中医望诊的重要组成部分,是在中医理论指导下的一种独特的诊断方法。近年来已被国内外医学界所重视和研究,认为舌的润燥可作为全身血液代谢的客观指标;而舌色的变化与血液循环的改变及细菌毒素的侵入以及生理失调、组织细胞代谢... 舌诊为中医望诊的重要组成部分,是在中医理论指导下的一种独特的诊断方法。近年来已被国内外医学界所重视和研究,认为舌的润燥可作为全身血液代谢的客观指标;而舌色的变化与血液循环的改变及细菌毒素的侵入以及生理失调、组织细胞代谢障碍有着明显的关系。舌诊是中医辨证施护的重要一环,舌象可反映人体内气血、脏腑、阴阳的病理变化,因而舌象的变化,能确定正气之盛衰,病邪之深浅,邪气之性质以及病情之进退。临床实践证明,中风患者的舌象变化迅速而明显,能客观地反映病情,舌诊已作为辩证施护中不可缺少的客观依据,同时也为诊断和治疗提供了有价值的信息。 展开更多

关键词 脑卒中 舌态 动态变化 辨证施护

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东港赤潮监控区中肋骨条藻生长的主要环境因子影响分析 被引量：6

8

作者 赵行行 刘妍忻 +2 位作者 宋明 宋国斌 丁光辉 《环境与发展》 2018年第11期13-15,共3页

根据东港赤潮监控区的实测数据,选取透明度、pH、水温、盐度、化学需氧量(COD)、溶解氧、磷酸盐、总氮(TN)和硅酸盐等9项环境因子,采用主成分分析法研究了影响该海区典型赤潮藻类——中肋骨条藻生长的主要环境因子。结果表明,影响该海... 根据东港赤潮监控区的实测数据,选取透明度、pH、水温、盐度、化学需氧量(COD)、溶解氧、磷酸盐、总氮(TN)和硅酸盐等9项环境因子,采用主成分分析法研究了影响该海区典型赤潮藻类——中肋骨条藻生长的主要环境因子。结果表明,影响该海域中肋骨条藻生长的关键环境因子为水温、硅酸盐和磷酸盐。另外,COD、pH、透明度及盐度等环境因子也对中肋骨条藻的生长有重要影响。 展开更多

关键词 赤潮 中肋骨条藻 环境因子 主成分分析法

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核电站附近海域漂流海藻的漂移路径数值模拟

9

作者 关春江 王昆 +5 位作者 田新华 徐鹏 陆宏亮 刘永健 赵行行 孔芳 《应用海洋学学报》 CSCD 北大核心 2022年第2期229-239,共11页

研究核电站附近海域漂流海藻的漂流路径对保障核电站冷源安全具有重要意义。本研究根据辽东湾东部海域漂流海藻的分布特征,构建该海域的二维水动力和粒子追踪数值预测、预报模型,基于近年实际观测的海流和潮位数据,对水动力模型进行验证... 研究核电站附近海域漂流海藻的漂流路径对保障核电站冷源安全具有重要意义。本研究根据辽东湾东部海域漂流海藻的分布特征,构建该海域的二维水动力和粒子追踪数值预测、预报模型,基于近年实际观测的海流和潮位数据,对水动力模型进行验证,并根据2019年5月至8月释放北斗和GPS浮标采集数据,对该海域相同工况下的海藻漂移路径进行校验,均吻合良好。同时,对该海域7月大潮期,取水口附近海域的海藻堵塞风险进行了模拟分析,得到各不同工况下,漂流海藻到达取水口定义威胁区范围内的时间。结果表明,该数值模型能够对漂流海藻的漂移路径进行准确模拟,可为科学规避或有效减轻漂流海藻对核电站冷源取水口的堵塞风险提供技术支撑。 展开更多

关键词 海洋水文学 核电站 漂流海藻 水动力 漂移路径 数值模拟

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人肠道来源艰难梭菌感染Caco-2细胞对NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响

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作者 洪伟 饶凤琴 +6 位作者 吴昌学 赵行行 程玉梅 张婷 齐晓岚 禹文峰 官志忠 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第12期1365-1369,共5页

目的:研究人肠道来源艰难梭感染Caco-2细胞对NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响。方法:用艰难梭菌毒素A和毒素B感染Caco-2细胞24 h,以未感染艰难梭菌毒素A和毒素B的Caco-2细胞为对照组,蛋白质免疫印迹法检测真核细胞核因子(NF-κB)通路... 目的:研究人肠道来源艰难梭感染Caco-2细胞对NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响。方法:用艰难梭菌毒素A和毒素B感染Caco-2细胞24 h,以未感染艰难梭菌毒素A和毒素B的Caco-2细胞为对照组,蛋白质免疫印迹法检测真核细胞核因子(NF-κB)通路蛋白P-p65和p65的表达;Caco-2细胞用6孔板制作爬片,待细胞长满6孔板后,以感染复数(MOI)=100加入艰难梭菌,与Caco-2细胞共培养3、6、9、12及24 h,革兰染色后油镜观察,记录黏附细菌数与细胞数,计算共培养时间与细菌黏附数量之间的关系;艰难梭菌感染Caco-2细胞12 h,以Caco-2为对照组,蛋白质免疫印迹法检测NF-κB通路蛋白P-p65、p65、IKKα及IκBα的表达。结果:艰难梭菌与Caco-2细胞共培养12 h时黏附数最多,P-p65和IKKα蛋白表达增加(P<0.05),p65和IκBα蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:人源艰难梭菌感染Caco-2细胞可激活NF-κB信号通路。 展开更多

关键词 人源艰难梭菌 肠上皮细胞 炎症 凋亡 NF-ΚB信号通路

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接触网施工中的问题及解决措施 被引量：1

11

作者 赵行行 《技术与市场》 2016年第5期262-263,共2页

接触网是机车供电的主要设备,其施工质量直接决定着铁路运输的效率和安全,当前铁路接触网施工中还存在很多问题,严重影响了铁路运输的安全和运营效率。为此对接触网施工中存在的问题进行了具体的分析,并在此基础上提出了改善接触网施工... 接触网是机车供电的主要设备,其施工质量直接决定着铁路运输的效率和安全,当前铁路接触网施工中还存在很多问题,严重影响了铁路运输的安全和运营效率。为此对接触网施工中存在的问题进行了具体的分析,并在此基础上提出了改善接触网施工过程的主要措施,以供参考。 展开更多

关键词 接触网 施工问题 解决措施

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大肠埃希菌密度感应调节子qseC基因失活突变株构建及其生物学特性

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作者 周青帅 赵行行 +5 位作者 李冬梅 崔古贞 陈峥宏 任玮 齐晓岚 洪伟 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第3期288-294,共7页

目的密度感应系统与细菌生长状态、毒力改变、生物膜形成、运动能力改变以及参与细菌和宿主的免疫反应和对药物的抗性等相关。大肠埃希菌密度调节子C(Escherichia coli quorum sensing regulator C,qseC)是其密度感应系统的受体,探究其... 目的密度感应系统与细菌生长状态、毒力改变、生物膜形成、运动能力改变以及参与细菌和宿主的免疫反应和对药物的抗性等相关。大肠埃希菌密度调节子C(Escherichia coli quorum sensing regulator C,qseC)是其密度感应系统的受体,探究其对大肠埃希菌生理、生化特征的影响。方法使用嗜热二型内含子基因打靶系统(Thermotargetron)构建大肠埃希菌HMS174菌株qseC基因失活突变株,测定其生长速率、溶血能力、生物膜形成和运动能力等表型的变化,以及对酸碱和6种抗生素的敏感性。结果成功构建了大肠埃希菌HMS174 qseC627s位点的打靶载体,该载体基因失活效率为100%。对比大肠埃希菌HMS174与ΔqseC627s突变株的表型发现,突变株生长速率和最大生物量降低、溶血能力丧失、生物膜形成能力降低、运动能力减弱、对酸、碱的耐受能力降低。抗生素敏感性测定结果表明,ΔqseC627s对氯霉素、氨苄青霉素、四环素、阿莫西林、甲硝唑耐受性降低。结论大肠埃希菌HMS174中qseC基因缺失后,突变株表型和对抗外界压力因素发生了显著改变。 展开更多

关键词 大肠埃希菌 密度感应系统 Thermotargetron 突变株表型

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大黄复方保留灌肠辅助治疗慢性肾脏病疗效及对患者生活质量的影响 被引量：8

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作者 董怡 马静 +6 位作者 余楠楠 王方圆 薛松妍 朱芳红 赵行行 储霞 姚锐 《陕西中医》 CAS 2021年第7期910-913,共4页

目的:研究大黄复方保留灌肠辅助治疗慢性肾脏病的治疗效果及对患者生活质量的影响。方法:纳入CKD患者170例,随机分为对照组和观察组,各85例。对照组患者进行常规对症治疗,观察组在对照组的基础上进行大黄复方保留灌肠。比较两组的治疗效... 目的:研究大黄复方保留灌肠辅助治疗慢性肾脏病的治疗效果及对患者生活质量的影响。方法:纳入CKD患者170例,随机分为对照组和观察组,各85例。对照组患者进行常规对症治疗,观察组在对照组的基础上进行大黄复方保留灌肠。比较两组的治疗效果,治疗前后的GSRS评分以及生活质量评分。结果:两组的治疗有效率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。对照组CKD分期进展率明显高于观察组(P<0.05)。治疗后,观察组反酸、腹胀、大便干结、恶心呕吐和嗳气评分均明显低于对照组(P<0.05),症状影响、躯体功能、情感生活、社会功能、社会角色、精力、肾病影响、疼痛、社会情感评分均明显高于对照组(P<0.05)。结论:大黄复方保留灌肠应用于CKD的辅助治疗中,疗效确切,有助于减缓疾病进展,减轻患者消化道症状,提高患者的生活质量。 展开更多

关键词 慢性肾脏病 大黄复方 保留灌肠 生活质量 安全性

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柴胡加龙骨牡蛎汤联合良附丸中脘穴贴敷治疗寒热夹杂型消化性溃疡的临床疗效 被引量：2

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作者 史金兰 董怡 +1 位作者 赵行行 石徳祥 《现代消化及介入诊疗》 2021年第6期676-680,共5页

目的探讨柴胡加龙骨牡蛎汤联合良附丸中脘穴贴敷治疗寒热夹杂型消化性溃疡的临床疗效及对胃泌素的影响。方法选取2019年1月至2020年1月中国人民解放军空军军医大学第一附属医院寒热夹杂型消化性溃疡患者200例,根据随机数表法分为对照组... 目的探讨柴胡加龙骨牡蛎汤联合良附丸中脘穴贴敷治疗寒热夹杂型消化性溃疡的临床疗效及对胃泌素的影响。方法选取2019年1月至2020年1月中国人民解放军空军军医大学第一附属医院寒热夹杂型消化性溃疡患者200例,根据随机数表法分为对照组和观察组,各100例。对照组采用常规治疗;在此基础上,观察组采用柴胡加龙骨牡蛎汤联合良附丸中脘穴贴敷治疗。持续治疗8周后评价临床疗效和不良反应状况,治疗前后测定血清胃动素(motilin,MTL)、胃泌素(gastrin,GAS)及中医证候积分。结果对照组有效率85.00%低于观察组有效率94.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗前血清MTL、GAS水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与治疗前比,两组患者治疗后血清MTL、GAS水平均降低;与对照组比,观察组患者治疗后血清MTL、GAS水平降低,治疗前后血清MTL、GAS差值较高,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗前中医证候积分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与治疗前比,两组患者治后中医证候积分均降低;与对照组比,观察组患者治疗后中医证候积分较低,治疗前后中医证候积分差值较高,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组不良率22.00%与观察组15.00%比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论柴胡加龙骨牡蛎汤联合良附丸中脘穴贴敷可提高寒热夹杂型消化性溃疡的临床疗效,进一步改善胃肠激素和中医证候,且安全性高。 展开更多

关键词 柴胡加龙骨牡蛎汤 良附丸中脘穴贴敷 寒热夹杂型 消化性溃疡 胃泌素

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血栓弹力图在严重创伤失血患者输血治疗中的应用价值分析

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作者 全欣莹 赵行行 +1 位作者 于锡沁 范厚敏 《中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生》 2022年第5期144-146,共3页

探究、分析血栓弹力图试验在严重创伤失血患者输血治疗中的临床应用价值。方法:选入严重创伤失血且行输血治疗的患者,共72例。随机数字表法进行分组。对照组:36例,常规治疗,检测输血前后凝血四项。实验组:36例,在对照组基础上,联合血栓... 探究、分析血栓弹力图试验在严重创伤失血患者输血治疗中的临床应用价值。方法:选入严重创伤失血且行输血治疗的患者,共72例。随机数字表法进行分组。对照组:36例,常规治疗,检测输血前后凝血四项。实验组:36例,在对照组基础上,联合血栓弹力图检测,并根据血栓弹力图结果给予相应治疗。对各组好转率、病死率、渗血时间、凝血指标、血制品使用情况等进行统计和分析,并评价实验组血栓弹力图指标的临床价值。结果:(1)与对照组相比,实验组输血后好转率升高,病死率下降,渗血时间缩短,凝血指标有明显改善,差异具有统计学意义,P <0.05。(2)实验组输血后血栓弹力图各指标均优于输血前,差异具有统计学意义,P <0.05。此外,实验组与对照组血液制品使用量也有明显差异(P <0.05)。结论:将血栓弹力图试验应用于严重创伤失血患者的输血治疗中,能明显改善患者凝血功,提高好转率,降低死亡率,有利于缩短渗血时间,促进合理用血,从而有效改善患者预后。 展开更多

关键词 严重创伤 输血治疗 血栓弹力图 临床价值

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温度诱导Targetron系统用于大肠杆菌高效基因失活 被引量：2

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作者 赵行行 程玉梅 +6 位作者 吴昌学 任玮 饶凤琴 周倩 崔古贞 齐晓岚 洪伟 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1659-1671,共13页

构建基于Te I3c/4c嗜热二型内含子的温度诱导Targetron基因失活系统(Thermotargetron),并应用于中温微生物基因编辑。在大肠杆菌HMS174(DE3)基因组中,选择Subunitofflagellum基因(fliC)和C4dicarboxylate orotate:H+symporter基因(dctA... 构建基于Te I3c/4c嗜热二型内含子的温度诱导Targetron基因失活系统(Thermotargetron),并应用于中温微生物基因编辑。在大肠杆菌HMS174(DE3)基因组中,选择Subunitofflagellum基因(fliC)和C4dicarboxylate orotate:H+symporter基因(dctA)为靶基因。根据Te I3c/4c DNA识别规则,在fliC和dctA基因中选择fliC489a、fliC828s、fliC1038s和dctA2a位点为基因打靶位点。使用重叠延伸PCR方法,基于pHK-TT1A质粒构建打靶载体。打靶载体转化HMS174菌株,对数期转化子培养液48℃热激1h后涂布于氯霉素抗性LB平板上。使用菌落PCR和DNA测序检测突变株并计算基因失活效率。获得突变株后,通过琼脂穿刺和碳源代谢实验,鉴定ΔfliC、ΔdctA突变株表型变化。菌落PCR测序结果表明,Te I3c/4c插入到fliC和dctA基因设计位点,且打靶效率高达100%。突变株表型验证实验表明,ΔfliC突变株运动能力显著下降,ΔdctA突变株苹果酸代谢能力缺失。综上所述,文中建立了一套适用于嗜中温微生物的温度诱导型、高效基因失活系统,该系统可通过控制宿主菌在48℃保温时间实现高效、靶向、精准基因失活。 展开更多

关键词 嗜热targetron Ⅱ型内含子 温度诱导 基因失活 大肠杆菌 FLIC dctA

原文传递

抗菌肽Cec4的结构改造及抗菌活性研究 被引量：8

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作者 彭建 赵行行 +3 位作者 吴兆颖 王涛 尚小丽 国果 《生物技术》 CAS 2019年第4期330-335,共6页

[目的]对抗菌肽Cec4进行结构改造,并评估优化小肽的稳定性及溶血性。[方法]采用序列截短、氨基酸替换的方式来改造Cec4。采用微量稀释法,检测改造后的Cec4对各类鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌的最小抑菌浓度(MIC)。绘制时间-杀菌曲线,并... [目的]对抗菌肽Cec4进行结构改造,并评估优化小肽的稳定性及溶血性。[方法]采用序列截短、氨基酸替换的方式来改造Cec4。采用微量稀释法,检测改造后的Cec4对各类鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌的最小抑菌浓度(MIC)。绘制时间-杀菌曲线,并评估不同因素对抗菌肽抑菌活性的影响,最后通过溶血实验检测其安全性。[结果]①截短后的Cec4失去抑菌效果。②Cec4氨基酸替换后的Cec4-1、Cec4-2未能提升抑菌能力。Cec4-4的MIC值为Cec4的50%。③在24h,时间-杀菌曲线显示,Cec4-4的抑菌活性较Cec4高30%。④血清会影响抗菌肽活性,并且高浓度胰蛋白酶(1. 0 mg/m L)会抑制Cec4-4抗菌活性。⑤溶血实验表明Cec4-4在1 mg/m L浓度下无溶血反应。[结论]截短使Cec4失去抑菌活性,氨基酸替换后的Cec4-4对各测试菌的抑菌活性较母肽提升了1倍,且抗菌肽在1mg/m L浓度下对人体无溶血反应。 展开更多

关键词 抗菌肽 结构改造 MIC 鲍曼不动杆菌 体外溶血

原文传递

ICU患者粪便样品艰难梭菌分离及抗生素耐药性检测 被引量：2

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作者 洪伟 程玉梅 +5 位作者 周青帅 赵行行 饶凤琴 崔古贞 齐晓岚 官志忠 《重庆医学》 CAS 2020年第12期1911-1918,共8页

目的探索贵州地区典型重症监护科(ICU)艰难梭菌感染及抗生素耐药性状况。方法采用肛门拭子法采集ICU患者粪便标本;扩增16S rDNA对菌株进行分类鉴定;使用MEGA6.0软件构建系统发育进化树;使用梯度稀释法测定分离的艰难梭菌菌株对16种常用... 目的探索贵州地区典型重症监护科(ICU)艰难梭菌感染及抗生素耐药性状况。方法采用肛门拭子法采集ICU患者粪便标本;扩增16S rDNA对菌株进行分类鉴定;使用MEGA6.0软件构建系统发育进化树;使用梯度稀释法测定分离的艰难梭菌菌株对16种常用抗生素的耐药性。结果从ICU 200份粪便样本中分离到12株艰难梭菌(阳性率6%)。所有菌株对氯霉素、甲砜霉素、甲硝唑、利福平和阿莫西林敏感。12株艰难梭菌均对氨苄青霉素、卡那霉素和D-环丝氨酸具有抗性。对克拉霉素、四环素、链霉素、红霉素、头孢西丁、诺氟沙星、克林霉素、万古霉素的耐药率分别为20%、58%、75%、50%、17%、42%、8%和8%。结论12株艰难梭菌具有独特的抗生素耐药谱,如对克林霉素、四环素、利福平的耐药性与其他地区具有明显差异,提示分离菌株可能具有独特特征。 展开更多

关键词 艰难梭菌 贵州省 重症监护科 抗生素 耐药性

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抗菌肽Cec4杂合肽的设计及其抗菌相关活性探究 被引量：2

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作者 彭建 赵行行 +2 位作者 朱贵明 尚小丽 叶远浓 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期4828-4833,共6页

结合不同抗菌肽的优点与抗菌肽Cec4杂合,以提高其抗菌能力。通过杂合肽进行序列比对、3级结构预测、相关抗菌效果等参数分析,设计出可能具有更强抗菌能力的杂合肽6条。进而采用微量稀释法,检测杂合肽对大肠杆菌、白色念珠菌、金黄色葡... 结合不同抗菌肽的优点与抗菌肽Cec4杂合,以提高其抗菌能力。通过杂合肽进行序列比对、3级结构预测、相关抗菌效果等参数分析,设计出可能具有更强抗菌能力的杂合肽6条。进而采用微量稀释法,检测杂合肽对大肠杆菌、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、及各类鲍曼不动杆菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。杂合肽Cec4-1-1、Cec4-4-2与母肽Cec4对革兰氏阴性菌(大肠杆菌)的抑菌效果相当,Cec4-2-1对大肠杆菌的MIC值为2μg/mL,其抑菌效果优于母肽Cec4。杂合肽和母肽Cec4对革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌)、真菌(白色念珠菌)均无抑菌效果。杂合肽Cec4-1-1、Cec4-2-2、Cec4-4-2与母肽Cec4对各类鲍曼不动杆菌的抑菌效果相当,Cec4-2-1对标准鲍曼不动杆菌的MIC值为0.5μg/mL,其抑菌效果优于母肽Cec4。综上,杂合肽Cec4-1-1、Cec4-2-1、Cec4-2-2、Cec4-4-2对各类鲍曼不动杆菌均有较强抑菌活性且对人红细胞无溶血反应。 展开更多

关键词 杂合肽 家蝇抗菌肽 MIC 鲍曼不动杆菌 体外溶血

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