急性食管坏死研究进展

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作者 马兴瑶 邹金铭 赵贵森 《食管疾病》 2024年第2期124-129,共6页

急性食管坏死(acute esophageal necrosis,AEN)主要累及食管中下段,患者常表现为上消化道出血,以食管远端黏膜变黑为典型特征,故有“黑色食管”(black esophagus)之称。AEN与恶性肿瘤、糖尿病、高血压和心血管疾病等常见疾病密切相关,... 急性食管坏死(acute esophageal necrosis,AEN)主要累及食管中下段,患者常表现为上消化道出血,以食管远端黏膜变黑为典型特征,故有“黑色食管”(black esophagus)之称。AEN与恶性肿瘤、糖尿病、高血压和心血管疾病等常见疾病密切相关,是老年重症患者常见的致命性并发症,相关死亡率高达30%以上。本文对AEN的流行病学、病因学、发病机制、临床诊治以及法医学尸检和死因分析等方面的新进展进行综述,供临床诊治及法医学鉴定参考。 展开更多

关键词 急性食管坏死 上消化道出血 死亡率 死亡原因

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HUMARA基因座差异甲基化的法医学意义 被引量：4

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作者 赵贵森 杨庆恩 +2 位作者 黄代新 余纯应 杨荣芝 《中国法医学杂志》 CSCD 2004年第5期275-277,共3页

目的　探讨X连锁差异甲基化多态性基因座的法医学应用意义。方法　以STR基因座HUMARA为例 ,应用甲基化敏感性限制酶消化后PCR技术 ,复合分析该基因座的STR多态性和甲基化状态 ,调查并比较男、女检材的分型效果。结果　基因组DNA经HpaⅡ... 目的　探讨X连锁差异甲基化多态性基因座的法医学应用意义。方法　以STR基因座HUMARA为例 ,应用甲基化敏感性限制酶消化后PCR技术 ,复合分析该基因座的STR多态性和甲基化状态 ,调查并比较男、女检材的分型效果。结果　基因组DNA经HpaⅡ消化后 ,男性没有扩增产物 ,女性分型不受影响 ,男女混合检材得到女性的分型图谱。女性单克隆瘤细胞只能检出 1个等位基因。结论　差异甲基化的HUMARA基因座是混合斑分析、性别鉴定和组织克隆性判断的有用工具。 展开更多

关键词 甲基化状态 分型 女性 多态性 瘤细胞 基因座 克隆性 检材 法医学应用 混合斑

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一种用于DNA甲基化分析的改进型亚硫酸氢盐转化法 被引量：2

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作者 赵贵森 郑海燕 +2 位作者 莫耀南 冯文芳 杨渝珍 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期876-880,共5页

DNA甲基化分析是认识生理、病理条件下基因表达变化的重要途径.亚硫酸氢盐转化是DNA甲基化分析的瓶颈.本文旨在改进琼脂糖-亚硫酸氢盐DNA处理方案(agarose bisulfite method),建立一种简便稳定、适合常规甲基化分析的亚硫酸氢盐转化法.... DNA甲基化分析是认识生理、病理条件下基因表达变化的重要途径.亚硫酸氢盐转化是DNA甲基化分析的瓶颈.本文旨在改进琼脂糖-亚硫酸氢盐DNA处理方案(agarose bisulfite method),建立一种简便稳定、适合常规甲基化分析的亚硫酸氢盐转化法.把DNA包入普通琼脂糖,以饱和亚硫酸氢盐在较高的温度下快速处理,然后用离心柱型琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒,集DNA凝胶回收、脱盐、脱磺基和纯化于一体,完成整个转化过程.Bisulfite-PCR、克隆测序和酶切法分析转化率、转化特异性和转化物的质量.用该方案处理的HeLa细胞DNA,多个片段的转化率均大于98%,甲基化片段96.2%的CpG保持不变,可以扩增605bp的较大片段,灵敏度介于普通法和琼脂糖亚硫酸氢盐法之间,而重复性较二者都好.改良后的方案简化了操作流程,快速稳定,易学易用,可实现高效特异转化,适合于一般实验者对常规检材进行DNA甲基化分析. 展开更多

关键词 DNA甲基化 亚硫酸氢钠 琼脂糖 DNA凝胶回收

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溺死诊断中的浮游生物检测法 被引量：5

4

作者 赵贵森 黄代新 杨庆恩 《中国法医学杂志》 CSCD 2005年第2期89-91,共3页

溺水是常见的死亡原因之一,浮游生物检验是法医学鉴定溺死的重要依据。浮游生物检验方法可分为破机法、非破机法和分子生物学方法三大类。前两者主要以形态标记为检验对象,依赖于浮游生物的理化特性,有很大局限性。分子生物学方法以分... 溺水是常见的死亡原因之一,浮游生物检验是法医学鉴定溺死的重要依据。浮游生物检验方法可分为破机法、非破机法和分子生物学方法三大类。前两者主要以形态标记为检验对象,依赖于浮游生物的理化特性,有很大局限性。分子生物学方法以分子标记为检验对象,适用范围广,信息丰富,是值得探索的新方法。本文回顾溺死鉴定中的各种浮游生物检测法,供法医工作者在实践和研究中进行参考。 展开更多

关键词 溺死 诊断 浮游生物检测法 法医病理学

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DNA甲基化标记法医学应用探讨 被引量：6

5

作者 赵贵森 杨庆恩 《法医学杂志》 CAS CSCD 2005年第1期61-64,共4页

CpG的胞嘧啶在DNA复制后多数被甲基化,5-甲基胞嘧啶的分布是贮存表遗传信息的主要形式。近年来研究表明,DNA甲基化标记具有信息含量丰富、相对稳定、检测和结果处理方便、可与SNP联合分析等优点,是一种新的强有力的遗传分析工具。基因... CpG的胞嘧啶在DNA复制后多数被甲基化,5-甲基胞嘧啶的分布是贮存表遗传信息的主要形式。近年来研究表明,DNA甲基化标记具有信息含量丰富、相对稳定、检测和结果处理方便、可与SNP联合分析等优点,是一种新的强有力的遗传分析工具。基因组的甲基化差异可用甲基化敏感性限制酶、重亚硫酸盐转化、Maxam-Gilbert裂解等技术来分析。人类基因组甲基化谱有时空特异性、亲源特异性、病理特异性等特征,在法医亲子鉴定、个人识别等方面有潜在应用价值。 展开更多

关键词 DNA甲基化 表遗传学 法医学 遗传标记

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Alu家族在法医DNA分析中的应用 被引量：2

6

作者 赵贵森 常林 莫耀南 《法医学杂志》 CAS CSCD 2010年第1期47-50,共4页

Alu家族是灵长类特有的短散在重复序列,在人类基因组内含量丰富,分布广泛,甲基化程度高,有种属特异性和插入变异,为法医DNA分析面临的许多问题提供了潜在的解决途径。目前,Alu元件在法医DNA分析中的应用包括:DNA定量、种属鉴定、种族鉴... Alu家族是灵长类特有的短散在重复序列,在人类基因组内含量丰富,分布广泛,甲基化程度高,有种属特异性和插入变异,为法医DNA分析面临的许多问题提供了潜在的解决途径。目前,Alu元件在法医DNA分析中的应用包括:DNA定量、种属鉴定、种族鉴定、性别鉴定、个体识别和亲子鉴定,以及全基因组扩增等。本文总结各种基于Alu元件的法医DNA分析技术的原理和特点,探讨Alu元件的法医学研究和应用前景,供相关学者参考。 展开更多

关键词 法医遗传学 Alu元件 综述[文献类型】

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片段长度差异等位基因特异性PCR—一种改良的SNP分型新方法 被引量：18

7

作者 黄代新 杨庆恩 赵贵森 《法医学杂志》 CAS CSCD 2005年第1期11-14,共4页

目的建立一种基于等位基因特异性PCR原理的改良SNP分型新方法:片段长度差异等位基因特异性PCR,并考察特异性引物的3'端第3位、第4位碱基错配对特异性延伸的影响。方法以SNP位点rs759117和rs760887为例,设计两条长度不同、3'末... 目的建立一种基于等位基因特异性PCR原理的改良SNP分型新方法:片段长度差异等位基因特异性PCR,并考察特异性引物的3'端第3位、第4位碱基错配对特异性延伸的影响。方法以SNP位点rs759117和rs760887为例,设计两条长度不同、3'末端分别与SNP两个等位基因碱基配对的上游引物,同时在两个等位基因特异性引物3'端第3或第4位碱基引入错配以增加特异性,下游为公用引物。PCR产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染显带后确定样本的基因型。结果不同SNP纯合子为长度不同的单一谱带,杂合子则为两条带,其结果与直接测序完全一致。两条特异性上游引物3'端第3或第4位碱基引入错配后非特异性延伸显著减少,且对PCR反应条件的严格性要求明显降低。结论片段长度差异等位基因特异性PCR是一种简单快速而有效的SNP分型新方法;两条特异性引物3'端第3。 展开更多

关键词 单核苷酸多态性 片段长度差异等位基因特异性PCR 碱基错配 法医物证检验学

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精斑鉴别技术研究进展 被引量：8

8

作者 范光耀 赵贵森 莫耀南 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期735-740,共6页

斑痕类型鉴别是法医物证检验的重要步骤。精斑是最常见的人体斑痕类型之一,现场精斑的确认对案件类型和犯罪事实有重要的证明作用。传统的精液/精斑检测主要依靠精子镜检、酶活化方法和抗原抗体反应,这些基于形态学的或蛋白质酶学的检... 斑痕类型鉴别是法医物证检验的重要步骤。精斑是最常见的人体斑痕类型之一,现场精斑的确认对案件类型和犯罪事实有重要的证明作用。传统的精液/精斑检测主要依靠精子镜检、酶活化方法和抗原抗体反应,这些基于形态学的或蛋白质酶学的检测方法对微量、混合、降解及污染检材的组织来源鉴别存在着明显的不足。近年来,随着转录组学、表观遗传学的迅速发展,PRM1、PRM2等精液特异mRNA标记在精液/精斑鉴定的法医实践中得到了应用,组织差异DNA甲基化的研究也为疑难检材的组织鉴定开辟了新的途径。本文对精液和精斑的法医学组织鉴定进行综述,以期为相关研究提供参考。 展开更多

关键词 精斑 组织 鉴定 MRNA 甲基化

原文传递

单管一步甲基化可变位点分析技术 被引量：2

9

作者 岳阳阳 赵贵森 +3 位作者 张倩 鲁涤 翟仙敦 莫耀南 《法医学杂志》 CAS CSCD 2013年第6期419-424,共6页

目的建立单管一步甲基化可变位点(methylation variable position,MVP)分析技术——单管消化后PCR链融解曲线分析(post-digestion PCR-melting curve analysis,PDP-MCA)。方法以文献报道的差异甲基化区(differentially methylated regio... 目的建立单管一步甲基化可变位点(methylation variable position,MVP)分析技术——单管消化后PCR链融解曲线分析(post-digestion PCR-melting curve analysis,PDP-MCA)。方法以文献报道的差异甲基化区(differentially methylated region,DMR)为模型,在MVP两侧设计一组解链温度各不相同的引物。应用FastDigest甲基化敏感性限制酶(methylation-sensitive restriction enzyme,MSRE),在同一反应管内顺次进行DNA的酶切、复合扩增和MCA检测,生成MCA图谱。同时用该方法和传统的MSRE-PCR MCA技术检测相同样品(外周静脉血、精液、阴道液各5份),比较两种方法检测结果,验证其可行性,并分析比较不同样品的MCA/HRM图谱。结果解链温度相差2℃以上的片段,MCA峰分离良好,复合扩增后可以用MCA技术检测。应用单管PDP-MCA技术,可以集酶切、扩增和检测三步于一管,在2h内得到与传统方法一致的特异性图谱和数据,并实现样品的快速分类鉴别。结论单管PDP-MCA技术可以实现多个MVP的单管、闭管检测,具有简便、快速、易于自动化等优点,可用于样品DNA甲基化差异的检测。 展开更多

关键词 法医遗传学 DNA甲基化 链融解曲线 甲基化敏感性限制酶 甲基化可变位点

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用新设计引物调查武汉汉族Penta D和Penta E基因座遗传多态性 被引量：2

10

作者 黄代新 杨庆恩 +1 位作者 陆惠玲 赵贵森 《中国法医学杂志》 CSCD 2004年第4期222-226,共5页

目的　研究PentaD和PentaE基因座分型引物设计 ,调查PentaD和PentaE基因座在武汉汉族人群中的遗传多态性。方法　用重新设计的PentaD和PentaE基因座分型引物 ,采用热启动PCR和PAGE技术对 2 81名武汉地区汉族无关个体进行分型调查 ,并将... 目的　研究PentaD和PentaE基因座分型引物设计 ,调查PentaD和PentaE基因座在武汉汉族人群中的遗传多态性。方法　用重新设计的PentaD和PentaE基因座分型引物 ,采用热启动PCR和PAGE技术对 2 81名武汉地区汉族无关个体进行分型调查 ,并将其分型结果与Promega公司的PowerPlexTM16系统荧光标记复合扩增试剂盒分型结果进行比较。结果　新设计引物扩增产物的片段大小范围分别为 15 3～ 198bp和 10 7～ 2 12bp ,其分型结果与PowerPlexTM16系统的分型结果完全一致 ,且用银染法检测的灵敏度显著提高 (由 0 5ng提高到 0 2ng)。PentaD和PentaE基因座在武汉汉族群体分别检出 10个和 2 1个等位基因 ,其基因型频率分布均符合Hardy Weinberg平衡。家系调查证实了其等位基因的传递符合孟德尔遗传规律。两基因座的个体识别能力 (DP)分别为 0 92 62、 0 9860 ,非父排除率 (PE)分别为 0 665 1、 0 83 2 5。结论　新设计引物用于PentaD和PentaE基因座的分型检测准确可靠 ,两基因座多态性程度高 ,在法医学个人识别和亲子鉴定中具有使用价值。 展开更多

关键词 引物 武汉市 汉族 Penta D Penta E 基因座 遗传多态性 法医物证学 引物设计

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15例围产期孕产妇死亡纠纷的法医学鉴定分析 被引量：2

11

作者 莫耀南 赵贵森 +1 位作者 李凡 孟晓峰 《中国法医学杂志》 CSCD 2002年第2期107-108,共2页

围产期孕产妇死亡引起的医疗纠纷近年来在基层时有发生,有关这方面的尸检报道较少,笔者对受理的15例围产期孕产妇死亡纠纷的法医学鉴定进行回顾性分析研究,结果报告如下:

关键词 法医学鉴定 医疗纠纷 法医鉴定 司法鉴定 民事纠纷 羊水栓塞症 孕产妇死亡 围生期 围产期

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法医学实习教学改革的探索 被引量：7

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作者 丁锵 周士锋 +3 位作者 莫耀南 周海梅 李凡 赵贵森 《医学理论与实践》 2009年第2期240-242,共3页

法医学是一门应用学科,要求学生有较强的动手能力和实践能力,法医学实习教学是提高学生实践能力的重要环节。现今法医人才培养还是知识型的模式,如何培养高素质的法医高级应用型人才,是时代赋予的课题。加快法医学教学改革,完善现行的... 法医学是一门应用学科,要求学生有较强的动手能力和实践能力,法医学实习教学是提高学生实践能力的重要环节。现今法医人才培养还是知识型的模式,如何培养高素质的法医高级应用型人才,是时代赋予的课题。加快法医学教学改革,完善现行的法医学教育模式,为我国法医学人才培养提供经验和借鉴,形成一个突出实践能力和创新能力特色的法医学人才培养体系。 展开更多

关键词 法医学 实习教学 改革

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SSCP法mtDNA分型的法医学应用 被引量：1

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作者 艾红伟 余纯应 +4 位作者 赵贵森 黄代新 柯技 岳霞 杨庆恩 《法医学杂志》 CAS CSCD 2006年第2期117-119,共3页

目的探讨SSCP法mtDNA分型在法医鉴定实践中的意义。方法PCR扩增mtDNAHV-I和HV-II的序列多态性片段,直接用SSCP技术分型。对70个湖北汉族真三联家系和140例随机个体进行检测,比较家系中mtDNA的单倍型SSCP图谱。统计分析SSCP法用于两个高... 目的探讨SSCP法mtDNA分型在法医鉴定实践中的意义。方法PCR扩增mtDNAHV-I和HV-II的序列多态性片段,直接用SSCP技术分型。对70个湖北汉族真三联家系和140例随机个体进行检测,比较家系中mtDNA的单倍型SSCP图谱。统计分析SSCP法用于两个高变区在母系确定、个人识别中的意义和鉴别能力。结果在70个家系中,母亲和孩子的HV-I、HV-IISSCP带型完全相同;家系中父亲与母子的HV-I图谱不同占98.57%;HV-IISSCP图谱不同占97.13%。140例随机个体的HVI、HVII区分别检出21、16种单倍型,GD值分别为0.9556、0.9356。结论mtDNA-SSCP分型在嫌疑人筛查和母系亲缘关系推断中有实际应用价值。 展开更多

关键词 线粒体DNA 单链构象多态性 个人识别 母系家系

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手套类检材DNA分型的取材部位初步研究 被引量：3

14

作者 范光耀 赵贵森 +3 位作者 莫耀南 戈文东 张灵敏 杨永强 《刑事技术》 2011年第2期8-10,共3页

目的探讨手套类检材进行法医DNA分型时的最佳取材部位。方法构建手套模型,对手套内表面分区取样,常规chelex-100法提取DNA,选取常用法医学STR基因座进行PCR扩增,PAGE检测条带,Quantity One和SPSS软件识别并分析条带。结果手套内表面不... 目的探讨手套类检材进行法医DNA分型时的最佳取材部位。方法构建手套模型,对手套内表面分区取样,常规chelex-100法提取DNA,选取常用法医学STR基因座进行PCR扩增,PAGE检测条带,Quantity One和SPSS软件识别并分析条带。结果手套内表面不同部位的D1S1656和D12S1064基因座扩增条带光密度存在显著的组间差异(P<0.05),来自右手掌指关节和左手小鱼际对应部位的扩增条带光密度差异显著性最大。结论选取与手掌指关节、小鱼际相对应的手套内表面部位,有可能获得更多的DNA以利于分型,这一判断可直接用于指导法医实践。 展开更多

关键词 手套 DNA STR

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降解检材STR分型Ladder-Like条带形成原因的探讨 被引量：1

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作者 楼迪栋 余纯应 +3 位作者 黄代新 赵贵森 任文 杨庆恩 《中国法医学杂志》 CSCD 2005年第6期332-334,共3页

目的探讨降解DNA短串联重复序列PCR扩增产物在PAGE中Ladder-L ike条带的形成原因。方法用一组人工合成的不同长度的D8S1179DNA单链,模拟降解检材中的断裂DNA;利用John M设计的D8S1179引物对模拟模板的DNA单链进行PCR扩增,PAGE分离。结... 目的探讨降解DNA短串联重复序列PCR扩增产物在PAGE中Ladder-L ike条带的形成原因。方法用一组人工合成的不同长度的D8S1179DNA单链,模拟降解检材中的断裂DNA;利用John M设计的D8S1179引物对模拟模板的DNA单链进行PCR扩增,PAGE分离。结果不同模拟模板的DNA单链的组合可以扩增出不同的Lad-der-L ike条带。结论短串联重复序列Ladder-like条带是PCR过程中降解DNA多态区互补扩增的产物。 展开更多

关键词 法医物证学 短串联重复序 Ladder-like条带 PCR—STR分型降解检材 降解检材

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Rotor-Gene链融解曲线法甲基化标记筛选技术的建立 被引量：1

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作者 莫耀南 赵贵森 +2 位作者 郑海燕 刘良 杨渝珍 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2008年第1期116-119,共4页

目的:建立基于Rotor-Gene的链融解曲线法的甲基化标记筛选技术,分析各种影响因素,评估其实用性。方法:克隆Hela细胞雄激素受体基因外显子-1的Bisulfite-PCR产物,挑出经测序证实的可以代表不同甲基化程度的一组质粒,并以之为模板,在Rotor... 目的:建立基于Rotor-Gene的链融解曲线法的甲基化标记筛选技术,分析各种影响因素,评估其实用性。方法:克隆Hela细胞雄激素受体基因外显子-1的Bisulfite-PCR产物,挑出经测序证实的可以代表不同甲基化程度的一组质粒,并以之为模板,在Rotor-Gene3000实时定量PCR仪进行扩增和链融解,分析融链温度、链融解曲线与甲基化程度、甲基化模式的相关性及各种影响因素。结果:基于Rotor-Gene的链融解曲线法,不仅可以区分甲基化与非甲基化,而且能够鉴别片段内细微的甲基化差异;主要的影响因素有升温幅度、缓冲液离子强度、产物浓度等。结论:基于Rotor-Gene的链融解曲线法,可以集扩增和链融解于一体,是一种经济简便的甲基化分析技术,可用于样品的甲基化筛选。 展开更多

关键词 DNA甲基化 链融解曲线法 亚硫酸氢盐 雄激素受体

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Hela细胞雄激素受体基因外显子1的甲基化检测 被引量：1

17

作者 李笑竹 赵贵森 +3 位作者 岳阳阳 翟仙敦 艾红伟 薛小琦 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2011年第6期856-858,共3页

目的:检测Hela细胞雄激素受体(AR)基因外显子1的甲基化水平。方法:用亚硫酸氢盐克隆测序法和联合亚硫酸氢盐的限制酶法(COBRA)检测不同来源Hela细胞AR基因外显子1的甲基化水平,BiQAnalyzer软件分析测序结果。结果:在非CpG胞嘧啶转化率&g... 目的:检测Hela细胞雄激素受体(AR)基因外显子1的甲基化水平。方法:用亚硫酸氢盐克隆测序法和联合亚硫酸氢盐的限制酶法(COBRA)检测不同来源Hela细胞AR基因外显子1的甲基化水平,BiQAnalyzer软件分析测序结果。结果:在非CpG胞嘧啶转化率>98%的前提下,Hela细胞AR基因外显子1片段的总甲基化率≥96.2%,除第8个CpG位点外,其他CpG位点均为完全甲基化或高甲基化。COBRA法与测序法结果一致。结论:DNA甲基化可能是Hela细胞AR基因失活的分子机制。 展开更多

关键词 雄激素受体 DNA甲基化 HELA细胞

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LATE-PCR非标探针法检测食管癌易感基因ALDH2 rs671位点3种基因型 被引量：1

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作者 杨斌 杨瑞 +3 位作者 周路敏 张振辉 冯巍 赵贵森 《食管疾病》 2020年第4期265-269,共5页

目的建立食管癌易感基因乙醛脱氢酶2(ALDH2)编码区SNP rs671的LATE(Linear-After-The-Exponential)-PCR非标探针分型技术。方法用Chelex法提取口腔拭子DNA,LATE-PCR技术制备单链,等位基因特异性探针与单链杂交后,在荧光定量PCR仪上通过... 目的建立食管癌易感基因乙醛脱氢酶2(ALDH2)编码区SNP rs671的LATE(Linear-After-The-Exponential)-PCR非标探针分型技术。方法用Chelex法提取口腔拭子DNA,LATE-PCR技术制备单链,等位基因特异性探针与单链杂交后,在荧光定量PCR仪上通过链融解曲线分析,根据融链峰进行SNP分型。用经PCR-RFLP法分型的已知样本验证本方法的有效性。结果LATE-PCR产物直接链融解曲线分析可以区分GG型和A基因携带者。PCR后加入非封闭探针分析可以鉴别3种基因型。15 bp 3’末端C6氨基修饰的封闭探针,可以在PCR前加入体系,A型、G型任一探针即可准确地鉴别3种基因型。结论LATE-PCR结合非标探针技术,可以实现SNP rs671的简便、快速、闭管分型,可用于食管癌高危个体筛查、法医嫌疑人排查等。 展开更多

关键词 乙醛脱氢酶2 食管癌 单核苷酸多态性 DNA探针

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唾液菌群的直接PCR扩增-高分辨率熔解曲线分析及其法医学应用

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作者 杨瑞 陈炯 赵贵森 《法医学杂志》 CAS CSCD 2022年第6期709-718,共10页

目的 建立一种基于直接PCR(direct PCR,dPCR)扩增和高分辨率熔解(high resolution melting,HRM)曲线分析的唾液菌群快速检测技术,评估其法医学应用价值。方法 离心收集唾液中的细菌后重悬于Tris-EDTA(TE)缓冲液,直接作为模板用于16S rDN... 目的 建立一种基于直接PCR(direct PCR,dPCR)扩增和高分辨率熔解(high resolution melting,HRM)曲线分析的唾液菌群快速检测技术,评估其法医学应用价值。方法 离心收集唾液中的细菌后重悬于Tris-EDTA(TE)缓冲液,直接作为模板用于16S rDNA V4区的扩增和HRM曲线分析,即dPCR-HRM,计算样本HRM图谱相对于参考图谱的判型置信度(genotype confidence percentage,GCP)。以传统的试剂盒(kit)提取模板DNA后再行PCR-HRM(即kPCR-HRM)为参考,验证dPCR-HRM的可行性。用dPCR-HRM法分析梯度稀释模板、群体样本和模拟唾液斑样本,评估其灵敏度、分型能力和检材适应性。结果 dPCR-HRM法可在90 min内得到唾液菌群的HRM图谱,与kPCR-HRM法之间的GCP>95.85%。应用dPCR-HRM法,一般个体0.29 nL的唾液即可测得菌群HRM型。61例唾液样本可分为10种型,8 h之内的唾液斑与新鲜唾液分型相同(GCP>90.83%)。结论 dPCR-HRM技术可用于唾液菌群的快速分型,且具有成本低、操作简单等优点。 展开更多

关键词 法医遗传学 高分辨率熔解 聚合酶链反应 唾液 菌群结构

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72例冠心病死者心脏的检验和死因分析 被引量：4

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作者 李凡 莫耀南 +3 位作者 马淑玲 董平栓 赵贵森 孟晓峰 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期108-108,共1页

关键词 冠心病猝死 心脏 检验 死因分析

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