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鸡产蛋下降综合征病毒间接免疫荧光检测方法的建立及应用
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作者 孔冬妮 王嘉 +9 位作者 邓永 翟天舒 刘丹 黄小洁 薛琪 候力丹 吴华伟 薛青红 李俊平 毛娅卿 《动物医学进展》 北大核心 2024年第1期44-51,共8页
为建立检测鸡产蛋下降综合征病毒(EDSV)的间接免疫荧光方法,并对该检测方法的各个步骤进行优化,以鸡产蛋下降综合征病毒多抗血清和FITC标记的兔抗鸡IgG为组合,对一抗和二抗的最适工作浓度和孵育时间进行了优化,对IFA方法进行了敏感性、... 为建立检测鸡产蛋下降综合征病毒(EDSV)的间接免疫荧光方法,并对该检测方法的各个步骤进行优化,以鸡产蛋下降综合征病毒多抗血清和FITC标记的兔抗鸡IgG为组合,对一抗和二抗的最适工作浓度和孵育时间进行了优化,对IFA方法进行了敏感性、特异性和重复性试验。结果表明,检测接种EDSV的96孔细胞培养板时,多抗血清的最适工作浓度为1∶320,孵育时间为45 min;FITC标记的兔抗鸡IgG的最适工作浓度为1∶200,孵育时间为30 min;病毒敏感性试验表明,该方法可以检测到10-2 TCID 50/mL的病毒;多抗血清敏感度试验表明,当多抗血清稀释到1∶1280时仍可见较明显的特异性荧光;特异性试验表明,该方法只针对EDSV,而不与禽副流感病毒4型、鸡新城疫病毒等其他病原反应;批内重复性试验和批间重复性试验结果表明,该方法具有较好的重复性和可靠性。结果表明,建立的间接免疫荧光方法具有较高的灵敏度和较好的稳定性,可为我国禽源性生物材料EDSV的检测提供技术支持,有巨大的市场需求。 展开更多
关键词 鸡产蛋下降综合征病毒 多抗血清 间接免疫荧光 优化
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我国禽用生物制品现状及禽用病毒类生物制品质量情况分析
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作者 吴华伟 刘丹 +11 位作者 王嘉 陈晓春 黄小洁 孔冬妮 苏佳 侯力丹 薛麒 邓永 翟天舒 赵炜 白洪旭 薛青红 《中国兽药杂志》 2024年第3期30-37,共8页
对我国禽用生物制品基本现状及2013-2022年禽用病毒类生物制品的质量情况进行总结,分析存在的问题,提出强化SPF鸡(鸡胚)质量控制、持续开展风险监测方法研究、完善禽用标准物质、推动禽用新型生物制品研制的建议。
关键词 病毒类生物制品 质量分析
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细胞源猪瘟活疫苗E2基因遗传稳定性和免疫原性分析
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作者 吴华伟 陈晓春 +8 位作者 黄小洁 刘丹 邓永 秦义娴 高金源 薛青红 孙淼 陈建 陈延飞 《中国兽药杂志》 2023年第4期1-10,共10页
测定了中国4个细胞源猪瘟活疫苗(C株)E2基因全序列,将其与GenBank上13个猪瘟病毒的E2基因序列(含C株原始毒株、7个猪瘟病毒C株以及国际上5个主要猪瘟活疫苗毒株的E2基因全序列)进行了核苷酸序列、推导的氨基酸序列进行遗传变异分析,通... 测定了中国4个细胞源猪瘟活疫苗(C株)E2基因全序列,将其与GenBank上13个猪瘟病毒的E2基因序列(含C株原始毒株、7个猪瘟病毒C株以及国际上5个主要猪瘟活疫苗毒株的E2基因全序列)进行了核苷酸序列、推导的氨基酸序列进行遗传变异分析,通过生物信息学手段对预测的E2蛋白N-糖基化位点、E2蛋白磷酸化位点和理化特性以及模拟的蛋白空间结构进行了比较,并通过免疫攻毒试验对4个细胞源猪瘟疫苗(C株)的免疫效果进行了验证。结果表明,与猪瘟病毒C株原始种毒相比,尽管中国4个细胞源猪瘟活疫苗的E2基因核苷酸序列、推导的E2蛋白氨基酸序列或模拟的三维结构等发生个别核苷酸变异、个别氨基酸位点突变或缺失,但均不影响猪瘟C株的免疫原性,猪瘟疫苗C株仍然是防控猪瘟的最有效武器。 展开更多
关键词 猪瘟 细胞源 活疫苗 E2基因 遗传稳定性 同源性 免疫原性
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禽流感病毒NP蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
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作者 黄小洁 薛麒 +6 位作者 张兵 邓永 侯力丹 吴华伟 薛青红 杨承槐 刘丹 《中国兽药杂志》 2023年第6期10-16,共7页
为获得禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)NP蛋白的单克隆抗体,将构建的重组表达质粒pET-30a-NP转化BL21细胞,经IPTG诱导表达、纯化后作为免疫原,免疫8周龄Balb/c雌性小鼠,并按常规方法制备杂交瘤细胞。通过ELISA方法、Western-blo... 为获得禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)NP蛋白的单克隆抗体,将构建的重组表达质粒pET-30a-NP转化BL21细胞,经IPTG诱导表达、纯化后作为免疫原,免疫8周龄Balb/c雌性小鼠,并按常规方法制备杂交瘤细胞。通过ELISA方法、Western-blot方法进行筛选,获得3株杂交瘤细胞株,命名为3A6、2H12、5F7,并进行了培养特性、分泌抗体活性、分泌抗体亚类的鉴定。结果显示:3株细胞株连续传10代均稳定分泌单克隆抗体,分泌的单克隆抗体亚型均为IgG2b,轻链类型均为Kappa。制备并纯化了以上3株单克隆抗体,浓度分别为2.9、2.5、2.8 mg/mL,纯度不低于90%。West-blot检测,单抗与H7血凝抑制试验抗原、H5血凝抑制试验抗原、H9N2病毒能发生特异性反应,说明单抗具有广谱性,且与IBDV、REV、IBV、MDV、ALV、AE、ILT、NDV、EDSV等均无特异性条带出现,说明特异性良好。本研究制备的3株针对禽流感NP蛋白的单抗,具有较好的特异性、保守性和广谱性,为下一步开展AIV诊断试剂如IFA检测试剂盒、ELISA检测试剂盒等的研制奠定了物质基础。 展开更多
关键词 禽流感病毒 NP蛋白 单克隆抗体 制备 鉴定
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猪轮状病毒阳性血清(G5型)制备及初步鉴定
5
作者 高金源 高月异 +5 位作者 邓永 王兆 秦义娴 李翠 吴华伟 薛青红 《中国兽药杂志》 2023年第5期1-5,共5页
采用常见猪病毒抗体阴性仔猪制备了猪轮状病毒G5型阳性血清,经冻干鉴定,其性状、无菌检验、特异性检验、剩余水分测定、真空度测定结果均符合要求,效价高达1∶11482,为我国猪轮状病毒活疫苗或其联苗成分的外源病毒检验、鉴别检验提供阳... 采用常见猪病毒抗体阴性仔猪制备了猪轮状病毒G5型阳性血清,经冻干鉴定,其性状、无菌检验、特异性检验、剩余水分测定、真空度测定结果均符合要求,效价高达1∶11482,为我国猪轮状病毒活疫苗或其联苗成分的外源病毒检验、鉴别检验提供阳性血清,以满足疫苗检验需求。 展开更多
关键词 猪轮状病毒 阳性血清 鉴定
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禽多瘤病毒TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
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作者 闫佳佳 翟天舒 +8 位作者 许冠龙 王嘉 孔冬妮 邓永 汪溪 薛青红 程佳 毛娅卿 印春生 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期566-571,共6页
为建立检测禽多瘤病毒(avian polyomavirus,APV)的快速诊断方法,根据APV VP4基因的保守序列设计并合成引物和探针,建立了TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法,验证了其特异性、敏感性和重复性,并利用建立的方法对采集的临床样本组织进行... 为建立检测禽多瘤病毒(avian polyomavirus,APV)的快速诊断方法,根据APV VP4基因的保守序列设计并合成引物和探针,建立了TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法,验证了其特异性、敏感性和重复性,并利用建立的方法对采集的临床样本组织进行检测。结果显示,建立的TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的C_(t)值与标准品在1.0×10^(9)~1.0×10^(2)copies/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.996,斜率为-3.021,检测下限为1.0×10^(1)copies/μL,与其他禽源病毒未发生交叉反应,重复性试验的变异系数均小于2%,重复性好,并且该方法在实际临床检测中可行。上述结果表明,建立的方法可用于禽多瘤病的早期诊断和APV快速检测。 展开更多
关键词 禽多瘤病毒 VP4基因 TaqMan探针实时荧光定量PCR
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裂谷热的流行与生物安全防控
7
作者 胡云皓 吴好庭 +7 位作者 门立强 刘绯 王嘉 孔冬妮 邓永 翟天舒 万建青 毛娅卿 《中国动物检疫》 CAS 2023年第11期69-75,共7页
裂谷热(Rift Valley fever,RVF)是一种以蚊子为传播媒介的病毒性人兽共患传染病,可引发人致命性出血热和反刍动物大量死亡。对RVF流行情况的分析表明,近年来RVF疫情形势总体平稳,主要在非洲国家流行,且涉及人和多种动物。由于频繁的国... 裂谷热(Rift Valley fever,RVF)是一种以蚊子为传播媒介的病毒性人兽共患传染病,可引发人致命性出血热和反刍动物大量死亡。对RVF流行情况的分析表明,近年来RVF疫情形势总体平稳,主要在非洲国家流行,且涉及人和多种动物。由于频繁的国际往来与贸易、病例报告不足与瞒报以及环境因素等,之前未受感染地区有很大的RVF传入风险。目前暂无批准的RVF疫苗用于接种人,仅在个别流行国家允许使用动物疫苗,提示生活在流行地区和去流行地区旅行的人员应提高对该病暴露风险的认识,做好相关生物安全防控。在我国,人员流动和动物国际贸易等活动加剧了RVF传入风险,同时也存在自然发生RVF疫情的风险。因此,应制定并严格执行进口动物生物安全防控制度,加快疫苗和检测技术研究,同时结合“同一健康”计划,做好流行风险评估与生物安全防控,降低RVF传入传播风险。 展开更多
关键词 裂谷热 人兽共患病 流行情况 风险因素 生物安全
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内质网磷酸化修饰与肺结核感染后免疫反应的相关性研究
8
作者 陈程 邓永 +2 位作者 鲁学明 李榜龙 李小玉 《河北医学》 CAS 2024年第2期218-223,共6页
目的:观察内质网(ER)磷酸化修饰与肺结核感染后免疫反应的相关性。方法:在这项观察性研究中,我们招募了2021年1月至2023年6月间在本院接受治疗的成年结核病患者(n=19)和没有结核病症状并接触过的家庭接触者(健康接触者)(n=20)。所有患... 目的:观察内质网(ER)磷酸化修饰与肺结核感染后免疫反应的相关性。方法:在这项观察性研究中,我们招募了2021年1月至2023年6月间在本院接受治疗的成年结核病患者(n=19)和没有结核病症状并接触过的家庭接触者(健康接触者)(n=20)。所有患者在开始治疗前采集血样,并对这些血样进行了结核分枝杆菌特异性T细胞应答、细胞因子产生以及磷酸化的蛋白激酶样内质网激酶(PERK)和转录激活因子3(STAT3)表达的特征分析。结果:与健康接触者相比,结核病患者的PPD刺激的全血样品中IL-17、IL-22水平显著降低(P<0.05),和IL-6、IL-10水平显著增加(P<0.05)。与健康接触者相比,结核病患者的自发IL-10、IL-6和IFN-γ浓度更高(P<0.05)。在没有IL-6体外刺激的情况下,与健康接触者相比,结核病患者的CD4^(+)T细胞中的PERK水平显著更高(P<0.001)。加入IL-6导致健康接触者CD4^(+)T细胞中PERK水平较没有IL-6体外刺激健康接触者CD4^(+)T细胞显著增加(P<0.01)。与健康接触者相比,结核病患者的CD4^(+)T细胞具有更高的STAT3蛋白表达(P<0.05)。在所有供体和结核病患者中,CD4^(+)T细胞中PERK和STAT3表达之间呈显著正相关性(rho=0.571、0.503,均P<0.05)。仅在结核病患者中观察到CD40L/IL-2共表达T细胞和CD40L/IFN-γ共表达T细胞比例与STAT3表达呈负相关(rho=-0.481、-0.705,P<0.001)。结论:本研究提供了关于ER磷酸化修饰相关PERK/STAT3信号通路可能驱动结核病患者中的免疫抑制/抗T细胞反应的证据。 展开更多
关键词 内质网 T细胞 肺结核 磷酸化的蛋白激酶样内质网激酶 免疫反应
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鼠源细胞TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立
9
作者 苏佳 赵炜 +6 位作者 秦义娴 邓永 高月异 白洪旭 薛青红 陈晓春 吴华伟 《中国兽药杂志》 2023年第3期10-16,共7页
为对鼠源细胞进行鉴别检测,以鼠线粒体16S rRNA基因序列为靶位点设计特异性引物及探针,建立实时荧光定量PCR检测方法,并评价该方法的特异性及敏感性。结果显示,所建立的检测方法特异性好,针对鼠源细胞基因组荧光定量PCR扩增曲线良好,其... 为对鼠源细胞进行鉴别检测,以鼠线粒体16S rRNA基因序列为靶位点设计特异性引物及探针,建立实时荧光定量PCR检测方法,并评价该方法的特异性及敏感性。结果显示,所建立的检测方法特异性好,针对鼠源细胞基因组荧光定量PCR扩增曲线良好,其他物种来源细胞基因组及生物制品原辅材料未出现特异性扩增曲线;敏感性高,基因拷贝数检出限度为45.3拷贝。本试验建立的荧光定量PCR检测方法能够有效地对鼠源细胞进行快速检测,为细胞质量控制提供了有效方法。 展开更多
关键词 鼠源细胞 荧光定量PCR 线粒体16S rRNA 检测
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我国宠物源人畜共患病流行现状与公共卫生安全 被引量:8
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作者 邓永 王嘉 +2 位作者 孔冬妮 侯力丹 毛娅卿 《中国兽药杂志》 2020年第1期26-30,共5页
近年来,我国宠物饲养数量激增带来的宠物源人畜共患病隐患已日益增加。强化宠物源人畜共患病的防范意识,采取有效措施控制疫病发生,对于保障公共卫生安全具有十分重要的现实意义。对宠物源人畜共患病流行现状做一综述,分析人畜共患病高... 近年来,我国宠物饲养数量激增带来的宠物源人畜共患病隐患已日益增加。强化宠物源人畜共患病的防范意识,采取有效措施控制疫病发生,对于保障公共卫生安全具有十分重要的现实意义。对宠物源人畜共患病流行现状做一综述,分析人畜共患病高发的原因,并提出解决这一问题的对策建议。 展开更多
关键词 宠物 人畜共患病 公共卫生安全
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单项式全胸腔镜肺叶切除手术对肺癌患者氧自由基及血管内皮生长因子的影响 被引量:4
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作者 邓永 施进 +3 位作者 杨文刚 沈楠林 吴树强 沈蓝 《医学临床研究》 CAS 2020年第5期689-692,共4页
[目的]探讨单向式全胸腔镜肺叶切除手术对肺癌患者氧自由基及血管内皮生长因子的影响.[方法]回顾性分析在本院诊治的136例肺癌患者的临床资料,按照治疗方法不同分为胸腔镜组(接受单向式全胸腔镜肺叶切除手术)和对照组(接受开胸肺癌根治... [目的]探讨单向式全胸腔镜肺叶切除手术对肺癌患者氧自由基及血管内皮生长因子的影响.[方法]回顾性分析在本院诊治的136例肺癌患者的临床资料,按照治疗方法不同分为胸腔镜组(接受单向式全胸腔镜肺叶切除手术)和对照组(接受开胸肺癌根治术).比较两组患者手术时间、出血量、胸腔引流量、住院时间、并发症发生率及手术前后24 h血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、C-反应蛋白(CRP)水平.[结果]胸腔镜组患者手术时间、出血量、胸腔引流量及住院时间均少于对照组(P<0.05);术后24h,胸腔镜组患者血清SOD及GSH-px水平均显著高于对照组(P<0.05),MDA、VEGF、MMP-9及CRP水平低于对照组(P<0.05);胸腔镜组患者并发症发生率低于对照组(P<0.05).[结论]单向式全胸腔镜肺叶切除手术治疗肺癌的疗效显著,对患者的创伤较小,可减轻患者氧化应激反应,减少V EG F的表达,且并发症发生率低,值得临床推广应用. 展开更多
关键词 肺肿瘤/外科学 肺切除术 胸腔镜检查
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邓永作品
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作者 邓永 《黄河文学》 2017年第12期140-140,共1页
春 1 东君着意弄琴弦,碧水盈盈钓纸鸢。 轻步寻诗青石板,风梳柳叶动心田。
关键词 诗词 文学 文学作品 诗集
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犬细小病毒2c亚型毒株的分离与鉴定 被引量:1
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作者 邓永 孔冬妮 +2 位作者 侯力丹 毛娅卿 王嘉 《中国兽药杂志》 2019年第9期19-26,共8页
采集一疑似犬细小病毒(CPV)患犬的粪便,用纳米PCR方法对病料进行CPV检测,并应用猫肾细胞F81进行病毒分离培养,采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)检测病毒在F81细胞中的增殖动态。利用PCR扩增分离病毒的VP2基因,测序结果用DNAMAN... 采集一疑似犬细小病毒(CPV)患犬的粪便,用纳米PCR方法对病料进行CPV检测,并应用猫肾细胞F81进行病毒分离培养,采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)检测病毒在F81细胞中的增殖动态。利用PCR扩增分离病毒的VP2基因,测序结果用DNAMAN软件对获得的VP2基因序列进行拼接,并与NCBI上已经公布的犬细小病毒的全基因组序列以及相关蛋白的核酸序列进行比较,确定其所分离的病毒株型并推导氨基酸序列。结果表明,纳米PCR检测结果为CPV核酸阳性,病料接种到F81细胞培养后出现明显细胞病变(CPE),血清学鉴定为CPV抗原阳性,序列测定分析表明,该毒株VP2基因开放阅读框(ORF)为1755 bp。进化分析显示,该毒株属于CPV-2c型,并命名为CPV-2c-Guangxi23。 展开更多
关键词 犬细小病毒 分离与鉴定 免疫过氧化物酶单层细胞染色法
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猪乙型脑炎研究进展 被引量:13
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作者 邓永 徐高原 《养殖与饲料》 2007年第6期43-46,共4页
关键词 流行性乙型脑炎 日本乙型脑炎 乙型脑炎病毒 中枢神经系统 人类危害 virus 病毒性疾病 人畜共患
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中国部分地区2005-2007年猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株ORF5基因和Nsp2基因遗传变异分析 被引量:15
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作者 薛青红 张彦明 +4 位作者 刘湘涛 郎洪武 邹敏 高金源 邓永 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期1805-1812,共8页
【目的】为分析2005-2007年间中国部分省区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株的分子生物学特征,了解其遗传演化规律,查明中国目前PRRSV流行毒株现状。【方法】应用病毒分离方法从中国4个省份在2005-2007年间采集的81份疑似蓝耳病... 【目的】为分析2005-2007年间中国部分省区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株的分子生物学特征,了解其遗传演化规律,查明中国目前PRRSV流行毒株现状。【方法】应用病毒分离方法从中国4个省份在2005-2007年间采集的81份疑似蓝耳病病料中分离到36株猪繁殖与呼吸综合征病毒,应用RT-PCR方法对36株PRRSV现地分离株的ORF5基因和Nsp2基因进行扩增和序列分析。【结果】36株现地分离株均属于美洲型PRRSV,ORF5基因全长均为603bp,未发现有基因缺失或插入,编码约200个氨基酸,分离株推导氨基酸序列变异主要发生在9~39位;36个分离株中有15株PRRSVNsp2基因全长为2940bp,21株PRRSVNsp2基因全长为2850bp;发生Nsp2缺失的PRRSV在Nsp2基因第481位、532~560位发生了不连续缺失,共缺失30个氨基酸。与GeneBank中收录的14个PRRSVORF5、Nsp2基因进行核苷酸及氨基酸序列比较和分析,系统进化关系显示,除B02-2005株可能与疫苗株有关外,多数现地分离株与Ch-1a株遗传距离较近,不同年份分离到的毒株与早期PRRSV分离株的同源性逐年降低。【结论】根据氨基酸变异情况对PRRSV现地分离株进行亚群聚类分析,发现36株现地分离株分别归属于以VR-2332为代表的4亚群,以BJ-4为代表的1亚群和以Ch-1a为代表的2亚群。进化关系表明PRRSVORF5、Nsp2基因及其推导的氨基酸序列均发生了较大变异,不同地区PRRSV分离株的遗传关系存在交叉现象,地域特征不明显。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 病毒分离 ORF5基因 NSP2基因 遗传变异
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重组产毒多杀性巴氏杆菌毒素PMT的N-端和C-端蛋白的生物学活性及免疫原性 被引量:6
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作者 汤细彪 吴斌 +4 位作者 赵战勤 邓永 何华 何启盖 陈焕春 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期213-219,共7页
将5个toxA基因片段N1518、C2345、N3172、N3388和C2115分别克隆到合适的原核表达载体pET-28a(b,c)系统,其中pET28a-N1518和pET28b-C2115在大肠杆菌成功表达,获得大小分别为57kDa和78kDa的融合蛋白rPMT-N和rPMT-C,Western blot检测证实... 将5个toxA基因片段N1518、C2345、N3172、N3388和C2115分别克隆到合适的原核表达载体pET-28a(b,c)系统,其中pET28a-N1518和pET28b-C2115在大肠杆菌成功表达,获得大小分别为57kDa和78kDa的融合蛋白rPMT-N和rPMT-C,Western blot检测证实两种表达产物均具有反应原性。分别以200μg rPMT-N和rPMT-C对小白鼠进行体内生物学活性试验,结果两种表达蛋白均不能致死小白鼠;体外细胞毒性试验证实896ng/mL的rPMT-N能使Vero细胞发生病变,而rPMT-C对Vero细胞无明显毒性作用。将rPMT-N和rPMT-C制成亚单位疫苗,同时设天然PMT及无菌PBS对照组,间隔2周分2次皮下免疫小白鼠。二免后2周用8.2×10~5 CFU的HN-13株T^+Pm进行腹腔攻毒,结果rPMT-N组保护率为90.0%(9/10),rPMT-C组保护率为50.0%(5/10),天然PMT组保护率为80.0%(8/10)。综上试验表明,rPMT-N具有良好的生物学活性和免疫原性,可作为PAR疫苗添加成分,显示了良好的应用前景。 展开更多
关键词 产毒多杀性巴氏杆菌 PMT 亚克隆 生物学活性 免疫原性
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胰十二指肠切除术后胰瘘的高危因素及胰体部平扫CT值对其预测价值的分析 被引量:6
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作者 杨美文 邓永 +1 位作者 黄涛 张雷达 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1177-1182,共6页
目的探讨胰十二指肠切除术(pancreatoduodenectomy,PD)后胰瘘的高危因素及术前胰腺体部拟切除断面平扫期CT值(以下简称胰体部CT值)对PD术后胰瘘发生风险的预测价值。方法回顾性分析西南医院肝胆外科2013年1月至2015年12月期间收治的408... 目的探讨胰十二指肠切除术(pancreatoduodenectomy,PD)后胰瘘的高危因素及术前胰腺体部拟切除断面平扫期CT值(以下简称胰体部CT值)对PD术后胰瘘发生风险的预测价值。方法回顾性分析西南医院肝胆外科2013年1月至2015年12月期间收治的408例住院行胰十二指肠切除术患者的完整病历资料,单因素分析采用Pearson卡方检验,多因素分析采用二分类Logistic回归分析,胰体部CT值与胰瘘之间的相关性采用简单线性相关分析,其对PD术后胰瘘的预测价值采用受试者工作特征(ROC)曲线下面积。结果 408例患者共发生胰瘘123例(30.14%),单因素分析显示BMI、术前γ-谷氨酰转肽酶、胰管直径、胰体部CT值、手术时间、胰腺质地软硬(术中判断)是PD术后胰瘘的危险因素;多因素分析显示BMI≥25 kg/m^2、胰管直径≤3 mm、胰体部CT值<40 Hu、胰腺质地软(术中判断)软为PD术后胰瘘发生的独立高危因素。不同胰瘘严重程度分级患者的胰体部CT值相比较,差异有统计学意义(P<0.05)。胰瘘严重程度与胰体部CT值呈负相关。胰体部CT值ROC曲线下面积为0.714,对PD术后胰瘘具有中等预测价值。结论 BMI≥25 kg/m^2、胰管直径≤3 mm、胰体部CT值<40 Hu、胰腺质地软硬(术中判断)软为PD术后胰瘘发生的独立高危因素,胰体部CT值对PD术后胰瘘具有中等预测价值,可指导围手术期治疗方案。 展开更多
关键词 胰十二指肠切除术 胰瘘 高危因素 胰体部CT值
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牛病毒性腹泻病毒链特异性SYBR Green荧光定量PCR方法的建立及应用 被引量:5
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作者 刘存 邓永 +3 位作者 梁琳 李金祥 张彦明 崔尚金 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期2079-2087,共9页
为了对牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)复制过程中正、负链RNA进行定量检测,通过生物学软件DNAStar和Primer express 3.0设计BVDV正、负链RNA特异性反转录引物并在其5′端添加非病毒核苷酸标签序列以区分BVDV正、负... 为了对牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)复制过程中正、负链RNA进行定量检测,通过生物学软件DNAStar和Primer express 3.0设计BVDV正、负链RNA特异性反转录引物并在其5′端添加非病毒核苷酸标签序列以区分BVDV正、负链RNA。同时设计荧光定量PCR引物与非病毒核苷酸标签序列组成引物对,建立了BVDV链特异性荧光定量RT-PCR(ssRT-qPCR)方法,对其敏感性、重复性、特异性进行评估并利用所建立BVDV ssRT-qPCR对不同接毒剂量下BVDV在细胞内复制过程中正、负链RNA进行定量检测。结果表明,以构建的pMD18T-BV+和pMD18T-BV-质粒为标准品建立的BVDV正链特异性荧光定量RT-PCR方法[ss(+)RT-qPCR]和负链特异性荧光定量RT-PCR方法[ss(-)RT-qPCR]在10 2~10 7拷贝范围内具有良好的线性关系,线性相关系数分别为0.998 1和0.995 3;敏感性试验结果显示,ssRT-qPCR敏感性较好,ss(+)RT-qPCR最低检测下限为10拷贝,ss(-)RT-qPCR最低检测下限为100拷贝。重复性试验结果显示,所建立的ssRT-qPCR批内和批间的变异系数为均小于1%,方法重复性良好。特异性试验显示,所建立的ssRT-qPCR方法与牛副流感病毒3型、牛传染性鼻气管炎病毒、牛呼吸道合胞体病毒等不存在交叉反应,特异性较好。利用建立的ssRT-qPCR对不同感染剂量下细胞内BVDV正、负链RNA进行定量分析,结果显示以10、0.1 MOI剂量接种BVDV于MDBK细胞后,BVDV正、负链RNA变化呈现先升后降再逐渐上升的趋势。以1 MOI剂量感染MDBK细胞,BVDV正、负链RNA的动态变化趋势略有差异,整体呈上升趋势。10、1 MOI接毒剂量接种细胞后,BVDV正、负链RNA在感染后36 h基本维持稳定水平,以0.1 MOI接种细胞后BVDV正、负链RNA在感染后24 h即达到稳定水平。BVDV链特异性检测进一步验证了所建立方法的适用性。该研究建立了BVDV链特异性荧光定量RT-PCR方法并利用该方法对BVDV在细胞内复制过程中正、负链RNA的动态变化过程进行描述,为研究宿主蛋白抗病毒机制、BVDV基因组RNA复制及调控机制等研究提供了研究手段。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 非病毒核苷酸序列标签 荧光定量PCR方法
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克氏针辅助穿刺在椎体成形术中的优势 被引量:2
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作者 邓永 牛和明 +2 位作者 郭涛 李俊 李小波 《安徽医学》 2019年第1期35-38,共4页
目的观察克氏针辅助穿刺在椎体成形术中的应用效果,并与传统穿刺治疗进行比较。方法选取芜湖市第一人民医院2015年2月至2017年2月老年性骨质疏松性椎体骨折患者48例,按照随机数字表法分为治疗组(24例)与对照组(24例)。对照组采用传统穿... 目的观察克氏针辅助穿刺在椎体成形术中的应用效果,并与传统穿刺治疗进行比较。方法选取芜湖市第一人民医院2015年2月至2017年2月老年性骨质疏松性椎体骨折患者48例,按照随机数字表法分为治疗组(24例)与对照组(24例)。对照组采用传统穿刺针方法治疗,治疗组采用克氏针辅助穿刺方法治疗。比较两组患者术后24小时疼痛视觉模拟评分(VAS)、术中使用C形臂X线机的透视次数、手术时间及骨水泥渗漏发生率。结果治疗组术后24小时VAS评分为(3. 10±0. 89)分,术中使用C形臂X线机透视次数为(11. 50±1. 70)次,手术时间为(49. 63±12. 60) min,骨水泥渗漏发生率为20. 8%,对照组分别为(3. 67±1. 03)分、(13. 80±2. 09)次、(56. 83±13. 44) min、33. 3%,差异均有统计学意义(P <0. 05)。结论椎体成形术中采用克氏针辅助穿刺治疗在缓解术后疼痛、减少X线透视次数、缩短手术时间、防止骨水泥渗漏等方面有一定优势。 展开更多
关键词 椎体压缩性骨折 骨质疏松 椎体成形术 克氏针
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猪轮状病毒的分离与鉴定 被引量:8
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作者 陈晓春 吴华伟 +3 位作者 张广川 邓永 高金源 郎洪武 《中国兽药杂志》 2013年第9期4-8,共5页
将疑似感染猪轮状病毒的内蒙古某猪场的腹泻仔猪粪便样品在MA104细胞上分离培养,得到一株能产生明显细胞病变的毒株(命名为PRV L1株)。经纯净性检测,该毒株无菌生长、无支原体污染及外源病毒污染。特异性检测结果显示该PRV L1株能被猪... 将疑似感染猪轮状病毒的内蒙古某猪场的腹泻仔猪粪便样品在MA104细胞上分离培养,得到一株能产生明显细胞病变的毒株(命名为PRV L1株)。经纯净性检测,该毒株无菌生长、无支原体污染及外源病毒污染。特异性检测结果显示该PRV L1株能被猪轮状病毒单特异性血清中和,并可被猪轮状病毒单克隆抗体识别,其VP7基因序列与G5型猪轮状病毒VP7基因序列同源性为99%。动物回归试验结果表明,该毒株口服攻击3日龄仔猪,可引起典型的猪轮状病毒病发病症状,并能在发病仔猪小肠内容物中检测到猪轮状病毒。 展开更多
关键词 猪轮状病毒 分离 纯净性 特异性 动物回归试验
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