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miR-216b-5p靶向ATG5介导自噬逆转食管癌Eca109细胞的顺铂耐药性 被引量:2
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作者 邱善婷 李晓燕 +3 位作者 陈哲聪 高梦源 金舒怡 陈文虎 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期552-559,共8页
目的:探讨miR-216b-5p对食管癌Eca109细胞顺铂(DDP)耐药性的影响及其作用机制。方法:采用qPCR法检测miR-216b-5p在食管癌细胞TE-1、KYSE-150、Eca109和耐药细胞Eca109/DDP中的表达水平。利用脂质体转染技术分别将miR-216b-5p mimic及mim... 目的:探讨miR-216b-5p对食管癌Eca109细胞顺铂(DDP)耐药性的影响及其作用机制。方法:采用qPCR法检测miR-216b-5p在食管癌细胞TE-1、KYSE-150、Eca109和耐药细胞Eca109/DDP中的表达水平。利用脂质体转染技术分别将miR-216b-5p mimic及mimic NC、自噬相关蛋白5(ATG5)过表达质粒转染到Eca109/DDP细胞中,用CCK-8、EdU法和FCM分别检测转染后细胞的增殖和凋亡;mRFP-eGFP-LC3双荧光标记实验检测mRFP-eGFP-LC3慢病毒感染后各组细胞自噬发生情况,WB法检测自噬相关蛋白LC3、Beclin 1和P62表达。用荧光素酶报告基因实验验证miR-216b-5p与ATG5的靶向关系,WB法检测ATG5的表达。建立裸鼠Eca109/DDP细胞移植瘤模型,观察miR-216b-5p过表达对移植瘤生长的影响。结果:miR-216b-5p在TE-1、KYSE-150、Eca109和Eca109/DDP细胞中均呈低表达(均P<0.05)。过表达miR-216b-5p可显著抑制Eca109/DDP细胞的增殖并诱导凋亡(均P<0.05),减少细胞中自噬小体数量(P<0.05),下调LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值和Beclin 1蛋白水平、上调P62蛋白水平(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-216b-5p靶向并负调控ATG5的表达(P<0.05),过表达ATG5可使miR-216b-5p mimic对Eca109/DDP细胞增殖、自噬的抑制作用和凋亡的诱导作用明显减弱(均P<0.05),自噬相关蛋白P62表达降低、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值和Beclin 1表达升高(均P<0.05)。荷瘤实验结果表明,miR-216b-5p过表达可显著抑制裸鼠移植瘤的生长(P<0.05)。结论:miR-216b-5p过表达可逆转食管癌Eca109/DDP细胞对DDP的耐药性,其机制可能与靶向负调控ATG5表达并影响细胞自噬有关。 展开更多
关键词 食管癌 Eca109/DDP细胞 miR-216b-5p 自噬 增殖 凋亡 顺铂耐药
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硼亲和材料在顺式二羟基物质前处理中的应用进展 被引量:1
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作者 王笑聪 方琳 +2 位作者 邱善婷 邵美琪 邓巧 《中国卫生检验杂志》 CAS 2022年第16期2046-2048,F0003,共4页
含有顺式二羟基的生物分子,如糖类、糖蛋白、核苷、单胺类神经递质等,它不仅是蛋白质组学、糖组学和代谢组学等组学分析的重要目标分析物,其中的许多成员还是重要的疾病标志物,如癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen,CEA)、前列腺特异抗... 含有顺式二羟基的生物分子,如糖类、糖蛋白、核苷、单胺类神经递质等,它不仅是蛋白质组学、糖组学和代谢组学等组学分析的重要目标分析物,其中的许多成员还是重要的疾病标志物,如癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen,CEA)、前列腺特异抗原(Prostate specific antigen,PSA)和甲胎蛋白(Alpha fetoprotein,AFP)等^([1-2]),是一类在生物分析中具有重要生物学意义或临床意义的化合物,受到了科研工作者们的广泛关注。但是,在实际生物样品分析中,它们的含量很低且基质干扰十分严重,因此对生物样品中顺式二羟基类物质进行分析检测仍面临挑战。为了解决这个问题,在进一步的分析之前,特定的捕获和浓缩通常是一个不可避免的过程。目前,最常用的前处理方法是固相萃取(Solid phase extraction,SPE)。 展开更多
关键词 硼亲和材料 顺式二羟基化合物 样品前处理
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